趙 昕，龔致平，游海波，彭必江，聶 珂，陶 鳳

1.重慶大學(xué)附屬三峽醫(yī)院檢驗科，重慶 404000;2.重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院院辦公室，重慶 401220;3.重慶市長壽區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，重慶 401220;4.重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院檢驗科，重慶 401220

宮頸癌是女性中第四常見的癌癥，是世界范圍內(nèi)的主要公共衛(wèi)生問題之一[1]。據(jù)報道2018年全球約有570 000例新發(fā)宮頸癌患者，311 000例患者死于該疾病，其中中國有106 000例新發(fā)宮頸癌患者，死亡48 000例[2]，并且全球每年有100萬例新的生殖器疣患者確診[3]。目前，已鑒定出的人乳頭瘤病毒(HPV)亞型超過200種，其中感染生殖道的HPV根據(jù)其與宮頸癌及其癌前病變發(fā)展的相關(guān)性進一步分為高危型和低危型。HPV不同型別與宮頸癌及癌前病變的相關(guān)程度有明顯區(qū)別，且HPV型別眾多，各地區(qū)各型別的流行率存在很大的差異。因此，本研究旨在分析萬州地區(qū)女性中HPV流行特征及其變化趨勢，為該地區(qū)HPV的預(yù)防策略制訂及治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年3 月至2020 年11 月在重慶大學(xué)附屬三峽醫(yī)院進行HPV檢查的門診就診、體檢、住院女性共56 006例為研究對象，年齡14～89歲，根據(jù)其年齡不同分為10組：<21、21～<26、26～<31、31～<36、36～<41、41～<46、46～<51、51～<56、56～<61、≥61歲組。所有研究對象或家屬均簽署知情同意書。本研究得到重慶大學(xué)附屬三峽醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2儀器與試劑 PCR擴增儀(型號：ETC811)購自北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司；全自動核酸分子雜交儀(型號：YN-H48)、HPV DNA 基因分型檢測試劑盒均由深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供。試劑盒可檢測出23種主要HPV型別，17種高危型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73 和HPV82)和6種低危型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV81和HPV83)。

1.3方法 女性宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本在陰道鏡下進行采集，保存在細(xì)胞保存液中，于-20 ℃冰箱儲存。采用PCR-反向點雜交法進行HPV檢測。試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本處理、DNA提取、PCR擴增、擴增產(chǎn)物的雜交及結(jié)果分析均嚴(yán)格按照試劑盒及儀器說明書進行。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS25.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同年齡組女性HPV感染情況 HPV檢出率為27.80%(15 569/56 006)，各年齡組檢出率和多重感染率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=345.10；P<0.001和χ2=231.55；P<0.001)。檢出率和多重感染率較高的有<21歲組(分別為43.78%和22.49%)、≥61歲組(分別為39.33%和16.82%)及56～<61歲組(分別為38.71%和13.29%)。41～<46歲組 HPV陽性構(gòu)成比最高，為22.48%。不同年齡組女性HPV感染情況見表1。

表1 不同年齡組女性HPV感染情況

2.2HPV感染種數(shù)及高低危型HPV感染構(gòu)成情況 HPV單一感染的患者占72.28%(11 254/15 569)；HPV多重感染的患者占27.72%(4 315/15 569)，其中以兩種HPV型感染為主，占19.87%(3 093/15 569)；高危型感染率為23.52%(13 171/56 006)，其中單純高危型感染占72.55%(11 296/15 569)，高低危型混合感染占12.04%(1 875/15 569)；低危型感染率為4.28%(2 398/56 006)。單一感染以高危型為主(79.88%，8 990/11 254)，多重感染以單純高危型感染和高低危型混合感染為主(96.89%，4 181/4 315)；HPV感染種數(shù)及高低危型感染構(gòu)成情況見表2。

表2 HPV感染種數(shù)及高低危型HPV感染構(gòu)成情況[n(%)]

續(xù)表2 HPV感染種數(shù)及高低危型HPV感染構(gòu)成情況[n(%)]

2.3各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況 各型別HPV在各年齡組的分布，除了HPV83型在56～<61歲組未被檢出外，其余22種HPV型別在所有年齡組中均有檢出。檢出率居前5位的高危型HPV依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，分別為6.03%、4.78%、3.12%、3.01%、2.14%；檢出率居前3位的低危型HPV依次為HPV81、HPV43、HPV6，分別為3.02%、1.61%、1.26%。檢出率居前5位的HPV型別依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV81、HPV53，高低危型均有。各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況見表3。

表3 各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況(n)

3 討 論

HPV是由7 320 bp組成的無包膜雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其感染具有種屬和組織特異性，是常見的性傳播病毒，而高危型HPV持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌的主要原因[2]，低危型HPV感染與生殖器疣和低度宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)生有關(guān)，所以HPV分型檢測是預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵手段之一。本研究首次對萬州地區(qū)56 006例女性的HPV流行特征進行分析，對萬州地區(qū)HPV檢測、預(yù)防策略制訂和進化特征的研究有促進作用。

HPV檢出率在不同地域和不同人群中差異較大，而本研究顯示萬州地區(qū)門診就診、體檢、住院的女性HPV檢出率為27.80%，與常規(guī)篩查女性相比，其HPV檢出率與剛果(28.2%)[4]接近，高于西班牙(8.3%)[5]，低于哈薩克斯坦(43.8%～55.8%)[6]；在中國，略高于四川(24.1%)[7]，明顯高于河南鄭州(12.09%)[8]、上海(18.98%)[9]、貴州遵義(16.95%)[3]等地區(qū)HPV檢出率，但低于江蘇泰州(34.58%)地區(qū)[10]；宮頸病變患者的HPV感染率明顯高于普通人群，且存在明顯的地區(qū)差異[11]。與有明顯宮頸病變女性相比，本研究中HPV檢出率低于河南省宮頸上皮內(nèi)瘤變1級(CIN1)、CIN2/3、宮頸癌患者的HPV檢出率(分別為62.64%、86.91%、89.21%)[12]?？傮w而言本研究HPV檢出率介于國內(nèi)外HPV檢出率范圍內(nèi)，介于普通女性與宮頸有明顯病變女性之間，屬于正常范圍。而本研究的檢出率仍然提示了萬州地區(qū)女性存在較高的HPV感染風(fēng)險。

全球?qū)m頸癌的平均診斷年齡為53歲，死于宮頸癌的女性平均年齡為59歲[13]，從HPV感染到發(fā)展為宮頸癌，需要10～15年時間，同時，HPV是一種性傳播病毒，性活躍是HPV感染最重要的因素。國內(nèi)外多項研究表明，HPV檢出率按年齡呈“雙峰”分布，且每個地區(qū)的雙峰年齡有差異[4,14]。本研究HPV檢出率顯示出兩個高峰，分別是<21歲(43.78%)和≥56歲(38.71%+39.33%)兩個年齡段；并且多重感染率在<21歲(22.49)和≥56歲(13.29%+16.82%)兩個年齡段也呈“雙峰”分布。第一個高峰可能與年輕女性性生活相對頻繁有關(guān)，第二個高峰可能與55歲以上女性絕經(jīng)后，隨著年齡的增長，靠自身清除病毒的能力逐漸減弱，繼發(fā)HPV持續(xù)感染的機會越高有關(guān)。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)HPV陽性構(gòu)成比最高的年齡在41～<46歲(22.48%)，與中國最近的幾項研究類似[15-16]，雖然年齡是HPV自然轉(zhuǎn)歸的影響因素，但>45歲女性HPV感染后自然清除率低，持續(xù)感染率高，進展率也較高。雖然本研究結(jié)果提示HPV的整體防控重點應(yīng)該放在<21歲和≥56歲女性中，但在患有婦科疾病的女性中，41～<46歲年齡段女性更應(yīng)加強HPV的檢測。與單一感染的女性相比，涉及多種致癌類型HPV的多重感染女性發(fā)生CIN2、宮頸高級別鱗狀上皮內(nèi)病變及以上病變(HSIL+)的風(fēng)險明顯增加。雖然本研究中HPV感染以單一感染為主(72.28%)，但卻以高危型為主(79.88%)；HPV多重感染患者占27.72%，以兩種HPV型感染為主(19.87%)；在多重感染中，以單純高危型感染和高低危型混合感染為主(96.89%)。該研究表明本地區(qū)感染HPV患者中高危型HPV感染的人數(shù)比例較大，從而患HSIL+和CIN2/3的風(fēng)險較大，所以更應(yīng)該加強本地區(qū)HPV的檢測及預(yù)防工作。

研究顯示中國女性約98%的宮頸癌由高危型 HPV導(dǎo)致，其中高危型HPV16、HPV18可以導(dǎo)致約69%的宮頸癌，高危型HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58可以導(dǎo)致約23%的宮頸癌，其他高危型HPV感染則可以導(dǎo)致約6%的宮頸癌，不同HPV型別導(dǎo)致宮頸癌的概率不同；而低危型如HPV6、HPV11則可能造成約90%的生殖器疣[16-17]。本研究顯示，除了HPV83型在56～<61歲組未被檢出外，其余22種HPV型別在所有年齡組中均有檢出，最常見的高危型是HPV52，其次是HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，與國內(nèi)相關(guān)研究基本一致[11,18]。 在本研究中HPV18檢出率在高危型HPV中僅排名第七，而HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68卻更常見，與其他地區(qū)不同[11]，提示HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68在本地區(qū)適應(yīng)能力可能更強，在制訂診斷和預(yù)防措施時應(yīng)加以考慮。世界范圍內(nèi)HPV6和HPV11是最常見的低危型HPV，本研究發(fā)現(xiàn)最常見的低危型是HPV81，然后是HPV43、HPV6和HPV11。HPV81在HPV預(yù)防中并不是重要的型別，但是就本研究結(jié)果來看本地區(qū)對HPV81的重視程度需要提高。

本研究分析了萬州地區(qū)門診就診、體檢、住院女性中HPV的分布狀況，總體而言萬州地區(qū)HPV的分布特征大體上與國內(nèi)外主流研究結(jié)果相似，但也存在一些差異，本地區(qū)HPV的檢測、預(yù)防策略及宮頸癌的篩查策略可能需要根據(jù)本地區(qū)HPV的流行特征進行制訂。