汪 洋，江舒雅，肖旭東

（1.安徽省蕪湖市市場監(jiān)管綜合行政執(zhí)法支隊(duì)三山經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)大隊(duì)，安徽蕪湖 241000；2.安徽省蕪湖市市場監(jiān)管綜合行政執(zhí)法支隊(duì)，安徽蕪湖 241000；3.安徽省蕪湖市食品藥品檢驗(yàn)中心，安徽蕪湖 241000）

在食品飲料中使用防腐劑，可以改善食品的 品質(zhì)、延長食品保質(zhì)期，防止食品發(fā)生腐敗變質(zhì) 等[1-4]。然而，過量使用苯甲酸、山梨酸可能會(huì)對人體造成一定危害[5]。例如，苯甲酸鈉對哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞具有致突變作用，糖精鈉可能致動(dòng)物膀胱 癌[6-9]。因此，針對食品添加劑的應(yīng)用，我國需要規(guī)范食品市場，為消費(fèi)者營造一個(gè)更加健康安全的消費(fèi) 環(huán)境。

國家食品安全監(jiān)管部門于2015年發(fā)布了最新版《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》 （GB 2760—2014），其明確規(guī)定了各類添加劑在食品中的最大添加量，其中苯甲酸在碳酸飲料和特殊用途飲料最大添加量為0.2 g/kg，在茶飲料、果（蔬）汁飲料和蛋白（乳）飲料中的最大添加量為1.0 g/kg；山梨酸和糖精鈉在5類飲料中的最大添加量分別為0.5 g/kg、0.15 g/kg。但一些廠家為了降低成本，延長產(chǎn)品的保質(zhì)期，常違規(guī)或超標(biāo)使用防腐劑，有些產(chǎn)品防腐劑含量甚至超標(biāo)幾十倍[10-13]。因此，測定飲料中的常見防腐劑至關(guān)重要。目前，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的檢測方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法和紫外分光光度法等[14-15]。本研究利用高效液相色譜法對5種市售飲料中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的含量進(jìn)行測定，為市場監(jiān)督管理部門對飲料的監(jiān)督管理提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

采用隨機(jī)抽樣方法對蕪湖市各商場、旅游景點(diǎn)抽檢不同品牌的5種飲料共100份，碳酸飲料、茶飲料、特殊用途飲料、果（蔬）汁飲料和蛋白（乳）飲料各20份。

1.2 試劑與儀器

苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品，甲醇（色譜純），其余試劑均為分析純。

Agilent 1100高效液相色譜儀、DAD檢測、Chemstation system工作站、超聲波清洗儀、FC204電子天平、LD5-2A離心機(jī)、0.45 μm有機(jī)濾膜、超純水設(shè)備、25 mL具塞離心管和EP管。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 色譜條件

色譜柱：C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨（5+95）；流速：1 mL/min；檢測波長：228 nm；進(jìn)樣量：20 μL。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

配制濃度分別為0 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL和4.0 μg/mL的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，各進(jìn)樣20 μL，按色譜條件進(jìn)行檢測，3種物質(zhì)以保留時(shí)間和峰面積對濃度分別進(jìn)行線性回歸。

1.3.3 樣品前處理

（1）碳酸飲料、茶飲料、特殊用途飲料和果（蔬）汁飲料。稱取10 g樣品（精確至0.001 g）于25 mL容量瓶中，用氨水（1+1）調(diào)節(jié)pH至近中性，用水定容至刻度，混勻，量取0.5 mL于25 mL容量瓶中，定容，混勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。每個(gè)樣品處理3次。

（2）蛋白（乳）飲料。稱取10 g樣品（精確至 0.001 g）于25 mL容量瓶中，加入2 mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入2 mL乙酸鋅溶液搖勻，以沉淀蛋白質(zhì)，加水定容至刻度，4000 r/min離心15 min，取上清液0.5 mL于25 mL容量瓶中，定容，混勻，取濾液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。每個(gè)樣品處理3次。

1.3.4 上機(jī)檢測

樣品經(jīng)前處理后，于自動(dòng)進(jìn)樣器中進(jìn)樣20 μL，根據(jù)待測樣保留時(shí)間定性，信號峰峰面積定量；按照標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程求得樣品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的濃度。

1.3.5 結(jié)果計(jì)算

樣品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的計(jì)算公式如下：

式中：X為樣品中待測組分含量，g/kg；C為濃度，μg/mL；V為樣品定容體積，mL；M為樣品質(zhì)量，g。

1.3.6 統(tǒng)計(jì)分析方法

使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉檢出量等計(jì)量資料采用中位數(shù)（四分位間距）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉檢測率、超標(biāo)率等計(jì)數(shù)資料采用率（%）進(jìn)行描述。

采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行5種飲料3種食品添加劑總檢出率、總超標(biāo)率、單一食品添加劑檢測率和超標(biāo)率差異性分析；采用多組間差異性比較的秩和檢驗(yàn)（非正態(tài)分布）進(jìn)行添加劑檢出量的組間比較；p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

按照標(biāo)準(zhǔn)曲線配制的方法得出標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖如圖1所示，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的保留時(shí)間分別為11.102 min、15.218 min和22.970 min，以苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品的濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，繪出3種食品添加劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖2所示。待測樣品根據(jù)保留時(shí)間定性，峰面積定量來求得樣品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的含量。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線色譜圖

圖2 苯甲酸、山梨酸和糖精鈉3種食品添加劑標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 5類飲料中3種食品添加劑的檢出和超標(biāo)情況

在100份樣品中共檢出含有3種添加劑的飲料43份（檢出率43.0%），超過食品安全標(biāo)準(zhǔn)的有13份（超標(biāo)率13.0%），且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=43.08，P＜0.001；F=16.68，P=0.005）。從飲料種類來看，蛋白（乳）飲料和碳酸飲料分別檢出19份和13份，檢出率分別為95.0%和65.0%；碳酸飲料和特殊用途飲料超標(biāo)份數(shù)分別為7份和4份，超標(biāo)率分別為35.0%和20.0%。從食品添加劑的種類來看，在100份樣品中共檢出含有苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的飲料分別為26份、18份和13份，超標(biāo)添加苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的飲料數(shù)分別為10份、3份和0份。其中，碳酸飲料苯甲酸檢出率和超標(biāo)率最高，分別達(dá)到65.0%和35.0%；糖精鈉全部是在蛋白（乳）飲料中檢出，其他飲料中未檢出，詳見表1。

2.3 檢出樣品中3種食品添加劑的含量情況

在檢出的43份樣品中，茶飲料和果（蔬）汁飲料檢出（檢出率）分別為1份（5.0%）、5份（25.0%），都僅有1份超標(biāo)（超標(biāo)率5.0%），詳見表1。以下重點(diǎn)對檢出或超標(biāo)情況較嚴(yán)重的碳酸飲料、特殊用途飲料和蛋白（乳）飲料3類飲料進(jìn)行含量分析。

表1 5類軟飲料中3種食品添加劑檢出結(jié)果分析

碳酸飲料、特殊用途飲料和蛋白（乳）飲料3類飲料共檢出添加劑37份，苯甲酸在3類飲料中的含量分別 為0.21（0.12～0.29） g/kg、0.75（0.49～ 0.88） g/kg和0.03（0.03～0.04） g/kg，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=13.66，P＜0.01）；山梨酸在3類飲料中的含量分別為0.10（0.09～0.11） g/kg、 0.55（0.43～0.66） g/kg和0.05（0.02～0.06） g/kg，且 差 異 具 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義（F=9.3，P＜0.01）；糖精鈉在碳酸飲料、特殊用途飲料未檢出，僅在蛋白（乳）飲料中檢出，含量為0.08（0.05～ 0.11） g/kg，未超標(biāo)，但檢出率為95.0%。特殊用途飲料在3種飲料中苯甲酸和山梨酸添加量均最高且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.015，P=0.02），詳見 表2。

表2 3類飲料中食品添加劑含量分析

3 結(jié)論與討論

近一半樣品中檢出苯甲酸、山梨酸和糖精鈉3種食品添加劑中的至少一種，且有超過1/10的樣品超過國家規(guī)定的食品安全標(biāo)準(zhǔn)限制，這一結(jié)果表明食品飲料中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的使用目前仍然十分普遍，且存在超標(biāo)現(xiàn)象。這一結(jié)果與武漢、煙臺(tái)、重新檢出結(jié)果基本一致[11-13]，相關(guān)監(jiān)管部門應(yīng)進(jìn)一步加大監(jiān)管與抽查的力度。同時(shí)，5類飲料之間的總檢出率、總超標(biāo)率以及苯甲酸的檢出率、超標(biāo)率均存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），這一結(jié)果表明不同飲料使用添加劑的種類和含量情況也有區(qū)別。茶飲料和果（蔬）汁飲料檢出率、超標(biāo)率均較低，僅有1份超標(biāo)樣品，說明在5類飲料中茶飲料和果（蔬）汁飲料食品添加劑使用情況不是十分普遍；蛋白（乳）飲料總檢出率和山梨酸、糖精鈉的檢出率均最高，表明蛋白（乳）飲料添加劑的使用情況較普遍，這可能是因?yàn)樯a(chǎn)廠家需要增加食品添加劑的使用量或聯(lián)合應(yīng)用來抵抗其飲料中較多易變質(zhì)的蛋白質(zhì)成分；在5類飲料中苯甲酸檢出率和超標(biāo)率最高的是碳酸飲料，且碳酸飲料的總超標(biāo)率在5類飲料中也是最高的，說明碳酸飲料中使用苯甲酸作防腐劑的情況較普遍，且超標(biāo)情況十分嚴(yán)重；糖精鈉的檢出率以蛋白（乳）飲料為最高，在其他飲料中未檢出，說明糖精鈉可能主要應(yīng)用在蛋白（乳）飲料，但超標(biāo)情況不常見。①建議飲料生產(chǎn)廠家通過改進(jìn)生產(chǎn)工藝和技術(shù)來降低食品添加劑的使用，加大對相關(guān)技術(shù)研發(fā)的支持力度。②相關(guān)監(jiān)管部門要改進(jìn)工作方式和方法，增加對食品飲料中有問題的產(chǎn)品定期抽樣監(jiān)測頻次，從而有針對性地對存在的安全風(fēng)險(xiǎn)問題進(jìn)行監(jiān)管，提高監(jiān)管效率。

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》 （GB 2760—2014）對苯甲酸、山梨酸和糖精鈉最大使用量均有規(guī)定，從本研究檢測結(jié)果來看，特殊用途飲料在3種飲料中苯甲酸和山梨酸添加量均較高，特別是苯甲酸超標(biāo)使用量幾乎是規(guī)定容許最大添加量的3.75倍，相比于總超標(biāo)率更高的碳酸飲料來說，其實(shí)際超出量遠(yuǎn)高于碳酸飲料。因此，建議相關(guān)部門應(yīng)加強(qiáng)對碳酸飲料、特殊用途飲料食品生產(chǎn)加工企業(yè)的監(jiān)督與執(zhí)法，降低碳酸飲料食品添加劑超標(biāo)率和特殊用途飲料食品添加劑違規(guī)添加量。

食品防腐劑的使用給人們的生活帶來了很多的便利，但使用不當(dāng)將會(huì)引起重大的食品安全問題[2-5]。因此，相關(guān)部門應(yīng)對食品飲料消費(fèi)市場要加大監(jiān)管力度，依據(jù)定期監(jiān)督抽查結(jié)果對特定種類飲料或廠家進(jìn)行針對性監(jiān)督檢查，推進(jìn)相關(guān)生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)工藝流程的改進(jìn)和合規(guī)合法生產(chǎn)意識的提高，確保偽劣產(chǎn)品或不符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品不再進(jìn)入市場。