潘凌峰 王 楹 伍小松* 蔣小豐 印遇龍

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，湖南省畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長沙 410128；2.湖南普菲克生物科技有限公司，長沙 410011)

隨著生活水平的不斷提高，人們對肉、蛋和奶的品質(zhì)需求也越來越高。而在畜禽養(yǎng)殖端，高密度規(guī)?；B(yǎng)殖帶來了可觀的經(jīng)濟收益，但也使得動物在飼養(yǎng)過程中更容易遭受各種應激，造成動物免疫力降低，生長性能下降。在飼糧中添加一定劑量的抗生素是傳統(tǒng)飼養(yǎng)模式中常見的做法，但這嚴重危害肉品質(zhì)及畜產(chǎn)品安全。我國自2020年7月開始禁止促生長抗生素在畜禽飼料中添加使用，因此，開發(fā)綠色安全、高效的新型飼料添加劑產(chǎn)品成為目前畜禽養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問題之一。

植物提取物具有多種生物活性功能，近年來越來越多的研究表明植物提取物可作為一種飼料添加劑合理應用于畜禽飼料中[1]。我國松科植物資源豐富，有30多種松樹，分布在云南、四川和湖南等地，全國針葉林面積約0.7億hm2，年產(chǎn)松針、樹皮和嫩枝約3億t，而這些資源大部分被遺棄或作薪柴使用[2]。松樹皮中含有豐富的多酚、多糖等活性功能成分。早在20世紀60年代，法國科學家從法國海洋松的松樹皮中提取出富含黃酮類化合物的天然活性物質(zhì)——碧蘿芷[3]，其具有很強的抗氧化能力，現(xiàn)在已經(jīng)作為多種疾病的治療藥物[4]。另外，多酚類物質(zhì)對致病微生物也有控制和影響作用[5]，多糖還具有改善免疫力的作用。與中草藥相比，松樹皮來源廣、價格低、易規(guī)模化生產(chǎn)，在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中具有廣闊的應用前景。因此，本研究旨在通過在肉雞無抗飼糧中添加不同劑量的松樹皮提取物，探討其對肉雞的生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)和抗氧化能力等的影響，以期為其在肉雞生產(chǎn)中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

云南松樹皮在65 ℃下烘干，粉碎，采用70%乙醇浸提，過濾，70 ℃干燥，得到松樹皮提取物，其中多酚含量24.2%、多糖含量3.5%。

1.2 試驗動物及分組

試驗選用252羽1日齡、健康狀態(tài)良好的溫氏天露黑五肉雞，采用單因素試驗設計，將試驗雞隨機分成3個組，每組6個重復，每個重復14羽(公母各占1/2)。對照組飼喂基礎飼糧，低劑量松樹皮提取物組和高劑量松樹皮提取物組分別在基礎飼糧中添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物。試驗期51 d。

1.3 試驗所用飼糧

試驗所用基礎飼糧由湖南粒豐生物科技有限公司提供，基礎飼糧分2個階段：生長前期為1～21日齡，生長后期為22～51日齡?；A飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

續(xù)表1項目Items含量 Content1～21日齡 1 to 21 days of age22～51日齡 22 to 51 days of age預混料 Premix1)0.500.50合計 Total100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)12.5412.97粗蛋白質(zhì) CP19.7719.58鈣 Ca1.000.92總磷 TP0.660.65賴氨酸 Lys1.161.10蛋氨酸 Met0.590.57色氨酸 Trp0.190.18蘇氨酸 Thr0.800.77

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗于湖南汨羅市某雞場進行，試驗雞采用地面平養(yǎng)。試驗開始前，對雞舍地面、飲水器和食槽等進行充分清洗消毒。試驗第1周雞舍光照時間23 h，而后逐漸過渡到試驗第4周為每天18 h光照，直到試驗結束。試驗開始雞舍溫度為37 ℃，以后每天降0.4 ℃，降至25 ℃穩(wěn)定至試驗結束。試驗期間肉雞自由飲水采食，并按常規(guī)程序進行免疫。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 生長性能

試驗期間分別于試驗第22和52天早上空腹稱取每個重復的試驗雞體重，計算平均日增重(ADG)；以重復為單位記錄投料量和剩余料量，計算平均日采食量(ADFI)和各階段料重比(F/G)。

1.5.2 屠宰性能及器官指數(shù)

試驗結束時，每個重復選取2羽健康、活體重接近重復平均體重的肉雞屠宰。根據(jù)《家禽生產(chǎn)性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823—2004)測定屠宰率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。雞放血處死后，脫毛，去腳角質(zhì)層、腳趾殼和喙殼后的重量為屠體重；在此基礎上去除氣管、食道、嗉囊、腸道、脾臟、胰臟、膽囊、心臟、肝臟、腺胃、肌胃、肺臟、腹脂、頭腳和生殖器官的重量為全凈膛重。將肝臟、脾臟、胸腺、法氏囊和腹脂分別分離出來并稱重，計算器官指數(shù)。其指標計算按如下公式：

屠宰率(%)=100×(屠體重/宰前體重)；
全凈膛率(%)=100×(全凈膛重/宰前體重)；
胸肌率(%)=100×(胸肌重/全凈膛重)；
腿肌率(%)=100×(腿肌重/全凈膛重)；
腹脂率(%)=100×(腹脂重/全凈膛重)；
器官指數(shù)(%)=100×(器官重/宰前體重)。

1.5.3 肉品質(zhì)和抗氧化能力

屠宰性能測定時，分別在屠宰后45 min和24 h時，使用便捷式pH計(205，Testo，德國)于胸肌和腿肌分別檢測3個點pH，取平均值得到不同時間胸肌、腿肌pH。屠宰后在胸肌、腿肌上分別取一塊體積、形狀相近的肉樣5 g，稱重后置于滴水損失測定管中，于4 ℃冰箱內(nèi)垂直放置24 h后取出再次稱重。滴水損失計算公式為：

滴水損失(%)=100×[(樣本初重-
樣本24 h后重量)/樣本初重]。

另取一塊體積、形狀相近的胸肌、腿肌樣品，重量約20 g，稱重后用蒸煮袋真空密封，而后于水浴鍋內(nèi)加熱至中心溫度70 ℃，取出后吸干表面水分再次稱重，根據(jù)如下公式計算蒸煮損失：

蒸煮損失(%)=100×[(蒸煮前重量-
蒸煮后重量)/蒸煮前重量]。

屠宰后胸肌、腿肌的亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)值使用便捷式色差儀檢測(NR20XE，3nh)，分別選取3個部位檢測取平均值。

肌肉中丙二醛(MDA)含量采用南京建成生物工程研究所試劑盒于多孔化學發(fā)光儀(Varioskan flash，ThermoFisher Scientific，美國)上檢測，操作方法嚴格參照試劑盒說明書進行。

1.5.4 血清和肝臟生化指標

屠宰性能測定時，肉雞稱活體重后頸靜脈處死，使用無抗凝劑采血管收集血液，靜止30 min，而后在1 500×g下離心10 min，收集血清待測。肉雞采血處死后，解剖取肝臟組織樣，待測。血清和肝臟中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游離脂肪酸(FFA)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)和總蛋白(TP)含量嚴格按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進行檢測。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Excel 2010對試驗數(shù)據(jù)進行初步整理后，利用SPSS 25.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并用Duncan氏法進行多重比較，結果數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 松樹皮提取物對肉雞生長性能的影響

由表2可知，在肉雞生長前期(1～21日齡)，與對照組相比，飼糧添加不同劑量的松樹皮提取物對肉雞ADFI無顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物(低劑量松樹皮提取物組)使肉雞ADG提高了14.39%(P<0.05)，而飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物(高劑量松樹皮提取物組)卻顯著降低了肉雞ADG(P<0.05)。此外，與對照組相比，飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物使1～21日齡F/G降低了16.97%(P>0.05)。21日齡肉雞體重以低劑量松樹皮提取物組最高，為326.57 g，顯著高于對照組(P<0.05)；而以高劑量松樹皮提取物組最低，為215.83 g，顯著低于對照組(P<0.05)。

在肉雞生長后期(22～51日齡)，與對照組相比，飼糧添加不同劑量的松樹皮提取物對肉雞ADFI無顯著影響(P>0.05)；飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物對肉雞ADG和F/G無顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物顯著降低了肉雞ADG和F/G(P<0.05)。51日齡肉雞體重以低劑量松樹皮提取物組最高，為1 135.73 g，顯著高于對照組(P<0.05)；而以高劑量松樹皮提取物組最低，為907.71 g，顯著低于對照組(P<0.05)。

在肉雞生長全期(1～51日齡)，與對照組相比，飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物使肉雞ADG提高了7.85%(P<0.05)，而飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物則顯著降低了肉雞ADFI和ADG(P<0.05)。3組肉雞F/G之間無顯著差異(P>0.05)，但以低劑量松樹皮提取物組最低，為3.51，較對照組降低了9.30%。

表2 松樹皮提取物對肉雞生長性能的影響

2.2 松樹皮提取物對肉雞屠宰性能及器官指數(shù)的影響

由表3可知，與對照組相比，飼糧添加不同劑量的松樹皮提取物對肉雞屠宰率無顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均能顯著降低肉雞的腹脂率(P<0.05)；飼糧添加不同劑量的松樹皮提取物對肉雞全凈膛率、胸肌率和腿肌率等屠宰性能指標均無顯著影響(P>0.05)。此外，與對照組相比，飼糧添加松樹皮提取物對肉雞肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物顯著提高了肉雞胸腺指數(shù)(P<0.05)；飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物有提高肉雞法氏囊指數(shù)的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

表3 松樹皮提取物對肉雞屠宰性能及器官指數(shù)的影響

2.3 松樹皮提取物對肉雞肉品質(zhì)和抗氧化能力的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均可顯著降低肉雞胸肌滴水損失(P<0.05)，但對胸肌其他指標無顯著影響(P>0.05)。從腿肌肌肉品質(zhì)來看，與對照組相比，飼糧添加不同劑量的松樹皮提取物均可顯著提高45 min時的pH和肉色L*值(P<0.05)，飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物可顯著提高肉色b*值(P<0.05)，同時飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物能顯著降低腿肌失水率(P<0.05)；飼糧添加松樹皮提取物對腿肌其他指標無顯著影響(P>0.05)。

表4 松樹皮提取物對肉雞肉品質(zhì)的影響

松樹皮提取物對肉雞肌肉抗氧化能力的影響如圖1所示，與對照組相比，飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均能顯著降低肉雞腿肌中MDA含量(P<0.05)，且低劑量松樹皮提取物組腿肌中MDA含量顯著低于高劑量松樹皮提取物組(P<0.05)；飼糧添加松樹皮提取物對肉雞胸肌中MDA含量無顯著影響(P>0.05)。

2.4 松樹皮提取物對肉雞血清和肝臟生化指標的影響

由表5可知，與對照組相比，飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物能顯著提高肉雞血清中HDL-C和ALB含量(P<0.05)，并且顯著降低肝臟中LDL-C含量(P<0.05)；飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物可顯著降低血清中TG含量(P<0.05)，顯著提高血清中FFA、HDL-C和ALB含量(P<0.05)，顯著降低肝臟中LDL-C含量(P<0.05)。

3 討 論

3.1 松樹皮提取物對肉雞生長性能的影響

松樹皮中含有多酚等生物活性物質(zhì)，前人已有研究表明，松樹皮提取物具有改善動物健康和生長性能的作用。崔蓮花等[6]在育肥豬飼糧中分別添加1 000、2 000和4 000 g/t的松樹皮提取物，結果發(fā)現(xiàn)3個試驗組ADG和F/G均有改善的趨勢。本試驗中，與對照組相比，在無抗飼糧中添加250 mg/kg松樹皮提取物顯著提高了肉雞生長前期和全期ADG，生長全期F/G也以250 mg/kg松樹皮提取物添加組最優(yōu)，但飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物則顯著降低了生長各階段ADG，這可能與高劑量松樹皮提取物影響了肉雞采食量有關。王占彬等[7]在艾維因肉雞飼糧中分別添加200和400 g/t松樹皮提取物，探討其對肉雞生長性能的影響，結果也發(fā)現(xiàn)200 g/t松樹皮提取物添加組效果最佳。松樹皮提取物中富含多酚，而多酚具有澀味，高劑量添加會影響動物的采食量，進而影響動物的生長性能[8]。劉曉華等[9]研究也表明，飼糧添加1 400 mg/kg茶多酚會顯著影響肉雞生長性能。上述結果在一定程度上可佐證松樹皮提取物中多酚影響肉雞采食量，進而影響生長性能。此外，本試驗中，飼糧添加250和1 000 mg/kg的松樹皮提取物均顯著提高了肉雞血清中ALB含量，其中250 mg/kg松樹皮提取物添加組血清ALB含量最高。ALB主要由肝臟合成，是血液中最主要的蛋白質(zhì)，其含量反映了動物機體蛋白質(zhì)的合成代謝狀況[10]。周洪松等[11]研究表明，血清中ALB含量與動物生長速度呈正相關，其原因可能是ALB作為組織蛋白的原料，其含量較高能夠促進組織蛋白的合成，因此能夠促進動物生長，Benlloch等[12]也有類似報道。

數(shù)據(jù)柱標記不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

表5 松樹皮提取物對肉雞血清和肝臟生化指標的影響

3.2 松樹皮提取物對肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

極高的能量代謝率會導致家禽腹脂率升高，嚴重影響胴體品質(zhì)，降低屠宰性能和飼料轉(zhuǎn)化率[13]；同時，肉雞體內(nèi)腹脂沉積過多還會誘發(fā)肉雞腹水綜合征和猝死癥等代謝疾病[14]，因此，降低腹脂率在家禽生產(chǎn)中具有重要意義。本試驗中，與對照組相比，飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均能夠顯著降低肉雞的腹脂率，且呈劑量依賴性。肉雞腹脂沉積與飼糧能量攝入、飼養(yǎng)周期、腸道菌群及脂肪代謝等都有關聯(lián)。肉雞脂質(zhì)代謝及其調(diào)控與哺乳類動物大不相同，肉雞脂肪細胞內(nèi)的脂肪生成十分有限，主要來源是肝臟內(nèi)合成和腸道中消化吸收，其中肝臟是肉雞脂肪合成的主要場所[15-16]，占90%以上。植物多酚具有調(diào)控機體脂質(zhì)代謝的作用，Bajerska等[17]研究發(fā)現(xiàn)，多酚可降低大鼠血清TG、低密度脂蛋白以及內(nèi)臟脂肪含量；Bansode等[18]研究也表明，多酚可顯著降低大鼠血清TG含量；Lockyer等[19]研究發(fā)現(xiàn)，富含多酚的橄欖葉提取物能夠降低動物血清中TC和LDL-C含量；Li等[20]研究表明，茶多酚能夠通過調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)信號通路降低肉雞血清中LDL-C和TC含量，改善脂質(zhì)代謝。本試驗分析了肉雞血清和肝臟中脂質(zhì)代謝相關指標，結果表明飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物能顯著提高血清中HDL-C的含量，并且顯著降低了肝臟中LDL-C的含量；飼糧添加1 000 mg/kg松樹皮提取物可顯著降低血清中TG含量，同時顯著提高血清中FFA和HDL-C的含量。HDL-C可將血液中多余的TG和TC等轉(zhuǎn)運到肝臟進行分解代謝，因此被譽為血管脂質(zhì)“清道夫”，侯福銀等[21]、Anhê等[22]研究也發(fā)現(xiàn)，多酚能夠提高血清和肝臟中HDL-C含量，降低LDL-C含量，從而改善脂質(zhì)代謝。盡管還缺乏分子水平的驗證，上述結果在一定程度上可以說明松樹皮提取物可促進脂肪酸代謝，減少肝臟脂質(zhì)合成，從而降低腹脂率。

肉品質(zhì)通常包括肉色、pH、嫩度、風味和系水力等。其中系水力是指屠宰后肌肉保持水分的能力(一般用滴水損失、失水率等來衡量)，系水力高則表明肌肉鮮嫩、多汁，系水力低的肌肉其營養(yǎng)物質(zhì)容易流失[23]。此外，屠宰后不同時間肌肉pH反映了肌肉中糖原的酵解速率，也是衡量肉品質(zhì)的重要指標之一。本試驗中，飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均顯著降低了肉雞胸肌滴水損失，且均顯著提高了腿肌45 min時的pH和肉色L*值，同時飼糧添加250 mg/kg松樹皮提取物還顯著降低了腿肌的失水率。進一步研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加250和1 000 mg/kg松樹皮提取物均顯著降低了肉雞腿肌中MDA含量。有報道指出，植物多酚可提高肌肉中自由基清除能力，保護肌肉細胞膜完整，減少蛋白質(zhì)損傷等，從而改善肉品質(zhì)[24]，這可能與植物多酚可通過調(diào)節(jié)絲裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路和其他抗氧化基因表達來提高機體抗氧化能力相關[25]。Zhao等[26]研究表明，飼糧添加主要成分為綠原酸的杜仲提取物能提高熱應激下肉雞胸肌24 h時的pH，降低滴水損失、蒸煮損失和胸肌MDA含量。以上研究結果提示，松樹皮提取物發(fā)揮調(diào)控動物脂質(zhì)代謝、降低肉雞腹脂率和腿肌失水率的功效與其中多酚的抗氧化能力相關。

4 結 論

綜上所述，在溫氏天露黑五肉雞飼糧中添加250 mg/kg松樹皮提取物可提高其生長性能，降低腹脂率，改善脂質(zhì)代謝和肉品質(zhì)，增強機體抗氧化能力。