耿智霞，王玉欣，賈 興，瞿紅穎，魏麗娟★，史萬玉

（1.河北遠(yuǎn)征藥業(yè)有限公司，石家莊 050041；2.河北省獸藥技術(shù)創(chuàng)新中心，石家莊 050041；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，保定 071001）

金芩藍(lán)口服液是由金銀花、黃芩、連翹和板藍(lán)根組成的、具有清熱解毒、消腫利咽功效的純中藥制劑[1]。本試驗通過研究金芩藍(lán)口服液對小鼠耳腫脹的影響，探究金芩藍(lán)口服液的抗炎消腫效果；用脂多糖建立大鼠發(fā)熱模型，測定給藥后不同時段大鼠的體溫，觀察金芩藍(lán)口服液對大鼠體溫的影響，探討其退熱效果；用濃氨水刺激法制造小鼠咳嗽模型，記錄小鼠咳嗽潛伏期以及咳嗽次數(shù)，探討其止咳效果。為金芩藍(lán)口服液的臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)相關(guān)依據(jù)。

1 材料和方法

1．1 試驗材料

1．1．1 試驗動物

健康昆明小鼠，斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司；SD 大鼠，北京斯貝福（中國）實(shí)驗動物科技有限公司。均分籠飼養(yǎng)，自由飲水，顆粒飼料喂養(yǎng)。

1．1．2 試驗藥物

金芩藍(lán)口服液：河北遠(yuǎn)征藥業(yè)有限公司（含量：每 ml 含原生藥1.25 g）；阿司匹林泡騰片（巴米爾），阿斯利康制藥有限公司；脂多糖，Sigma公司生產(chǎn)。

1．1．3 試驗主要儀器

分析天平：賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；水銀體溫計：江蘇魚躍醫(yī)用有限公司。

1．2 試驗設(shè)計及分組

1．2．1 小鼠耳廓腫脹試驗

取60 只健康昆明小鼠，隨機(jī)分為6 組，每組10 只，雌雄各半，分別是正常對照組、模型對照組、阿司匹林對照組和金芩藍(lán)高、中、低劑量組。經(jīng)前期的預(yù)試驗各組灌服相應(yīng)藥物的劑量如表1。各組每天給藥1 次，連續(xù)給藥7 d。最后一次給藥45 min 后，左耳每支小鼠涂抹二甲苯20 μl，右耳不做處理，作為正常對照，40 min后處死小鼠（脫頸椎），沿耳廓基線剪下兩耳，用打孔器在左右耳同一位置的打圓形耳片，稱重，將圓形耳片重量之差作為耳腫脹度，并計算各組小鼠腫脹度[2]。

表1 小鼠耳廓腫脹試驗分組與處理情況

1．2．2 退熱試驗

試驗分組前30 min 給大鼠測2 次肛溫，淘汰溫度波動0.5℃的大鼠。試驗分組與處理情況見表2。除健康組外，其余組腹腔注射脂多糖劑量為80 μg/kg 體重，脂多糖注射2 h 后開始給藥。分別在造模后的1 h、2 h、4 h、6 h、8 h 測大鼠肛溫，記錄數(shù)據(jù)[3～6]。

表2 退熱試驗分組與處理情況

1．2．3 止咳試驗

將60 只昆明小鼠隨機(jī)分為6 組，每組10只，分別為健康組、模型組、陽性藥物對照組（枸櫞酸噴托維林，20 mg/kg）、金芩藍(lán)口服液高、中、低劑量組（4 ml/kg、2 ml/kg、1 ml/kg），3～6 組每天進(jìn)行小鼠灌服給藥1 次，連續(xù)給藥5 d，正常組和模型組灌服相同體積生理鹽水。最后一次藥1 h 后，將小鼠倒扣在250 ml 透明玻璃中，并立即放入將含有30% 氨水100 μl 的棉球，正常組用生理鹽水棉球代替[7]，記錄小鼠出現(xiàn)咳嗽的潛伏期時間和2 min內(nèi)的咳嗽總次數(shù)。

2 結(jié)果

2．1 對小鼠耳廓腫脹度的影響

模型對照組小鼠的耳腫脹極顯著高于健康對照組（P ＜0.01），說明造模成功。應(yīng)用阿司匹林和金芩藍(lán)口服液后均可極顯著降低小鼠的耳腫脹（P＜0.01）；金芩藍(lán)口服液的3 個劑量組中，高、中兩個劑量組的消炎效果均極顯著優(yōu)于低劑量組（P＜0.01），而高、中兩個劑量組之間無顯著差異（P＞0.05）。具體數(shù)據(jù)如表3所示。

表3 金芩藍(lán)口服液對小鼠耳腫脹度的影響（n=10，±s）

注：同一列不同小寫字母間表示組間差異顯著，P ＜0.05；不同大寫字母間，表示組間差異極顯著，P ＜0.01。

組別 劑量 腫脹度（mg）健康組 — 0.63±0.95A模型組 — 7.44±1.70B阿司匹林組 200 mg/kg 2.38±0.60Ca金芩藍(lán)高劑量組 4 ml/kg 3.02±0.59Cb金芩藍(lán)中劑量組 2 ml/kg 3.07±0.58Cb金芩藍(lán)低劑量組 1 ml/kg 5.30±0.88D

2．2 金芩藍(lán)口服液退熱試驗結(jié)果

與健康組比較，其它組大鼠造模1 h 后，肛溫均極顯著升高（P ＜0.01）。模型組在造模后1 h直到試驗結(jié)束，與健康組大鼠比較均顯著差異（P＜0.05）；說明明脂多糖制造的大鼠發(fā)熱模型在維持時間及發(fā)熱水平上均能滿足試驗要求。在造模后4 h 至試驗結(jié)束期間內(nèi)，阿司匹林組和金芩藍(lán)口服液高、中劑量組大鼠的肛溫與模型組相比，均顯著降低（P ＜0.05），說明阿司匹林和金芩藍(lán)口服液對制造的發(fā)熱模型具有較好的解熱效果。金芩藍(lán)口服液低劑量組大鼠的體溫從造模后8 h 才開始顯著降低（P ＜0.05），且降幅顯著低于阿司匹林組和金芩藍(lán)口服液高、中劑量組（P ＜0.05），說明低劑量組的解熱效果較上述三組較慢、較弱。金芩藍(lán)口服液高、中劑量組和阿司匹林組三組之間的體溫變化均無明顯差異（P ＞0.05），說明其解熱效果與阿司匹林基本一致。具體數(shù)據(jù)如表4所示。

2．3 金芩藍(lán)口服液止咳作用試驗結(jié)果

金芩藍(lán)口服液高、中劑量組小鼠的咳嗽潛伏期與模型組相比均顯著延長（P ＜0.01），顯著長于金芩藍(lán)口服液低劑量組（P ＜0.05），但高、中劑量組間無顯著差異（P ＞0.05），低劑量組與模型組相比無顯著性差異（P ＞0.05）。金芩藍(lán)口服液高、中、低三個劑量組小鼠的咳嗽次數(shù)與模型組相比顯著減少（P ＜0.01），且金芩藍(lán)口服液高、中劑量組小鼠的咳嗽次數(shù)與低劑量組相比顯著減少（P＜0.05），但高、中劑量組間無顯著差異（P ＞0.05）；金芩藍(lán)口服液高、中劑量組與枸櫞酸噴托維林組的小鼠咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)無顯著差異（P＞0.05）。具體數(shù)據(jù)如表5所示。

表5 金芩藍(lán)口服液對氨水致小鼠咳嗽的影響結(jié)果（n=10，±s）

表5 金芩藍(lán)口服液對氨水致小鼠咳嗽的影響結(jié)果（n=10，±s）

注：表中同一列不同字母代表組間差異顯著（P ＜0.05 或P ＜0.01）；有相同字母代表組間差異不顯著（P ＞0.05）。

組別 給藥劑量 咳嗽潛伏期（s） 咳嗽次數(shù)（次/2min）正常組 — — 0模型組 — 36.37±4.63b 74.5±6.1a枸櫞酸噴托維林組 20 mg/kg 53.08±8.50a 36.4±5.7c金芩藍(lán)高劑量組 4 g/kg 50.98±6.54a 37.9±8.4c金芩藍(lán)中劑量組 2 g/kg 50.80±8.19a 39.9±7.2c金芩藍(lán)低劑量組 1 g/kg 41.83±7.66b 60.9±7.5b

3 討論與結(jié)論

金芩藍(lán)口服液中金銀花清熱解毒祛病因，在方中做主藥[8～9]；黃芩清瀉肺熱，做輔藥[10～11]；連翹清熱解毒，消腫散結(jié)[12]，板藍(lán)根清熱解毒，涼血利咽，共同緩解咽喉腫脹，在方中共做佐使藥。四藥合用，共奏清熱解毒，瀉肺平喘，利咽消腫之功效，用于多種原因引起的發(fā)熱、咳嗽、咽喉腫痛的防治。

本試驗從現(xiàn)代藥理學(xué)角度研究發(fā)現(xiàn)，金芩藍(lán)口服液具有顯著的抗炎、退熱作用也可顯著延長氨水致小鼠咳嗽的潛伏期，有效減少小鼠的咳嗽次數(shù)。雞傳染性喉氣管炎是由瘟疫之毒犯肺引起的一種肺熱咳喘之證。證見發(fā)熱，咽喉腫脹，張口伸脖呼吸，氣喘、咳嗽等。治宜清熱解毒，瀉肺平喘，利咽消腫。因此本試驗為金芩藍(lán)口服液在獸醫(yī)臨床上用于雞傳染性喉氣管炎引起的發(fā)熱、咳嗽、咽喉腫痛提供了藥理學(xué)依據(jù)。