寧亞維，李明蕊，陳 藝，張東春，康亞朋，王志新，陳 佳

（1.河北科技大學(xué)食品與生物學(xué)院，河北 石家莊 050018；2.石家莊學(xué)院化工學(xué)院，河北 石家莊 050035）

血栓是因血小板異常聚集、纖維蛋白異常增加、凝血與抗凝血系統(tǒng)失衡而在血管內(nèi)形成的一種固體質(zhì)塊，是造成急性心肌梗死、缺血性卒中、肺栓塞、動脈粥樣硬化等心腦血管疾病的主要原因，它所導(dǎo)致的死亡率占全球死亡率的30%。目前市場上抗血栓藥物種類較多，主要有低分子肝素、阿司匹林（乙酰水楊酸）、氯吡格雷等。這些藥物雖能抑制血栓形成，但不良反應(yīng)較多（出血率高、過敏反應(yīng)、胃黏膜損傷、肝功能受損）。并且隨著科技水平的發(fā)展，人們對健康的需求已由傳統(tǒng)單一的醫(yī)療治療型向疾病預(yù)防型及健康促進(jìn)型轉(zhuǎn)變。與傳統(tǒng)藥物相比，天然抗血栓因子如多酚類、黃酮類、多糖類、有機酸類等具有低毒性、低副作用等優(yōu)點，能夠顯著降低血栓治療的風(fēng)險。其中有機酸類具有舒張血管、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用，且食物來源廣泛，更符合人們對健康的需求。

具有抗血栓作用的有機酸主要包括酚酸和五環(huán)三萜酸兩類。其中酚酸包括苯甲酸及其衍生物、肉桂酸及其衍生物，具體分類與結(jié)構(gòu)見圖1。不同的有機酸由于結(jié)構(gòu)不同，抗血栓活性和作用機制不同?？寡C制的明確對于合理選用抗血栓功能因子等具有指導(dǎo)作用，因此本文從抗凝血、抗血小板聚集和溶栓等方面對有機酸抗血栓機制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

圖1 具有抗血栓作用的有機酸結(jié)構(gòu)分類Fig. 1 Classification of organic acids with antithrombotic effects

1 有機酸的食物來源

有機酸廣泛分布于蔬菜、水果、谷物、藥食同源食品等各類植物源食品中，其中谷物及藥食同源食品中有機酸含量較高。具體來源及含量等信息見表1。

表1 有機酸的食物來源及含量Table 1 Food sources and contents of organic acids

續(xù)表1

2 有機酸抗凝血機制

凝血過程由凝血系統(tǒng)與抗凝血系統(tǒng)共同完成，凝血系統(tǒng)與抗凝血系統(tǒng)的動態(tài)平衡維持著血液的穩(wěn)態(tài)。當(dāng)血栓形成時，可通過抑制凝血因子的活性來減弱凝血反應(yīng)，也可通過提高抗凝系統(tǒng)中抗凝物質(zhì)的含量與活性達(dá)到治療血栓的目的，具體機制如圖2所示。研究抗凝血機制的測定指標(biāo)包括凝血四項、凝血因子活性及抗凝血酶活性等指標(biāo)，其中凝血四項包括活化部分凝血活酶時間（activated partial thrombin time，APTT）、凝血酶時間（thrombin time，TT）、凝血酶原時間（prothrombin time，PT）、纖維蛋白原時間（fibrinogen time，F(xiàn)IB）。APTT用于反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)狀況，PT用于反映外源性凝血系統(tǒng)狀況，TT主要反映纖維蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白的時間，F(xiàn)IB主要反映纖維蛋白原含量。具有抗凝血作用的有機酸有檸檬酸、齊墩果酸、綠原酸、西紅花酸等。

圖2 凝血與抗凝血機制Fig. 2 Coagulation and anticoagulation mechanisms

2.1 檸檬酸

檸檬酸又名枸櫞酸，化學(xué)名稱為2-羥基丙烷-1,2,3-三羧酸，是一種較為常見的有機酸，廣泛存在于檸檬、菠蘿等水果中。檸檬酸的衍生物檸檬酸鈉有較強的抗凝血作用，并已在臨床中應(yīng)用。檸檬酸鈉的抗凝機制主要是螯合血液中的Ca，阻斷凝血級聯(lián)反應(yīng)，達(dá)到抗凝效果。Ca在凝血級聯(lián)反應(yīng)中影響多個凝血因子的活化，因此螯合血液中的Ca可以有效阻止血液凝固。由于這一抗凝特性，在檢測凝血反應(yīng)的血液中，通常加入3.2%檸檬酸鈉進(jìn)行抗凝；此外，在血液透析過程中常加入檸檬酸鈉作為抗凝劑防止血液凝固。Zhang Qichun等研發(fā)出一種由檸檬酸、琥珀酸和蘋果酸組成的配方，該配方可在不影響血小板活力的前提下，有效防止血小板黏附，通過直接干擾信號激活血小板和內(nèi)皮細(xì)胞功能的調(diào)控兩個主要途徑發(fā)揮抗血栓的作用。

2.2 齊墩果酸

齊墩果酸是一種五環(huán)三萜酸，熊果酸的結(jié)構(gòu)類似物，廣泛存在于山楂、女貞子等藥食同源植物中。齊墩果酸的抗凝血作用主要表現(xiàn)為在體外實驗中能夠顯著延長APTT和PT，并顯著降低人血的纖維蛋白聚集率。Lee等對齊墩果酸的抗凝血機制進(jìn)行了深入研究，結(jié)果表明齊墩果酸在不影響抗凝血酶III（antuthrom III，ATIII）活性的前提下，抑制凝血因子X（coagulation factor X，F(xiàn)X）活性并保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。并且齊墩果酸能夠抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中FXa、凝血酶的產(chǎn)生及組織因子（tissue factor，TF）的表達(dá)，從而抑制內(nèi)源性及外源性凝血途徑。

2.3 綠原酸

綠原酸是咖啡酸的衍生物，廣泛存在于杜仲、金銀花等藥食同源植物中。綠原酸的抗凝血機制主要是抑制部分凝血因子活性。Choi等通過體外測定APTT、PT、TT及凝血酶、FXa和FXIIIa的活性，發(fā)現(xiàn)綠原酸能夠延長APTT、PT、TT，且對凝血酶和FXa活性有顯著抑制作用。其中綠原酸對TT的延長效果最好，對凝血酶活性的抑制作用最強。由此分析得出綠原酸可能通過間接改變共同凝血途徑，誘導(dǎo)降低凝血酶活性或抑制相關(guān)凝血因子，從而發(fā)揮抗血栓活性。

2.4 西紅花酸及其他有機酸

西紅花酸又名藏紅花酸、番紅花酸，是西紅花苷的體內(nèi)水解產(chǎn)物，西紅花的有效成分之一。徐沁蕾等研究發(fā)現(xiàn)，口服西紅花酸能夠明顯延長急性血瘀模型大鼠的APTT、PT、TT以及大鼠尾部的出血、凝血時間，但對于發(fā)揮抗凝血作用的具體機制并未進(jìn)行深入的研究。有關(guān)芥子酸的抗凝血作用體外研究顯示，芥子酸能夠顯著延長PT、TT，表明其抗凝血作用主要通過外源性凝血途徑和共同凝血途徑發(fā)揮作用，但對所涉及的凝血因子活性尚未進(jìn)行研究。此外，還有一些有機酸，如咖啡酸、香草酸等都具有體外抗凝血效果，但具體機制尚鮮有相關(guān)研究闡明。

不同有機酸及其衍生物的抗凝血作用總結(jié)如表2所示。

表2 有機酸及其衍生物的抗凝血作用Table 2 Anticoagulant effects of organic acids and their derivatives

3 有機酸抗血小板聚集機制

血小板聚集是造成血栓的主要原因之一，當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時，血小板膜糖蛋白Ib（platelet membrane glycoprotein，GPIb）經(jīng)血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）介導(dǎo)迅速黏附于暴露的膠原組織，使血小板被激活。經(jīng)二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）等誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后，活化的血小板上的血小板膜糖蛋白IIb/IIIa經(jīng)纖維蛋白原介導(dǎo)發(fā)生相互聚集。血小板聚集主要有3種途徑：ADP途徑、血栓素（thromboxane，TX）A2途徑、血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）途徑（圖3）。抗血小板聚集機制的評價指標(biāo)包括：1）出血、凝血時間。出血時間主要用于評價皮膚毛細(xì)血管的止血能力，是預(yù)估血小板功能的一個初篩指標(biāo)。2）各種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板聚集率。常用的誘導(dǎo)劑有花生四烯酸（arachidonic acid，AA）、ADP、凝血酶、膠原4種。不同誘導(dǎo)劑是針對血小板膜上不同受體設(shè)計，代表血小板不同的活化途徑；3）血漿中TXB2、6-酮前列腺素（6-keto prostaglandin，6-keto-PG）F1a、環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）含量。TXB2、6-keto-PGF1a分別為TXA2、前列環(huán)素（prostaglandin I2，PGI2）無生物活性的轉(zhuǎn)變產(chǎn)物。TXA2、PGI2為AA的代謝產(chǎn)物，TXA2產(chǎn)生于血小板內(nèi)，具有收縮血管和促進(jìn)血小板聚集的作用。PGI2的作用與TXA2相反，能夠擴張血管、抑制血小板聚集，且能夠作用于血小板膜表面受體，升高血小板內(nèi)cAMP的含量。cAMP含量增加可以激活蛋白激酶，使蛋白磷酸化并抑制Ca從儲庫中釋放，提高細(xì)胞內(nèi)Ca濃度，從而抑制血小板聚集。有機酸中阿魏酸、丹酚酸A、咖啡酸、對香豆酸、迷迭香酸、醋酸、莽草酸及樺木酸均可明顯抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集。以上有機酸中，除丹酚酸A、莽草酸和樺木酸外，其他有機酸均可顯著降低TXB2含量，其中阿魏酸、丹酚酸A及咖啡酸還可以顯著提高血漿中cAMP含量（表3）。

圖3 血小板聚集機制Fig. 3 Platelet aggregation mechanism

表3 有機酸及其衍生物的血小板聚集抑制作用Table 3 Inhibitory effects of organic acids and their derivatives on platelet aggregation

3.1 阿魏酸

阿魏酸化學(xué)名稱為4-羥基-3-甲氧基肉桂酸（肉桂酸衍生物），是川芎、當(dāng)歸等藥食同源食品的主要成分。阿魏酸抑制血小板聚集機制為提高cAMP含量、調(diào)節(jié)TXB2/6-keto-PGF1a平衡。Hong Qian等測定了阿魏酸對ADP、AA、凝血酶、膠原、U46619 5種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板聚集率及ATP釋放的影響。在體內(nèi)和體外實驗中，阿魏酸對5種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率為40%～60%，且阿魏酸能夠以濃度依賴的方式抑制凝血酶所誘導(dǎo)的ATP釋放。通過對TXB2、cAMP、cGMP、一氧化氮（NO）、Ca含量等指標(biāo)的分析，發(fā)現(xiàn)阿魏酸對血小板的抑制作用主要通過以下兩種途徑：1）抑制p38絲裂原激活的蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated protein kinase，ERK）2的磷酸化。p38與ERK2是血小板細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶，二者的磷酸化能夠促進(jìn)血小板的聚集。2）通過抑制磷酸二酯酶激活蛋白激酶A和蛋白激酶G，抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子含量，從而抑制血小板聚集。阿魏酸鈉是阿魏酸的鈉鹽，同樣具有抑制血小板聚集的作用，其作用機制與阿魏酸類似。阿魏酸鈉能夠降低TXB2的濃度，提高6-keto-PGF1a的含量。因此阿魏酸鈉的抗血小板聚集作用主要體現(xiàn)在調(diào)節(jié)TXA2/6-keto-PGF1a在體內(nèi)的平衡上。有關(guān)阿魏酸的抗凝血作用研究顯示，灌胃給藥后阿魏酸可顯著延長小鼠的出血時間和凝血時間。Choi等對阿魏酸的體外抗凝血研究結(jié)果表明，當(dāng)使用量達(dá)到0.11 mg/mL時，阿魏酸能夠顯著上調(diào)各項凝血參數(shù)。

3.2 丹酚酸A

丹酚酸A是從唇形科植物丹參中提取的一種酚酸類化合物，它是丹參的水溶性成分之一，是丹參活血化瘀功效的主要有效成分。丹酚酸A的抑制血小板聚集機制是抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3-K）的活性。Tang Minke等通過對ADP、AA及凝血酶等所誘導(dǎo)的血小板聚集率的測定，發(fā)現(xiàn)丹酚酸A在體內(nèi)外實驗中對膠原所誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率明顯高于ADP所誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率，并且丹酚酸A能夠調(diào)節(jié)血小板中重要蛋白質(zhì)含量，如LIM結(jié)構(gòu)域蛋白CLP-36和熱休克70 kDa蛋白。Fan Huaying等在體外實驗中發(fā)現(xiàn)，丹酚酸A對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率明顯高于AA所誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率。實驗中用動靜脈旁路血栓模型評價丹酚酸A的抗血栓效果，結(jié)果表明，丹酚酸A在不影響TXB2、6-keto-PGF1a含量及比值的情況下，可提高血小板內(nèi)cAMP含量。Huang等對丹酚酸A抑制血小板聚集機制進(jìn)行了更深入的研究，發(fā)現(xiàn)丹酚酸A的抗血小板聚集作用是通過抑制PI3-K活性實現(xiàn)的。PI3-K可被活化后的P2Y12受體激活，通過調(diào)節(jié)Ca濃度，抑制血小板聚集。丹酚酸A不具有抗凝血作用，但Fan Huaying等發(fā)現(xiàn)連續(xù)靜脈注射5 d丹酚酸A能夠明顯改善大鼠的血液流變性，降低全血黏度、紅細(xì)胞比容等參數(shù)，改善血液循環(huán)狀態(tài)。

3.3 咖啡酸

咖啡酸化學(xué)名稱為3,4-二羥基肉桂酸，是肉桂酸的又一衍生物，廣泛存在于杜仲、金銀花、小薊等中草藥植物中。研究表明咖啡酸抑制血小板聚集的機制主要為增加cAMP含量、抑制P-選擇素的表達(dá)。李泉等在研究咖啡酸對小鼠腦血栓形成的抑制作用時發(fā)現(xiàn)，咖啡酸可以濃度依賴性的方式抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，且明顯抑制P-選擇素的表達(dá)、ATP的釋放、Ca的動員以及整合素αIIbp3的活化；咖啡酸還能明顯抑制ADP誘導(dǎo)的p38、ERK和Jun氮端激酶（Jun N-terninal kinases，JNK）的磷酸化，提高cAMP的水平。表明咖啡酸通過抑制MAPKs的活化升高cAMP水平，通過下調(diào)P-選擇素的表達(dá)和整合素αIIbβ3的活化達(dá)到抑制血小板聚集的作用。Lee等對咖啡酸的抗血小板聚集機制進(jìn)行了深入研究，結(jié)果表明咖啡酸升高cAMP水平后，通過A-激酶激活磷酸化三磷酸肌醇受體和血管擴張刺激磷蛋白磷酸化位點VASP-Serl57來抑制Ca釋放，通過抑制環(huán)氧合酶（cyclooxygenase，COX）-1活性抑制TXA2的產(chǎn)生。Park在研究咖啡酸與及其衍生物5-咖啡基奎寧酸（綠原酸）的抗血栓作用時發(fā)現(xiàn)，兩種物質(zhì)均能夠顯著降低COX-1、COX-2的活性?？诜o藥后，能夠明顯降低P-選擇素的表達(dá)，同時發(fā)現(xiàn)5-咖啡基奎寧酸和咖啡酸在小鼠的血漿中以完整結(jié)構(gòu)發(fā)揮抑制作用。

3.4 對香豆酸

對香豆酸即對羥基肉桂酸，化學(xué)名稱為3-(4-羥基苯基)-2丙烯酸。對香豆酸常以游離態(tài)廣泛存在于水果（蘋果、橘子）、中草藥（人參、菟絲子）等多種植物中。對香豆酸的抑制血小板聚集作用主要通過COX通路降低TXA2水平實現(xiàn)。Luceri等研究發(fā)現(xiàn)，對香豆酸可以抑制血小板聚集而不影響血小板的形狀與數(shù)量；對香豆酸對AA誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用呈劑量依賴性，對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用呈時間依賴性；將TXB2作為測定COX-1的活性指標(biāo)，結(jié)果表明對香豆酸能夠明顯降低血漿中TXB2含量。Ekowati等研究發(fā)現(xiàn)，對香豆酸合成的相關(guān)衍生物如()-甲基3-(4-甲氧基苯基)丙烯酸酯同樣具有抗血小板活性。該學(xué)者分析結(jié)構(gòu)對抗血小板作用的影響時發(fā)現(xiàn)，甲基存在時作用增強，而乙烯基雙鍵變?yōu)閱捂I會降低衍生物與COX-1的相互作用。

3.5 莽草酸

莽草酸化學(xué)名稱為3,4,5-三羥基-1-環(huán)己烯-1-甲酸，廣泛存在于八角、松針中，也可通過微生物代謝合成。莽草酸主要通過P2Y/P2Y12途徑發(fā)揮抑制血小板聚集的作用。陳驍熠、陳英等用比濁法對莽草酸體外血小板聚集抑制率進(jìn)行了研究，結(jié)果表明莽草酸呈劑量依賴性抑制ADP、膠原誘導(dǎo)的血小板聚集。馬怡等通過腹腔給藥、建立大鼠腦中動脈血栓模型分析莽草酸在體內(nèi)對ADP、膠原誘導(dǎo)的血小板聚集及TXB2、6-keto-PGF1a含量的影響。結(jié)果表明，莽草酸能夠明顯抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，并能顯著提高6-keto-PGF1a的含量。Veach等通過對血栓形成標(biāo)記物和血小板活化依賴的表面標(biāo)記物的表達(dá)及血小板聚集率的測定分析莽草酸的抗血栓作用途徑，結(jié)果表明莽草酸顯著降低了血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子（platelet endothelial cell adhesion molecule，PECAM）-1的表達(dá)，說明莽草酸能夠顯著抑制血栓形成，且莽草酸能夠明顯抑制酶原活化復(fù)合物（procaspase，PAC）-1、P-選擇素及CD62P的表達(dá)，表明莽草酸能夠抑制血小板的初期活化。并且莽草酸可顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，對膠原誘導(dǎo)的血小板聚集無明顯影響，表明莽草酸的抗血小板活性不通過GPVI途徑發(fā)揮作用，且與AA途徑無關(guān)，它是通過P2Y1/P2Y12途徑降低血小板和白細(xì)胞黏附內(nèi)皮因子的活性，從而抑制血小板聚集。另外，莽草酸的乙?；苌锶阴ＣР菟峥梢酝ㄟ^提高cAMP含量抑制血小板聚集。Huang Fengyang等通過灌胃給藥方式研究了莽草酸對ADP、膠原誘導(dǎo)的血小板聚集率及TXB2、6-keto-PGF1a、cAMP、cGMP含量的影響，結(jié)果表明三乙酰莽草酸能夠明顯抑制ADP、膠原誘導(dǎo)的血小板聚集，且抑制ADP誘導(dǎo)的血小板TXB2、腹主動脈壁6-keto-PGF1a的生成，升高6-keto-PGF1a/TXB2比值，但對血漿中TXB2及6-keto-PGF1a含量無影響。三乙酰莽草酸還能顯著提高血小板內(nèi)cAMP含量，但對血小板內(nèi)cGMP含量無明顯影響。因此，三乙酰莽草酸的抗血小板聚集作用主要通過提高cAMP含量實現(xiàn)。

3.6 水楊酸

水楊酸即鄰羥基苯甲酸。水楊酸衍生物阿司匹林（乙酰水楊酸）應(yīng)用于抗血栓臨床治療已有近百年時間。阿司匹林的抗血小板聚集作用主要通過抑制COX活性來實現(xiàn)。COX是催化AA合成前列腺素（prostaglandin，PG）的酶系。AA是組成細(xì)胞膜磷脂的降解產(chǎn)物，在體內(nèi)經(jīng)過COX催化氧化生成PGH2，再經(jīng)一系列的生化反應(yīng)生成PGs、PGI2和TXA2等。阿司匹林不可逆地抑制TXA2的生成，從而達(dá)到抑制血小板聚集的作用。水楊酸鈉能夠明顯抑制血栓的形成，降低血栓質(zhì)量，且不影響出血時間。

3.7 沒食子酸及其他有機酸

沒食子酸化學(xué)名稱為3,4,5-三羥基苯甲酸，是“活血化瘀”常用中藥赤芍中的一種成分。沒食子酸具有顯著的抗血小板聚集、促進(jìn)血栓溶解等作用。沒食子酸能誘導(dǎo)血管內(nèi)皮依賴性收縮，其機制推測為抑制內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮生成，并且能夠降低ADP誘導(dǎo)的p38、ERK的磷酸化水平從而抑制血小板聚集。沒食子酸衍生物沒食子酸丙酯和沒食子酸異丁酯作用與赤芍類似，并且二者都具有增加血小板膜流動性的作用，對AT-III氧化有較高的抑制率，對血管具有舒張作用。其機制是通過血管內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮-鳥苷酸環(huán)化酶途徑釋放一氧化氮，且與抑制鈣通道的開放有關(guān)。沒食子酸的另一衍生物表沒食子兒茶素沒食子酸酯的作用機制為抑制血小板膜糖蛋白P-選擇素的產(chǎn)生及表達(dá)，并抑制TXB的產(chǎn)生。毛冬青酸抗血小板聚集的作用通過提高PGI2水平實現(xiàn)。樺木酸與毛冬青酸一樣為五環(huán)三萜酸，對ADP、AA誘導(dǎo)的血小板聚集有明顯的抑制作用。另外，芥子酸、西紅花酸、琥珀酸、原兒茶酸、海松酸等都有抗血小板聚集的作用，但具體機制有待深入研究。

4 有機酸溶栓作用機制

血栓主要由血小板小梁、小梁間形成的纖維蛋白網(wǎng)及大量紅細(xì)胞構(gòu)成，因此治療血栓的直接方法是溶栓。溶栓途徑主要有4種：一是直接水解網(wǎng)狀的纖維蛋白；二是通過刺激組織型纖溶酶原激活劑（tissue plamnipen activator，t-PA），刺激纖溶酶產(chǎn)生以達(dá)到溶解纖維蛋白的目的。目前靜脈注射t-PA是唯一一種被美國食品及藥物管理局允許的急性腦卒中治療手段；三是抑制纖溶酶原激活物抑制劑的活性，提高t-PA濃度；四是激活腎臟中的尿激酶原，使其成為能夠溶解血栓的尿激酶。評價溶栓效果的指標(biāo)主要有兩個：一是血凝塊溶解率，用于評價有機酸溶栓作用強弱；二是血漿優(yōu)球蛋白溶解時間，用于評價纖維蛋白溶解活性的強弱。以下簡述有機酸溶栓效果的評價方法及機制。

4.1 迷迭香酸

迷迭香酸是一種酚酸化合物，廣泛存在于唇形科、紫草科植物中，是丹參的水溶性提取物，也是丹參素與咖啡酸的縮合物。研究發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸可以通過提高纖維蛋白的溶解活性發(fā)揮溶栓作用。鄒正午等通過進(jìn)行纖維蛋白溶解實驗，發(fā)現(xiàn)當(dāng)迷迭香酸的靜脈注射給藥量為100～150 mg/kg時，血漿優(yōu)球蛋白溶解時間明顯縮短27%～30%。同等劑量下，用雙縮脲顯色法測定纖維蛋白原含量時，含量無明顯變化。說明迷迭香酸可以通過提高纖維蛋白溶解活性從而發(fā)揮溶栓作用。迷迭香酸不僅具有溶栓作用，還能夠顯著抑制血小板聚集。迷迭香酸抑制血小板聚集的機制主要為下調(diào)sP-選擇素的水平。Wang Yuji等通過P-選擇素活性位點對接實驗發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸能夠顯著抑制凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集。經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸能夠顯著下調(diào)sP-選擇素的水平。sP-選擇素是P-選擇素的可溶性狀態(tài)，與配體結(jié)合后可引起血小板聚集從而導(dǎo)致血栓形成。而P-選擇素是一種糖蛋白，它是激活血小板必要的效應(yīng)因子，其被激活后，在血小板及內(nèi)皮細(xì)胞上的黏附因子表達(dá)，再從血小板表面脫落形成sP-選擇素。此外，鄒正午等還研究了迷迭香酸對大鼠血小板聚集率的抑制作用，結(jié)果顯示迷迭香酸能夠明顯抑制膠原誘導(dǎo)的血小板聚集，當(dāng)給藥量為150 mg/kg時抑制率可達(dá)46.6%，但對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集無明顯影響。糖蛋白VI（glycoprotein VI，GPVI）為膠原受體，能夠抑制膠原誘導(dǎo)的血小板聚集，說明迷迭香酸的抗血栓作用主要通過GPVI通路發(fā)揮作用。

4.2 醋酸

醋酸又名乙酸、冰醋酸，是食醋的主要生物活性物質(zhì)。醋酸的溶栓作用主要是通過提高纖溶酶原的溶解活性實現(xiàn)。Li Jing等通過纖維蛋白板上透明圈法考察了醋酸對尿激酶纖溶活性的影響及作用機制。結(jié)果表明醋酸濃度大于0.3 mmol/L時，其纖溶活性隨濃度提高而增加；且醋酸的纖溶活性可以通過直接激活纖溶酶原從而發(fā)揮降解交聯(lián)纖維蛋白的作用。醋酸不僅具有溶栓作用，還可以通過抑制COX-1與TXB2的生成抑制血小板聚集。通過測定血小板聚集率發(fā)現(xiàn)，醋酸呈劑量依賴性地顯著抑制ADP、膠原、凝血酶和AA誘導(dǎo)的血小板聚集。通過COX-1與TXB2含量分析發(fā)現(xiàn)，醋酸通過介導(dǎo)AA代謝途徑抑制COX-1的產(chǎn)生，導(dǎo)致TXB2含量減少，從而抑制血小板聚集。

4.3 烏索酸及其他有機酸

烏索酸又名熊果酸、烏蘇酸，是從枇杷葉中提取的一種五環(huán)三萜酸。熊筱娟等通過測定烏索酸對體外血凝塊的溶解效果考察烏索酸的溶栓作用，結(jié)果顯示烏索酸質(zhì)量濃度為20～320 mg/L時，血凝塊的溶解率可提高18.02%～20.54%。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示，當(dāng)灌胃給藥同等劑量時，含烏索酸的血凝塊溶解率顯著提高，但效果不隨劑量增加而加強。此外，烏索酸的衍生物毛冬青酸是從毛冬青中提取的一種五環(huán)三萜酸，作用機制與迷迭香酸相同，能夠明顯提高纖維蛋白的溶解活性以發(fā)揮溶栓的作用。張芳林等通過測定血漿優(yōu)球蛋白溶解時間評價毛冬青酸對纖溶系統(tǒng)的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)靜脈注射給藥量為20～80 mg/kg時，血漿優(yōu)球蛋白溶解時間可顯著縮短21.2%～52.0%。

另外，研究發(fā)現(xiàn)亞油酸、亞麻酸可顯著提高血栓的溶解率。楊曉君等通過測定亞油酸與亞麻酸對體外血凝塊溶解率的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)給藥量為28 mg/mL時溶解率顯著提高3.89%，結(jié)果表明亞油酸與亞麻酸的具體作用機制可能與提高纖維蛋白的溶解活性有關(guān)。此外，共軛亞油酸的異構(gòu)體如9、12、10、11，不僅具有溶栓作用，還能顯著抑制血小板的聚集。

有機酸抗血栓作用機制研究匯總?cè)绫?所示。

表4 有機酸抗血栓作用機制Table 4 Antithrombotic mechanism of organic acids

續(xù)表4

5 結(jié) 語

血栓類疾病的患病率及致死率正在逐年增加，針對這類疾病，藥物及手術(shù)是主要治療手段，但其副作用大、價格昂貴、治療周期長、病情易反復(fù)。有機酸作為一種食物來源的天然抗血栓功能因子，在血栓的防治中具有副作用低、作用效果顯著等優(yōu)勢，開發(fā)富含有機酸功能因子的食品，對于降低長期坐立、臥床、血液高凝體質(zhì)、靜脈內(nèi)膜損傷等人群的患病機率以及提高血栓病人的健康水平具有重要意義。不同有機酸的抗血栓作用途徑及效果具有明顯差別，比較發(fā)現(xiàn)西紅花酸灌胃量低，抗凝血效果最好，丹酚酸A的抑制血小板聚集率最高，故有機酸的開發(fā)利用需結(jié)合其在食品中含量、抗血栓活性及作用途徑等方面綜合考慮。

在食品中有機酸開發(fā)利用方面，由于食品中天然所含有機酸量差異較大，有機酸降血栓功能性食品和藥物可依據(jù)天然食品中有機酸的含量和食品的可接受度開發(fā)。針對山楂等富含有機酸的原料可開發(fā)相應(yīng)的加工食品；針對紅花、桃仁等藥食同源類物質(zhì)，由于阿魏酸功效已明確，可制備阿魏酸提取物等食品配料和保健品；針對功能顯著且藥理明確的齊墩果酸等物質(zhì)可以開發(fā)臨床用藥物。食品有機酸功能性的深度開發(fā)對于提升人們健康水平具有重要意義，同時可增加食品附加值，促進(jìn)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展。

在有機酸藥物開發(fā)方面，目前僅有少數(shù)有機酸及衍生物（如乙酰水楊酸、阿魏酸、丹酚酸A）已應(yīng)用于血栓預(yù)防及臨床治療，大部分有機酸因存在如下亟待解決的問題而鮮被開發(fā)利用。首先，結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系尚未明確，盡管酚酸類具有明顯的抗血小板聚集作用且不影響凝血系統(tǒng)，但抗血小板聚集作用與酚酸類物質(zhì)的構(gòu)型是否有關(guān)尚鮮有研究；其次，目前大部分有機酸的生理功能均是基于體外實驗與動物模型所得結(jié)果，而人體臨床研究有限，最佳攝入水平及吸收代謝等方面有待深入研究；最后，部分有機酸抗血栓機制尚未明確。如芥子酸、西紅花酸的抗凝血作用機制；海松酸、琥珀酸、原兒茶酸的抗血小板聚集的作用機制等。本文通過對有機酸的食物來源、抗血栓機制進(jìn)行總結(jié)，期望可為有機酸抗血栓機制的深入研究以及富含有機酸食品的開發(fā)提供參考。