類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 ( rheumatoid arthritis，RA ) 是以侵蝕性和對(duì)稱性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的一種慢性、全身性及系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其病因和發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明，有研究發(fā)現(xiàn)，RA 發(fā)生與關(guān)節(jié)缺氧微環(huán)境有密切關(guān)系

。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-6 ( insulin-like growth factor binding protein-6，IGFBP-6 ) 是胰島素樣生長(zhǎng)因子 ( insulin-like growth factors，IGFs ) 家族的重要成員之一，可與胰島素樣生長(zhǎng)因子-2 ( insulin-like growth factor-2，IGF-2 ) 特異性結(jié)合而抑制 IGF-2 活性，同時(shí)也可抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 ( vascular endothelial growth factor，VEGF )功能，從而抑制血管新生

。而缺氧誘導(dǎo)因子-1α( hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α ) 是調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)缺氧反應(yīng)的核轉(zhuǎn)錄因子，在促進(jìn)滑膜炎癥、血管新生及血管翳形成、軟骨破壞及骨侵蝕方面均發(fā)揮著重要的作用

。同時(shí) VEGF 是促進(jìn)血管形成的一種最重要的細(xì)胞因子，可直接促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，與 RA 血管翳形成密切相關(guān)

。為此，本研究對(duì)RA 患者和非 RA 健康人群血清中 IGFBP-6、HIF-1α及 VEGF 水平進(jìn)行對(duì)比分析，并探討其與不同活動(dòng)度 RA 相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

江小白借力青春微電影、MV，植入熱門影視劇，借小白哥之口講述年輕人追夢(mèng)路上的甜蜜與辛酸，夢(mèng)想與拼搏。酒是情緒最好的宣泄，產(chǎn)品的適時(shí)嵌入更能激發(fā)強(qiáng)烈的情感共鳴。

材料與方法

一、納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.納入標(biāo)準(zhǔn)：( 1 ) RA 組 2019 年 7 月至 2021 年3 月，在深圳市龍華區(qū)中心醫(yī)院和人民醫(yī)院確診的RA 患者；( 2 ) 符合 RA 診斷標(biāo)準(zhǔn)

者；( 3 ) 首次確診者；( 4 ) 無抗風(fēng)濕藥使用史者；( 5 ) 患者及家屬知情同意，并簽署知情同意書者。

2.排除標(biāo)準(zhǔn)：( 1 ) 患有其它自身免疫性疾病者；( 2 ) 復(fù)診者；( 3 ) 伴有腫瘤、糖尿病及血液等疾病者；( 4 ) 有嚴(yán)重器官實(shí)質(zhì)性病變者；( 5 ) 需非常規(guī)治療者；( 6 ) 懷孕及哺乳者。

二、研究對(duì)象

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

隨著 RA 患者活動(dòng)度加重 IGFBP-6 水平不斷下降，而 HIF-1α 和 VEGF 水平不斷升高，不同活動(dòng)度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (

＜ 0.05 ) ( 表3 )。

AE-275 全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀 ( 深圳愛康生物公司，AE-275 )。

三、儀器與試劑

本研究 RA 組納入 87 例，其中男 59 例，年齡 32～65 歲，平均 ( 41.57±10.24 ) 歲；女 28 例，年齡 31～67 歲，平均 ( 40.29±11.06 ) 歲。對(duì)照組納入同期非 RA 患者 120 例，其中男 81 例，年齡30～68 歲，平均 ( 42.01±12.52 ) 歲；女 39 例，年齡 32～65 歲，平均 ( 41.85±10.97 ) 歲，體查均無自身免疫性疾病、腫瘤、肝腎功能不全、代謝綜合征、骨與關(guān)節(jié)相關(guān)性疾病。兩組的年齡、性別等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (

＞ 0.05 )，具有可比性。RA 組患者根據(jù) RA 疾病活動(dòng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) ( DSA280 )分為輕度活動(dòng)組 ( DSA28 ＜ 3.2 ) 31 例、中度活動(dòng)組( 3.2 ＜ DSA28 ＜ 5.1 ) 37 例、重度活動(dòng)組 ( DSA28 ＞5.1 ) 19 例。

四、試驗(yàn)方法

“簡(jiǎn)單來說，就是一個(gè)前體mRNA分子可以經(jīng)過不同的加工方式，形成不同的成熟mRNA產(chǎn)物?！痹撜撐牡谝蛔髡?、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)玉米改良中心陳秋月博士解釋，這就像用剪刀去剪繩子，再把剪下來的繩段重新打結(jié)一樣，剪哪里、剪幾刀、留下哪些繩段、以什么順序打結(jié)，這些都會(huì)產(chǎn)生不同的新繩。

1.標(biāo)本采集：抽取清晨空腹靜脈血 3～5 ml 于干燥無抗凝劑管內(nèi)，室溫放置 30 min 后離心分離血清，及時(shí)檢測(cè)，不能及時(shí)完成檢測(cè)的于 -20 ℃ 冰箱內(nèi)保存。

2.IGFBP-6、HIF-1α 及 VEGF 水平： 采用酶聯(lián)免疫吸附法 ( enzyme linked immunosorbent assay，ELSIA ) 分別檢測(cè)血清中 IGFBP-6、HIF-1α 及 VEGF水平，操作按儀器和試劑說明書進(jìn)行。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

RA 組 IGFBP-6 水平明顯低于對(duì)照組，而 HIF-1α及 VEGF 水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

＜ 0.05 ) ( 表1 )。

結(jié) 果

一、IGFBP-6、HIF-1α 及 VEGF 水平

在綜合驗(yàn)收方面，制定科學(xué)有效的驗(yàn)收辦法，由區(qū)縣農(nóng)發(fā)辦、財(cái)政局聯(lián)合具有一定資質(zhì)的第三方機(jī)構(gòu)或土建、水利等社會(huì)機(jī)構(gòu)專家，嚴(yán)格按照下達(dá)的投資計(jì)劃進(jìn)行全面驗(yàn)收。建立健全追責(zé)機(jī)制，對(duì)項(xiàng)目通過驗(yàn)收但因建設(shè)內(nèi)容不達(dá)標(biāo)等問題的，分別追究項(xiàng)目實(shí)施主體和驗(yàn)收人員的責(zé)任。

二、不同性別 RA 患者的 IGFBP-6、HIF-1α及 VEGF 水平

如表2所示，對(duì)PP注塑件VOC八項(xiàng)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，主要檢出物為甲醛和乙醛，其它物質(zhì)由于含量較低無法檢出(ND)。造成該結(jié)果的原因是PP材料在高溫下會(huì)發(fā)生熱氧化降解，其主要產(chǎn)物為醛類小分子化合物。從圖1中可以看出，隨著注塑溫度升高，甲醛和乙醛含量增大，當(dāng)溫度高于210℃時(shí)，熱氧化降解加強(qiáng)，產(chǎn)生的醛類物質(zhì)開始大量增加。如表2所示，隨著注塑溫度升高，PP注塑件的氣味越來越大，主要為焦糊味，注塑溫度超過210℃后，焦糊味越來越濃，逐漸無法接受。所以在PP材料注塑加工過程中，把加工溫度控制在在210℃以下，有利于降低PP注塑件的氣味、VOC。

三、不同活動(dòng)度 RA 患者 IGFBP-6、HIF-1α及 VEGF 水平比較

分析乾隆南巡期間排名前十的游覽景觀，杭州以西湖、孤山和云棲3處景觀列在首位，蘇州和鎮(zhèn)江都以2處景觀即寒山和靈巖山、金山和焦山并列第二，江寧、揚(yáng)州和常州各以1處景觀即棲霞山、大明寺、惠山位居第三。此外，蘇州的虎丘是乾隆帝賦詩(shī)吟誦的重要景觀，揚(yáng)州的天寧寺和高旻寺、杭州的織造府行宮是乾隆帝題聯(lián)賜匾的重要景觀。

不同性別 RA 患者血清中 IGFBP-6、HIF-1α 及VEGF 水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (

＞ 0.05 ) ( 表2 )。

四、RA 組 GFBP-6、HIF-1α 及 VEGF 水平與DAS28 評(píng)分相關(guān)性分析

RA 組 IGFBP-6 水平明顯降低，而 HIF-1α 及VEGF 水平明顯升高。經(jīng) Spearman 相關(guān)性分析，RA 患者 IGFBP-6 水平與 DAS28 評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(

= -0.6172，

= 0.0328 )，而 HIF-1α 和 VEGF 水平與 DAS28 評(píng)分呈正相關(guān) (

= 0.7349，0.7802，

=0.0279，0.0236 )。

討 論

RA 是臨床上最常見的一種炎性關(guān)節(jié)病，其基本病理變化為關(guān)節(jié)滑膜首先出現(xiàn)慢性炎癥及血管翳形成，然后關(guān)節(jié)軟骨和骨遭受破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)變形及功能喪失，嚴(yán)重者可致殘，其發(fā)病率全球約為 0.5%～1.0%，我國(guó)約為 0.33% 左右，給患者生活質(zhì)量和身心健康造成嚴(yán)重影響

。目前，常用于 RA 診斷的類風(fēng)濕因子 ( rheumatoid factor，RF )、C-反應(yīng)蛋白 ( C-reactive protein，CRP ) 及紅細(xì)胞沉降率 ( erythrocyte sedimentation rate，ESR ) 對(duì) RA 診斷靈敏度高，但特異度低，而抗環(huán)瓜氨酸肽 ( cyclic citrullinate peptide，CCP ) 抗體診斷特異度高，但靈敏度低，給 RA 早期診斷和活動(dòng)度評(píng)估造成很大困難

。因此，尋找更適合 RA 早期診斷和活動(dòng)度評(píng)估指標(biāo)尤為重要。

RA 是一種引起多處小關(guān)節(jié)慢性炎癥的全身性自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，且尚不明確。目前多數(shù)認(rèn)為 RA 主要由免疫細(xì)胞和炎癥細(xì)胞因子共同作用所引起的一種炎癥性疾病

。IGFBP-6 是 IGFs 活性的調(diào)節(jié)因子，人體組織、細(xì)胞及體液中廣泛存在，與 IGF-2 特異性結(jié)合后具有抑制 IGF-2 和 VEGF 生物活性，抑制新血管生成，同時(shí)還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化及凋亡等功能。此外，還能依賴促分裂原活化的蛋白激酶途徑促進(jìn)細(xì)胞遷移。最新研究表明，IGFBP-6 可抑制骨代謝并能促進(jìn)中性粒細(xì)胞生成活性氧類及釋放髓過氧化物酶，趨化免疫細(xì)胞遷移至關(guān)節(jié)滑膜，參與 RA發(fā)病

。本研究結(jié)果顯示，RA 患者血清中 IGFBP-6水平明顯降低，且與活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān) (

＜ 0.05 )。提示 IGFBP-6 在 RA 發(fā)病過程中可能發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用，其水平降低減弱了其對(duì) IGF-2 和 VEGF 抑制作用，從而促進(jìn) RA 發(fā)生和發(fā)展。

RA 最早病變是血管新生，其為促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、血管翳形成及慢性炎癥持續(xù)存在的重要因素，并貫穿 RA 病理過程的全程。有研究發(fā)現(xiàn)，RA發(fā)生與病變部位缺氧微環(huán)境有密切關(guān)系

。HIF-1α是一種在特異性缺氧狀態(tài)下發(fā)揮生物活性的轉(zhuǎn)錄因子，其在缺氧條件下多種類型的細(xì)胞內(nèi)表達(dá)水平增加，進(jìn)一步促進(jìn)多種靶基因如促紅細(xì)胞生成素、VEGF 等基因的轉(zhuǎn)錄，從而引起血管新生及炎癥的發(fā)生

。VEGF 是一種促進(jìn)血管形成最重要的細(xì)胞因子之一，同時(shí)也是 HIF-1α 調(diào)控的一種下游因子，可直接促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，與血管翳的形成有直接關(guān)系，在滑膜血管新生過程中起關(guān)鍵作用。此外，VEGF 可上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶的水平，從而可引起一系列炎癥反應(yīng)。有研究表明，VEGF 水平與RA 發(fā)病有密切關(guān)系

。本研究結(jié)果顯示，RA 患者血清中 HIF-1α 和 VEGF 水平明顯升高，且與 RA活動(dòng)度呈正相關(guān) (

＜ 0.05 )。提示：( 1 ) HIF-1α 和VEGF 在 RA 發(fā)病中互相發(fā)揮了重要的促進(jìn)作用；( 2 ) RA 患者可能存在微缺氧狀態(tài)；( 3 ) HIF-1α 在RA 患者中的作用可能與其在微缺氧狀態(tài)下表達(dá)水平增加，可進(jìn)一步促進(jìn)其下游因子 VEGF 基因轉(zhuǎn)錄及抑制 IGFBP-6 水平表達(dá)，從而促進(jìn) RA 發(fā)生和發(fā)展等有關(guān)。

綜上所述，RA 患者 IGFBP-6 水平明顯降低，而HIF-1α 及 VEGF 水平明顯升高，且與活動(dòng)度有關(guān)。因此，加強(qiáng) IGFBP-6、IF-1α 及 VEGF 水平監(jiān)測(cè)，對(duì)RA 及時(shí)診斷、病情評(píng)估及發(fā)病機(jī)制的研究具有一定的參考價(jià)值，值得臨床推廣應(yīng)用。

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