安 妮

（鐵嶺縣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧 鐵嶺 112000）

大腸埃希菌（E.coli）俗稱大腸桿菌，是人和動(dòng)物腸道內(nèi)的正常菌群成員之一，常隨糞便排出，故被用作水、食品和飼料等衛(wèi)生檢測(cè)的指標(biāo)。少數(shù)具有致病性，可以引起畜禽特別是幼畜禽的大腸埃希菌病。本研究擬對(duì)鐵嶺地區(qū)雞肉源大腸埃希菌的藥物敏感性進(jìn)行檢測(cè)，為指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)，以減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

菌株：2019年7月，從鐵嶺地區(qū)4家市場(chǎng)采集的樣品中分離得到10株大腸埃希菌。

藥物：氨芐西林、頭孢唑啉、頭孢噻肟、美羅培南、慶大霉素、阿米卡星、鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸、環(huán)丙沙星、黏菌素、磷霉素、復(fù)方新諾明。

1.2 試驗(yàn)方法

采用瓊脂稀釋法，對(duì)10株大腸埃希菌進(jìn)行耐藥性檢測(cè)。

菌液制備：將已純化并鑒定的10株大腸埃希菌在瓊脂平板上劃線培養(yǎng)后，挑取單個(gè)菌落接種于2毫升MH肉湯管中，37℃恒溫振蕩培養(yǎng)4～8小時(shí)，用MH肉湯稀釋菌液，至含菌量約為1×10CFU/毫升，備用。

抗菌藥的稀釋：把抗菌藥物原液按試管二倍稀釋法在試管中稀釋到需要的各個(gè)梯度，吸入2毫升藥液放進(jìn)做好標(biāo)記的平皿中。

藥物瓊脂平板的制備：用25毫升滅菌移液管吸取18毫升冷卻至50～60℃MH的瓊脂，加入已有2毫升抗菌藥物的平皿中，吹打混勻。同時(shí)每種藥物設(shè)有兩個(gè)空白瓊脂平板。在超凈工作臺(tái)中風(fēng)干冷卻后，立即使用。

細(xì)菌接種：按照藥物濃度從低到高的順序，將菌液接種到瓊脂平板表面。將接種好菌液的瓊脂平板放置在超凈臺(tái)內(nèi)，直到接種的菌液被瓊脂完全吸干。然后將平板放入培養(yǎng)箱，37℃恒溫培養(yǎng)18～24小時(shí)。

1.3 結(jié)果判定

當(dāng)接種前后兩塊空白的MH平板上的所有接種點(diǎn)的菌生長(zhǎng)良好，而無(wú)接種細(xì)菌的平皿均無(wú)菌落生長(zhǎng)時(shí)，試驗(yàn)組完全不見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為該藥物對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度（MIC）。以MIC值規(guī)定的敏感、耐藥折點(diǎn)值范圍判斷結(jié)果。受試藥物的敏感折點(diǎn)值判斷標(biāo)準(zhǔn)（見(jiàn)表1）。

表1 瓊脂稀釋法藥敏試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn) 微克/毫升

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)中10株大腸埃希菌對(duì)美羅培南、阿米卡星均敏感，對(duì)其他藥物呈現(xiàn)不同程度的耐藥（見(jiàn)表2）。

表2 大腸埃希菌的耐藥率和敏感率 %

3 結(jié)論

試驗(yàn)表明，一些常用藥物在雞肉源大腸埃希菌中的耐藥率較高，這將給臨床治療大腸埃希菌的感染帶來(lái)困難。為了達(dá)到最佳的治療效果，需要正確合理地使用抗生素，在藥敏試驗(yàn)的基礎(chǔ)上有針對(duì)性地選擇用藥，加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測(cè)以及對(duì)臨床用藥的指導(dǎo)和監(jiān)管，避免耐藥菌向人類傳播。