王 莉，劉麗秋，辛 華

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯154003)

臨床常見傳染性疾病為丙型肝炎，患者因感染丙型肝炎病毒(HCV)而患病，涉及免疫介導(dǎo)、HCV直接損害兩種，常見病毒因素有復(fù)制能力、病毒基因型等，細(xì)胞免疫、體液免疫及先天性免疫反應(yīng)則屬宿主因素[1]，傳播途徑以輸血、針刺及吸毒等方式為主，其中輸血傳播較常見，經(jīng)輸血、血液制品傳播疾病，流行病學(xué)顯示[2]，此病在全球中感染率約占3%，患病率逐年升高，已成為嚴(yán)重的社會、公共衛(wèi)生問題。有文獻(xiàn)指出[3]，丙型肝炎的病理機(jī)制與乙肝有相似性，主要以淋細(xì)胞浸潤、肝細(xì)胞壞死為主，患者患病后因匯管區(qū)纖維組織增生、易增加肝硬化風(fēng)險，直接危及生命，因此早期如何正確檢驗、受到臨床高度重視[4]。證實，目前檢驗抗-HCV以酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)為主，其中應(yīng)用較廣泛的是間接ELISA，其可盡早明確病情，但血清中非特異性IgG因素易干擾檢測結(jié)果、增加假陽性幾率，對檢測準(zhǔn)確度造成直接影響、耽誤疾病治療，未獲得患者青睞，鑒于此，本文分析丙型肝炎患者行不同檢驗方式的價值。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

遴選本院2019-01～2020-12收治的100例丙型肝炎患者，科研組50例，男女比例為26:24，年齡21～60歲，平均(38.24±4.27)歲；其中已婚28例，未婚22例；BMI值19～26kg/m2，均值(23.58±0.27)kg/m2；教育背景：低于初中15例，高中15例，高于大專20例；合并癥：高血壓13例，糖尿病14例，高血脂11例，其他12例；參照組50例，男女比例為27:23，年齡22～64歲，平均(38.67±4.34)歲；其中已婚29例，未婚21例；BMI值19～26kg/m2，均值(23.12±0.34)kg/m2；教育背景:低于初中16例，高中14例，高于大專20例；合并癥：高血壓14例，糖尿病13例，高血脂12例，其他11例?？杀容^(P>0.05)。簽署“知情同意書”，經(jīng)倫理委員會審批。

納入標(biāo)準(zhǔn):①與中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會制定“丙型肝炎防治指南(2004年版)”相符[5]；②患病后呈易疲勞、腹脹及食欲減退等表現(xiàn)；③年齡18～60歲；④可獨(dú)立溝通；⑤有完整資料。

排除標(biāo)準(zhǔn):①心肝腎功能障礙；②其他傳染性疾?。虎壅帒言谢虿溉槠?；④精神障礙；⑤中途退出研究。

1.2 方法

入院后兩組均在同一實驗室內(nèi)完成血清標(biāo)本檢驗，兩組也均由同一組檢驗人員、同一檢驗儀器完成。

兩組患者均行ELISA法檢測，先采集空腹、晨間肘部靜脈血3mL，按3000r/min速率持續(xù)離心10min，完成離心操作后對血清分離、等待檢測，檢測流程：室溫下平衡30min，將試劑取出板條，各板陰性對照3孔，陽性對照有2孔，按照編號將樣本放入對應(yīng)的孔內(nèi)，將100μL稀釋液放于各個孔內(nèi)，10μL待測樣本血清進(jìn)行陰陽對照，調(diào)節(jié)溫度到37℃，溫育處理1h、采用洗板機(jī)進(jìn)行洗板處理5min，最后完成扣干處理，陰性標(biāo)準(zhǔn)為OD值<臨界值；陽性標(biāo)準(zhǔn)為OD值>臨界值。

參照組(間接ELISA法)：由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供間接ELISA法試劑盒，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

科研組(雙抗原夾心ELISA法)：由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供雙抗原夾心ELISA法試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.3 觀察指標(biāo)

檢測結(jié)果：記錄GMWW 組抗-HCV陽性、抗-HCV陰性的例數(shù)。

診斷效能：統(tǒng)計靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值[6]，具體檢測流程靈敏度(真陽性例數(shù)/[真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)]×100%)、特異度(真陰性例數(shù)/[真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)]×100%)、陽性預(yù)測值(真陽性例數(shù)/[真陽性例數(shù)+假陽性例數(shù)]×100%)、陰性預(yù)測值(真陰性例數(shù)/[真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù)]×100%)、陽性檢出率(真陽性例數(shù)/總例數(shù)×100%)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果

經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，9份抗-HCV陽性標(biāo)本中，科研組陽性檢出率為88.89%，參照組陽性檢出率33.33%；科研組假陰性樣本有1份，參照組假陰性樣本有6份；科研組抗-HCV陰性標(biāo)本檢出率為96.70%，參照組抗-HCV陰性樣本檢出率為85.71%，兩組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

表1 兩組檢測結(jié)果比較[n(%)]

2.2 診斷效能

與參照組比較，科研組靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值更高(P<0.05)，見表2。

表2 兩組診斷效能比較[n=50,n(%)]

3 討論

近年來研究表明[7]，HCV屬單股正鏈RNA病毒，丙型肝炎患者感染初期無典型癥狀，若疾病持續(xù)加重，部分群體呈食欲減退、疲勞等不適表現(xiàn)，未及時治療易增加慢性肝炎、肝功能衰竭及肝癌等發(fā)病風(fēng)險，甚至危及生命。HCV已是全球范圍內(nèi)的公共衛(wèi)生問題，主要傳播途徑為輸血傳播，目前臨床并未研制出有效的疫苗控制HCV感染，因此控制丙型肝炎傳染仍以早期篩查及診治為主，嚴(yán)控疾病進(jìn)展、對改善患者預(yù)后有積極作用，利于盡早根據(jù)檢查結(jié)果制定治療方案、為后期治療提供參考數(shù)據(jù)。

隨著現(xiàn)代醫(yī)療事業(yè)進(jìn)展，國內(nèi)采供血機(jī)構(gòu)多采用間接ELISA法篩查抗-HCV血液，具有特異性高的優(yōu)勢，臨床被廣泛應(yīng)用，分析作用機(jī)制是：間接ELISA法以二抗為酶結(jié)合物，與IgM抗體比較，血清中出現(xiàn)IgG抗體的時間更晚，因此患者早期若感染HCV，采集血液進(jìn)行檢測時，極易出現(xiàn)陽性漏檢現(xiàn)象、影響最終檢測結(jié)果，且受間接ELISA法制備抗原技術(shù)特征的影響，血清中具有高濃度的IgG抗體濃度，類風(fēng)濕因子吸附、少量非特異性IgG抗體出現(xiàn)一定比例后，極易增加假陽性風(fēng)險，借助稀釋方式雖能將IgG抗體濃度降低，但操作流程較繁瑣、仍然未能避免假陽性問題，影響最終檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此盡早如何選檢測方式、受到相關(guān)領(lǐng)域重視。有文獻(xiàn)報道，雙抗原夾心ELISA法檢測丙型肝炎可提高疾病準(zhǔn)確度，分析發(fā)現(xiàn)：其以重組抗原技術(shù)為基點(diǎn)發(fā)展形成，分析作用機(jī)制是：利用酶類對抗原標(biāo)記、完成酶類標(biāo)記二抗的替代，重點(diǎn)檢測IgG、IgM等總抗體，2次特異性反應(yīng)抗體，使非特異性的IgG干擾明顯減少，彌補(bǔ)間接ELISA法IG的缺陷，利于提高檢測特異性、敏感度，具有較高的臨床應(yīng)用價值。

本研究示：①9份抗-HCV陽性標(biāo)本中，科研組陽性檢出率為88.89%，參照組陽性檢出率33.33%；科研組假陰性樣本有1份，參照組假陰性樣本有6份；科研組抗-HCV陰性標(biāo)本檢出率為96.70%，參照組抗-HCV陰性樣本檢出率為85.71%，兩組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，表示雙抗原夾心ELISA法檢測可盡早檢出抗-HCV陽性，為疾病治療提供參考數(shù)據(jù)、利于改善患者預(yù)后效果；②與參照組比較，科研組靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值更高(P<0.05)，說明本文與李京濤[8]文獻(xiàn)相似，因此雙抗原夾心ELISA法具有較高的診斷效能，提高檢測準(zhǔn)確度、減少假陽性發(fā)生，避免醫(yī)療糾紛出現(xiàn)、可作為疾病篩查首選。