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        “蛋白質(zhì)變性”生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐研究

        2022-07-12 02:50:00張芳萍
        現(xiàn)代鹽化工 2022年3期
        關(guān)鍵詞:變性試管蛋白質(zhì)

        張芳萍

        (寶雞市陳倉(cāng)高級(jí)中學(xué),陜西 寶雞 721300)

        蛋白質(zhì)是高中生物課程的重要內(nèi)容,也是高中生物教學(xué)的難點(diǎn)。蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)是學(xué)生初步建立結(jié)構(gòu)與功能觀(guān)的重要工具。通過(guò)分析近年的新高考試卷不難發(fā)現(xiàn),“蛋白質(zhì)”相關(guān)知識(shí)的分值比例越來(lái)越高,同時(shí)也是學(xué)生容易丟分的內(nèi)容。原因主要是學(xué)生對(duì)蛋白質(zhì)的形成過(guò)程等缺乏直接的感性認(rèn)識(shí),未能充分掌握蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)成分?!暗鞍踪|(zhì)變性”是歷年高考的重點(diǎn),因此,筆者結(jié)合多年工作經(jīng)驗(yàn),詳細(xì)闡述“蛋白質(zhì)變性”生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方案。

        1 蛋白質(zhì)的變性原理

        蛋白質(zhì)是由多種氨基酸通過(guò)肽鍵構(gòu)成的高分子化合物。蛋白質(zhì)變性就是蛋白質(zhì)受物理或者化學(xué)因素影響,改變分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的作用。蛋白質(zhì)變性的結(jié)果就是改變蛋白質(zhì)的理化性質(zhì),導(dǎo)致其喪失生物活性。例如蛋白質(zhì)變性后,其分子結(jié)構(gòu)較為松散,不易形成結(jié)晶,容易被蛋白酶水解。如果蛋白質(zhì)變性后,空間構(gòu)象遭到嚴(yán)重破壞且不可復(fù)原,則被稱(chēng)為不可逆變性。如果變性程度較輕,去除變性因素后可以恢復(fù)原有的構(gòu)象和活性,則被稱(chēng)為復(fù)性。例如離子濃度和pH可以使蛋白質(zhì)變性,但是通過(guò)糾正離子濃度和pH可以使蛋白質(zhì)復(fù)性。人們?cè)谏钪惺褂玫木凭褪抢闷鋵?duì)細(xì)菌蛋白質(zhì)的變性作用。又如生活中常見(jiàn)的煮雞蛋就是利用高溫快速變性微生物蛋白質(zhì),使病原微生物滅活。實(shí)踐調(diào)查發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的因素較多:(1)化學(xué)因素,主要是強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子以及某些弱酸等化學(xué)成分。(2)物理因素。劇烈振蕩或攪拌、超聲波、強(qiáng)磁、紫外線(xiàn)照射及X射線(xiàn)等都是造成蛋白質(zhì)變性的物理因素[1]。

        2 “蛋白質(zhì)變性”生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)的設(shè)計(jì)

        高中生物課程在新高考體系中占據(jù)重要地位,是理科專(zhuān)業(yè)的必選課程之一。根據(jù)新課標(biāo)要求,“分子與細(xì)胞”模塊內(nèi)容的價(jià)值就是讓學(xué)生深入了解生命的物質(zhì)基礎(chǔ)與結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),理解生命活動(dòng)中物質(zhì)的變化。蛋白質(zhì)變性是物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的最高形式,由于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次比較復(fù)雜,容易受外界環(huán)境變化的影響而發(fā)生改變,為了加深學(xué)生對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)知識(shí)的認(rèn)知,教師要開(kāi)展“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)教學(xué),讓學(xué)生掌握蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的相關(guān)知識(shí)。

        通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)成分的研究可知,蛋白質(zhì)分子主要由肽鏈組成,肽鏈呈現(xiàn)規(guī)則而緊密排列的結(jié)構(gòu)形式[2]。如果蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,變性的蛋白質(zhì)分子就會(huì)聚集,導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。由于導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的因素比較多,教師選擇學(xué)生在日常生活中常見(jiàn)的因素作為“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)的誘導(dǎo)因素。

        2.1 不同溫度對(duì)蛋白質(zhì)性質(zhì)的影響

        蛋白質(zhì)受溫度的影響比較大,因此,教師以生活中常見(jiàn)的燙發(fā)為例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。根據(jù)生物分析,人類(lèi)頭發(fā)的主要成分是角蛋白,其結(jié)構(gòu)中含有連接肽鏈的硫鍵,利用高溫可以使硫鍵出現(xiàn)斷裂而改變其結(jié)構(gòu)形式,造成頭發(fā)變性。在科學(xué)界,關(guān)于燙發(fā)是否屬于蛋白質(zhì)變性還存在爭(zhēng)議。為了保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)的嚴(yán)謹(jǐn)性,讓學(xué)生掌握不同溫度對(duì)蛋白質(zhì)的影響,以生活中常見(jiàn)的雞蛋為例實(shí)施以下實(shí)驗(yàn)。

        (1)實(shí)驗(yàn)原理。研究表明,不同溫度對(duì)蛋白質(zhì)的影響不同。雞蛋的主要成分是蛋白,根據(jù)生活常理,雞蛋蛋白液在75 ℃以上會(huì)凝固,原理就是雞蛋蛋白質(zhì)的肽鏈?zhǔn)軣嵩斐蓺滏I斷裂。

        (2)實(shí)驗(yàn)步驟。首先,教師要為學(xué)生提供必要的實(shí)驗(yàn)材料。準(zhǔn)備一個(gè)生雞蛋、1個(gè)碗、1個(gè)恒溫水浴鍋、4個(gè)20 mL試管以及刻度吸液管等。其次,學(xué)生按照教師的要求分別在4個(gè)20 mL試管中做出標(biāo)號(hào),分別標(biāo)記為①、②、③、④。再次,學(xué)生將生雞蛋打破,將蛋黃和蛋清分離(利用刻度吸液管吸取蛋白液),將吸取的蛋白液分別注入等量蛋白液中[3]。最后,以不同溫度對(duì)試管進(jìn)行加溫處理,觀(guān)察不同溫度下試管蛋白液的狀態(tài)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。為了保證實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)謹(jǐn)性,在對(duì)試管蛋白液進(jìn)行加溫時(shí),需要在60~80 ℃依次遞增。從表1可以清晰地看出,蛋白液在不同的溫度作用下會(huì)出現(xiàn)不同的狀態(tài),例如在60 ℃以下時(shí)蛋白液未出現(xiàn)明顯的凝固現(xiàn)象,表明其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)沒(méi)有發(fā)生不可逆變性。當(dāng)溫度上升到75 ℃以上時(shí),蛋白液發(fā)生了凝固,表明蛋白質(zhì)發(fā)生了變化。可見(jiàn),蛋白質(zhì)變性受溫度的影響,尤其是溫度達(dá)到75 ℃時(shí),蛋白質(zhì)變性現(xiàn)象更加突出。

        表1 不同溫度影響蛋白液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        2.2 重金屬對(duì)蛋白質(zhì)性質(zhì)的影響

        實(shí)踐證明,蛋白質(zhì)分子在堿性溶液中帶負(fù)電荷,可與重金屬離子(Zn2+、Cu2+、Hg2+、Pe2+等)作用,結(jié)合成不溶性鹽而沉淀。例如在民間如果出現(xiàn)鉛中毒,人們經(jīng)常會(huì)讓中毒者飲用蛋清液,主要原理就是蛋白質(zhì)與重金屬離子結(jié)合產(chǎn)生鹽,導(dǎo)致中毒者嘔吐,從而幫助解毒。

        (1)實(shí)驗(yàn)材料與試劑。本實(shí)驗(yàn)主要使用水、蛋清、牛奶、4個(gè)試管、大燒杯以及0.1 mol/L硝酸鉛溶液等物品。

        (2)實(shí)驗(yàn)方法與步驟。首先,學(xué)生利用記號(hào)筆分別在4個(gè)試管中標(biāo)記①、②、③、④。其次,學(xué)生將等量的水、蛋清、牛奶以及豆?jié){分別倒入①、②、③、④試管中,加入濃度為0.1 mol/L的硝酸鉛溶液0.5 mL,將其充分搖晃后,保證硝酸鉛溶液與試管內(nèi)的原料完全融合。最后,學(xué)生要觀(guān)察試管內(nèi)是否出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,如果出現(xiàn)沉淀,說(shuō)明蛋白質(zhì)與重金屬發(fā)生了反應(yīng)。具體結(jié)果見(jiàn)表2。通過(guò)表2可知,編號(hào)③的試管中出現(xiàn)大量沉淀物,表明牛奶中的蛋白質(zhì)在硝酸鉛溶液的作用下發(fā)生了變質(zhì),而豆?jié){中的蛋白質(zhì)也在硝酸鉛溶液的作用下發(fā)生了變質(zhì)。導(dǎo)致沉淀物量不同的原因就是牛奶中的蛋白質(zhì)含量高于豆?jié){以及蛋清。

        表2 不同試管的反應(yīng)情況

        2.3 酸性物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)性質(zhì)的影響

        酸性物質(zhì)會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生影響,例如蛋白質(zhì)在酸性溶液中會(huì)帶正電荷,進(jìn)而與帶負(fù)電荷的酸根相結(jié)合,形成鹽類(lèi)沉淀物。為了讓學(xué)生清晰地了解酸性物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)變性的具體影響,進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)操作。

        (1)實(shí)驗(yàn)材料。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備蛋清液、不同濃度的醋酸溶液、4支試管、試管架、膠頭滴管等物品。

        (2)實(shí)驗(yàn)方法與步驟。步驟同2.1、2.2實(shí)驗(yàn)基本相同。首先,學(xué)生利用記號(hào)筆在4支試管中標(biāo)號(hào)(①、②、③、④)。其次,學(xué)生在不同的試管中注入等量蛋清液(2.0 mL)。再次,學(xué)生分別在試管中加入0.5 mL不同濃度的醋酸溶液(表3)。最后,學(xué)生觀(guān)察不同試管中的現(xiàn)象并且做好相關(guān)記錄[4]。

        表3 酸性物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)性質(zhì)影響的實(shí)驗(yàn)

        3 “蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)操作的注意事項(xiàng)

        在“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中,需要注意以下事項(xiàng)。

        3.1 做好實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作,讓學(xué)生熟悉實(shí)驗(yàn)室管理制度

        由于“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)教學(xué)需要借助大量的實(shí)驗(yàn)器材及設(shè)備,在“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)操作中,教師要做好各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。一是要提前為學(xué)生提供必要的實(shí)驗(yàn)器材。例如教師需要在課前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)操作要用的酸性物質(zhì),有效提升課堂的教學(xué)效率。同時(shí),為了激發(fā)學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)操作的積極性,教師可以有目的地讓學(xué)生按照本節(jié)課實(shí)驗(yàn)教學(xué)的要求準(zhǔn)備自己認(rèn)為有用的實(shí)驗(yàn)材料,加深學(xué)生對(duì)“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)的認(rèn)知。例如在操作實(shí)驗(yàn)2時(shí),教師可以讓學(xué)生自己準(zhǔn)備蛋白質(zhì)含量不同的物品,讓學(xué)生在尋找含蛋白質(zhì)物品時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)知識(shí)進(jìn)行回顧與復(fù)習(xí)。二是加強(qiáng)學(xué)生管理工作,讓學(xué)生提前熟悉實(shí)驗(yàn)室的安全管理制度?!暗鞍踪|(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)需要在特定的實(shí)驗(yàn)教室內(nèi)進(jìn)行操作,為了保證實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)器材的安全使用,避免出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)事故,教師在學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前要求學(xué)生認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,并且熟悉實(shí)驗(yàn)室管理制度;在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要遵守記錄,保證實(shí)驗(yàn)室安靜,不得大聲喧嘩。

        3.2 教師加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),鼓勵(lì)學(xué)生自主探索

        在“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中,教師必須改變以往的教學(xué)模式,將實(shí)驗(yàn)操作的主動(dòng)權(quán)歸還學(xué)生,讓學(xué)生自主完成實(shí)驗(yàn)操作,一是教師要有的放矢,給予學(xué)生一定的自主權(quán),讓學(xué)生按照自己的思維、知識(shí)水平獨(dú)立操作。長(zhǎng)期以來(lái),在高中生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在學(xué)生按照教師實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作的現(xiàn)象,學(xué)生在整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作中完全處于被動(dòng)地位,違背實(shí)驗(yàn)教學(xué)的本質(zhì)目的。因此,在生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,教師要改變傳統(tǒng)的授課模式,讓學(xué)生獨(dú)立操作。當(dāng)然,教師“放權(quán)”并不是完全放任不管,而是要深入學(xué)生群體,根據(jù)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的具體步驟,提供有效的指導(dǎo)。根據(jù)學(xué)生的不同問(wèn)題進(jìn)行有針對(duì)性的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),可以有效提升實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量,調(diào)動(dòng)學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)操作的積極性[5]。二是教師要做好總結(jié)工作,及時(shí)將實(shí)驗(yàn)操作發(fā)布到作業(yè)群,讓學(xué)生進(jìn)行探討。教師也可以將學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作得出的結(jié)論發(fā)到班級(jí)群中,讓學(xué)生利用課外時(shí)間分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否合理,發(fā)表自己的看法。通過(guò)相互討論的方式,可以加深學(xué)生對(duì)“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)的認(rèn)知,從而將理論知識(shí)轉(zhuǎn)化為實(shí)踐應(yīng)用能力。

        3.3 規(guī)范學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作行為,保護(hù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)器材

        “蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)操作需要學(xué)生獨(dú)立完成,而在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要使用大量實(shí)驗(yàn)器材,例如恒溫水浴鍋、各類(lèi)酸性物質(zhì)等,如果使用不當(dāng),就會(huì)發(fā)生安全事故。例如學(xué)生在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中由于行為不規(guī)范碰掉恒溫水浴鍋,將里面的熱水灑到自己或者他人身上,造成燙傷。因此,在實(shí)驗(yàn)操作中,一方面教師要加強(qiáng)對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)行為規(guī)范的管理。對(duì)不規(guī)范的行為要及時(shí)制止,全面做好學(xué)生的安全管理工作;另一方面,學(xué)生要從自身做起,嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范要求進(jìn)行操作,在使用各類(lèi)實(shí)驗(yàn)器材時(shí)輕拿輕放、安全有序,有效保護(hù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)器材的安全。例如學(xué)生在完成實(shí)驗(yàn)操作后要及時(shí)清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)衛(wèi)生,保證實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、藥品架、水池清潔整齊,各類(lèi)實(shí)驗(yàn)試劑按照實(shí)驗(yàn)要求規(guī)格使用,多余的試劑及材料要按照教師的要求進(jìn)行回收,防止隨意丟棄污染環(huán)境。

        3.4 做好實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄,及時(shí)轉(zhuǎn)化為自身知識(shí)

        在“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,教師要及時(shí)指導(dǎo)學(xué)生做好相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄工作,學(xué)生通過(guò)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不僅能對(duì)所學(xué)知識(shí)加深記憶,還可以及時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否準(zhǔn)確與他人進(jìn)行對(duì)比。因此,學(xué)生要及時(shí)做好實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄工作。由于“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)內(nèi)容豐富,在規(guī)定時(shí)間內(nèi),學(xué)生不能參與全部活動(dòng),通常建議每小組在研究性活動(dòng)時(shí)間內(nèi)選擇2項(xiàng)探究性實(shí)驗(yàn)和1項(xiàng)實(shí)踐活動(dòng),有興趣的學(xué)生可利用課余時(shí)間繼續(xù)實(shí)驗(yàn)[6]。

        4 結(jié)語(yǔ)

        “蛋白質(zhì)”是高中生物教學(xué)的重點(diǎn)與難點(diǎn),生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)是提高學(xué)生知識(shí)水平的重要途徑?;诤诵乃仞B(yǎng)教育的深入實(shí)施,為了提升學(xué)生的認(rèn)知能力,增強(qiáng)學(xué)生運(yùn)用所學(xué)理論知識(shí)解決生活實(shí)際問(wèn)題的能力,教師要積極開(kāi)展“蛋白質(zhì)變性”實(shí)驗(yàn)教學(xué),讓學(xué)生更加直觀(guān)地了解蛋白質(zhì)變性的機(jī)理,獲悉影響蛋白質(zhì)變性的具體因素,促進(jìn)學(xué)生的全面發(fā)展。

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