鮑紅春，賈博淵，李小雷，何瑞超，李 慧，賈曉東，賈學宇，吳小燕 ( .內蒙古自治區(qū)園藝研究院，內蒙古呼和浩特 000；.內蒙古漠菇生物科技有限公司，內蒙古鄂爾多斯 07000；.內蒙古農業(yè)大學，內蒙古呼和浩特 0005 )

沙杵菇[(JIA)]又稱“沙棒槌菇”“沙錘子菇”,隸屬于菌傘綱，傘菌亞目，蘑菇科，鬼傘屬。因其形似沙槌而得名，是一種珍稀的藥食兼用野生真菌，廣泛分布于內蒙古鄂爾多斯市準格爾旗部分地區(qū)，在雨后的沙蒿地、草沙地、楊樹林及沙漠腐草灘地較為常見。近年來由于野生蘑菇含有多種氨基酸及生物活性酶類，有助消化、降血壓、抗腫瘤、降血脂等功效，使其備受人們青睞。野生沙杵菇因其綠色無污染、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，深受人們喜愛，市場需求越來越大，由于利益的驅使，導致人們掠奪性采摘，使得當地珍貴野生沙杵菇資源瀕臨滅絕。目前關于沙杵菇人工栽培研究甚少，因此，選育質優(yōu)、高產新菌種進行人工栽培，是保護野生沙杵菇資源的一項有效措施，對當地野生食用菌資源的開發(fā)利用將具有巨大意義。

野生菌株是優(yōu)良菌種選育和馴化的基礎材料之一。筆者以采集到的野生沙杵菇菌絲團與菌蕾為試驗材料，經組織分離得到菌株，對分離菌株進行菌絲生長情況觀察評估，并對2個優(yōu)選菌株進行栽培試驗，以期選育出適合大面積推廣的優(yōu)良菌株，為最終實現沙杵菇人工規(guī)?；耘嗟於ɡ碚摶A。

1 材料與方法

試驗所用的沙杵菇菌絲團與菌蕾，采集于內蒙古鄂爾多斯市準格爾旗布爾陶亥鄉(xiāng)爾圪濠村附近沙蒿地，經組織分離培養(yǎng)得到原始菌株。

母種采用常規(guī)PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL)；原種培養(yǎng)料配方：玉米秸絲35.0%，玉米芯35.0%，羊糞28.5%，石膏粉1.5%，含水量50.0%～55.0%；栽培料配方：玉米秸30.0%，玉米芯30.0%，沙蒿粉10.0%，羊糞26.2%，石膏粉2.0%，石灰粉1.8%，含水量65.0%，pH 7.5～8.0。

野生沙杵菇菌絲體的分離。將野外采集的沙杵菇菌絲團和菌蕾置于0～5 ℃條件下低溫處理。待菌絲團緊縮致密，菌蕾變小而圓整、質硬時，取出28個菌絲團，分別編號為SHCHG(S)01～SHCHG(S)28， 43個菌蕾編號為SHCHG(L)01～SHCHG(L)43。迅速清除干凈外圍的腐草土，分別放入無菌培養(yǎng)皿中。在超凈工作臺上，先用0.1%的HgCl溶液消毒10 min，再用無菌水沖洗，然后剝離外圍物質，直到露出菌絲團的核心和單一菌蕾，再用無菌水反復沖洗，剝取約1 mm組織分別接入裝有PDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中。在溫度18 ℃、濕度80%～85%的生物培養(yǎng)箱中培養(yǎng)150 h，備用。

野生沙杵菇再生菌絲體的提純。從28個菌絲團培養(yǎng)皿中，通過趨中優(yōu)選原則，選取3組。為防止菌絲體感染病毒，在培養(yǎng)基中加入0.35‰的5%EDTA抑毒劑脫毒，采用先端菌絲體分離提純菌絲，變換培養(yǎng)基復壯菌種，利用“適培基”馴化。選取較好的菌絲體轉接到試管斜面中。同樣，從43個菌蕾培養(yǎng)皿中選取10組較好菌絲體進行轉接。

原種、栽培種制作和出菇試驗。按上述配方配料，將230 g原種發(fā)酵料裝入250 mL三角瓶，常壓滅菌后接入已活化的 PDA菌種。栽培種發(fā)酵料采用17 cm×33 cm×0.06 cm聚丙烯袋。常溫滅菌后接種，置于25 ℃生物培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀測菌絲形態(tài)特征、長勢，比較各處理菌絲生長速度。出菇試驗采用內徑規(guī)格為42 cm×42 cm×18 cm 塑料筐，試驗以優(yōu)選的2個菌株進行原種培養(yǎng)及出菇比較試驗，每個處理設10個重復。設置3個處理，分別為T100%未經堆腐發(fā)酵的培養(yǎng)料，T2發(fā)酵料與未發(fā)酵料各占50%，T3 100%經堆腐發(fā)酵的培養(yǎng)料。

菌絲長勢評分標準：5分為菌絲長勢濃密，均勻；4分為菌絲長勢濃密，較均勻；3分為菌絲長勢較濃密，較均勻；2分為菌絲長勢較稀疏，較均勻；1分為菌絲長勢稀疏，不均勻。

2 結果與分析

在同種平板PDA培養(yǎng)基上，供試菌株菌絲均能夠正常生長，但各菌株菌絲顏色、菌絲濃密度、均勻度、菌絲長勢存在一定差異。通過觀察比較，采用趨中優(yōu)選原則，從28個菌絲團中，優(yōu)選出3個菌株，分別為SHCHG(S)02、SHCHG(S)09、SHCHG(S)23。 同樣從43個菌蕾中，優(yōu)選出10個菌株，分別為SHCHG(L)07、SHCHG(L)09、SHCHG(L)22、SHCHG(L)24、SHCHG(L)25、SHCHG(L)31、SHCHG(L)34、SHCHG(L)36、SHCHG(L)40、SHCHG(L)42。13個菌株的菌絲生長情況見表1，SHCHG(S)02與SHCHG(L)07菌株菌絲濃白粗壯、均勻濃密、長勢強，經過反復優(yōu)選確定SHCHG(S)02和SHCHG(L)07為最佳菌株。

表1 部分野生沙杵菇菌株的菌絲在PDA培養(yǎng)皿中的生長情況(18 ℃)

從表2可以看出，在相同處理下SHCHG(J)02菌株菌絲生長速度均優(yōu)于SHCHG(L)07。2個菌株菌絲生長速度為5.0～7.5 mm/d。在T3處理下SHCHG(J)02和SHCHG(L)07菌株菌絲萌發(fā)時間最短，分別為20和21 h；菌絲生長速度最快，為7.5和6.5 mm/d。T2處理下菌絲生長情況次之，T1處理下2個菌株菌絲萌發(fā)時間長，生長速度慢，菌絲體長勢弱。由此可知，在經過堆腐發(fā)酵的栽培料上，2個沙杵菇菌株表現為生長速度快，菌絲體粗壯且濃白、長勢強；未經堆腐發(fā)酵的培養(yǎng)料，不利于野生沙杵菇菌絲正常生長。

表2 2個菌株菌絲體在不同栽培料中的生長情況Table 2 The mycelium growth of the 2 strains in different cultivated cultures

由表3可知，2個沙杵菇菌株在栽培料3個處理中均出菇。在T3處理下SHCHG(J)02菌株岀菇所需時間為66 d，平均每筐產量為2 387 g，生物學轉化率為39.78%；SHCHG(L)07菌株岀菇所需時間為71 d，平均每筐產量為2 123 g，生物學轉化率為35.38%，均優(yōu)于其他2個處理。在T3、T1處理下，SHCHG(J)02菌株平均每筐產量、生物學轉化率均優(yōu)于SHCHG(L)07；T2處理下SHCHG(L)07菌株平均每筐產量、生物學轉化率則優(yōu)于SHCHG(J)02。由此可知，2個菌株在堆腐發(fā)酵的栽培料上栽培均表現為出菇所需時間短、產量高、生物學轉化率高；在未經堆腐發(fā)酵的栽培料上栽培出菇晚、產量低、生物學轉化率低。

3 結論與討論

在食用菌生產中，菌種的作用是首要的，其質量直接影響食用菌產業(yè)的發(fā)展。而菌絲生長特性是衡量菌種質量的重要指標，菌絲生長迅速、長勢強且濃密的食用菌菌種是實際生產中優(yōu)質菌株的表現之一。該試驗采用組織分離法得到的71個菌株，通過比較各菌株菌絲體的菌絲顏色、菌絲濃密度、均勻度、菌絲長勢，優(yōu)選出10個菌株，對10個菌株進行反復優(yōu)選，最終確定SHCHG(S)02和SHCHG(L)07為最佳菌株。SHCHG(S)02和SHCHG(L)07與其他菌株相比菌絲生長最佳，萌發(fā)時間短，菌絲生長濃密且均勻，長勢評分為5分，是具有開發(fā)潛力的沙杵菇優(yōu)良菌株，可作為遺傳改良目標菌株，并進一步觀察鑒定，以培育成產量高、質優(yōu)的沙杵菇菌株。

表3 沙杵菇不同菌株的產量比較Table 3 Comparison of yields of different strains of Coprinus comatus

筆者結合多年試驗結果及該地區(qū)的原料特點，以玉米芯、玉米秸、沙蒿粉、羊糞為主料，這些原料在當地資源豐富，成本低廉，而且非常適合沙杵菇栽培。該試驗以玉米秸30%、玉米芯30%、沙蒿粉10%、羊糞26.2%、石膏粉2.0%、石灰粉1.8%為配方，同種原料設置3個不同的堆腐發(fā)酵處理。結果表明，100%熟料栽培2個沙杵菇菌株生長勢強，生長速度快，菌絲體粗壯且濃白，產量高，岀菇時間短，生物學轉化率高。