崔 瑾，詹 茜，羅 琴，李俊男，張玉洪△

重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院：1.臨床分子醫(yī)學(xué)檢測(cè)中心；2.產(chǎn)科，重慶 400016

健康的胎盤在母體和胎兒間起轉(zhuǎn)運(yùn)營(yíng)養(yǎng)、氣體和廢物的作用，母體和胎兒各自外周循環(huán)中細(xì)胞是互相獨(dú)立的。當(dāng)胎盤受損，引起胎兒失血，且胎兒全血進(jìn)入母體血液循環(huán)達(dá)到一定量時(shí)可引起母親和胎兒發(fā)生溶血性反應(yīng)，即胎母輸血綜合征(FMH)，其發(fā)病率和病死率均較高，病情的嚴(yán)重性取決于胎兒的失血量[1]。FMH患者早期沒(méi)有明顯的臨床癥狀，晚期診斷主要依靠胎動(dòng)減少或消失，胎心監(jiān)護(hù)出現(xiàn)典型的正弦曲線、胎心基線變異減少及晚期減速，B超檢查顯示胎兒水腫及胎兒生長(zhǎng)受限等[2]。因此，F(xiàn)MH早發(fā)現(xiàn)極為重要，建立一個(gè)快速、準(zhǔn)確、客觀評(píng)估胎兒失血量的方法非常關(guān)鍵。國(guó)外幾乎所有(96%)對(duì)FMH的確診依靠紙片擴(kuò)散(K-B)法。血紅蛋白電泳(HBE)檢測(cè)胎兒血紅蛋白F(HbF)百分含量也可作為輔助診斷FMH的方法。FMH評(píng)估指南指出,隨著流式細(xì)胞術(shù)(FCM) 的廣泛使用，這項(xiàng)技術(shù)已成為診斷FMH的金標(biāo)準(zhǔn)，受限于流式細(xì)胞儀，該方法在國(guó)內(nèi)還沒(méi)有推廣[3]；同時(shí)，熒光素、圈門策略及儀器的靈敏度不同[4]，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的變異和缺乏客觀性，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室在建立該方法時(shí)應(yīng)進(jìn)行性能確認(rèn)。本研究先通過(guò)抗HbF單克隆熒光抗體滴度試驗(yàn)找出胎兒紅細(xì)胞數(shù)量與抗HbF單克隆熒光抗體的最佳反應(yīng)比，建立FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟，再對(duì)該方法的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度及重復(fù)性進(jìn)行確認(rèn)，最后分別采用FCM及HBE對(duì)疑似FMH孕婦外周血標(biāo)本進(jìn)行胎兒紅細(xì)胞和HbF檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果與K-B法進(jìn)行比較，結(jié)合患者臨床相關(guān)癥狀，明確FCM在FMH診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年10月至2021年7月本院產(chǎn)科90例孕婦作為研究對(duì)象，年齡21～36歲，中位年齡27歲，患者自覺(jué)胎動(dòng)減少、超聲多普勒檢查示胎兒大腦中動(dòng)脈收縮期血流峰值>正常值的1.5倍中位數(shù)倍數(shù)(MoM)、胎心監(jiān)護(hù)出現(xiàn)典型的正弦曲線、胎心基線變異減少及晚期減速。通過(guò)HBE或珠蛋白生成障礙性貧血(簡(jiǎn)稱地貧)基因篩查，選出最常見(jiàn)的含有血紅蛋白變異體或地貧相關(guān)基因的5份外周血標(biāo)本，分別含有α-鏈血紅蛋白變體(α-HbV)、β-鏈血紅蛋白變體(β-HbV)、δ-鏈血紅蛋白變體(δ-HbV)、α-地貧相關(guān)基因、β-地貧相關(guān)基因。

1.2儀器與試劑 主要儀器包括血細(xì)胞分析儀(日本希森美康公司)，流式細(xì)胞儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司)，血紅蛋白電泳儀(法國(guó)賽比亞公司)，顯微鏡(日本奧林巴斯公司)；主要試劑包括血紅蛋白測(cè)定試劑盒(法國(guó)賽比亞公司)，磷酸鹽緩沖液(PBS，美國(guó)HyClone公司)，25%戊二醛(美國(guó)Sigma公司)，聚乙二醇辛基苯基醚(美國(guó)賽默飛公司)，抗人HbF-FITC單克隆抗體(美國(guó)賽默飛公司)，磷酸氫二鈉(重慶博藝化學(xué)試劑有限公司)，枸櫞酸(成都市科隆化學(xué)品有限公司)，伊紅(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)，小牛血清清蛋白(BSA，美國(guó)Sigma公司)，乙醇(重慶川東化工集團(tuán)有限公司)。

1.3方法

1.3.1FCM 采用FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞百分比(fetal-RBC)。血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)EDTA抗凝臍帶血和孕婦外周血紅細(xì)胞數(shù)量后，選擇紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量相似的2個(gè)樣品，按照抗體說(shuō)明書(shū)制備臍血和孕婦血紅細(xì)胞懸液，并使其終濃度為(4～6)×104/μL，然后按比例混合上述紅細(xì)胞懸液，得到一系列fetal-RBC理論值(THV)為100%、25%、8%、5%、2%和0%的混合紅細(xì)胞懸液；加1～5 μL紅細(xì)胞懸液、4～8 μL 抗HbF抗體和70 μL PBS/BSA(0.1%)到流式管中，室溫避光孵育15 min，再加入2 mL PBS/BSA 渦旋混勻后以600×g離心5 min，最后移除上清液并加入0.5 mL PBS/BSA重懸紅細(xì)胞上機(jī)檢測(cè)[5]。

1.3.2K-B法 采用K-B法檢測(cè)fetal-RBC。按常規(guī)制備血涂片，自然干燥>10 min，80%乙醇固定5 min，水洗待干，將固定后的血涂片在37 ℃的酸性緩沖液(0.2 mol/L磷酸氫二鈉12.3 mL、0.1 mol/L枸櫞酸37.7 mL、pH值為3.3±0.2)中洗脫8 min，沖洗干燥；在10 g/L伊紅染液中染色1 min，水洗待干后，計(jì)數(shù)1 000個(gè)紅細(xì)胞中胎兒紅細(xì)胞數(shù)量[6]，胎兒紅細(xì)胞為紅色，成人紅細(xì)胞為無(wú)色淡影。

1.3.3HBE 采用HBE檢測(cè)HbF。血紅蛋白電泳儀開(kāi)機(jī)自檢結(jié)束后，檢測(cè)血紅蛋白A2(HbA2)和HbF質(zhì)控標(biāo)本，室內(nèi)質(zhì)控通過(guò)后將待測(cè)標(biāo)本推入進(jìn)樣倉(cāng)進(jìn)行外周血HbF檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞數(shù)量方法的建立 按試劑說(shuō)明書(shū)推薦5 μL抗HbF單克隆熒光抗體可染色2×105個(gè)紅細(xì)胞，上機(jī)檢測(cè)結(jié)果不佳。為檢測(cè)抗體的效價(jià)，采用THV為25%且胎兒紅細(xì)胞數(shù)量約為5×104個(gè)臍血和孕婦血混合紅細(xì)胞懸液，分別與3、4、5、6和7 μL抗HbF單克隆熒光抗體反應(yīng)，上機(jī)檢測(cè)fetal-RBC為(23.33±0.33)%，胎兒紅細(xì)胞數(shù)量與成人紅細(xì)胞數(shù)量平均熒光強(qiáng)度差(ΔMFI)為10.65～55.52(圖1A)。為進(jìn)一步驗(yàn)證抗原抗體最適反應(yīng)比，取1 μL臍血紅細(xì)胞懸液(含胎兒紅細(xì)胞5×104個(gè))分別與5、6、7和8 μL抗HbF單克隆熒光抗體反應(yīng)，抗體量為5～6 μL時(shí)，fetal-RBC及熒光強(qiáng)度(MFI)升高幅度最大，但隨著抗體量增加，MFI緩慢增加，而fetal-RBC開(kāi)始降低(圖1B)。綜合考慮后，fetal-RBC和MFI在后續(xù)試驗(yàn)中均按胎兒紅細(xì)胞數(shù)量與抗HbF單克隆熒光抗體比為5×104個(gè)∶6 μL進(jìn)行熒光抗體染色。

注：A為混合紅細(xì)胞懸液中fetal-RBC理論值為25%；B為臍血紅細(xì)胞懸液中fetal-RBC理論值為100%。圖1 不同劑量抗HbF抗體染色后FCM檢測(cè)fetal-RBC及MFI

2.2FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞方法性能驗(yàn)證 分別采用FCM、HBE及K-B法檢測(cè)fetal-RBC理論值(THV)為25%、8%、5%、2%的臍血和孕婦混合血紅細(xì)胞懸液，3種方法準(zhǔn)確度比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，THV與FCM、FCM與HBE、FCM與K-B法fetal-RBC理論值與實(shí)測(cè)值比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.591、0.217、0.286)(圖2A)。同時(shí)采用FCM檢測(cè)值(Y)與理論值(X1)及HBE檢測(cè)值(X2)分別進(jìn)行直線回歸分析，得到Y(jié)=0.969X1+0.426(R2=0.999 95)和Y=1.185X2-0.229(R2=0.999 76)。

檢測(cè)靈敏度和流式細(xì)胞儀收集的總細(xì)胞數(shù)密切相關(guān)，總細(xì)胞數(shù)越多，靈敏度越高。引入反應(yīng)體系的總紅細(xì)胞量數(shù)最少為5×104個(gè)，儀器收集到30個(gè)及以上信號(hào)數(shù)為有效細(xì)胞群，該方法檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞的最低靈敏度為0.06%，隨著參加反應(yīng)總紅細(xì)胞數(shù)量增加，相應(yīng)的檢測(cè)靈敏度也不斷提高，見(jiàn)表1。

表1 FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞的靈敏度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

采用FCM對(duì)含有α-HbV、β- HbV、δ- HbV、α-地貧伴HbCs外周血進(jìn)行fetal-RBC檢測(cè)，結(jié)果均<0.68%，見(jiàn)表2。值得注意的是，對(duì)于β-地貧伴HbF升高的成人外周血，F(xiàn)CM檢測(cè)到30.08% HbF弱陽(yáng)性，即MFI較低的紅細(xì)胞(F-RBC)(圖2B)，而HBE檢測(cè)到HbF 相對(duì)含量?jī)H為10.6%，通過(guò)比較FCM和HBE結(jié)果，可以將fetal-RBC與F-RBC明確區(qū)分開(kāi)來(lái)。

表2 FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞的特異度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

注：A為FCM、HBE、K-B法的理論值與實(shí)測(cè)值比較；B為FCM檢測(cè)β-地貧伴HbF升高患者外周血的fetal-RBC；C為90 d內(nèi)fetal-RBC高、中、低水平的5次FCM檢測(cè)值。圖2 FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞方法的準(zhǔn)確性、特異度及重復(fù)性驗(yàn)證

由于FCM分析對(duì)象為活細(xì)胞，為了避免自然凋亡造成的計(jì)數(shù)降低，將外周血標(biāo)本制成固定好的紅細(xì)胞懸液并儲(chǔ)存在4 ℃，在90 d內(nèi)進(jìn)行了5次fetal-RBC檢測(cè)，高、中、低3種水平的變異系數(shù)(CV)分別為1.36%、3.22%、7.00%，均小于10.00%(圖2C)。

2.3FCM檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞和HBE檢測(cè)HbF 將K-B法檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞百分比大于 0.68%暫定為FMH診斷標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)90例疑似FMH孕婦外周血標(biāo)本進(jìn)行FCM和HBE聯(lián)合檢測(cè)：82例孕婦外周血標(biāo)本聯(lián)合檢測(cè)均為陰性，排除FMH診斷；各有3例孕婦外周血標(biāo)本單檢陽(yáng)性，結(jié)合地貧基因篩查結(jié)果，判定為假陽(yáng)性；2例孕婦外周血標(biāo)本聯(lián)合檢測(cè)均為陽(yáng)性，確診為FMH。

2.4診斷FMH病例2例 1例患者孕40周，胎心監(jiān)護(hù)異常6 h后采集外周靜脈血進(jìn)行FMH檢測(cè)，結(jié)果如下：FCM檢測(cè)fetal-RBC為6.09%，MFI為56.78(圖3A)，HBE檢測(cè)HbF百分含量為4.90%(圖3B)，隨后進(jìn)行K-B 法驗(yàn)證，K-B法計(jì)數(shù)為6.30%(圖3C)，3項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果一致，均提示FMH發(fā)生，醫(yī)生對(duì)患者緊急進(jìn)行剖宮產(chǎn)，產(chǎn)下1名活胎男嬰，Apgar評(píng)分為8分(膚色扣1分、肌張力扣1分)-10-10分。另1例患者孕39周，腹痛2 h，堅(jiān)持順產(chǎn)，常規(guī)子宮收縮近5 h，順產(chǎn)分娩一活女?huà)?，Apgar評(píng)分6分(膚色扣2分，呼吸扣1分，肌張力扣1分)-7分(膚色扣2分，呼吸扣1分)-7分(膚色扣2分，呼吸扣1分)，并進(jìn)行FMH相關(guān)檢測(cè)，fetal-RBC為6.57%，HbF為4.90%，根據(jù)公式估計(jì)胎兒失血量為230 mL，考慮存在新生兒貧血轉(zhuǎn)入新生兒科。

注：A為FCM檢測(cè)到胎兒紅細(xì)胞-右側(cè)峰，MFI為56.78；B中箭頭所指的中間峰代表HbF，含量為4.90%；C為伊紅染色陽(yáng)性的胎兒紅細(xì)胞及伊紅染色陰性的成人紅細(xì)胞。圖3 1例FMH陽(yáng)性病例檢測(cè)結(jié)果

2.5除外FMH診斷病例1例 孕婦27歲，妊娠12周后開(kāi)始常規(guī)產(chǎn)前檢查，HBE屢次發(fā)現(xiàn)HbF升高。最近1次HBE結(jié)果：HbF為6.40%，HbA2為2.1%(圖4A)，血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果如下：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為3.56×1012/L，血紅蛋白為120 g/L，血細(xì)胞比容為36.10%，平均紅細(xì)胞體積為101.4 fL，平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量為33.7 pg，平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度為332.0 g/L。產(chǎn)科醫(yī)生建議孕婦先進(jìn)行地貧基因篩查，基因位點(diǎn)包含α-地貧的153個(gè)突變和4個(gè)常見(jiàn)缺失，β-地貧的348個(gè)突變和3個(gè)常見(jiàn)缺失，未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果；再進(jìn)行FMH實(shí)驗(yàn)室檢查，F(xiàn)CM未檢測(cè)到胎兒紅細(xì)胞(圖4B)，但F-RBC百分比高達(dá)38.93%，MFI為12.29，與HBE檢測(cè)的HbF含量相差較大。隨后對(duì)該患者標(biāo)本行針對(duì)α基因稀有缺失、α三聯(lián)體和血紅蛋白持續(xù)增多癥相關(guān)的DNA凝膠電泳，得出此患者是存在αααanti4.2的α-地貧患者(圖4C)，這就解釋了孕婦HbF百分比增高的原因。

注：A中箭頭所指的中間峰代表HbF，百分含量為6.40%；B為FCM檢測(cè)到的右側(cè)峰，為HbF弱陽(yáng)性紅細(xì)胞，MFI為12.29；C為基因檢測(cè)結(jié)果，左邊5道分別為DNA標(biāo)志物、αααanti3.7和αααanti4.2陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照；右邊2道為待測(cè)樣品αααanti3.7和αααanti4.2的檢測(cè)結(jié)果。圖4 1例排除FMH的αααanti4.2地貧病例檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

FMH發(fā)病機(jī)制或誘因目前不清楚，中度到嚴(yán)重程度的FMH發(fā)病率估算為每1 000個(gè)新生兒出現(xiàn)1～3個(gè)[7-9]。FMH的流行病學(xué)調(diào)查缺乏大量數(shù)據(jù)的前瞻性研究，同時(shí)部分產(chǎn)科醫(yī)生對(duì)其警惕程度不夠均導(dǎo)致該病現(xiàn)有發(fā)病率比實(shí)際情況低很多[1]。有研究支持對(duì)急性腹部創(chuàng)傷的孕婦，若出現(xiàn)新生兒貧血、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、胎兒水腫及不明原因死胎均應(yīng)及時(shí)開(kāi)展FMH篩查[10-11]。本研究共檢測(cè)90例臨床懷疑FMH的孕婦外周血標(biāo)本，確診FMH 2例，陽(yáng)性率為2.22%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其估算的發(fā)病率，提示對(duì)于出現(xiàn)胎兒宮內(nèi)貧血的孕婦很大一部分可能漏診了FMH。因此，有必要將FMH的確診試驗(yàn)作為常規(guī)產(chǎn)前檢查項(xiàng)目，以便能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)早期FMH，避免晚期出現(xiàn)嚴(yán)重后果；同時(shí)對(duì)這類病例的積累，也為FMH的流行病學(xué)研究提供了臨床參考數(shù)據(jù)。

K-B法檢測(cè)胎兒紅細(xì)胞已有60年歷史，它是利用HbF不被酸洗脫的原理使胎兒紅細(xì)胞顯紅色，成人紅細(xì)胞為無(wú)色淡影，最初主要用來(lái)評(píng)估Rh陰性孕婦預(yù)防性抗RhD免疫球蛋白的使用劑量，因此，只對(duì)Rh陰性孕婦做該檢查。因其成本低，不需要特殊儀器，目前仍是大部分中國(guó)醫(yī)生診斷FMH的首選實(shí)驗(yàn)室方法，待產(chǎn)婦胎兒紅細(xì)胞百分含量參考值范圍小于0.68%，但手工操作(如血片厚度、干燥度及酸性緩沖液洗脫時(shí)間等)均會(huì)影響胎兒紅細(xì)胞染色[10]，結(jié)果判定主觀性強(qiáng)，重復(fù)性差，在不同實(shí)驗(yàn)員或?qū)嶒?yàn)室間檢測(cè)結(jié)果差異較大，而且當(dāng)孕婦紅細(xì)胞存在耐酸的血紅蛋白變異體，或存在如β-地貧、鐮刀型細(xì)胞貧血、遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白綜合征等造成F-RBC比例升高的血紅蛋白病時(shí)，K-B法檢測(cè)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性[12-13]。HBE檢測(cè)的是紅細(xì)胞溶血后各血紅蛋白組分的百分比，成人紅細(xì)胞僅有非常少量甚至沒(méi)有HbF(0～2%)，胎兒紅細(xì)胞主要組分即HbF，然而25%的孕婦從懷孕8周起紅細(xì)胞HbF開(kāi)始增加，到孕32周時(shí)HbF百分含量可高達(dá)7%[3]，因此，HBE雖可以輔助診斷FMH[14]，但不能確診。與K-B法比較，F(xiàn)CM檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，省時(shí)、省力，該法基于胎兒紅細(xì)胞含70%以上的HbF，健康成人紅細(xì)胞含90%以上的HbA，利用抗HbF單克隆熒光抗體特異性標(biāo)記胎兒紅細(xì)胞中的HbF，而不與母血紅細(xì)胞中的HbA或其他血紅蛋白變異體反應(yīng)，從而準(zhǔn)確測(cè)定胎兒紅細(xì)胞在母血紅細(xì)胞中的百分比，且流式細(xì)胞儀可在短時(shí)間內(nèi)收集數(shù)萬(wàn)至數(shù)十萬(wàn)個(gè)細(xì)胞信號(hào)，檢測(cè)靈敏度及重復(fù)性較高[10,15]，結(jié)果客觀穩(wěn)定，是臨床確診FMH的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)展方向。

本研究對(duì)臨床90例疑似FMH的孕婦外周血標(biāo)本分別進(jìn)行FCM和HBE兩種方法檢測(cè)，93.33%(84/90)的結(jié)果具有一致性。其中3例標(biāo)本FCM結(jié)果為胎兒紅細(xì)胞百分含量偏高，而HBE結(jié)果顯示紅細(xì)胞裂解液中主要為HbA和HbA2，HbF相對(duì)百分含量較低，其原因可能是沒(méi)有采用新鮮臍血作為陽(yáng)性對(duì)照，流式細(xì)胞儀每天的flowcheck雖然合格，但光路同前次還是有少許差異，因而造成FCM檢測(cè)后結(jié)果為假陽(yáng)性；另外3例檢測(cè)結(jié)果不一致的情況是FCM僅檢測(cè)到HbF弱陽(yáng)性的F-RBC，未檢測(cè)到HbF強(qiáng)陽(yáng)性的胎兒紅細(xì)胞，HBE結(jié)果為HbF>2%且HbA2>3.5%，因?yàn)镠bA2>3.5%是β-地貧患者HBE的典型表現(xiàn)，相對(duì)高水平的HbF也是地貧表現(xiàn)之一[16]，經(jīng)過(guò)地貧基因檢測(cè)，3例患者均確診為伴HbF升高的β-地貧。因此，本研究在后續(xù)進(jìn)行FMH確診試驗(yàn)時(shí)，均采用FCM和HBE兩種方法，并且每次FCM檢測(cè)需加新鮮臍血作為陽(yáng)性對(duì)照，以確定陰陽(yáng)界限。

值得注意的是，母血中胎兒紅細(xì)胞數(shù)量主要和以下3個(gè)因素有關(guān)，胎兒失血量、出血時(shí)間及母血中是否存在胎兒紅細(xì)胞抗體，出血時(shí)間太久或母血中存在針對(duì)胎兒紅細(xì)胞的抗體，均可導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏低甚至假陰性。因此，檢測(cè)時(shí)機(jī)非常重要。本研究2例FMH患者，1例患者采用FCM及HBE聯(lián)合檢測(cè)確診為FMH后及時(shí)行剖宮產(chǎn)，胎兒情況良好，另1例孕婦腹痛發(fā)生后堅(jiān)持順產(chǎn)，醫(yī)生對(duì)FMH的警惕性不足，未及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，新生兒貧血嚴(yán)重，情況較差。FCM及HBE聯(lián)合檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短，孕婦僅需提供1 mL抗凝外周血，即可對(duì)外周血中胎兒紅細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，為FMH篩查納入大規(guī)模常規(guī)產(chǎn)前檢查提供了可能性。重慶作為全國(guó)地貧高發(fā)地區(qū)之一，F(xiàn)MH篩查同樣也能為稀有基因型地貧的鑒別診斷提供新證據(jù)。而且ABO血型相容的胎兒紅細(xì)胞與成人外周血紅細(xì)胞的壽命相同[17]，對(duì)于分娩時(shí)出現(xiàn)胎兒窘迫或貧血的產(chǎn)婦在生產(chǎn)4個(gè)月內(nèi)均可采集外周血進(jìn)行FMH篩查找到原因。

綜上所述，本研究建立了FCM檢測(cè)FMH的非創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷方法，其聯(lián)合HBE檢查，不但可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)評(píng)估宮內(nèi)胎兒出血量，而且為后續(xù)治療方案的調(diào)整提供依據(jù)，改善了胎兒不良預(yù)后。