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        酶法制備玉米慢消化淀粉的研究

        2022-07-23 10:16:18李若敏張煥新盤賽昆
        中國糧油學(xué)報(bào) 2022年6期
        關(guān)鍵詞:鏈段水解消化

        李若敏, 張煥新, 鄭 義, 盤賽昆, 江 娟

        (江蘇海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院1,連云港 222005) (江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院2,泰州 225300)

        淀粉經(jīng)淀粉酶、糊精酶、麥芽糖酶水解后形成可被人體吸收的葡萄糖,葡萄糖通過小腸黏膜進(jìn)入血液,導(dǎo)致餐后血糖指數(shù)(GI)快速升高[1]。Englyst等[2]根據(jù)人體消化和釋放葡萄糖的速率,將淀粉分為快消化淀粉(RDS,20 min內(nèi)消化),慢消化淀粉(20~120 min內(nèi)消化)和抗性淀粉(120 min仍未消化)?,F(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)研究表明,碳水化合物參與了生物合成反應(yīng)以及多種生命現(xiàn)象和生理過程,它與人類肥胖、糖尿病和心、腦血管等疾病具有很大的相關(guān)性,基于碳水化合物對人體健康和慢性病的膳食營養(yǎng)干預(yù)已成為一個(gè)重要的研究前沿[3]。慢消化淀粉(SDS)具有緩慢釋放葡萄糖并能被人體吸收的特性,在人體內(nèi)產(chǎn)生較平緩的血糖應(yīng)答,不會對血糖平衡系統(tǒng)造成大的壓力,具有預(yù)防代謝性疾病的功能。

        淀粉消化率受很多因素影響,如淀粉來源、顆粒大小、直鏈淀粉含量、晶型和相對結(jié)晶度、鏈長分布等因素[4]。為了改善天然淀粉易吸收的營養(yǎng)缺陷并擴(kuò)大其應(yīng)用范圍,國內(nèi)外大多數(shù)研究通過物理、化學(xué)或復(fù)合法[5]對淀粉進(jìn)行改性,制備SDS,而采用酶法[6,7]制備SDS的研究相對較少。分支酶(Branching enzyme,BE,EC2.4.1.18)是一類多功能的淀粉酶,屬于糖苷水解家族GH13或GH57,能催化鏈間支化、鏈內(nèi)環(huán)化和鏈內(nèi)支化三類反應(yīng),其機(jī)理是先水解供體淀粉鏈上的某一α-1,4糖苷鍵,產(chǎn)生具有帶還原性端的鏈段,然后將該鏈段轉(zhuǎn)移至受體糖鏈的葡萄糖單元C6的位置,形成α-1,6分支點(diǎn),完成支化過程,因此可根據(jù)其來源和底物種類的不同,合成具有不同功能特性的改性淀粉[8]。本研究以玉米淀粉為原料,采用α-淀粉酶和Bacillusstearothermophilus來源的BE對其連續(xù)處理,不僅實(shí)驗(yàn)條件溫和、成本低廉、產(chǎn)品安全性高、對環(huán)境污染少,而且可以獲得高含量的SDS產(chǎn)品,為普通玉米淀粉深加工提供新的途徑[9]。

        1 材料與方法

        1.1 主要材料試劑

        天然玉米淀粉:市售;α-淀粉酶、Bacillusstearothermophilus來源的分支酶(200 U/g)、葡萄糖苷酶(1 200 U/g)、豬胰腺α-淀粉酶(80 U/g)、葡萄糖試劑盒;磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、無水乙醇等均為分析純。

        1.2 主要儀器設(shè)備

        T6型紫外可見分光光度計(jì),85810R型高速冷凍離心機(jī),Labconoo FreeZone 6L型臺式凍干機(jī)。

        1.3 方法

        1.3.1 制備玉米慢消化淀粉(SDS)

        稱取玉米淀粉溶解于磷酸鈉緩沖液(10 mol/L,pH 6.5)中,將其分別配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10、15、20、25、30%的淀粉漿溶液,90 ℃水浴振蕩糊化,冷卻至室溫。添加200 U/g α-淀粉酶(以干淀粉質(zhì)量計(jì)),50 ℃酶解4 h后沸水浴滅酶。取出后分別至于65、70、75、80、85 ℃保溫,調(diào)節(jié) pH 至7.0,分別添加100、200、300、400、500 U/g BE(以干淀粉質(zhì)量記),酶解2、4、6、8、12 h,沸水浴滅酶。加入兩倍體積的無水乙醇于4 ℃靜置12 h,冷凍離心(8 000 r/min,25 min),沉淀復(fù)溶,-80 ℃儲藏12 h,冷凍干燥72 h,過100 目篩[10]。

        1.3.2 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

        單因素實(shí)驗(yàn)主要研究酶作用時(shí)間、酶添加量、酶解溫度和淀粉漿濃度4個(gè)因素對產(chǎn)物中SDS含量的影響。基本條件設(shè)定為:淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%,α-淀粉酶添加量200 U/g,BE添加量300 U/g,α-淀粉酶酶解溫度50 ℃,BE酶解溫度75 ℃,α-淀粉酶解時(shí)間4 h,BE酶解時(shí)間6 h,進(jìn)行醇沉,冷凍干燥,過100目篩。模擬體外消化,測定SDS含量。改變其中一個(gè)因素,其他因素保持不變,分別考察各因素對SDS含量的影響,每組處理重復(fù)3次。

        1.3.3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

        根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的結(jié)果,如表1所示,選取對SDS含量有影響的酶作用時(shí)間、酶添加量、酶解溫度、淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)為因素,采用Box-Benhnken中心組合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),進(jìn)行4因素3水平分析實(shí)驗(yàn),確定最佳工藝參數(shù),利用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)優(yōu)化[11]。

        表1 Box-Benhnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素水平

        1.3.4 SDS質(zhì)量濃度測定

        配制新鮮酶液:取1.8 mL A液(40 μL葡萄糖苷酶稀釋至2.0 mL)、18 mL B液(4.0 g豬胰腺a-淀粉酶溶于26 mL,4 ℃攪拌溶解,離心取上清液)與1.2 mL去離子水混合均勻。

        稱取200 mg樣品溶于15 mL磷酸鹽緩沖液(200 mol/L,pH 5.2),37 ℃保溫5 min加入5.0 mL新鮮酶液,37 ℃、200 r/min條件下反應(yīng),在20 min和120 min時(shí)各取出0.5 mL反應(yīng)液加入4倍體積乙醇滅酶,水解產(chǎn)生的葡萄糖含量通過葡萄糖試劑盒測定[12]。

        SDS=(G120-G20)×0.9

        式中:G20和G120為淀粉水解20 min和120 min時(shí)釋放葡萄糖的含量。

        1.3.5 復(fù)合酶制備慢消化淀粉相關(guān)性能測定1.3.5.1 淀粉顆粒形貌觀察

        采用掃描電子顯微鏡進(jìn)行顆粒形態(tài)的表征[13]。

        1.3.5.2 鏈段分布測定

        將淀粉樣品溶解于NaAc-HAc緩沖液(100 mol/L,pH 4.5)中,配制成0.2 mg/mL乳液,并在沸水浴中充分糊化。40 ℃水浴中平衡溫度,并添加3 μL異淀粉酶酶解24 h。沸水浴滅酶,冷卻離心(8 000 r/min,10 min),上清液通過0.45 μm注射器濾膜,并利用HPAEC-PAD測定鏈長分布[14]。測試條件:色譜柱為CarboPacPA200;洗脫液A為250 mol/L NaOH溶液,洗脫液B為50 mol/L NaAc溶液和150 mol/L NaOH溶液的混合物(首先用液體A平衡色譜柱,然后使用液體B進(jìn)行洗脫);流速0.5mL/min;測試溫度25 ℃。

        1.3.5.3 相對結(jié)晶度測定

        將干燥的淀粉樣品填充到壓片機(jī)凹槽中并壓實(shí),以確保壓制的淀粉片無裂紋且厚度輕薄均勻,然后將其放置在X射線衍射儀中以掃描和測量改性淀粉的相對結(jié)晶度[15]。測試條件:掃描范圍為5°~35°,掃描速度為2°/min,電壓電流分別為40 kV和40 mA。

        1.3.5.4 溶解度和膨脹度測定

        準(zhǔn)確稱取淀粉樣品加去離子水配制成5%的淀粉漿,在95 ℃下加熱攪拌30 min。冷卻至室溫5 000 r/min離心10 min,沉淀部分即為膨脹淀粉。將上清液分離干燥至恒重,即得水溶性淀粉[16]。根據(jù)公式計(jì)算淀粉溶解度和膨脹度:

        1.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        所有實(shí)驗(yàn)測定均重復(fù)3次。測定結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)。使用SPSS statistics 23對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析確定差異顯著性。圖表使用Origin 2018和Excel進(jìn)行繪制。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 各因素對SDS含量的影響

        酶作用時(shí)間對SDS含量的影響差異顯著,對SDS含量影響如圖1所示。經(jīng)糊化的玉米淀粉含有較多長鏈結(jié)構(gòu),當(dāng)酶解時(shí)間不足時(shí),長直鏈淀粉在酶作用下并未完全被水解成短鏈,較多的長鏈淀粉分子冷卻回生比較緩慢會直接影響SDS的形成[17]。酶解時(shí)間為6 h時(shí),SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,為36.75%。此時(shí)淀粉中葡聚糖長鏈已在反應(yīng)中被BE完全水解,并通過糖基轉(zhuǎn)移作用使淀粉分子具有更小的支鏈及更高的支化程度,阻礙支鏈淀粉在貯藏過程中分子重排,進(jìn)而更好的抑制淀粉回生,促使SDS形成。但當(dāng)酶解時(shí)間過長時(shí),淀粉分子內(nèi)生成了大量較短的鏈段,分子間劇烈活動使淀粉分子不易結(jié)晶,SDS形成受到抑制[18]。因此,合適的酶作用時(shí)間對SDS含量有很大的影響。因此,選取酶作用時(shí)間4、6、8 h進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。

        不同酶添加量對SDS含量存在一定影響,酶的用量影響淀粉的黏度大小。由圖1可知,隨著酶用量的增加,SDS含量也隨之增加。當(dāng)分支酶添加量為300 U/g(以干淀粉質(zhì)量計(jì))時(shí),SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,達(dá)到35.85%。但之后SDS含量隨著酶添加量的增加逐漸降低,推測主要原因可能是因?yàn)锽E屬于糖基轉(zhuǎn)移酶,它可以先水解供體淀粉鏈上的某一α-1,4-糖苷鍵,生成具有還原性末端的鏈段,繼而將該鏈段通過轉(zhuǎn)糖基作用轉(zhuǎn)移至葡萄糖殘基的第6位碳原子上,從而形成適當(dāng)數(shù)量、含有較高分支短鏈比例的α-1,6-糖苷鍵,完成支化過程,并在冷藏回生過程中利用生成的氫鍵和低結(jié)晶度從而提高SDS含量[19,20]。而當(dāng)酶濃度過高時(shí),淀粉糊黏度過低,導(dǎo)致分子擴(kuò)散性受到影響,生成無活性的中間產(chǎn)物,不利于淀粉回生后結(jié)晶,從而影響SDS的生成。此研究結(jié)果與趙凱等[21]利用酶脫支處理制備玉米緩慢消化淀粉中發(fā)現(xiàn)較高酶濃度會抑制SDS形成的結(jié)論一致。因此,選取分支酶的添加量200、300、400 U/g進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。

        由圖1可知,隨著酶作用溫度的升高,反應(yīng)體系達(dá)到適宜溫度,SDS含量隨著酶促反應(yīng)速度的加快而逐漸增加。當(dāng)BE在75 ℃下反應(yīng)時(shí)SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到35.41%。繼溫度再升高,SDS含量有所減少。這可能是因?yàn)锽acillusstearothermophilus來源的酶熱穩(wěn)定性較高,但過高或過低的溫度都會降低酶催化效率,影響酶對淀粉分子的水解作用[22]。當(dāng)酶作用溫度過高時(shí),大部分酶被破壞,發(fā)生不可逆變性,導(dǎo)致酶失活不能水解淀粉分子,影響短鏈和結(jié)晶的形成,SDS含量降低[23]。因此,選取酶作用溫度70、75、80 ℃進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。

        圖1 各單因素對SDS含量的影響

        淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)對SDS含量影響如圖1所示。當(dāng)?shù)矸蹪{質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%時(shí),SDS的質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,達(dá)到34.67%。但隨著底物濃度逐漸增大,SDS含量反而隨之降低,這可能是因?yàn)楫?dāng)?shù)孜餄舛冗^大時(shí),淀粉糊黏度增加,導(dǎo)致酶不能充分與淀粉分子接觸,使酶的水解轉(zhuǎn)苷作用不能完全發(fā)揮[24]。形成有序短鏈結(jié)構(gòu)減少,促使淀粉冷藏回生時(shí)相對結(jié)晶度下降,SDS含量隨之減少[25]。因此,選取淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%、20%、25%進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。但總體而言,淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)對SDS含量影響不明顯,各個(gè)底物濃度條件下,SDS含量差別不大。

        2.2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化設(shè)計(jì)

        2.2.1 模型的建立及顯著性檢驗(yàn)

        選取酶作用時(shí)間、酶添加量、酶解溫度、淀粉漿濃度4個(gè)單因素設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用Box-Benhnken中心組合實(shí)驗(yàn),考察各個(gè)因素對SDS含量的影響,進(jìn)行4因素3水平的響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果見表2。

        表2 響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)及結(jié)果

        續(xù)表2

        通過Design-Expert軟件對表2中的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合分析后,預(yù)測回歸模型為:

        Y=37.42+1.32A+0.62B+0.59C+0.33D+0.072AB-0.24AC-0.22AD-0.16BC-0.027BD-0.15CD-3.03A2-1.44B2-2.49C2-2.29D2

        表3表明,模型的F值為1.25(>0.05)、P<0.000 1,結(jié)果表明所建立的回歸方程模型極顯著。預(yù)測值與真實(shí)值之間具有較好的相關(guān)性,這進(jìn)一步表明該模型具有良好的擬合度和較小的實(shí)驗(yàn)誤差。

        表3 方差分析

        該回歸方程可用于酶法制備慢消化玉米淀粉的過程進(jìn)行初步分析和預(yù)測。二次回歸方程中A、B、C、A2、B2、C2和D2對SDS含量的影響極顯著(P<0.01),其他差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此,各測試因子對響應(yīng)值的影響顯示出二次拋物線關(guān)系。此外,在酶作用時(shí)間、酶添加量、酶解溫度和淀粉漿濃度這4個(gè)關(guān)鍵因素中,對SDS含量的影響順序?yàn)椋好缸饔脮r(shí)間(A)> 酶添加量(B)>酶解溫度(C)>淀粉漿濃度(D)。擬合F值的缺失為0.69>0.05,P=0.711 7>0.05,表明未知干擾因素對測試結(jié)果的影響很小,模型擬合良好,測試誤差小。該模型可用來顯示每個(gè)因素和響應(yīng)值之間的差異。

        2.2.2 響應(yīng)面分析

        通過Design-Expert V8.0.6軟件,對各種因素之間的相互作用進(jìn)行響應(yīng)面分析。隨著A(酶作用時(shí)間)、B(酶添加量)、C(酶解溫度)、D(淀粉漿濃度)的增加,SDS含量(響應(yīng)值)均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。作用時(shí)間曲線和BE添加量曲線具有相對陡峭的斜率,因此其對SDS含量具有顯著影響;淀粉漿濃度曲線和作用溫度曲線比較平滑,響應(yīng)值隨該值變化不大,因此對SDS含量影響很小。同時(shí),這4個(gè)因素之間存在一定的相互作用,但交互作用不顯著(P>0.05);較高的SDS含量都出現(xiàn)在每個(gè)因素的中心附近,這表明在這種條件下制備的慢消化玉米淀粉的慢消化率可能最好。

        2.2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

        通過Design-Expert V8.0.6軟件響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn),對各工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化分析后,SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)預(yù)測值為37.66%,其對應(yīng)的因素為酶作用時(shí)間為6.5 h,需添加BE用量為320.0 U/g,酶反應(yīng)溫度為75.5 ℃,淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)21.0%。在最佳工藝條件下設(shè)定最佳工藝參數(shù),并進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn),制備酶修飾的慢消化玉米淀粉,SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為37.2%、36.9%、37.7%,平均值為(37.28±0.34)%,接近模型的預(yù)測值,表明使用Box-Benhnken中心組合獲得的工藝參數(shù)和響應(yīng)面分析準(zhǔn)確可靠,具有一定的應(yīng)用價(jià)值。

        2.3 慢消化淀粉相關(guān)性能分析

        2.3.1 顆粒形貌分析

        利用掃描電鏡觀察淀粉顆粒大小及改性前后表觀特征,將樣品分別于2 000和5 000倍數(shù)下進(jìn)行拍攝觀察。如圖2所示,天然玉米淀粉顆粒大多呈棱角圓滑的多面體結(jié)構(gòu),少許呈球形,表面凹凸不平狀,部分有細(xì)孔[26]。糊化處理使淀粉內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,結(jié)晶區(qū)被破壞,已完全失去顆粒形態(tài)。如箭頭所指處,酶解后出現(xiàn)分布致密規(guī)則的孔洞,深入的通向內(nèi)部結(jié)構(gòu),部分還出現(xiàn)空殼現(xiàn)象。

        圖2 天然玉米淀粉和酶改性6.5 h玉米淀粉的顆粒形貌

        2.3.2 鏈段分布分析

        通過HPAEC-PAD對淀粉樣品進(jìn)行鏈長分布測定。對各峰進(jìn)行積分處理,鏈段分布結(jié)果如圖3所示。根據(jù)聚合度(DP)將不同長度的鏈段分為3個(gè)部分:A鏈(DP≤10),B鏈(10

        表4 酶改性前后玉米淀粉鏈段分布變化

        2.3.3 相對結(jié)晶度分析

        天然玉米淀粉和酶改性淀粉的XRD衍射圖譜如圖4所示,天然玉米淀粉衍射角度2θ在15°、17.5°、19°和 23°出現(xiàn)了4個(gè)強(qiáng)度較高的特征衍射峰,這屬于典型的A型晶體衍射圖譜。經(jīng)BE酶解6.5 h的淀粉樣品,僅在17.5°和22°處有較強(qiáng)的衍射峰,屬于標(biāo)準(zhǔn)B型晶體結(jié)構(gòu)。X-衍射峰強(qiáng)度取決于淀粉內(nèi)部雙螺旋結(jié)構(gòu)重排的情況以及分子鏈相互作用,因此酶改性淀粉衍射峰下降可能是因?yàn)槊笇﹂L鏈的水解轉(zhuǎn)苷作用,使鏈段連接發(fā)生變化[28]。利用Jade 6.5軟件對淀粉相對結(jié)晶度進(jìn)行測定,結(jié)果顯示,酶改性淀粉相對結(jié)晶度為27.11%,比天然淀粉減少了18.10%,這可能是因?yàn)槊撝幚硎沟矸畚⒕ЫY(jié)構(gòu)發(fā)生變化,長鏈有序結(jié)構(gòu)減少,短支鏈結(jié)構(gòu)增加,從而導(dǎo)致相對結(jié)晶度降低[29]。

        圖4 酶改性前后玉米淀粉XRD衍射圖

        2.3.4 溶解度與膨脹度分析

        溶解度和溶脹度反映淀粉和水結(jié)合的程度,并且與淀粉的內(nèi)部結(jié)構(gòu)密切相關(guān)[30]。根據(jù)表5得出,天然玉米淀粉幾乎不溶于水;經(jīng)酶改性6.5 h的淀粉,溶解度達(dá)到29.12%,比天然玉米淀粉提高了20.50%。這可能是因?yàn)檫@種現(xiàn)象與酶水解后無定形區(qū)域的直鏈淀粉浸出有關(guān),糊化破壞了淀粉結(jié)晶區(qū)域的雙螺旋結(jié)構(gòu),并經(jīng)酶修飾暴露了更多的氫鍵,親水基團(tuán)增加,水合性能增強(qiáng),從而導(dǎo)致淀粉樣品的溶解度增加。天然玉米淀粉的膨脹度為23.58%,酶改性6.5 h后的膨脹度為12.35%,降低了11.23%。 這歸因于BE可以催化α-1,4-糖苷鍵斷裂,增加分支點(diǎn)比例,使質(zhì)點(diǎn)間結(jié)合能力增強(qiáng)從而降低膨脹速率。

        表5 酶改性前后淀粉溶解度和膨脹度的變化

        2.3.5 體外消化性能分析

        根據(jù)淀粉的體內(nèi)消化速率,可將淀粉分為快消化淀粉、慢消化淀粉、抗性淀粉。以天然玉米淀粉為底物進(jìn)行酶法修飾,利用體外模擬消化對所得改性淀粉的消化性能進(jìn)行分析。如表6所示,天然玉米淀粉含有較高的RDS,SDS質(zhì)量分?jǐn)?shù)僅有23.12%。隨著酶作用時(shí)間的增加,RDS含量下降,SDS和RS含量有了顯著提高。酶改性6.5 h,SDS和RS質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別增加了14.01%和5.43%,可能是因?yàn)槊父男圆粌H增加淀粉短鏈數(shù)量、縮短鏈長,還增加短簇鏈段的分支度,降低淀粉多尺度結(jié)構(gòu),增加α-1,6-糖苷鍵比例,從而有助于慢消化性能的提高。

        表6 酶改性前后淀粉消化性能的變化

        3 結(jié)論

        根據(jù)中心組合設(shè)計(jì)原理,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)4因素3水平的響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn),并以酶作用時(shí)間6.5 h、BE添加量為320 U/g、酶解溫度為75.5 ℃、淀粉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)21%為條件,得到酶法改性玉米慢消化淀粉的最佳制備工藝條件。在此條件下制備的SDS的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為37.28%,接近預(yù)測值37.66%。研究結(jié)果表明,SDS含量與淀粉精細(xì)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。觀察其微觀結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)具有較高慢消化速率的淀粉顆粒表面在酶水解6.5 h后均出現(xiàn)致密規(guī)則的孔洞,這為酶水解提供了孔道結(jié)構(gòu)。通過觀察其精細(xì)結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)具有較高SDS含量的改性淀粉短鏈比例較高和相對結(jié)晶度較低,這表明酶的轉(zhuǎn)糖基化可以使淀粉產(chǎn)生具有較高支鏈和短鏈的有序結(jié)構(gòu),促使消化性能降低,經(jīng)酶改性后的玉米淀粉具有良好的溶解性和膨脹性。

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