李 軍，王忠山

（1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師101團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，新疆 五家渠 831300；2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 五家渠 831300）

口蹄疫（FMD）是偶蹄類動(dòng)物的一種重要傳染病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為A 類動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病。因其嚴(yán)重危害畜牧業(yè)，影響經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)穩(wěn)定，受到國際社會(huì)高度關(guān)注。多年來口蹄疫一直被列為我國強(qiáng)制免疫的動(dòng)物疫病。筆者所在單位對(duì)?？谔阋叩拿庖咭恢睂?shí)施一年兩免，犢牛90日齡首免一個(gè)月后再加強(qiáng)免疫一次的免疫程序，雖未發(fā)生過口蹄疫疫情，但在檢測血清抗體時(shí)，常出現(xiàn)抗體合格率達(dá)不到70%以上（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求標(biāo)準(zhǔn)）的情況。為分析發(fā)生這種情況的原因，進(jìn)一步優(yōu)化免疫程序，本試驗(yàn)對(duì)免疫了FMD二價(jià)滅活疫苗的牛群進(jìn)行O型抗體水平的跟蹤監(jiān)測。

1 材料與方法

1.1 疫苗及檢測試劑 FMD 疫苗為某生物制藥有限公司生產(chǎn)的口蹄疫O 型、A 型二價(jià)滅活疫苗（OHM/02 株＋AKT-Ⅲ株），批號(hào)：2 021023；檢測試劑為某生物科技有限公司生產(chǎn)的口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA試劑盒，批號(hào)：20210217101-3。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)方案 在某規(guī)模奶牛場分別選擇30頭2～4 歲的成年奶牛和30 頭3 月齡犢牛為試驗(yàn)對(duì)象，按照現(xiàn)行的免疫程序，成年牛在上次免疫后6 個(gè)月實(shí)施口蹄疫疫苗免疫接種，犢牛3 月齡首次免疫后間隔1個(gè)月進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫。免疫后（犢牛于首免后）每間隔30 d采集一次血清，連續(xù)采樣5次直至下次免疫開始。對(duì)采集的血清樣品進(jìn)行O型抗體檢測，根據(jù)樣品抗體效價(jià)滴度判定對(duì)應(yīng)牛是否免疫合格。分別統(tǒng)計(jì)成年奶牛和犢牛免疫后30、60、90、120、150 d 的免疫抗體合格率，根據(jù)抗體合格率評(píng)價(jià)免疫后不同時(shí)間段的保護(hù)水平。

1.2.2 免疫接種及樣品采集 免疫接種：疫苗使用前放置至室溫后搖勻，于牛頸部肌肉注射，2.0 mL/頭。樣品采集：每頭牛采集全血5 mL，常溫靜置1h后，4000r/min離心5min，收集血清備用。

1.2.3 檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn) 采用液相阻斷ELISA方法檢測抗體水平。個(gè)體血清抗體效價(jià)滴度≥27（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求標(biāo)準(zhǔn)）判定為免疫合格個(gè)體，合格率≥70%判定為群體免疫合格。

2 結(jié)果與分析

2.1 測定結(jié)果 見表1、表2。

表1 成年奶牛免疫后不同時(shí)間段的O型抗體水平

表2 犢牛免疫后不同時(shí)間段的O型抗體水平

2.2 O型抗體合格率情況 表1顯示，成年奶牛免疫FMD二價(jià)滅活疫苗后一個(gè)月（30 d）O型抗體合格率即達(dá)到90%以上（93.3%），免疫后5 個(gè)月（150 d）仍維持在80%。表2 顯示，犢牛首次免疫FMD二價(jià)滅活疫苗后一個(gè)月（30 d）O型抗體合格率只有53.3%（低于70%），加強(qiáng)免疫后才達(dá)到70%以上的要求，且維持高抗體合格率的時(shí)間較短，加強(qiáng)免疫后4 個(gè)月（150 d）O 型抗體合格率已接近70%的最低要求標(biāo)準(zhǔn)（72.4%）。由此可見，無論抗體合格率還是高抗體合格率維持時(shí)間，成年牛都優(yōu)于犢牛。其機(jī)理可能是因?yàn)槌赡昱＝?jīng)過多次免疫后機(jī)體應(yīng)答機(jī)制已趨于成熟，對(duì)新的免疫刺激能迅速產(chǎn)生高質(zhì)量的免疫應(yīng)答。業(yè)界認(rèn)為口蹄疫免疫次數(shù)與抗體效價(jià)呈正相關(guān)［1］。犢牛首次免疫后抗體合格率較低（53.3%），查閱原始檢測資料，對(duì)比首次免疫和加強(qiáng)免疫后的抗體效價(jià)，發(fā)現(xiàn)首次免疫后抗體效價(jià)離散度較大，加強(qiáng)免疫后抗體效價(jià)整體提高且整齊度顯著提升，提示犢牛首次免疫接種口蹄疫疫苗后并不能產(chǎn)生穩(wěn)定的抗體，必須要進(jìn)行加強(qiáng)免疫，這與魏孔福等的觀點(diǎn)一致［2］。免疫接種FMD二價(jià)滅活疫苗后5個(gè)月（150 d），成年奶?？贵w合格率為80%、犢牛為72.4%，提示一年兩免的免疫程序，成年牛全年可維持較高的抗體合格率，而犢牛則需在首免后5個(gè)月（加強(qiáng)免疫后4個(gè)月）及時(shí)續(xù)免。

2.3 抗體合格率不達(dá)標(biāo)的原因 針對(duì)血清抗體合格率低于70%標(biāo)準(zhǔn)的情況，我們進(jìn)行了進(jìn)一步調(diào)查分析，主要原因如下：一是各種原因?qū)е碌拿庖邉┝坎蛔?，如注射器漏液、打“飛針”引起的疫苗外灑，注射針頭較粗、進(jìn)針較淺導(dǎo)致溢液等；二是未嚴(yán)格按程序免疫，如犢牛未進(jìn)行加強(qiáng)免疫、成年牛未及時(shí)續(xù)免等；三是采樣時(shí)機(jī)失當(dāng)，如采樣時(shí)免疫接種時(shí)間不足21 d或采樣時(shí)已超過6個(gè)月以上等。其他如牛的營養(yǎng)狀況不良、疫苗保存不當(dāng)導(dǎo)致失效或效價(jià)降低等也是重要的影響因素。白正輝等［3］對(duì)當(dāng)前臨床使用的幾種牛FMD疫苗進(jìn)行跟蹤監(jiān)測，認(rèn)為幾種疫苗都可產(chǎn)生較好的免疫抗體，因此只要是正規(guī)疫苗，不同生產(chǎn)廠家或不同亞型聯(lián)組形式的差異不是造成抗體合格率低的原因?！?/p>