余麗麗，王艷波，王 毅

海南省第二人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，海南五指山 572299

胃癌是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，患者早期癥狀不明顯，就診時(shí)往往已處于腫瘤中晚期，治療較為困難，術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)較高，嚴(yán)重威脅著患者的生存預(yù)后。根治性切除術(shù)是目前胃癌的主要治療方法之一，但部分患者手術(shù)療效欠佳，患者術(shù)后復(fù)發(fā)率及轉(zhuǎn)移率較高、5年生存率較低[1]。富含脯氨酸小蛋白2A(SPRR2A)可促進(jìn)細(xì)胞遷移及組織修復(fù)，與多種惡性腫瘤(如膽管細(xì)胞癌[2]、舌鱗狀細(xì)胞癌[3])的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(PECAM-1)是血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物，其表達(dá)升高可促進(jìn)癌細(xì)胞的黏附和浸潤(rùn)，導(dǎo)致癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的上升，繼而影響患者預(yù)后[4]。白細(xì)胞介素-35(IL-35)是固有免疫反應(yīng)中的天然抑制因子，其可促進(jìn)細(xì)胞增殖和腫瘤血管生成，并與腫瘤發(fā)生進(jìn)展有關(guān)。陳飛兒等[5]報(bào)道，結(jié)直腸癌患者血清IL-35水平明顯升高，其與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)。本研究旨在分析血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平在胃癌患者中的變化，并分析其與患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，以期為患者臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年6月至2018年1月在本院行胃癌根治術(shù)的胃癌患者130例作為胃癌組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)病理學(xué)檢測(cè)確診為原發(fā)性胃癌；(2)為首次確診和治療；(3)術(shù)前未接受放療、新輔助化療等抗腫瘤治療；(4)年齡>18歲；(5)簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他臟器惡性腫瘤者；(2)有嚴(yán)重心、肝、腎、肺等功能不全；(3)有嚴(yán)重傳染性疾病或感染性疾病；(4)有自身免疫性疾病及血液系統(tǒng)疾?。?5)臨床隨訪資料不全；(6)妊娠及哺乳期女性；(7)無(wú)法配合本次研究。胃癌組男性80例，女性50例；年齡32～78歲，平均年齡(61.94±8.22)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為20～26 kg/m2，平均BMI(23.75±1.61)kg/m2。同期，另選取本院體檢健康志愿者80例作為對(duì)照組：男性40例，女性40例；年齡35～75歲，平均年齡(60.28±7.16)歲；BMI為20～26 kg/m2，平均BMI(23.49±1.58)kg/m2。兩組間性別、年齡、BMI比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究方案經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2方法

1.2.1血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35檢測(cè) 胃癌組和對(duì)照組分別于入院后12 h內(nèi)及體檢時(shí)空腹抽取靜脈血5 mL，以4 ℃ 3 500 r/min離心10 min，離心半徑15 cm，離心后留取上層血清，置于-80 ℃冰箱保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平，SPRR2A檢測(cè)試劑盒由上海科敏生物科技有限公司提供，PECAM-1檢測(cè)試劑盒由上海酶研生物科技有限公司提供，IL-35檢測(cè)試劑盒由杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司提供，均按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.2隨訪及分組比較 采用門(mén)診復(fù)診或電話等方式對(duì)胃癌術(shù)后患者進(jìn)行隨訪。隨訪時(shí)間為3年，前2年每3個(gè)月隨訪1次，以后每6個(gè)月隨訪1次，隨訪截至2021年1月或患者死亡。根據(jù)患者隨訪期間的生存或死亡，將其分為預(yù)后良好組(n=101)及預(yù)后不良組(n=29)。對(duì)兩組患者年齡、性別、BMI、腫瘤最大徑、TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

2.1胃癌組與對(duì)照組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平比較 胃癌組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平高于對(duì)照組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 胃癌組與對(duì)照組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比較

2.2胃癌患者血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平與臨床病理特征的關(guān)系 胃癌患者的血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平與患者年齡、性別、腫瘤最大徑無(wú)關(guān)(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 胃癌患者血清中SPRR2A、PECAM-1、IL-35表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

2.3不同預(yù)后組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比較 胃癌患者預(yù)后不良組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平與預(yù)后良好組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同預(yù)后組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比較

2.4血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35對(duì)胃癌患者不良預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析顯示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35單獨(dú)及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)用于預(yù)測(cè)胃癌患者不良預(yù)后的曲線下面積(AUC)分別為0.783、0.811、0.819和0.900，見(jiàn)表4、圖1。

圖1 血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35預(yù)測(cè)胃癌患者不良預(yù)后的ROC曲線

表4 血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35對(duì)胃癌患者不良預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

2.5影響胃癌患者臨床預(yù)后的多因素分析 以TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35作為自變量進(jìn)行胃癌預(yù)后影響因素的多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、低分化、合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血清SPRR2A、PECAM-1、IL-3升高是胃癌患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表5。

表5 影響胃癌患者臨床預(yù)后的多因素分析

3 討 論

胃癌是消化道常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其具有惡性程度高、易復(fù)發(fā)、病死率高及預(yù)后差等特點(diǎn)。隨著人們飲食結(jié)構(gòu)改變及人口老齡化，胃癌發(fā)病率逐漸升高，且呈現(xiàn)出年輕化趨勢(shì)，若不能及時(shí)診斷與治療，將嚴(yán)重影響患者的生命安全及生存質(zhì)量。近年來(lái)，胃癌的治療方法取得了很大進(jìn)展，胃癌患者的總體生存率明顯改善，但患者預(yù)后仍不佳，5年生存率僅為20%[6]。因此，尋找準(zhǔn)確評(píng)估胃癌患者臨床預(yù)后生物標(biāo)志物，對(duì)改善患者預(yù)后尤為重要。

SPRR2A是SPRR基因家族中的成員之一，其可通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)激活酪氨酸激酶受體家族成員-表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)和酪氨酸激酶受體2(ErbB2)以及上調(diào)糖蛋白130(gp130)，促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移與侵襲，影響著患者生存預(yù)后[7]。周靜等[8]報(bào)道，肺鱗癌組織中SPRR2A基因的表達(dá)水平明顯上調(diào)，高表達(dá)SPRR2A與肺鱗癌患者的預(yù)后不良有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，胃癌患者血清SPRR2A水平明顯升高，其水平升高與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期有關(guān)[9]。PECAM-1又稱CD31，屬于免疫球蛋白超家族，其在免疫炎癥反應(yīng)、血管生成、細(xì)胞遷移和凋亡等過(guò)程中起重要作用。同時(shí)，PECAM-1還可調(diào)節(jié)與腫瘤生長(zhǎng)和侵襲相關(guān)的腫瘤微環(huán)境，并通過(guò)ITGB1-FAK-Akt信號(hào)通路來(lái)誘導(dǎo)癌細(xì)胞EMT，并調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移。研究表明，PECAM-1水平變化與腫瘤信號(hào)通路的激活有關(guān)，其能夠交錯(cuò)式激活患者體內(nèi)的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，提高癌細(xì)胞DNA的擴(kuò)增速度[4]。有研究證實(shí)，結(jié)直腸癌患者血清PECAM-1水平明顯升高，PECAM-1升高與結(jié)直腸癌的發(fā)病及病情進(jìn)展密切相關(guān)[10]。CAO等[11]報(bào)道，PECAM-1在非小細(xì)胞肺癌的病情進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，PECAM-1是影響非小細(xì)胞肺癌患者生存預(yù)后的重要危險(xiǎn)因素，也是非小細(xì)胞肺癌患者潛在的預(yù)后生物標(biāo)志物。IL-35屬于IL-12家族，是由Treg細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，可抑制T細(xì)胞增殖和分化。在腫瘤微環(huán)境中IL-35的存在可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)減少和免疫活性荷瘤宿主的存活率降低，并促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[12]。研究發(fā)現(xiàn)，高水平的IL-35可顯著促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的遷移、侵襲和增殖，其與前列腺癌小鼠的腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后密切相關(guān)[13-14]。ZHANG等[15]報(bào)道，IL-35表達(dá)與腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)，IL-35高表達(dá)與肺癌患者預(yù)后相關(guān)。

本研究顯示，胃癌組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平升高與胃癌發(fā)生密切相關(guān)。有研究表明，與癌旁正常胃黏膜組織相比，SPRR2A在胃癌組織中的表達(dá)明顯增加，SPRR2A表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖和遷移[7]。LI等[16]報(bào)道，胃癌患者血清PECAM-1水平高于對(duì)照組，抑制PECAM-1表達(dá)可降低腫瘤的活性和侵襲性細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)，抑制腫瘤的發(fā)展。隨著患者TNM分期進(jìn)展、病理分化程度降低和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平逐漸升高，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平可能與胃癌患者病情進(jìn)展有關(guān)，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平越低可能預(yù)示腫瘤較高的TNM分期、組織低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。分析原因：SPRR2A過(guò)表達(dá)促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖及癌組織周?chē)鶨MT形成，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移；PECAM-1的激活也可降解細(xì)胞外及血管基膜，產(chǎn)生大量生長(zhǎng)因子及基質(zhì)水介酶，促進(jìn)腫瘤微血管形成，導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)增加；IL-35高表達(dá)可進(jìn)一步影響腫瘤免疫微環(huán)境免疫應(yīng)答，抑制CD8+T細(xì)胞功能，導(dǎo)致癌細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視，促使腫瘤微血管形成及EMT[13]，從而加重患者病情。而腫瘤來(lái)源的IL-35可增加腫瘤微環(huán)境中CD11b+Gr1+在骨髓細(xì)胞的積累并促進(jìn)腫瘤血管生成，參與腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致患者預(yù)后不良。研究表明，血清IL-35是胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，高血清IL-35水平與胃癌患者的預(yù)后不良有關(guān)[17]。本研究還發(fā)現(xiàn)，胃癌患者預(yù)后不良組血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明顯高于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平與胃癌患者預(yù)后狀況有一定聯(lián)系，與既往報(bào)道[16-17]相似。研究發(fā)現(xiàn)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較高的TNM分期是影響胃癌患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素[18]，與本文報(bào)道一致。多因素Logisitc回歸分析顯示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35升高是胃癌患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35高水平與胃癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。ROC曲線分析顯示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35單獨(dú)及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)用于預(yù)測(cè)胃癌患者不良預(yù)后的AUC均大于0.7，其中3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的預(yù)測(cè)效能最好，說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35對(duì)胃癌患者的不良預(yù)后有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值，進(jìn)而有助于臨床盡早采取有效干預(yù)措施，以提高患者生存率。

綜上所述，胃癌患者血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明顯升高，并與患者腫瘤的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征及預(yù)后有關(guān)，3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)判斷胃癌患者的預(yù)后情況有較高價(jià)值。