鄭燕深,董 忠 (1.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院泌尿外科,廣東 汕頭 515041;2.惠州市中心人民醫(yī)院泌尿外科,廣東 惠州 516001)
前列腺癌是臨床最為常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在男性惡性腫瘤中發(fā)病率僅次于肺癌,具有較高的致死率,已引起全世界的廣泛關(guān)注[1]。近年來(lái),隨著男性生活、飲食、工作等因素的變化,再加上老齡化趨勢(shì)的加劇,前列腺癌的發(fā)病率逐年上升,已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了男性的健康乃至生命安全[2]。目前,臨床對(duì)于前列腺的治療主要是手術(shù)治療,輔助相應(yīng)放化療,但是仍有大約5%的患者診斷時(shí)存在轉(zhuǎn)移性病變,導(dǎo)致效果不是非常理想[3]。因此,尋找一種新的診斷標(biāo)志物對(duì)臨床治療效果的提升至關(guān)重要。微小RNA-92a(miR-92a)是內(nèi)源性小分子單鏈RNA之一,與肝癌、肺癌、胃癌等惡性腫瘤密切相關(guān),呈現(xiàn)出高表達(dá)的現(xiàn)象[4],但與前列腺癌的關(guān)系,并且在前列腺癌中的表達(dá)尚未清楚。為此,本研究納入我院收集到的60例前列腺癌標(biāo)本,針對(duì)miR-92a的表達(dá)及其臨床意義展開(kāi)分析。
1.1一般資料:選取2014年1月~2021年6月在我院泌尿外科接受治療的前列腺癌患者60例進(jìn)行研究,并選取相應(yīng)的癌旁組織作為對(duì)照,經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。全部患者中,年齡45~78歲,平均(62.31±2.45)歲;病程2~6年,平均(3.25±0.32)年;臨床分期:Ⅰ期15例,Ⅱ期26例,Ⅲ期12例,Ⅳ期7例。收集所有患者的其他資料,如特異抗原、Gleason評(píng)分、骨轉(zhuǎn)移情況等。
納入標(biāo)準(zhǔn):①符合前列腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];②均病理結(jié)果證實(shí),首次發(fā)病,初次接受治療;③術(shù)前未接受放化療,未接受雄激素剝奪治療;④臨床各項(xiàng)資料完整、齊全。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他類(lèi)型的惡性腫瘤;②術(shù)前已實(shí)施放化療;③依從性較差,不配合研究者;④身體狀態(tài)較差,預(yù)計(jì)生存期無(wú)法完成本次調(diào)查。
1.2研究方法:采用免疫組化學(xué)檢測(cè)miR-92a表達(dá)水平:取前列腺癌組織、癌旁組織病理石蠟塊切片,厚度3 μm左右。對(duì)采集到的切片進(jìn)行處理,如烤片、脫臘、脫水等,隨后進(jìn)行抗原修復(fù)。完成上述操作后,滴入過(guò)氧化氫(H2O2)阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化氫酶活性,分別將兔多克隆mi R-802、RAB23抗體(購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司)加入其中,調(diào)節(jié)好稀釋比為1∶100,溫度為4℃留置一夜。將辣根過(guò)氧化酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗兔二抗(購(gòu)自賽默飛世爾中國(guó)公司)加入其中,室溫下留置30 min,DAB顯色,蘇木精復(fù)染,乙醇脫水,二甲苯透明,封片。
1.3結(jié)果判定:針對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判定[6],采用雙盲法進(jìn)行。隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野(×400),對(duì)陽(yáng)性染色細(xì)胞的數(shù)量、占比等予以明確。①染色強(qiáng)度:0分:無(wú)色,1分:淡黃色,2分:棕黃色,3分:棕褐色。②陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)百分率:0分:≤5%,1分:5%~25%;2分:25%~50%,3分:≥50%。(3)組織學(xué)評(píng)分計(jì)算公式:染色強(qiáng)度×陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)百分率,陰性表達(dá)說(shuō)明0~1分,陽(yáng)性表達(dá)說(shuō)明≥2分。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS18.0軟件處理,計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料行t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1不同細(xì)胞組織miR-92a表達(dá)水平的比較:前列腺癌組織中,miR-92a的表達(dá)水平為(0.82±0.10)%;前列腺癌旁組織中,miR-92a的表達(dá)水平為(0.56±0.06)%。前列腺癌組織明顯高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.2前列腺癌組織miR-92a表達(dá)水平與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系:Gleason評(píng)分≥7分、腫瘤分期Ⅲ期~Ⅳ期、骨轉(zhuǎn)移患者的miR-92a表達(dá)水平高于Gleason評(píng)分<7分、腫瘤分期Ⅰ期~Ⅱ期、無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但不同年齡、血清特異抗原的miR-92a表達(dá)水平相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。如表1。
表1 前列腺癌組織miR-92a表達(dá)水平與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系
2.3miR-92a表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系:miR-92a表達(dá)陽(yáng)性患者3年生存率為11例(24.44%)、生存期為(39.45±3.51)個(gè)月,均低于陰性表達(dá)者的8例(53.33%)、(24.16±2.78)個(gè)月,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
前列腺癌是臨床作為常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,好發(fā)于中老年男性群體中,具有較高的死亡率。相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),美國(guó)每年因癌癥死亡的人數(shù)中,前列腺癌位居第二,超過(guò)29 000人死于轉(zhuǎn)移性去勢(shì)抵抗性前列腺癌[7]。前列腺癌發(fā)病后,早期患者不會(huì)進(jìn)展為侵襲性疾病或死亡,因此目前急需評(píng)估新診斷患者和晚期前列腺癌患者的風(fēng)險(xiǎn)。既往研究發(fā)現(xiàn)[8],在部分前列腺癌手術(shù)標(biāo)本的惡性組織中,發(fā)現(xiàn)了miRNAs存在差異性,并且在相當(dāng)一部分晚期前列腺癌患者血清中也檢測(cè)到了miRNAs基因的差異性表達(dá)。因此,在對(duì)前列腺癌檢測(cè)、預(yù)后評(píng)估和治療靶點(diǎn)尋找時(shí),miRNAs可以作為重要的評(píng)估指標(biāo)。
miR-92a是miRNAs的重要成員之一,以往研究表明[9],其在諸多惡性腫瘤中均呈現(xiàn)出高表達(dá)現(xiàn)象,常見(jiàn)的如肝癌、胃癌、肺癌等,作為一個(gè)癌基因,它能夠促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、遷移和轉(zhuǎn)移,反之若能夠下調(diào)其表達(dá),則可以對(duì)癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移起到抑制作用。本研究中結(jié)果說(shuō)明了與其他類(lèi)型的惡性腫瘤一樣,前列腺癌患者的確存在miR-92a高表達(dá)的現(xiàn)象。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),Gleason評(píng)分≥7分、腫瘤分期Ⅲ-Ⅳ期、骨轉(zhuǎn)移患者的miR-92a的表達(dá)水平要高于Gleason評(píng)分<7分、腫瘤分期Ⅰ-Ⅱ期、無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者,表明了miR-92a不僅單純?cè)谇傲邢侔┙M織中存在高表達(dá),并且與預(yù)測(cè)該腫瘤預(yù)后和評(píng)估病情的關(guān)鍵指標(biāo)有關(guān)。另外發(fā)現(xiàn)相較于miR-92a陰性表達(dá)患者,陽(yáng)性表達(dá)患者的3年生存率和生存期更低,提示前列腺癌組織中的miR-92a表達(dá)狀況,會(huì)對(duì)患者的預(yù)后產(chǎn)生較大的影響。MiR-92a是一種較為常見(jiàn)的miRNA,通過(guò)對(duì)其靶基因的研究,能夠全方位地評(píng)估m(xù)iR-92a的生物學(xué)功能,其過(guò)度表達(dá)時(shí),可以抑制F-box和WD重復(fù)含蛋白質(zhì)7來(lái)促進(jìn)骨肉瘤腫瘤生長(zhǎng)[10],對(duì)其的檢測(cè)操作,與其他傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比,檢測(cè)時(shí)更加的穩(wěn)定,并且無(wú)創(chuàng),可用于早期診斷及病情評(píng)估,因此作為腫瘤標(biāo)志物更加具有優(yōu)勢(shì)。
綜上所述,前列腺癌細(xì)胞組織中的miR-92a表達(dá)水平高于癌旁組織,陽(yáng)性表達(dá)會(huì)對(duì)患者的預(yù)后產(chǎn)生不良影響。