李德濤 侯玉磊

血清鐵蛋白是機(jī)體內(nèi)一種貯存鐵的可溶組織蛋白,作為鐵的貯存形式,其在血清中的濃度與體內(nèi)貯存的鐵呈正比,可用于監(jiān)測體內(nèi)鐵代謝［1］。血清鐵蛋白在急性髓性白血病中會上升,隨著病情的好轉(zhuǎn)而降低［2］。妊娠期糖尿病患者一般血清鐵蛋白會升高［3］。有分析表明血清鐵蛋白水平同糖尿病患者急性冠狀動脈綜合征的冠脈病變程度相關(guān)［4］,另外,鐵蛋白在乳腺癌、食管癌和肺癌等腫瘤疾病中出現(xiàn)不同程度的升高,且與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測,可大大提高腫瘤的檢出率,可以作為腫瘤療效的評估指標(biāo)［5-7］。目前,國內(nèi)臨床將血清鐵蛋白用于預(yù)測機(jī)體內(nèi)鐵含量和惡性腫瘤的實驗室診斷,但大部分實驗室的血清鐵蛋白仍采用試劑說明書提供的參考區(qū)間,隨著生活水平的改善,健康成人血清鐵蛋白的濃度亦有可能會發(fā)生改變,經(jīng)調(diào)查本院2016 年下半年2843 例健康體檢者血清鐵蛋白濃度在參考區(qū)間以外的比例為22%,因此,若醫(yī)生將血清鐵蛋白應(yīng)用于腫瘤的診斷中容易誤診,進(jìn)而造成患者恐慌。因此,作者希望通過研究重慶地區(qū)健康人群血清鐵蛋白水平,期望建立基于羅氏Cobas e602 檢測系統(tǒng)的適合本地區(qū)、本人群的血清鐵蛋白參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017 年1～12 月來自重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院健康體檢中心的成年健康體檢者2000 例：按照性別分為男性和女性,各1000 例。男性患者年齡22～85 歲,平均年齡45 歲。女性患者年齡19～78 歲,平均年齡42 歲。男性和女性患者的一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性?；颊咴俑鶕?jù)年齡分為18～30 歲、31～40 歲、41～50 歲、51～60 歲、≥61 歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①1 個月內(nèi)無急性病感染史；②B 超提示無肝硬化、脂肪肝及其他肝??；③無炎癥、感染、腎臟和肺部疾??；④半年內(nèi)無手術(shù)史和輸血史；⑤女性不在妊娠期或哺乳期；⑥調(diào)查前1 個月內(nèi)無獻(xiàn)血；⑦無腫瘤疾病史。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 嚴(yán)格按照科室靜脈采血操作規(guī)程采集空腹靜脈血2 ml,室溫放置5 min,待血液凝固后,3500 r/min,離心10 min,排除黃疸、溶血、脂血標(biāo)本,分離血清后待檢,8 h 內(nèi)完成檢測。

1.2.2 儀器與試劑 德國羅氏Cobas e602 全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀,鐵蛋白檢測試劑盒(批號：307544)、校準(zhǔn)品(批號：330886)及質(zhì)控品(批號：237198)均由羅氏公司提供。

1.2.3 質(zhì)量控制 按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程在實驗前分別檢測羅氏配套低水平和高水平質(zhì)控,確定質(zhì)控在控的前提下進(jìn)行樣本測定,本年度Cobas e602 全自動電化學(xué)分析儀鐵蛋白性能評價的批間平均變異系數(shù)分別為2.5%和2.8%,不精密度可接受。同時查閱2017 年衛(wèi)生部門臨檢中心鐵蛋白室間質(zhì)評,成績滿意,正確度得到保障。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS13.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。按照CLSI C28-A3［8］文件判斷離群值并剔除,偏態(tài)分布資料參考區(qū)間采用百分位數(shù)法表示,以非參數(shù)排序取P2.5～P97.5作為參考區(qū)間,組間比較采用秩和檢驗。P＜0.01 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 男女兩組鐵蛋白水平比較 對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行離群分析,采用Dixon 法剔除離群值,998 例健康成年男性和998 例健康成年女性清鐵蛋白測定結(jié)果納入下一步統(tǒng)計分析。對所有數(shù)據(jù)按性別進(jìn)行分組統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)：健康成年男性和健康成年女性血清鐵蛋白測定結(jié)果均為偏態(tài)分布,應(yīng)當(dāng)采用百分位數(shù)法進(jìn)行進(jìn)一步分析(圖1,圖2)。經(jīng)秩和檢驗分析,健康成年男性血清鐵蛋白濃度明顯高于健康成年女性,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義［334.50(225.40,488.70)ng/ml VS 79.17(39.88,133.10)ng/ml,P＜0.01］。見圖3。

圖1 998 例健康男性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖2 998 例健康女性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖3 不同性別血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.2 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較 將同性別血清鐵蛋白濃度按年齡分段并同上一年齡段進(jìn)行比較,≥61 歲健康成年男性的血清鐵蛋白濃度低于51～60 歲男性,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。51～60 歲健康成年女性的血清鐵蛋白濃度高于41～50 歲女性,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見圖4。女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

表1 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較［M(P25,P75),ng/ml］

圖4 不同性別及年齡段血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.3 建立重慶地區(qū)男女血清鐵蛋白參考區(qū)間 重慶地區(qū)健康成年不同性別的血清鐵蛋白濃度有差異,相同性別不同年齡段的血清鐵蛋白濃度也有差異,所以重慶地區(qū)健康成年參考區(qū)間應(yīng)針對不同性別和年齡段來進(jìn)行設(shè)置。將無統(tǒng)計學(xué)意義的年齡段進(jìn)行合并,得出血清鐵蛋白不同性別及年齡段參考區(qū)間：男性：18～60 歲 為88.93～1139.35 ng/ml,≥61 歲 為34.10～854.42 ng/ml；女性：18～50 歲為6.17～260.73 ng/ml,≥51 歲為30.59～500.45 ng/ml。見表2。

2.4 重慶地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間與其他地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間比較 統(tǒng)計文獻(xiàn)可知,血清鐵蛋白在不同地區(qū),不論檢測方法是否相同,其參考區(qū)間并不一致。見表2。

表2 不同區(qū)域的血清鐵蛋白參考區(qū)間

2.5 參考區(qū)間驗證 選取2018 年1 月～2019 年3 月在健康體檢中心體檢的體檢人員進(jìn)行參考區(qū)間驗證,按照CLSIC28-A3 文件剔除離群值。根據(jù)CLSIC28-A3文件,制定判斷標(biāo)準(zhǔn)為：男性和女性血清鐵蛋白濃度在參考區(qū)間以外的人數(shù)占總?cè)藬?shù)的10%以下,認(rèn)為則驗證通過。經(jīng)驗證,本次血清鐵蛋白參考區(qū)間通過驗證。見表3。

表3 2018 年1 月～2019 年3 月健康體檢血清鐵蛋白參考區(qū)間驗證

3 討論

鐵蛋白作為人體細(xì)胞內(nèi)最重要的儲鐵蛋白,主要功能是儲存并調(diào)節(jié)血清鐵水平。同時作為一種急性時相反應(yīng)蛋白,其能夠調(diào)節(jié)造血和免疫系統(tǒng)［12］,血清鐵蛋白的降低常與缺鐵性貧血相關(guān),由此可見,血清鐵蛋白的異常升高或降低都有臨床意義。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人們的生活方式和飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,體內(nèi)血清鐵貯存量也有明顯的改變。有研究發(fā)現(xiàn)很多因素影響血清鐵蛋白參考區(qū)間的建立,主要包括研究人群(性別、生活習(xí)慣和水平等)和檢測方法兩個方面,另外有研究證實,年齡、運(yùn)動、飲酒等因素均會影響血清鐵蛋白濃度［13,14］。

本次研究顯示,女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。根據(jù)文獻(xiàn)報道,這可能與女性飲食較少,且月經(jīng)失血有關(guān)［15］。男性血清鐵蛋白在成年后逐漸增加,在30～60 歲相對穩(wěn)定,在60 歲后開始下降,這可能與老年人飲食結(jié)構(gòu)改變和鐵吸收能力有關(guān)。女性50 歲以后血清鐵蛋白濃度明顯升高,這可能與女性絕經(jīng)相關(guān)。這提示,血清鐵蛋白參考區(qū)間建立應(yīng)該根據(jù)性別進(jìn)行劃分,并且按年齡段進(jìn)行統(tǒng)計分析。

參考區(qū)間又稱正常值范圍,是醫(yī)生判斷患者健康與否的重要標(biāo)準(zhǔn)之一,這就要求臨床實驗室提供正確適用的參考區(qū)間,否則會導(dǎo)致誤診、引起患者的恐慌,甚至錯誤的診療。因此建立適合本地區(qū)人群的血清鐵蛋白參考區(qū)間,以給臨床醫(yī)生提供正確可靠的診斷提示就顯得至關(guān)重要。本次建立重慶地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間時發(fā)現(xiàn)應(yīng)當(dāng)按性別和年齡段進(jìn)行劃分,同其他地區(qū)采用相同檢測方法或不同檢測方法的參考區(qū)間也不一致［9-11］,基于電化學(xué)檢測方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間上限高于基于免疫比濁和化學(xué)發(fā)光方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間,這可能與血清鐵蛋白的檢測方法有關(guān),但需要進(jìn)一步研究；其次可能與不同地區(qū)的人群的生活方式以及飲食結(jié)構(gòu)不同有關(guān)。本研究也僅是基于羅氏電化學(xué)方法的檢測,且＞60 歲健康成年男性較少。鑒于血清鐵蛋白在腫瘤疾病診斷的重要性,本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同檢測方法的血清鐵蛋白參考范圍不一致,對于同一標(biāo)本,應(yīng)用不同檢測方法可能會出現(xiàn)不一致的結(jié)果,這就需要根據(jù)實驗方法建立相應(yīng)人群的參考范圍,對于重慶地區(qū)不同檢測方法間的血清鐵蛋白比對需要在下一步的工作中進(jìn)行調(diào)查研究。

綜上所述,本研究建立了重慶地區(qū)以羅氏電化學(xué)發(fā)光法測定的血清鐵蛋白參考區(qū)間,初步為臨床提供了適用于重慶地區(qū)基于電化學(xué)檢測方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間。