劉夢(mèng)雪，劉優(yōu)優(yōu)，何云鳳，周博，李蘊(yùn)玉，李佩國

（河北科技師范學(xué)院 河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北秦皇島 066604）

蛋雞進(jìn)入產(chǎn)蛋后期后，對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力減弱，生產(chǎn)性能逐漸下降，產(chǎn)蛋率逐漸降低，破蛋率、畸形蛋率升高（Chen等，2021；周玉雙，2019；崔闖飛等，2018 ），而蛋雞產(chǎn)蛋后期較長，占整個(gè)產(chǎn)蛋期的50%（王曉濤，2016），因此，為提高養(yǎng)殖者的經(jīng)濟(jì)效益，需要采取策略來提高產(chǎn)蛋后期的產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)，以充分發(fā)揮蛋雞在整個(gè)產(chǎn)蛋周期的生產(chǎn)性能?？咕模ˋMPs）是一種具有廣譜抗菌、抗病毒、抗寄生蟲、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能的小分子多肽類物（Kaur等，2020）。近年來，其作為一種飼料添加劑受到了越來越多的關(guān)注。前人對(duì)抗菌肽的研究大多集中于在基礎(chǔ)飼料中添加抗菌肽后能提高動(dòng)物的免疫性能，促進(jìn)生長，改善腸道組織結(jié)構(gòu)和環(huán)境等方面（Zi等，2020），但是關(guān)于抗菌肽對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及血清生化指標(biāo)影響的相關(guān)研究報(bào)道較少，尤其是對(duì)蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)代謝率的研究鮮見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在研究抗菌肽對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)代謝和血清生化指標(biāo)的影響，為其作為新型飼料添加劑的研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 抗菌肽由中科康源（唐山）生物技術(shù)有限公司提供，基于微流控技術(shù)高通量進(jìn)化從枯草芽孢桿菌中篩選出，其濃度可達(dá)1.5 g/L。

1.2 試驗(yàn)用飼糧與營養(yǎng)水平 飼糧參照我國飼料成分及營養(yǎng)價(jià)值表（2019）配制并加工成粉狀配合飼料，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選取66 周齡體重與產(chǎn)蛋率相近的海蘭褐蛋雞120只，隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 只蛋雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在飼喂基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上分別添加100、200、400 mg/kg 的抗菌肽。試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正試期56 d。在預(yù)試期間，記錄各組蛋雞的產(chǎn)蛋數(shù)和蛋重，并進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整，使各組間的產(chǎn)蛋率和平均蛋重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在河北科技師范學(xué)院牧場(chǎng)內(nèi)進(jìn)行，采用籠養(yǎng)，自由采食與飲水，每日光照16.5 h，按常規(guī)免疫，定期清糞和消毒，試驗(yàn)期間每日觀察蛋雞的健康狀況并做好飼養(yǎng)記錄。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 試驗(yàn)期間以重復(fù)為單位每日記錄各組雞的產(chǎn)蛋數(shù)、破蛋數(shù)、蛋重，每周記錄給料量和剩料量，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)計(jì)算其產(chǎn)蛋率、平均蛋重、料蛋比和破蛋率。

1.5.2 蛋品質(zhì)測(cè)定 在試驗(yàn)第55～ 56 天連續(xù)兩天從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)收集3 枚雞蛋，使用電子天平測(cè)定蛋重；使用游標(biāo)卡尺測(cè)量蛋的縱徑與橫徑并計(jì)算蛋形指數(shù)；使用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀測(cè)定蛋殼強(qiáng)度；使用數(shù)顯外徑千分尺測(cè)定蛋殼厚度；使用比色扇測(cè)定蛋黃顏色；使用蛋黃分離器分離蛋黃，用電子天平稱重并計(jì)算蛋黃比例；使用鋼尺測(cè)量蛋白高度；計(jì)算哈夫單位。

1.5.3 營養(yǎng)物質(zhì)利用率 在試驗(yàn)第54～ 56 天連續(xù)三天以重復(fù)為單位采用全收糞法進(jìn)行代謝試驗(yàn)，將收集糞樣中的羽毛、飼料等雜質(zhì)剔除后稱重。65 ℃烘干至恒重，回潮24 h，粉碎過40 目篩，裝入樣品瓶中，用于測(cè)定飼糧、糞便中粗蛋白質(zhì)、脂肪和粗灰分的含量，并計(jì)算出營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

1.5.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從每個(gè)重復(fù)選取2 只體重相近的雞，空腹12 h 后翅下靜脈采血5 mL，靜置1 h 后于3000 r/min離心10 min，分裝血清于-20 ℃保存。采用南京建成試劑盒測(cè)定血清中葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、尿酸、總蛋白、白蛋白、球蛋白、鈣、磷、堿性磷酸酶的含量。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，并通過Duncan's法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P <0.05 表示差異顯著，P >0.05 表示無顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗菌肽對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組的產(chǎn)蛋率分別提高5.72%（P <0.05）和3.41%（P <0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組的平均蛋重提高1.27%（P <0.05），料蛋比降低6.07%（P <0.05）。試驗(yàn)各組的破蛋率均低于對(duì)照組，但差異不顯著（P >0.05）。

表2 抗菌肽對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 抗菌肽對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 由表3 可知，飼糧中添加不同水平的抗菌肽對(duì)蛋重、蛋形指數(shù)、蛋白高度及哈夫單位均無顯著影響（P >0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的蛋黃比例提高3.90%（P<0.05）；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組的蛋殼厚度均提高5.56%（P<0.05），蛋黃顏色分別提高11.54%（P <0.05）和14.37%（P <0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組的蛋殼強(qiáng)度提高8.90%（P <0.05）。

表3 抗菌肽對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 抗菌肽對(duì)蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)利用率的影響 由表4 可知，試驗(yàn)各組干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)及粗脂肪的利用率與對(duì)照組相比差異均不顯著（P >0.05），而試驗(yàn)Ⅱ組的粗灰分利用率比對(duì)照組提高16.43%（P <0.05）。

表4 抗菌肽對(duì)蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)利用率的影響 %

2.4 抗菌肽對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 由表5可知，飼糧中添加不同水平的抗菌肽對(duì)蛋雞血清中葡萄糖、甘油三酯、尿酸、白蛋白及鈣含量均無顯著影響（P>0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組血清中的總膽固醇含量分別降低39.96%（P <0.05）、35.36%（P <0.05）和27.62%（P <0.05），球蛋白含量分別提高22.52%（P <0.05）、22.86%（P <0.05）和25.88%（P <0.05），磷含量分別提高53.42%（P <0.05）、39.13%（P <0.05）和52.17%（P <0.05）；試驗(yàn)Ⅲ組的總蛋白含量提高14.60%（P <0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組的堿性磷酸酶活性提高24.00%（P <0.05）。

表5 抗菌肽對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 抗菌肽對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 近年來，試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)將抗菌肽添加到飼料中可以改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的生產(chǎn)性能。Chen 等（2020）研究表明，在72 周齡的海蘭褐蛋雞飼糧中添加100 mg/kg 的天蠶素抗菌肽能顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率，降低料蛋比。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加不同水平的抗菌肽對(duì)蛋雞平均日采食量與破蛋率無顯著影響，添加一定水平的抗菌肽能夠顯著降低蛋雞的料蛋比、提高產(chǎn)蛋率、增加平均蛋重，與前人研究報(bào)道基本一致?？赡苁强咕拇龠M(jìn)了雌激素的分泌（周芬等，2021），從而促進(jìn)了卵泡吸收卵黃物質(zhì)并加速了卵黃沉積（張磊，2017），以此提高了蛋雞產(chǎn)蛋性能。還有可能是抗菌肽可以清除體內(nèi)自由基（肖明珠等，2010），降低肝功能損傷，促進(jìn)卵黃前體物質(zhì)合成，從而提高產(chǎn)蛋性能。

3.2 抗菌肽對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋黃顏色等是評(píng)價(jià)蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)，提高蛋殼強(qiáng)度可以減少蛋殼在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中造成的經(jīng)濟(jì)損失（Zhan等，2019），蛋黃顏色越深表明雞蛋等級(jí)越高，越受消費(fèi)者青睞（秦彩玲等，2020）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加一定濃度的抗菌肽能夠顯著提高蛋雞的蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋黃比例和蛋黃顏色。抗菌肽能提高蛋殼質(zhì)量的原因可能是抗菌肽能改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，調(diào)節(jié)機(jī)體物質(zhì)代謝，促進(jìn)機(jī)體吸收鈣磷，進(jìn)而提高蛋殼品質(zhì)?？咕哪芴岣叩包S顏色的原因可能是抗菌肽可改善機(jī)體腸道的酶活性，促進(jìn)機(jī)體對(duì)色素的吸收，使類胡蘿卜素等色素沉積，進(jìn)而提高蛋黃顏色。

3.3 抗菌肽對(duì)蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)利用率的影響 目前，有關(guān)抗菌肽對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋后期營養(yǎng)物質(zhì)利用率影響的研究鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加不同劑量的抗菌肽對(duì)蛋雞干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的利用率無顯著影響，而粗灰分的利用率顯著提高?？咕哪芴岣郀I養(yǎng)物質(zhì)利用率可能是由于其能調(diào)節(jié)腸道微生物平衡，刺激黏膜免疫（李平等，2019）。由于抗菌肽的來源、試驗(yàn)動(dòng)物營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)階段均可影響試驗(yàn)結(jié)果，因此抗菌肽作為飼料添加劑對(duì)蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)利用率的影響還需進(jìn)一步研究。

3.4 抗菌肽對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)變化與機(jī)體的代謝狀況密切相關(guān)。血清總膽固醇含量是反映機(jī)體脂質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。血清總蛋白含量與機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平有關(guān)，球蛋白含量一定程度上可反映機(jī)體免疫水平。堿性磷酸酶是小腸消化吸收功能的標(biāo)志酶，可防御致病菌脂多糖損害腸道黏膜（邢冠潤，2019）。血清無機(jī)磷含量與蛋殼質(zhì)量呈正向關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，添加一定濃度的抗菌肽能顯著降低產(chǎn)蛋后期蛋雞血清總膽固醇的含量，顯著提高總蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶及磷的含量。研究還發(fā)現(xiàn)添加抗菌肽對(duì)血清葡萄糖、鈣含量有提高趨勢(shì)，對(duì)甘油三酯含量有降低趨勢(shì)。本試驗(yàn)結(jié)果提示，抗菌肽能提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的免疫力，增強(qiáng)蛋白質(zhì)合成代謝，提高小腸的消化吸 收能力和腸道消化酶活性，促進(jìn)糖原分解、脂質(zhì)代謝和鈣磷吸收，從而提高蛋雞產(chǎn)蛋性能，改善蛋品質(zhì)。

4 結(jié)論

在產(chǎn)蛋后期蛋雞日糧中添加抗菌肽可以提高蛋雞的生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)利用率及血清生化指標(biāo)。綜合考慮各項(xiàng)性能指標(biāo)結(jié)果，抗菌肽的適宜添加量為200 mg/kg。