據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，原發(fā)性肝癌是世界六大惡性腫瘤之一，其死亡率在癌癥中排列第二。原發(fā)性肝癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率非常高

。原發(fā)性肝癌早期癥狀不明顯，大部分患者就診時(shí)已處于中晚期，即使早期治療的患者，由于在治療過(guò)程中，癌癥易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，仍然導(dǎo)致患者預(yù)后不良率較高

。據(jù)研究統(tǒng)計(jì)，我國(guó)原發(fā)性肝癌患者術(shù)后5年生存率僅10%左右

。Mac-2結(jié)合蛋白是一類糖蛋白，該蛋白由含7個(gè)N糖基的單體組成，可以聚集成大的環(huán)狀或線狀結(jié)構(gòu)，在多種癌癥、炎癥性疾病中明顯升高

。Mac-2結(jié)合蛋白聚糖異構(gòu)體(Mac-2 binding protein glycan isomer，M2BPGi)是Mac-2結(jié)合蛋白另一種存在形式，具有肝臟特異性，能更好反映肝臟纖維化進(jìn)展。高敏等

研究發(fā)現(xiàn)在乙型肝炎肝纖維化中，M2BPGi水平隨肝纖維程度加重而升高。本研究擬探討M2BPGi在原發(fā)性肝癌患者血清中的變化及其與預(yù)后的關(guān)系，旨在為預(yù)測(cè)原發(fā)性肝癌的預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院在2018年1月至2019年12月期間收治的原發(fā)性肝癌患者100例(原發(fā)性肝癌組)、慢性乙型肝炎患者72例(慢性乙型肝炎組)為研究對(duì)象。原發(fā)性肝癌組中男59例，女41例，年齡35～76歲，平均(56.86±10.81)歲；腫瘤直徑≤5 cm 41例，腫瘤直徑>5 cm 59例；根據(jù)腫瘤個(gè)數(shù)，單發(fā)22例，多發(fā)或彌漫性78例。慢性乙型肝炎組中男40例，女32例；年齡35～76歲，平均(57.02±11.06)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合原發(fā)性肝癌病理診斷指南(2015年版)

；②慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2015年《慢性乙型肝炎防治指南》

；③患者年齡35～76歲；④患者之前未接受任何抗癌治療；⑤同意隨訪并配合此次試驗(yàn)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤患者；②合并嚴(yán)重腎功能障礙患者；③ 合并有嚴(yán)重感染性疾病患者；④合并有自身免疫性疾病患者；⑤其他肝炎病毒感染者；⑥精神異常患者；⑦酒精性脂肪肝患者。選取同時(shí)期本院體檢結(jié)果健康者100例為對(duì)照組，男54例，女46例，年齡35歲～76歲，平均(56.97±10.98)歲。原發(fā)性肝癌組、慢性乙型肝炎組及對(duì)照組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

>0.05)，具有可比性。本研究通過(guò)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬知情并簽署知情同意書(shū)和臨床研究協(xié)議書(shū)，研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》。

1.2 標(biāo)本采集 對(duì)所有研究對(duì)象清晨空腹時(shí)采取靜脈血4～5 ml裝于采血管中，靜置20 min后，4℃，3 500 r/min，離心15 min，留上清，凍存于-80℃冰箱中，待測(cè)。

氣候突變表示氣候從一種穩(wěn)定態(tài)跳躍式地轉(zhuǎn)變到另一種穩(wěn)定態(tài)的現(xiàn)象，它是普遍存在于氣候變化中的一個(gè)重要現(xiàn)象。圖3為天峻地區(qū)1961-2017年春季干旱指數(shù)M-K突變檢驗(yàn)，從分析的結(jié)果來(lái)看，相對(duì)濕潤(rùn)度指數(shù)(M指數(shù))和標(biāo)準(zhǔn)化降水指數(shù)(SPI指數(shù))的M-K突變檢驗(yàn)是一致的，在上下兩條±1.96(α=0.05)的置信線內(nèi)，兩個(gè)指數(shù)的UF與UB兩條曲線均在1966年和2016出現(xiàn)交叉點(diǎn)，UF曲線在1966年的交叉點(diǎn)后向負(fù)方向變化，并低于-1.96，說(shuō)明交叉點(diǎn)后減小趨勢(shì)顯著，因此認(rèn)為1966年為突變年，而2016年的交叉點(diǎn)是不是突變點(diǎn)，有待需要更長(zhǎng)序列的數(shù)據(jù)驗(yàn)證。

1.3 檢測(cè)血清M2BPGi水平 采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)血清M2BPGi水平，操作步驟嚴(yán)格依據(jù)M2BPGi ELISA試劑盒(貨號(hào)：JCSW1945，上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司)進(jìn)行，使用Multiskan MK3酶標(biāo)儀進(jìn)行。

(4)對(duì)老舊管線的清管作業(yè)，應(yīng)事先根據(jù)管道實(shí)際情況，有選擇地在適當(dāng)位置斷管，摸清管道內(nèi)黑粉情況，然后選擇適當(dāng)?shù)那骞芷?，并采取多段清管的方式清除管道?nèi)黑粉。

2.3 M2BPGi與肝纖四項(xiàng)的相關(guān)性分析 Pearson分析顯示，原發(fā)性肝癌患者血清M2BPGi與HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相關(guān)(

<0.05)，見(jiàn)表3。

1.5 隨訪 對(duì)原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行隨訪1年，根據(jù)患者病情分為預(yù)后良好組75例和預(yù)后不良組25例，預(yù)后不良指患者病情復(fù)發(fā)、癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移或死亡。隨訪方式為入戶、電話隨訪，或邀請(qǐng)患者入院檢查，每?jī)蓚€(gè)月隨訪1次。

2 結(jié)果

2.1.2 混播禾草種類對(duì)混播植物POD活性的影響 A2處理禾草POD活性最高，其次是A3處理。其中，A2處理禾草POD活性分別比A1，A3和A4處理高250.04%，20.22%和350.42%倍，差異均達(dá)極顯著水平(P<0.01)；A3處理禾草POD活性分別比A1和A4處理高191.18%和274.68%(P<0.01)。A1和A4處理之間差異不顯著(表1)。A1處理下苜蓿POD活性比A4處理高19.47%(P<0.01)；A3處理POD活性比A4處理高16.40%(P<0.05)；其余處理之間無(wú)顯著差異。

2.2 預(yù)后良好與預(yù)后不良原發(fā)性肝癌血清M2BPGi和肝纖四項(xiàng)水平比較 原發(fā)性肝癌的不良預(yù)后與患者的腫瘤大小、腫瘤的個(gè)數(shù)均相關(guān)(χ

=6.480、62.720，

=0.011、0.000)。見(jiàn)表2。

1.4 檢測(cè)血清中肝纖四項(xiàng)水平 采用日立7170型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、層黏連蛋白(LN)水平。

2.1 血清M2BPGi和肝纖四項(xiàng)水平比較 見(jiàn)表1。

2.4 ROC分析M2BPGi對(duì)原發(fā)性肝癌不良預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 M2BPGi對(duì)原發(fā)性肝癌不良預(yù)后診斷的曲線下面積AUC為0.883，靈敏度為84.00%，特異度為81.30%，截?cái)嘀禐?.65 mg/ml。

現(xiàn)代漢語(yǔ)詞匯的重疊一般不兒化，但在歷史上卻并非如此。動(dòng)詞的重疊形式后面加‘兒’的形式，常常見(jiàn)于明、清時(shí)期的白話文學(xué)作品里，從明代中葉的小說(shuō)《西游記》、《金瓶梅》來(lái)看，動(dòng)詞重疊兒化達(dá)到高潮。如：

3 討論

2016年全球肝癌患者已達(dá)到了100萬(wàn)例，且每年的發(fā)病率依然在持續(xù)升高，嚴(yán)重威脅人民的身體健康

。原發(fā)性肝癌患者早期無(wú)明顯臨床表現(xiàn)，晚期時(shí)表現(xiàn)為肝部刺痛或持續(xù)性鈍痛，并伴隨腹脹等，多數(shù)患者就診時(shí)原發(fā)性肝癌已發(fā)展至中晚期，導(dǎo)致患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)期，因而大多患者術(shù)后預(yù)后差。因此臨床上急需探尋一種分子標(biāo)志物用于原發(fā)性肝癌患者預(yù)后判斷，以期為臨床治療決策和改善患者不良預(yù)后提供理論依據(jù)。

在我國(guó)，長(zhǎng)期被肝炎病毒感染(以乙型肝炎或丙型肝炎病毒為主)的患者，后期易發(fā)展為肝纖維化、肝硬化及肝癌

。肝纖維化是肝細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度堆積為主的慢性炎癥過(guò)程，是肝硬化的前期階段

，肝纖四項(xiàng)(HA、PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C)是肝細(xì)胞外基質(zhì)的主要組成成分。研究發(fā)現(xiàn)肝纖維化及肝硬化時(shí)，Ⅳ-C被大量沉積在細(xì)胞外基質(zhì)，血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平在肝癌患者中明顯升高，且與肝癌的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)

。本研究發(fā)現(xiàn)在對(duì)照組、慢性乙型肝炎組、原發(fā)性肝癌組中，血清HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN水平依次顯著升高，提示慢性乙型肝炎、原發(fā)性肝癌患者均存在肝纖維化。

M2BPGi是一種新的血清肝纖維化生物標(biāo)志物。M2BPGi是由Mac-2結(jié)合蛋白與紫藤多花凝集素組成，二者結(jié)合后，Mac-2結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。紫藤多花凝集素陽(yáng)性Mac-2結(jié)合蛋白檢測(cè)纖維化的原理是利用紫藤多花凝集素檢測(cè)蛋白質(zhì)表面糖鏈變化，對(duì)檢測(cè)肝纖維化是一種無(wú)創(chuàng)、可靠的生物標(biāo)志物。Mac-2結(jié)合蛋白最早被發(fā)現(xiàn)能與半乳糖凝集素3結(jié)合形成糖化蛋白，導(dǎo)致Mac-2結(jié)合蛋白的質(zhì)和量都發(fā)生變化，猜測(cè)可能原因是糖鏈修飾蛋白結(jié)構(gòu)造成的

。后來(lái)研究顯示，N-乙酰半乳糖基化修飾的紫藤多花凝集素也可與Mac-2結(jié)合蛋白形成紫藤多花凝集素陽(yáng)性Mac-2結(jié)合蛋白，且對(duì)肝纖維化的不同分期具有較高的診斷價(jià)值

。高敏等

研究發(fā)現(xiàn)紫藤多花凝集素對(duì)識(shí)別肝纖維化過(guò)程中，紫藤多花凝集素陽(yáng)性Mac-2結(jié)合蛋白的水平不受其他器官組織分泌的M2B結(jié)合蛋白的影響，具有肝臟特異性，因此可反映肝纖維化的程度。研究顯示M2BPGi對(duì)晚期肝纖維化、肝硬化、肝細(xì)胞癌術(shù)后的發(fā)展和復(fù)發(fā)具有預(yù)測(cè)價(jià)值

。王偉等

研究發(fā)現(xiàn)慢性丙型肝炎肝纖維化患者血清M2BPGi水平明顯高于丙型肝炎無(wú)肝纖維化患者，且M2BPGi對(duì)丙型肝炎患者肝纖維化具有較好的診斷價(jià)值。肝纖維化是“肝炎-肝纖維化-肝硬化-肝癌”這一發(fā)展過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

。本研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌組患者血清M2BPGi水平顯著高于慢性乙型肝炎組和正常健康人，慢性乙肝病組患者血清M2BPGi水平顯著高于正常健康人，提示M2BPGi可能參與原發(fā)性肝癌的發(fā)生。肝炎后肝硬化是原發(fā)性肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。另外Ueno等

研究報(bào)道，M2BPGi可作為評(píng)估膽道閉鎖肝硬化患者的預(yù)后指標(biāo)，因?yàn)榛颊甙l(fā)生肝硬化后，其肝纖維化程度仍可能發(fā)生變化。預(yù)后不良組原發(fā)性肝癌患者血清M2BPGi顯著高于預(yù)后良好組原發(fā)性肝癌患者，提示M2BPGi可能與原發(fā)性肝癌患者預(yù)后不良密切相關(guān)，猜測(cè)M2BPGi在不同預(yù)后的原發(fā)性肝癌患者血清有變化可能是因?yàn)樵l(fā)性肝癌患者肝纖維化程度可能仍在變化

。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)M2BPGi與HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相關(guān)，提示M2BPGi參與肝癌患者肝纖維化進(jìn)程。M2BPGi對(duì)原發(fā)性肝癌不良預(yù)后診斷的曲線下面積AUC為0.883，靈敏度為84.00%，特異度為81.30%，提示M2BPGi對(duì)原發(fā)性肝癌預(yù)后不良可能具有較好的評(píng)估價(jià)值，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)M2BPGi水平變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

綜上所述，血清M2BPGi水平原發(fā)性肝癌中呈上調(diào)，對(duì)原發(fā)性肝癌預(yù)后不良具有較好的評(píng)估價(jià)值。但本研究是單中心回顧性分析，缺乏前瞻性臨床研究。M2BPGi與原發(fā)性肝癌的疾病發(fā)生的相關(guān)機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。

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