王斌，任學(xué)花，黨興東，屠麗芳

（武威市林業(yè)綜合服務(wù)中心，甘肅 武威733000）

沙冬青Ammopiptanthus mongolicus為豆科沙冬青屬常綠灌木[1]，分布于內(nèi)蒙古、寧夏、甘肅等地，生于沙丘、河灘邊臺(tái)地，是良好的固沙植物，具有很強(qiáng)的抗寒抗旱能力[2]。

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungus，AMF），存在于幾乎所有類型的土壤中，能與絕大多數(shù)植物建立共生關(guān)系[3]，擴(kuò)大根系吸收范圍，促進(jìn)植物對(duì)水分、養(yǎng)分（特別是磷和氮）的吸收[4]，提高植物耐干旱[5]、耐鹽堿[6-7]和抵抗病原物感染的能力[8]，還可以改善土壤結(jié)構(gòu)和提高土壤肥力[9]。

在自然環(huán)境中普遍存在叢枝菌根真菌與沙冬青形成菌根[10]。因此，本研究通過測(cè)定沙冬青幼苗接種不同叢枝菌根真菌后的生長表現(xiàn)，旨在探索叢枝菌根真菌在沙冬青育苗中的利用前途。

1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于武威市涼州區(qū)下雙鎮(zhèn)南水村，地理坐標(biāo)102°42′E、38°03′N，海拔1 480 m；土壤為砂壤質(zhì)鹽漬化荒漠灰鈣土，pH值7.8～8.5。試驗(yàn)在連棟溫室內(nèi)進(jìn)行，溫度可控，正午平均光照強(qiáng)度8.1klx；地下水灌溉，pH值8.1左右。

2 試驗(yàn)材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料

供試菌種為摩西球囊霉Glomus mosseae、幼套球囊霉G. etunicatum、根內(nèi)球囊霉G. intraradices，購自北京市農(nóng)林科學(xué)院“叢枝菌根真菌種質(zhì)資源庫”。

1）供試菌劑制備。菌種擴(kuò)繁以玉米Zea mays為宿主。在試驗(yàn)前1年，土、河沙、珍珠巖、石英砂按體積比2:3:3:3制成培養(yǎng)基，撒入供試菌種，混合均勻，播種玉米，經(jīng)過1個(gè)生長季擴(kuò)繁，制成接種菌劑，內(nèi)含孢子、菌絲和侵染根段，風(fēng)干后貯藏備用。

2）育苗基質(zhì)制備。挖取玉米田耕作土與腐熟羊糞以體積比10:1混合均勻，烘箱內(nèi)160 ℃殺菌2 h看成育苗基質(zhì)，冷卻后備用。

3）供試苗培育。沙冬青種子當(dāng)?shù)刈圆?。育苗基質(zhì)裝入育苗穴盤。飽滿無損傷沙冬青種子，0.3% K2MnO4溶液浸泡30 min消毒，播種于育苗穴盤，發(fā)芽出苗后供試。

2.2 試驗(yàn)方法

盆栽試驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理，分別接種摩西球囊霉、幼套球囊霉、根內(nèi)球囊霉和空白對(duì)照，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100個(gè)育苗袋，隨機(jī)區(qū)組。育苗袋直徑16 cm，高18 cm。每個(gè)處理取用供試菌劑50 g，空白對(duì)照加入高溫滅菌后的菌劑50 g，與育苗基質(zhì)充分混合后裝入育苗袋。2019年4月18日，供試苗平均高5 cm時(shí)，每個(gè)育苗袋移栽2株。接種育苗袋整齊擺放于連棟溫室中，控制室內(nèi)晝溫25～31 ℃，夜溫15～20 ℃，正常管理。

2.3 指標(biāo)測(cè)定

2019年11月15日，接種苗生長停止后結(jié)束試驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)重復(fù)小區(qū)供試苗成活數(shù)量。每個(gè)重復(fù)小區(qū)隨機(jī)抽取樣苗30株，游標(biāo)卡尺測(cè)量地徑，卷尺測(cè)量苗高。每個(gè)重復(fù)小區(qū)隨機(jī)抽取樣苗30株，電子天平稱量地上、地下部分鮮質(zhì)量；烘箱內(nèi)105 ℃烘干5 h，電子天平稱量地上、地下部分干質(zhì)量。每個(gè)重復(fù)小區(qū)隨機(jī)抽取樣苗30株，新鮮根剪成1cm左右根段，漂洗干凈后用甲醛－乙酸－乙醇固定液中固定12 h，用酸性品紅染液進(jìn)行染色[11]后用顯微鏡觀察，統(tǒng)計(jì)侵染率?；旌虾娓蓸用绲厣?、地下部分樣品，粉碎，凱氏定氮法、硝酸－高氯酸消煮－鉬銻抗分光光度法、火焰光度法分別測(cè)定N、P、K含量。

侵染率（%）=（侵染根段數(shù)/被檢查的根段數(shù)）×100%

根冠比=地下部分鮮質(zhì)量/地上部分鮮質(zhì)量

含水率（%）=（1－樣苗干質(zhì)量/樣苗鮮質(zhì)量）×100%

2.4 數(shù)據(jù)處理。

使用Mirosoft Excel 2010、IBM SPSS Statistics 21.0軟件處理數(shù)據(jù)，采用LSD法進(jìn)行多重比較。

3 結(jié)果分析

3.1 侵染效果

表1可見，樣苗成活率各接種處理與空白對(duì)照之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明不能否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差，從而判定接種樣苗成活率與空白對(duì)照相同，即接種處理對(duì)樣苗成活無影響。樣苗接種不同叢枝菌根真菌后均能被侵染，在根內(nèi)形成清晰菌絲、根內(nèi)孢子及囊泡（圖1）。表1可見，樣苗侵染率各接種處理之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且數(shù)值依次增大，說明可以否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定亦由處理所致，即不同供試菌對(duì)樣苗的侵染效果各異，侵染效果依次為根內(nèi)球囊霉＞摩西球囊霉＞幼套球囊霉。

表1 接種樣苗成活率和侵染率

圖1 供試菌劑侵染樣苗根系顯微解剖特征

3.2 樣苗生長

方差分析表明，接種處理間的株高、地徑、干質(zhì)量、含水率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），說明可以否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定亦由處理所致，即供試菌劑接種造成樣苗各生長指標(biāo)的差異。表2可見，樣苗株高、地徑、干質(zhì)量，摩西球囊霉接種處理與空白對(duì)照均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且數(shù)值大于后者，說明可以否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定亦由處理所致，即接種摩西球囊霉可以提高樣苗高、徑、干物質(zhì)生長量；根內(nèi)球囊霉接種處理與空白對(duì)照均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明不能否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定二者等效，即接種根內(nèi)球囊霉對(duì)樣苗生長無影響；同理，接種幼套球囊霉對(duì)樣苗生長無影響。同理，樣苗高生長摩西球囊霉接種處理優(yōu)于幼套球囊霉接種處理，根內(nèi)球囊霉則介于二者之間；徑生長摩西球囊霉接種處理優(yōu)于根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉處理；干物質(zhì)生長3種供試菌劑等效。

表2可見，樣苗含水率摩西球囊霉接種處理、根內(nèi)球囊霉處理均與空白對(duì)照無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差，因此判定接種摩西球囊霉、根內(nèi)球囊霉與空白對(duì)照無差異，即接種摩西球囊霉、根內(nèi)球囊霉對(duì)含水率無影響；幼套球囊霉處理含水率與空白對(duì)照有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明其數(shù)據(jù)差異不屬于隨機(jī)誤差，而是由處理所致，幼套球囊霉處理能降低樣苗植株含水率。

表2可見，樣苗根冠比摩西球囊霉處理與空白對(duì)照有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明其數(shù)值差異不僅屬于隨機(jī)誤差，而是由處理所致，即摩西球囊霉處理降低根冠比；根內(nèi)球囊霉處理、幼套球囊霉處理均與空白對(duì)照有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明其數(shù)值差異不僅屬隨機(jī)誤差而是由處理所致，因此判定根內(nèi)球囊霉處理、幼套球囊霉處理能提高根冠比，幼套球囊霉優(yōu)于根內(nèi)球囊霉。

表2 接種樣苗生長量

3.3 樣苗養(yǎng)分狀況

方差分析表明，樣苗地下、地上部分N、P、K含量處理間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），說明可以否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定亦由處理所致，即供試菌劑接種造成樣苗養(yǎng)分吸收的差異。表3可見，樣苗地下部分N含量，摩西球囊霉接種處理與空白對(duì)照有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且數(shù)值大于后者，說明可以否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定亦由處理所致，即摩西球囊霉接種可以增加樣苗地下部分N含量；根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉與空白對(duì)照無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明不能否定其數(shù)值差異僅屬隨機(jī)誤差而判定2種供試菌劑處理與空白對(duì)照等效，即根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉對(duì)樣苗地下部分N含量無影響；同理，摩西球囊霉接種可以提升樣苗地下部分P、K和地上部分N、P、K含量，根內(nèi)球囊霉接種可以提升樣苗地下部分P和地上部分N、K含量，幼套球囊霉接種可以提升樣苗地上部分K含量而降低地下部分K和地上部分N含量。同理，摩西球囊霉接種相比根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉接種，能夠提高樣苗地下部分N、K和地上部分N、P含量，降低地下部分P含量；對(duì)樣苗地上部分K含量的影響，摩西球囊霉接種與幼套球囊霉接種同效，而高于根內(nèi)球囊霉接種；對(duì)于樣苗地下和地上部分N、P、K含量的影響，根內(nèi)球囊霉接種與摩西球囊霉接種或者同效，或者互有高低。上述結(jié)果表明，摩西球囊霉接種均能促進(jìn)樣苗吸收積累N、P、K，并促進(jìn)樣苗地上部分積累P；根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉接種對(duì)樣苗吸收積累N、P、K的影響不定，或者促進(jìn)，甚至削弱；3種供試菌劑中以摩西球囊霉接種促進(jìn)樣苗吸收積累N、P、K的效果最優(yōu)。

表3 樣苗養(yǎng)分含量 g/kg

綜合上述分析，3種供試菌劑均能與樣苗形成菌根，對(duì)樣苗成活無影響，侵染效果以根內(nèi)囊霉為優(yōu)；摩西球囊霉接種能促進(jìn)樣苗生長和對(duì)N、P、K的吸收積累但降低根冠比；根內(nèi)球囊霉對(duì)樣苗生長無影響，促進(jìn)或不影響對(duì)N、P、K的吸收；幼套球囊霉對(duì)樣苗生長無影響，促進(jìn)或削弱對(duì)N、P、K的吸收，降低樣苗含水率，增大根冠比。總之，在促進(jìn)樣苗生長方面，摩西球囊霉接種效果最優(yōu)；在提高樣苗耐旱性能方面，幼套球囊霉效果較優(yōu)。

4 結(jié)論與討論

摩西球囊霉、根內(nèi)球囊霉、幼套球囊霉均能與沙冬青幼苗形成菌根，侵染率可達(dá)40%～50%；3種叢枝菌根真菌接種均對(duì)沙冬青幼苗移栽成活無影響，其中摩西球囊霉可以有效促進(jìn)幼苗生長，幼套球囊霉可以提高幼苗耐旱性能。因此，摩西球囊霉可用于培養(yǎng)具有高生物量潛力的沙冬青苗木，而幼套球囊霉可用于培養(yǎng)具有較高抗旱潛力的沙冬青苗木。

經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，三種叢枝菌根真菌均能侵染沙冬青幼苗根系，并能對(duì)其產(chǎn)生影響，不同叢枝菌根真菌對(duì)沙冬青根系的侵染率不同，這與研究中沙冬青根系能與叢枝菌根真菌形成菌根的結(jié)論一致[12]，與“不同叢枝菌根真菌對(duì)同種或不同種植物的侵染率不同”的結(jié)論一致[11]，此外有研究表明叢枝菌根真菌對(duì)沙冬青根系的侵染率在不同時(shí)間具有差異[13]，因此，叢枝菌根真菌對(duì)沙冬青根系的侵染需進(jìn)一步研究。

摩西菌根霉對(duì)沙冬青幼苗苗高、地徑生長量、全株N、P、K積累均有促進(jìn)作用；根內(nèi)球囊霉對(duì)沙冬青幼苗苗高、地徑生長影響不顯著，但能促進(jìn)沙冬青幼苗根部P元素積累，同時(shí)促進(jìn)地上部分N、K元素積累；幼套球囊霉對(duì)沙冬青幼苗苗高、地徑生長影響不顯著，但能顯著促進(jìn)沙冬青幼苗根部P元素和地上部分K元素積累，同時(shí)抑制地上部分N元素含量。

接種幼套球囊霉后沙冬青幼苗的干鮮比、根冠比均為最大，結(jié)合幼套球囊霉對(duì)沙冬青幼苗根系P元素積累的促進(jìn)作用和對(duì)莖葉N元素積累的抑制作用，說明接種幼套球囊菌后沙冬青幼苗根系生長旺盛，干物質(zhì)積累多，可能具有更強(qiáng)的抗逆性[14]，而困難立地造林時(shí)生長表現(xiàn)優(yōu)良的苗木成活更為困難，因此與幼套球囊霉菌根化的沙冬青苗木可能更適宜困難立地條件下造林；接種摩西球囊霉后沙冬青幼苗的根莖比較小，說明地上部分生長旺盛，可能與摩西球囊霉促進(jìn)N元素吸收[15]有關(guān)，地上部分生長旺盛的苗木相應(yīng)對(duì)水肥需求量更高，因此抗逆性較差，適宜在良好的立地條件下造林。

本研究僅對(duì)一年生沙冬青容器苗的生物及養(yǎng)分吸收積累性狀進(jìn)行了研究，需要開展沙冬青菌根化苗木造林實(shí)驗(yàn)，觀測(cè)其生長及抗逆性表現(xiàn)，以進(jìn)一步研究叢枝菌根真菌對(duì)沙冬青造林的長遠(yuǎn)影響。