鄭燕深，董 忠 (1.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院泌尿外科，廣東 汕頭 515041；2.惠州市中心人民醫(yī)院泌尿外科，廣東 惠州 516001)

前列腺癌是臨床最為常見的惡性腫瘤之一，在男性惡性腫瘤中發(fā)病率僅次于肺癌，具有較高的致死率，已引起全世界的廣泛關(guān)注[1]。近年來，隨著男性生活、飲食、工作等因素的變化，再加上老齡化趨勢的加劇，前列腺癌的發(fā)病率逐年上升，已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了男性的健康乃至生命安全[2]。目前，臨床對于前列腺的治療主要是手術(shù)治療，輔助相應(yīng)放化療，但是仍有大約5%的患者診斷時存在轉(zhuǎn)移性病變，導(dǎo)致效果不是非常理想[3]。因此，尋找一種新的診斷標(biāo)志物對臨床治療效果的提升至關(guān)重要。微小RNA-92a(miR-92a)是內(nèi)源性小分子單鏈RNA之一，與肝癌、肺癌、胃癌等惡性腫瘤密切相關(guān)，呈現(xiàn)出高表達的現(xiàn)象[4]，但與前列腺癌的關(guān)系，并且在前列腺癌中的表達尚未清楚。為此，本研究納入我院收集到的60例前列腺癌標(biāo)本，針對miR-92a的表達及其臨床意義展開分析。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2014年1月～2021年6月在我院泌尿外科接受治療的前列腺癌患者60例進行研究，并選取相應(yīng)的癌旁組織作為對照，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。全部患者中，年齡45～78歲，平均(62.31±2.45)歲；病程2～6年，平均(3.25±0.32)年；臨床分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期26例，Ⅲ期12例，Ⅳ期7例。收集所有患者的其他資料，如特異抗原、Gleason評分、骨轉(zhuǎn)移情況等。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合前列腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②均病理結(jié)果證實，首次發(fā)病，初次接受治療；③術(shù)前未接受放化療，未接受雄激素剝奪治療；④臨床各項資料完整、齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他類型的惡性腫瘤；②術(shù)前已實施放化療；③依從性較差，不配合研究者；④身體狀態(tài)較差，預(yù)計生存期無法完成本次調(diào)查。

1.2研究方法：采用免疫組化學(xué)檢測miR-92a表達水平：取前列腺癌組織、癌旁組織病理石蠟塊切片，厚度3 μm左右。對采集到的切片進行處理，如烤片、脫臘、脫水等，隨后進行抗原修復(fù)。完成上述操作后，滴入過氧化氫(H2O2)阻斷內(nèi)源性過氧化氫酶活性，分別將兔多克隆mi R-802、RAB23抗體(購自美國Santa Cruz公司)加入其中，調(diào)節(jié)好稀釋比為1∶100，溫度為4℃留置一夜。將辣根過氧化酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗兔二抗(購自賽默飛世爾中國公司)加入其中，室溫下留置30 min，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，乙醇脫水，二甲苯透明，封片。

1.3結(jié)果判定：針對檢測結(jié)果的判定[6]，采用雙盲法進行。隨機選取5個高倍視野(×400)，對陽性染色細(xì)胞的數(shù)量、占比等予以明確。①染色強度：0分:無色，1分:淡黃色，2分:棕黃色，3分:棕褐色。②陽性細(xì)胞計數(shù)百分率：0分:≤5%，1分:5%～25%；2分:25%～50%，3分:≥50%。(3)組織學(xué)評分計算公式：染色強度×陽性細(xì)胞計數(shù)百分率，陰性表達說明0～1分，陽性表達說明≥2分。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS18.0軟件處理，計數(shù)資料行χ2檢驗，計量資料行t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1不同細(xì)胞組織miR-92a表達水平的比較:前列腺癌組織中，miR-92a的表達水平為(0.82±0.10)%；前列腺癌旁組織中，miR-92a的表達水平為(0.56±0.06)%。前列腺癌組織明顯高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2前列腺癌組織miR-92a表達水平與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系:Gleason評分≥7分、腫瘤分期Ⅲ期～Ⅳ期、骨轉(zhuǎn)移患者的miR-92a表達水平高于Gleason評分<7分、腫瘤分期Ⅰ期～Ⅱ期、無骨轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。但不同年齡、血清特異抗原的miR-92a表達水平相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。如表1。

表1 前列腺癌組織miR-92a表達水平與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3miR-92a表達水平與患者預(yù)后的關(guān)系：miR-92a表達陽性患者3年生存率為11例(24.44%)、生存期為(39.45±3.51)個月，均低于陰性表達者的8例(53.33%)、(24.16±2.78)個月，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

前列腺癌是臨床作為常見的惡性腫瘤之一，好發(fā)于中老年男性群體中，具有較高的死亡率。相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，美國每年因癌癥死亡的人數(shù)中，前列腺癌位居第二，超過29 000人死于轉(zhuǎn)移性去勢抵抗性前列腺癌[7]。前列腺癌發(fā)病后，早期患者不會進展為侵襲性疾病或死亡，因此目前急需評估新診斷患者和晚期前列腺癌患者的風(fēng)險。既往研究發(fā)現(xiàn)[8]，在部分前列腺癌手術(shù)標(biāo)本的惡性組織中，發(fā)現(xiàn)了miRNAs存在差異性，并且在相當(dāng)一部分晚期前列腺癌患者血清中也檢測到了miRNAs基因的差異性表達。因此，在對前列腺癌檢測、預(yù)后評估和治療靶點尋找時，miRNAs可以作為重要的評估指標(biāo)。

miR-92a是miRNAs的重要成員之一，以往研究表明[9]，其在諸多惡性腫瘤中均呈現(xiàn)出高表達現(xiàn)象，常見的如肝癌、胃癌、肺癌等，作為一個癌基因，它能夠促進癌細(xì)胞的增殖、遷移和轉(zhuǎn)移，反之若能夠下調(diào)其表達，則可以對癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移起到抑制作用。本研究中結(jié)果說明了與其他類型的惡性腫瘤一樣，前列腺癌患者的確存在miR-92a高表達的現(xiàn)象。進一步分析發(fā)現(xiàn)，Gleason評分≥7分、腫瘤分期Ⅲ-Ⅳ期、骨轉(zhuǎn)移患者的miR-92a的表達水平要高于Gleason評分<7分、腫瘤分期Ⅰ-Ⅱ期、無骨轉(zhuǎn)移患者，表明了miR-92a不僅單純在前列腺癌組織中存在高表達，并且與預(yù)測該腫瘤預(yù)后和評估病情的關(guān)鍵指標(biāo)有關(guān)。另外發(fā)現(xiàn)相較于miR-92a陰性表達患者，陽性表達患者的3年生存率和生存期更低，提示前列腺癌組織中的miR-92a表達狀況，會對患者的預(yù)后產(chǎn)生較大的影響。MiR-92a是一種較為常見的miRNA，通過對其靶基因的研究，能夠全方位地評估m(xù)iR-92a的生物學(xué)功能，其過度表達時，可以抑制F-box和WD重復(fù)含蛋白質(zhì)7來促進骨肉瘤腫瘤生長[10]，對其的檢測操作，與其他傳統(tǒng)檢測方法相比，檢測時更加的穩(wěn)定，并且無創(chuàng)，可用于早期診斷及病情評估，因此作為腫瘤標(biāo)志物更加具有優(yōu)勢。

綜上所述，前列腺癌細(xì)胞組織中的miR-92a表達水平高于癌旁組織，陽性表達會對患者的預(yù)后產(chǎn)生不良影響。