辛文虎，潘惠娟，王 芳

（蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030）

宮頸癌是目前全球女性常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率排名第四，而我國(guó)每年有新增病例13.2萬人，約占全球?qū)m頸癌新發(fā)病例的24.91%，嚴(yán)重威脅著女性的生理和心理健康[1]，且近幾年發(fā)病率逐漸升高，感染年齡呈年輕化趨勢(shì)。有研究表明，高危型人乳頭瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）持續(xù)感染是引起宮頸癌及癌前病變發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素，約99.8%的宮頸癌患者都可檢測(cè)到高危型HPV持續(xù)感染[1-2]。HPV是一類具有高度宿主異質(zhì)性的嗜上皮小分子DNA病毒，可促進(jìn)人體皮膚及黏膜的異常增生，導(dǎo)致多種腫瘤的發(fā)生，以性接觸傳播為主要傳播方式，人群普遍易感。至今已分離出的HPV亞型有130余種，依據(jù)其致病潛力可以分為高危型（HR）和低危型（LR）兩類，高危型主要包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58和HPV59等，低危型主要包括HPV6、HPV11、HPV42和HPV43等。HPV流行學(xué)分布特點(diǎn)和感染型別均受地理區(qū)域、年齡和性生活狀態(tài)等多因素影響［3-4］。盡管我國(guó)目前已將HPV篩查作為宮頸癌篩查的重要組成項(xiàng)目進(jìn)行全面推廣，但如何有針對(duì)性地進(jìn)行HPV分型檢測(cè)及HPV疫苗接種，將為宮頸癌高效預(yù)防和精準(zhǔn)診療提供重要理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料

選取2018年5月—2020年8月，在蘭州大學(xué)第二醫(yī)院婦科門診和健康體檢中心，接受HPV分型檢測(cè)的21 402例女性相關(guān)資料及檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行研究，年齡范圍17～68歲，平均年齡為（37.13±9.78）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：非孕期、非經(jīng)期、檢查前24 h內(nèi)無性行為、72 h內(nèi)無陰道給藥或沖洗、半年內(nèi)未進(jìn)行宮頸相關(guān)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：急性生殖道感染、陰道不規(guī)則出血、子宮切除術(shù)后、盆腔放療患者。

1.2 標(biāo)本采集

由蘭州大學(xué)第二醫(yī)院婦科門診及健康體檢中心醫(yī)師負(fù)責(zé)采集宮頸脫落細(xì)胞。充分暴露宮頸后使用一次性宮頸脫落細(xì)胞采集刷，以宮頸外口為中心，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5～6圈后停留10 s，將宮頸刷取出放入裝有專用細(xì)胞保存液的取樣管中，分別標(biāo)記并登記患者信息。采集樣本置4℃冰箱內(nèi)保存，24 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.3 HPV檢測(cè)方法

采用PCR-反向點(diǎn)雜交法，使用人乳頭瘤病毒基因分型檢測(cè)試劑盒（廣州達(dá)安基因生物有限公司提供）進(jìn)行23種HPV亞型的分型檢測(cè)，包括17種高危亞型（HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV82）和6種低危亞 型（HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81）。根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作，流程如下：①HPV DNA提?。虎赑CR擴(kuò)增；③雜交；④洗膜；⑤顯色；⑥結(jié)果判斷。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。不同組別間計(jì)數(shù)資料以“率”表示，采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV總體感染情況和各亞型分布及檢出情況

21 402例標(biāo)本中有4 509例HPV陽性，感染率為21.07%，其中17.05%為高危型感染（3 649例，感染高危亞型中任意一種即為高危型感染），4.02%為低危亞型感染（860例，感染型別均為低危亞型）。HPV高危亞型感染率排名前5位依次是：HPV52（3.64%）、HPV16（3.28%）、HPV51（2.86%）、HPV58（2.77%）、HPV18（2.44%），低危亞型主要以HPV6（2.33%）、HPV11（1.13%）為主，見表1。

表1 HPV23種基因亞型分布與感染情況（n=4 509）

2.2 HPV各亞型混合感染情況

在4 509例HPV感染標(biāo)本中，以單一型別感染為主，感染3 066例，感染率14.33%，陽性構(gòu)成比68.00%；雙重感染1 042例，感染率為4.87%，陽性構(gòu)成比為23.11%；HPV三重及以上感染401例，感染率為1.87%，陽性構(gòu)成比為8.89%，見表2。

表2 4 509例HPV標(biāo)本中混合感染情況

2.3 HPV感染病例年齡分布情況

將4 509例標(biāo)本按患者年齡分為6組，對(duì)每個(gè)年齡段的HPV感染率進(jìn)行分析，結(jié)果顯示感染者年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.82，P＜0.01），≤20歲組HPV感染率最高，為33.00%；其次為＞60歲組，感染率為30.80%；41～50歲組感染率最低，為16.01%，見表3。

表3 HPV感染不同年齡分布情況

3 討論

宮頸癌與其他惡性腫瘤相比，病因相對(duì)明確，高危型HPV病毒持續(xù)感染是其主要致病因素，因此對(duì)HPV病毒基因型進(jìn)行針對(duì)性的預(yù)防和早期檢測(cè)，能夠顯著降低宮頸癌的發(fā)病率和病死率，對(duì)宮頸癌的有效防治具有重大意義。同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)在相關(guān)研究中檢測(cè)HPV感染分型所采用的實(shí)驗(yàn)室方法相同，HPV感染率的差異可能主要與地域差異有關(guān)，還可能與不同研究所收集的資料年限相關(guān)。如有研究顯示，全球范圍內(nèi)HPV高危型陽性率最高的前兩位分別為HPV16、HPV18，占宮頸癌患者中HPV感染亞型的71%[5]，而本研究中感染率排列前5位的HPV亞型分別為HPV52、HPV16、HPV51、HPV58和HPV18，該結(jié)論與全世界范圍內(nèi)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果不相一致，這些研究結(jié)果均提示不同地理環(huán)境和社會(huì)區(qū)域中主要致病HPV基因亞型陽性率存在一定的差異。從HPV感染亞型的類型構(gòu)成情況來看，單一高危型HPV感染率顯著高于雙重感染、三重及以上的感染率，表明高危型HPV感染類型以單一型別感染為主，這與其他地區(qū)HPV感染類型情況基本一致。而與單一HPV亞型感染相比，HPV多重感染是否會(huì)更易促進(jìn)宮頸病變的發(fā)生和發(fā)展，目前還存在較大的爭(zhēng)議。有學(xué)者認(rèn)為HPV多重感染更易造成機(jī)體HPV持續(xù)感染，對(duì)宮頸病變及宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展起到促進(jìn)作用，也有研究指出發(fā)生HPV多重感染的患者與單一型別感染者相比，宮頸CIN及宮頸癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)不會(huì)明顯增加［6］，但目前還缺少系統(tǒng)性研究，有待通過進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行系統(tǒng)隨訪研究來證實(shí)感染類型與宮頸病變的關(guān)系。

HPV病毒感染傳播方式多樣，性接觸傳播為其最主要的傳播途徑，HPV病毒感染的危險(xiǎn)因素包括多個(gè)性伴侶、第一次性生活年齡、口服避孕藥、吸煙、免疫抑制劑使用、首次分娩年齡及分娩次數(shù)等，而年齡是重要的危險(xiǎn)因素之一[7]，有研究表明絕經(jīng)期前后（50～55歲）是宮頸病變尤其是宮頸癌發(fā)病率最高的年齡階段[8]。而本研究中≤20歲和＞60歲年齡組感染率明顯高于其他組，這與劉寧等[9]對(duì)北京部分地區(qū)HPV患者感染情況分析結(jié)果相一致。分析其原因，20歲以下的人群高發(fā)主要與機(jī)體對(duì)HPV抵抗力弱、過早性交或多個(gè)性伴侶有關(guān)，60歲以上人群由于隨著卵巢功能下降直至衰竭，體內(nèi)激素水平發(fā)生明顯變化，免疫力下降，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)病毒的清除能力降低，HPV持續(xù)感染率隨之增加[10]。因此,應(yīng)加大對(duì)青少年女性的性教育及健康科普宣傳，同時(shí),應(yīng)加強(qiáng)青年女性及絕經(jīng)后女性HPV的普查力度，適當(dāng)縮短此年齡段HPV感染患者的隨訪復(fù)查周期，及時(shí)發(fā)現(xiàn)、正確處理、嚴(yán)密隨訪HPV感染者，旨在早發(fā)現(xiàn)、早治療與HPV感染關(guān)系密切的宮頸疾病[11]。

綜上所述，本研究回顧性分析了蘭州大學(xué)第二醫(yī)院婦科門診及健康體檢中心21 402例女性年齡、民族、HPV檢測(cè)結(jié)果等資料，初步總結(jié)出甘肅省部分地區(qū)女性HPV感染率、感染亞型、感染類別和年齡的分布特點(diǎn)，為本區(qū)域HPV感染的預(yù)防和監(jiān)測(cè)提供了可靠依據(jù)，對(duì)預(yù)防宮頸癌的發(fā)生具有重要意義。