胡昌明

遼寧省營口市鲅魚圈區(qū)農業(yè)農村綜合發(fā)展中心，遼寧營口 115007

高致病性禽流感（HPAI）是禽類感染甲型流感病毒后引發(fā)的一種急性接觸性傳染病，屬于我國一類動物疫病，由于該病原體可感染人類且具有持續(xù)的人傳人侵害力，對人畜健康和社會公共衛(wèi)生安全造成巨大威脅。HPAI 主要通過和傳染源密切接觸（養(yǎng)殖、拔毛、宰殺、肉食品加工）感染，病禽發(fā)熱、咳嗽，消化、呼吸和神經系統(tǒng)出現(xiàn)異常，高致病性毒株侵害的禽類死亡率高，且病程短，無典型癥狀，不利于高致病性禽流感的診斷和治療[1]。疫苗免疫是當前HPAI 防治的主要手段，我國自2017年開始，從家禽免疫H5 亞型禽流感基礎上補充了H7N9 免疫，并要求各地動物疫病預防機構及時開展免疫效果監(jiān)測評價，對免疫抗體不達標、免疫副反應或接種失敗的情況進行補免。因此，對HPAI 免疫抗體監(jiān)測及免疫效果進行研究具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材 料

1）試驗動物。8 個養(yǎng)雞場（存欄量大于5 000只），20 個散養(yǎng)戶全部雞只。

2）試驗試劑。雞紅細胞懸液，PBS（pH=7.2，0.01 mol/L），阿氏（Alsevers）液（pH=6.1），高致病性禽流感病毒血凝素抗原、陰性血清、標準分型血清。

3）試驗儀器。96 孔V 型板，無菌離心管、微量振蕩器、板式離心機、微量移液器（含滴頭）。

1.2 采 樣

對試驗動物所在的養(yǎng)雞場進行采樣，每只試驗雞只以“翅靜脈采血”方式采集血液樣本，同時做好試驗動物的日齡、品種、接種疫苗、免疫時間、接種次數(shù)等記錄。每個養(yǎng)雞場采集樣本100 份（抽檢），養(yǎng)雞場的樣本采集數(shù)共2 800 份，散養(yǎng)戶共采集1 456 份（全部采集），每個樣本量為1.5～2.0 mL。

1.3 檢測方法

檢測方法為血凝抑制（HI）試驗，具體操作方法參照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2003），血清和反應液加完后置于4 ℃反應40 min，觀察紅細胞血凝狀態(tài)。當陰性反應＜3log2 且陽性孔見誤差＜1 個滴度結果才具有可讀性。

1.4 結果判定

試驗雞只血清的血凝抑制滴度≥24（1∶16）為高致病性禽流感疫苗免疫合格。

2 結果與分析

2.1 不同飼養(yǎng)方式HPAI 免疫抗體效果

通過對8 個存欄量＞5 000 只的養(yǎng)雞場及該區(qū)20 個散養(yǎng)戶全部雞只HPAI 免疫抗體進行檢測，結果發(fā)現(xiàn)，規(guī)模養(yǎng)雞場共檢測800 份樣本，合格數(shù)為759 份，而散養(yǎng)戶共檢測145 份樣本，合格數(shù)為106份，規(guī)模養(yǎng)雞場的HPAI 免疫合格率明顯高于散養(yǎng)戶（表1）。

表1 不同飼養(yǎng)方式HPAI 免疫抗體合格情況

2.2 不同類型養(yǎng)殖場HPAI 免疫抗體效果

試驗選擇的8 個養(yǎng)殖場中，6 個為蛋雞場，2 個為肉雞場。由表2可知，蛋雞場共檢測600 份樣本，合格數(shù)為578 份，而肉雞場共檢測200 份樣本，合格數(shù)為181 份，蛋雞場的HPAI 免疫效果優(yōu)于肉雞場。

3 討 論

3.1 群體HPAI 免疫抗體合格情況

根據(jù)本研究調查結果發(fā)現(xiàn)，營口市鲅魚圈區(qū)高致病性禽流感免疫效果較好，無論是規(guī)模化養(yǎng)殖場還是散養(yǎng)戶，群體HPAI 免疫抗體平均合格率為91.53%，超過農業(yè)農村部規(guī)定的群體免疫抗體合格率達到70%（家禽H7 抗體滴度≥24）標準，表明養(yǎng)殖場和養(yǎng)殖戶對高致病性禽流感具有一定的防疫意識，高致病性禽流感防疫推廣和普及工作具有一定成效，今后仍需進一步加強高致病性禽流感防控工作，確保養(yǎng)禽業(yè)生產安全。

3.2 飼養(yǎng)模式對HPAI 免疫效果的影響

根據(jù)本研究調查結果發(fā)現(xiàn)，規(guī)模養(yǎng)雞場的HPAI 免疫合格率為94.88%，而散養(yǎng)戶的HPAI 免疫合格率為73.10%。由于規(guī)模化養(yǎng)雞場數(shù)量較大，本試驗以抽檢方式進行隨機檢測，而對散養(yǎng)戶采用的是全部檢測方式，不同養(yǎng)殖方式HPAI 免疫合格率相差21.78%，表明散養(yǎng)戶在高致病性禽流感疫苗接種防疫中仍有不足之處，免疫不合格的原因有很多，疫苗選擇的合理性，HPAI 疫苗必須采用國家認可且正規(guī)生產經營疫苗，如重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗。疫苗選擇還需要根據(jù)當?shù)厍萘鞲辛餍胁W情況選擇合適的病毒抗原，接種方式對疫苗免疫效果也有較大影響，禽類膽子小，接種時容易出現(xiàn)應激刺激，因此接種時嚴禁粗暴捕捉，工作人員也勿大聲喧嘩，驚嚇到禽類，且接種前后要做好消毒工作，這樣可以提高HPAI 免疫合格率[2]。由于許多養(yǎng)殖戶為了節(jié)省時間，會選擇飲水免疫方式，這種方式的免疫效果無法切實保障，因此獲得HPAI 免疫合格率較低，建議采用肌肉或皮下注射方式，且根據(jù)不同日齡合理用量，如重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗以肌肉注射，14～35日齡雛雞接種0.3 mL，35日齡以上雞只接種0.5 mL。

3.3 養(yǎng)殖類型對HPAI 免疫效果的影響

本研究調查結果顯示，規(guī)模蛋雞場的HPAI 免疫合格率為96.33%，而肉雞場的HPAI 免疫合格率為90.50%，肉雞場HPAI 免疫合格率低于蛋雞場，表明不同的養(yǎng)殖類型對高致病性禽流感免疫具有一定影響，這主要是和肉雞飼養(yǎng)周期短，部分養(yǎng)殖場缺乏二次免疫，而二次免疫可以顯著增強HPAI免疫效果[3]。同時，肉雞首次免疫時間較早，此時雞只體內的免疫應答反應不良，且肉雞出生后開始免疫的疫苗較多，不同疫苗間的影響較大，因此要合理控制HPAI 首次免疫時間，一般首免在14日齡左右最佳。