朱 倩，席 佳，時(shí)向利

（1.江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，江蘇連云港 222000；2.江蘇康緣醫(yī)藥商業(yè)有限公司，江蘇連云港 222000）

隨著近年來化學(xué)藥物副作用問題凸顯，中藥療法以安全、有效、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)勢(shì)，在臨床治療中越來越多地受到了醫(yī)生和患者的青睞。蒼術(shù)中含有揮發(fā)油成分，即蒼術(shù)醇，經(jīng)現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，蒼術(shù)醇能夠抑制質(zhì)子泵——H+、K+-ATP 酶的活性，同時(shí)還具有較強(qiáng)的抗菌活性，故而常被用于胃腸疾病的治療。目前針對(duì)蒼術(shù)的研究多集中在其藥理、揮發(fā)性成分等方面，且大多為復(fù)方蒼術(shù)制劑的研究。而中藥配方顆粒作為一種中藥飲片的深加工產(chǎn)品，其不僅便于調(diào)劑，也能夠充分發(fā)揮出藥物的有效成分，是中藥飲片劑型改革的重要方向。本文將以標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率、指標(biāo)成分蒼術(shù)總萜醇含量、轉(zhuǎn)移率等作為參照，對(duì)蒼術(shù)配方顆粒制備工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)和優(yōu)化，同時(shí)建立蒼術(shù)配方顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以期為有效控制產(chǎn)品治療提供參考。

1 材料

1.1 試藥

蒼術(shù)，購(gòu)于湖北英山縣宏業(yè)中藥材種植合作社（批號(hào)201000601、201000602、201000603），經(jīng)專業(yè)人士鑒定均為菊科植物北蒼術(shù)干燥根莖，符合《中國(guó)藥典》（2020）中關(guān)于蒼術(shù)藥材的相關(guān)條件。蒼術(shù)對(duì)照藥材（批號(hào)：120983201004，中國(guó)食品藥品檢定研究院）。

甲醇（色譜級(jí)）、乙腈（莫克股份有限公司）；甲酸（色譜級(jí)，天津市富宇精細(xì)化工有限公司）；蒼術(shù)總萜醇（自制，批號(hào)：20190801、20101101）；茅術(shù)醇（批號(hào)：20100601，分析純）。

1.2 儀器

設(shè)備儀器見表1。

表1 設(shè)備儀器

2 方法與結(jié)果

2.1 蒼術(shù)提取工藝

2.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

本次研究參考相關(guān)中藥配方顆粒制備工藝文獻(xiàn)，以加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)作為影響因素，以蒼術(shù)總萜醇和出膏率作為提取工藝的考察指標(biāo)，設(shè)計(jì)L9（3）4正交表開展研究，見表2。

表2 因素水平

2.1.2 蒼術(shù)醇含量測(cè)定方法

色譜條件：分析柱為25m*0.22mm*0.25μm，設(shè)備程序升溫：起始溫度60 ℃（180s），10 ℃/min；150℃，3℃/min；220℃ 25℃/min，250℃（2min）.分流比為15 ∶1，載氣流速設(shè)定為1mL/min。流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸，紫外波長(zhǎng)為230nm。

2.1.3 實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果

精準(zhǔn)稱取各個(gè)批次蒼術(shù)飲片3份，每份10g，利用設(shè)計(jì)好的正交表開展試驗(yàn)，結(jié)果見表3，方差分析結(jié)果見表4。

表3 蒼術(shù)顆粒正交試驗(yàn)

表4 方差分析表

續(xù)表

通過試驗(yàn)結(jié)果可以看出，各個(gè)因素之間影響大小順序分別為C ＞A ＞B，且以A3B3C2 作為煎煮條件時(shí)，制備顆粒效果最佳。在考慮A2與A3，B2與B3之間數(shù)據(jù)相差的差異性無顯著意義，從節(jié)約能耗、降低工時(shí)、節(jié)約生產(chǎn)成本等方面進(jìn)行綜合考慮，選擇A2B2C2作為最佳的蒼術(shù)配方顆粒提取調(diào)節(jié)，即在加水10倍量、煎煮兩次，每次1.5h 的條件下，即可獲得最佳的煎煮效果。

2.2 對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備

本次研究以標(biāo)準(zhǔn)湯劑作為配方顆粒衡量基準(zhǔn)，參考《醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥煎藥管理規(guī)范》以及《征求意見稿》相關(guān)內(nèi)容，制備蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑。取蒼術(shù)飲片100g，加入清水煎煮，第一次加9倍水后浸泡30min 后煎煮20min，再次加入7倍量水煎煮15min，趁熱將湯汁過濾，將兩次濾液合并后減壓濃縮到150mL。將制備好的濃縮液凍干處理后，即可得到蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉。

配方顆粒制備時(shí)取2 500g 的蒼術(shù)飲片，加清水煎煮兩次后，將煎液過濾后，濃縮成為密度在1.04～1.06 g/mL（80℃）左右的浸膏，再次過濾后加入適量的麥芽精華，采用噴霧干燥后，再次加入適量的麥芽糊精和適量的二氧化硅用于助流，攪拌均勻后制粒，制備所得為蒼術(shù)配方顆粒。分別取3個(gè)批次的蒼術(shù)飲片，按照A2B2C2的制備生產(chǎn)工藝，制備出3批蒼術(shù)配方顆粒（CZ01-CZ03），即加水10倍量、煎煮兩次，每次1.5h 的條件下，制備蒼術(shù)顆粒。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證

2.3.1 出膏率測(cè)定

蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率根據(jù)凍干粉量來計(jì)算，即出膏率=凍干粉重量/湯劑制備所用飲片量*100%。蒼術(shù)配方顆粒出膏率則根據(jù)干燥后的干膏粉量來進(jìn)行計(jì)算，即配方顆粒出膏率=浸膏干膏粉重量/原料飲片重量*100%。經(jīng)過研究可見，3個(gè)批次蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率在28.78%～37.9%，均值為32.72%，SD則為2.58%。根據(jù)《征求意見稿》相關(guān)內(nèi)容，標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率允許范圍=均值±3倍SD 或者是均值的70%～130%，兩種不同計(jì)算方式的蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率為21.02%～45.67%和22.9%～42.54%，兩種計(jì)算方式的結(jié)果差異不大，進(jìn)而確定蒼術(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率為均值的70%～130%，即22.9%～42.54%。而3批蒼術(shù)配方顆粒的干膏粉出膏率分別為28.33%、28.17%以及27.95%，均在標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率范圍之內(nèi)，表明配方顆粒提取工藝合理。

2.3.2 總萜醇產(chǎn)率測(cè)定

采用A2B2C2作為制備工藝，采用重復(fù)試驗(yàn)法對(duì)工藝A2B2C2進(jìn)行評(píng)價(jià)，并以標(biāo)準(zhǔn)湯劑的總萜醇產(chǎn)率作為對(duì)照，對(duì)正交試驗(yàn)準(zhǔn)確性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果可見，標(biāo)準(zhǔn)蒼術(shù)湯劑的總萜醇提取物平均提取率為4.72%，總萜醇平均含量為85.35%，總萜醇平均轉(zhuǎn)移率為97.24%。而A2B2C2 作為提取條件時(shí)，總萜醇提取物平均提取率為4.51%，總萜醇平均含量為81.26%，總萜醇平均轉(zhuǎn)移率為95.81%，通過結(jié)果可以看出，A2B2C2作為提取條件效果良好。

2.4 蒼術(shù)配方顆粒制備

根據(jù)《中國(guó)藥典》2020版中對(duì)于顆粒劑的相關(guān)規(guī)定，對(duì)A2B2CB 提取工藝條件下試制的顆粒進(jìn)行檢驗(yàn)。制備顆粒時(shí)將A2B2CB 提取工藝制備的干膏與配料按照1 ∶1的比例加入輔料，再將濃縮好的藥液加入到制粒機(jī)中，利用全自動(dòng)顆粒機(jī)制備成蒼術(shù)配方顆粒。

2.5 蒼術(shù)配方顆粒質(zhì)量檢驗(yàn)

2.5.1 粒度檢測(cè)

3個(gè)批次的蒼術(shù)各稱取適量制備成蒼術(shù)配方顆粒，每份10g，分別過5號(hào)篩和1號(hào)篩，對(duì)能過5號(hào)篩但未能通過1號(hào)篩的顆粒比例進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果可見，3個(gè)批次蒼術(shù)中能夠5號(hào)篩但未能通過1號(hào)篩的顆粒比例分別為12.4%、12.5%和12.6%，均未超過15%，符合《中國(guó)藥典》（2020版）相關(guān)規(guī)定。

2.5.2 水分檢查

根據(jù)《中國(guó)藥典》（2020）中水分測(cè)定法對(duì)制備好的顆粒水分進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，三個(gè)批次蒼術(shù)配方顆粒水分含量分別為5.01%、4.95%以及5.11%。三個(gè)批次的蒼術(shù)配方顆粒水分均未超過8%，符合相關(guān)規(guī)定要求。

2.5.3 干燥失重檢查

稱取3個(gè)批次的蒼術(shù)配方顆粒各10g，放置在電熱恒溫干燥箱內(nèi)，設(shè)定溫度為80℃，持續(xù)干燥至恒重后對(duì)顆粒進(jìn)行稱重。結(jié)果可見，3份樣本干燥失重比為0.0132g、0.0157g 和0.0109g，干燥失重比平均值為0.0133g，符合相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

2.5.4 溶化性檢查

取每個(gè)批次的蒼術(shù)配方顆粒樣本10g，加入80℃的蒸餾水300mL，勻速攪拌5min，對(duì)顆粒的溶化情況進(jìn)行觀察。結(jié)果可見顆粒在攪拌后出現(xiàn)輕微的渾濁，且全部溶化，符合《中國(guó)藥典》（2020版）相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

2.5.5 流動(dòng)相考察

休止角測(cè)定法采用固定漏斗法，即將三個(gè)串聯(lián)在一起的漏斗采用鐵架臺(tái)進(jìn)行固定，然后將最下方的漏斗放置在距離水平繪圖紙約1cm 高度的位置，將顆粒小心地沿著漏斗壁傾倒于漏斗內(nèi)，直至下方顆粒形成的錐體尖端能夠接觸到漏斗下方口為止，對(duì)圓錐體的高度以及錐體底部半徑（R）tan?=H/R，其中?即休止角。結(jié)果可見，三組樣本的休止角分別為23.4°、23.7°和24.2°，均＜40°，符合相關(guān)要求。

2.5.6 重復(fù)性考察

以蒼術(shù)總萜醇含量作為重復(fù)性考察指標(biāo)，檢測(cè)時(shí)取蒼術(shù)總萜醇，按照供試品溶液配制方法，制備不同批次的供試品溶液6份，對(duì)其茅術(shù)醇和β-桉葉醇含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果可見，6份樣本平均茅術(shù)醇含量分別為43.28%，RSD%為0.31%，β-桉葉醇的平均含量為34.52%，RSD%則為0.29%，可見該方法具有良好的重復(fù)性。

2.5.7 加樣回收試驗(yàn)

精準(zhǔn)稱取制備好的蒼術(shù)配方顆粒粉末0.5g，平行分為6份，置入到50mL 量瓶?jī)?nèi)，按照1 ∶1的比例加入對(duì)照品溶液，然后按照上述方法制備供試品溶液，精準(zhǔn)抽取10μL，在365mm 紫外燈下行色譜鑒定，并對(duì)回收率進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果可見，茅術(shù)醇和β-桉葉醇平均加樣回收率為99.55%和99.29%，RSD 則分別為0.82%和1.05%，回收率試驗(yàn)結(jié)果良好。

3 討論

采用正交試驗(yàn)，對(duì)蒼術(shù)配方顆粒的生產(chǎn)條件進(jìn)行篩選優(yōu)化，經(jīng)優(yōu)選后，以A2B2C2作為蒼術(shù)藥物提取工藝，即加水10倍量、煎煮兩次，每次1.5h，所得提取物無論是在穩(wěn)定性還是在出膏率方面，均表現(xiàn)良好。通過對(duì)該工藝制備的蒼術(shù)配方顆粒質(zhì)量進(jìn)行考察，以蒼術(shù)醇作為考察指標(biāo)，經(jīng)考察，研究所采用的制備工藝制備所得蒼術(shù)配方顆粒具有良好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，該參數(shù)不僅有效提高了成品質(zhì)量，還能夠最大程度上降低生產(chǎn)成本，有利于大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用。

4 結(jié)論

以煎煮即在加水10倍量、煎煮兩次，每次1.5h的條件作為蒼術(shù)提取工藝，制備所得蒼術(shù)配方顆粒具有良好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，該制備工藝設(shè)計(jì)合理，質(zhì)量穩(wěn)定，質(zhì)控方法簡(jiǎn)便，適宜工業(yè)化批量生產(chǎn)。