王 穎，姚玉淑 (天津市北辰醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津 300400)

過(guò)敏性紫癜(HSP)是兒童自身免疫性血管變態(tài)反應(yīng)性疾病，具有較高的發(fā)病率。該疾病的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜難明，普遍認(rèn)為與體液免疫、細(xì)胞免疫存在密切關(guān)系[1]。有研究顯示檢測(cè)HSP急性期外周血CD4+、CD8+T細(xì)胞及免疫球蛋白(Ig)含量，有助于為臨床診治提供參考依據(jù)[2]。本文對(duì)比分析HSP急性期患兒外周血CD4+、CD8+T細(xì)胞及IgA、IgM、IgG水平變化的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2016年7月～2020年5月天津市北辰醫(yī)院接收的HSP急性期患兒53例作為研究組，另選同期保健科接收體檢健康兒童53例作為對(duì)照組。研究組中男28例，女25例，年齡3～14歲，平均(8.12±1.25)歲。HSP分型：皮膚型18例，腎型12例，腹型10例，混合型8例，關(guān)節(jié)型5例。對(duì)照組中男27例，女26例，年齡3～15歲，平均(8.21±1.23)歲。兩組性別、年齡資料相近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本次研究經(jīng)過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2納入排除標(biāo)準(zhǔn)：研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：①患兒均符合《兒童過(guò)敏性紫癜循證診治建議》中關(guān)于HSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，且均處于急性期；②均為首次確診患兒；③家屬及患兒認(rèn)知功能正常；④家屬知情同意，自愿參與。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)與研究組③、④一致。研究組排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除伴有其他血管性疾病患兒；②排除伴有免疫功能障礙性疾病患兒；③排除入組前1個(gè)月內(nèi)使用激素及免疫藥物患兒；④排除資料不全、失訪患兒。對(duì)照組排除標(biāo)準(zhǔn)與研究組均一致。

1.3方法

1.3.1儀器與試劑：采用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的FACSCalibur流式細(xì)胞儀及配套試劑測(cè)定CD4+、CD8+細(xì)胞，采用美國(guó)Beckman Coulter公司生產(chǎn)的特定免疫球蛋白測(cè)定儀及配套試劑測(cè)定IgA、IgM、IgG水平。所有研究對(duì)象均采集清晨空腹外周靜脈血兩份各2 ml，分別置于EDTA-K2抗凝管、真空管中，標(biāo)本最長(zhǎng)保留時(shí)間6 h。樣本中白細(xì)胞數(shù)目控制在4×109/L～10×109/L，若白細(xì)胞數(shù)過(guò)少則需單個(gè)核細(xì)胞分離，若白細(xì)胞數(shù)過(guò)多則稀釋處理，若樣本出現(xiàn)溶血，則棄用。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)使用，標(biāo)本處理好后上機(jī)檢測(cè)，獲取CD4+、CD8+細(xì)胞百分率，計(jì)算CD4+/CD8+；Ig測(cè)定時(shí)，外周血樣本進(jìn)行完全凝集，并保證無(wú)任何纖維蛋白及微小顆粒，離心沉降處理，分離血清。血清完全凝固后上機(jī)，采用散射比濁法測(cè)定IgA、IgM、IgG水平。研究組在患兒出院當(dāng)天再次采集清晨空腹外周靜脈血，檢測(cè)方法同上。

1.4觀察指標(biāo)：對(duì)比分析HSP急性期患兒與健康兒童IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+之間的差異。觀察比較HSP急性期患兒治療前后IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+的差異。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS25.0軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1兩組IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比較：研究組外周血CD4+、CD4+/CD8+明顯低于對(duì)照組，CD8+、IgA明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩組IgM、IgG水平對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組外周血CD4+、CD8+及Ig比較結(jié)果

2.2研究組治療前后IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比較：研究組治療后外周血CD4+、CD4+/CD8+高于治療前，CD8+、IgA低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，研究組治療前后IgM與IgG無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 研究組治療前后外周血CD4+、CD8+及Ig比較結(jié)果

3 討論

小兒HSP屬于常見(jiàn)自身免疫性疾病，臨床表現(xiàn)和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜[4]。常見(jiàn)的病因包括感染、藥物、食物、花粉等，發(fā)生后表現(xiàn)出一定的皮膚癥狀、消化道癥狀、關(guān)節(jié)癥狀、腎臟癥狀及其他癥狀，因此被分為皮膚型、腹型、關(guān)節(jié)型、腎型、混合型，但不論哪種類(lèi)型，都表現(xiàn)出免疫功能紊亂[5]。通過(guò)檢查患兒免疫功能相關(guān)指標(biāo)，有助于判斷病情，為臨床治療提供參考。

兒童時(shí)期免疫功能發(fā)育不成熟，容易受到外界因素影響而誘發(fā)免疫功能障礙。細(xì)胞免疫和體液免疫都參與集體免疫功能調(diào)節(jié)[6]。其中T淋巴細(xì)胞屬于細(xì)胞免疫效應(yīng)細(xì)胞[7]，在外來(lái)抗原侵入機(jī)體時(shí)，T淋巴細(xì)胞參與反應(yīng)，調(diào)節(jié)血CD4+、CD8+，其中血CD4+在局部環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，被誘導(dǎo)分化為T(mén)h1、Th2、Th17等亞群，通過(guò)不同轉(zhuǎn)錄途徑及分泌不同細(xì)胞因子來(lái)執(zhí)行生物學(xué)效應(yīng)。正常情況下Th1/Th2處于穩(wěn)定狀態(tài)，存在相互制約與調(diào)節(jié)的關(guān)系，共同維持機(jī)體正常免疫應(yīng)答，而當(dāng)HSP急性期發(fā)作，Th1/Th2的平衡關(guān)系遭到破壞，引起機(jī)體免疫功能紊亂，呈現(xiàn)Th2細(xì)胞亞群相對(duì)優(yōu)勢(shì)。導(dǎo)致Th2細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫功能增強(qiáng)，促使B細(xì)胞增殖、分化，誘導(dǎo)產(chǎn)生IgA，進(jìn)一步形成循環(huán)免疫復(fù)合物，在全身小血管壁沉積，導(dǎo)致組織和器官損傷，促使HSP加重[8]。本研究結(jié)果顯示研究組外周血CD4+、CD4+/CD8+明顯低于對(duì)照組，CD8+、IgA明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明HSP急性期體液免疫、細(xì)胞免疫功能發(fā)生明顯改變，因此認(rèn)為誘發(fā)HSP免疫功能紊亂的主要環(huán)節(jié)是T淋巴細(xì)胞亞群功能紊亂[9]。經(jīng)過(guò)治療發(fā)現(xiàn)，研究組治療后外周血CD4+、CD4+/CD8+高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，外周血CD4+、CD8+及IgA恢復(fù)至正常水平，免疫功能恢復(fù)平衡，疾病得到改善。因此，通過(guò)檢測(cè)HSP急性期患兒血清Ig及外周血CD4+、CD8+，有助于觀察疾病進(jìn)展情況，并及時(shí)采取有效治療措施，調(diào)節(jié)免疫功能，促進(jìn)患兒恢復(fù)，并為疾病治療效果評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)。

綜上所述，小兒HSP急性期表現(xiàn)出體液免疫和細(xì)胞免疫功能紊亂，外周血CD4+下降、CD8+升高、IgA水平升高，治療后免疫功能恢復(fù)平衡，通過(guò)監(jiān)測(cè)指標(biāo)變化，有助于為臨床診治提供參考。