李憶紅，梁雨璐，張潔，解嘉琪，劉傳鑫，黃建梅*（1.北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥學(xué)院，北京 102488；2.河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌代謝中心 內(nèi)分泌代謝科，河南省遺傳罕見病醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實驗室，國家代謝性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心洛陽分中心，河南 洛陽 471003；3.北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥品質(zhì)評價北京市重點(diǎn)實驗室，北京 102488）

梔子為茜草科植物梔子（Gardenia jasminoidesEllis）的干燥成熟果實，其味苦，性寒，歸心、肺、三焦經(jīng)；具有瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒的功效[1]。在我國梔子主產(chǎn)區(qū)有江西、浙江、福建、湖南等地[2]，應(yīng)用廣泛，屬于原衛(wèi)生部頒布的第一批藥食同源的中藥材。梔子作為傳統(tǒng)的大宗藥材，具有廣泛的藥理活性，如保肝利膽、抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗抑郁、降血糖、神經(jīng)保護(hù)等，另外還有改善血液循環(huán)、抗血栓、防治腦出血等保護(hù)心血管系統(tǒng)的藥理活性[3-12]。

在信噪比等于0 dB時，利用多載波系統(tǒng)仿真出的信道沖激響應(yīng)如圖2所示。紅色曲線為理想值，藍(lán)色曲線為估計值。可以看出，在信噪比較低的情況下，經(jīng)過降噪算法處理后的信道沖激響應(yīng)能夠較好的模擬理想值。

生梔子苦寒，炮制可降低梔子的寒性，《中國藥典》[1]中有生梔子、炒梔子（清炒至黃褐色）、焦梔子（清炒至焦褐色或焦黑色）3種，是對全果進(jìn)行炮制，另外在《上海炮制規(guī)范》《湖南炮制規(guī)范》的記載中，炮制梔子無去殼、帶殼的說法，但根據(jù)東漢至明清典籍記載，梔子果實的皮仁分用較為常見，目前部分地區(qū)中醫(yī)用藥仍沿用古時用法，如清《本草備要》記載“內(nèi)熱用仁，表熱用皮”；《本草綱目》記載，梔子用以“治上焦、中焦連殼用，下焦去殼”[13-14]；根據(jù)記載，樟幫法[15]炮制梔子是去皮留仁，建昌幫法[16]炮制梔子是以皮、仁分用。梔子果皮、果仁易分離，其皮、仁分用可能是臨床使用中兩者表現(xiàn)出了藥效差異，而這種差異可能來源于梔子果皮、果仁的物質(zhì)基礎(chǔ)的不同。

有研究表明梔子苷、西紅花苷Ⅰ、西紅花苷Ⅱ在梔子仁中含量比梔子皮中含量高[17]，去乙酰車葉草酸甲酯、京尼平龍膽二糖苷、梔子苷等化合物的含量分布存在差異[18-20]。雖已有文獻(xiàn)報道關(guān)于梔子果皮、果仁成分差異研究，但選用的指標(biāo)成分較少，也缺乏系統(tǒng)性?；诖?，本試驗利用UHPLCQ-Exactive/MS技術(shù)對梔子果實不同部位的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)性的快速識別，并結(jié)合正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA）判別模式對梔子果實不同部位特征性差異化合物進(jìn)行篩選識別，為梔子果皮、果仁藥效差異提供理論依據(jù)，也為梔子皮、仁的快速鑒定與臨床合理應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

超高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用儀（Thermo Scientific Q Exactive LC-MS，美國Thermo Fisher公司）；ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）（美國Waters公司）；JA2003B電子天平（上海越平科學(xué)儀器有限公司）；KQ-300DB數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式多用真空泵（河南省予華儀器有限公司）；TGL-16aR高速冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；MX-S渦旋混勻儀（北京博雅創(chuàng)新科技發(fā)展有限公司）。

質(zhì)譜級乙腈、乙酸[賽默飛世爾科技（中國）有限公司]；屈臣氏蒸餾水（廣州屈臣氏食品飲料有限公司）；梔子藥材采摘于福建，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)楊瑤珺教授鑒定為茜草科植物梔子（Gardenia jasminoidesEllis）的干燥成熟果實。

采用ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色譜柱；以0.2%乙酸水（A）-乙腈（B）作為流動相，線性洗脫梯度（0～1 min，10%B；1～4 min，10%～15%B；4～18 min，15%～30%B；18～24 min，30%～50%B；24～28 min，50%～100%B；28～31 min，100%B；31～32 min，100%～10%B；32～35 min，10%B）；柱溫為30℃；流速為0.3 mL·min-1；進(jìn)樣量為2 μL。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備

通過保留時間、質(zhì)譜裂解規(guī)律、文獻(xiàn)信息共鑒定了22個差異具有統(tǒng)計學(xué)意義的化合物[21-25，27-34，42]，如表2所示，化合物1～7、11、12、14～19、21、22等17種化合物在梔子果皮中的含量更高；而化合物8[雞矢藤次苷甲酯（scandoside methyl ester）]、9[梔子苷（geniposide）]、10[京尼平龍膽二糖苷（genipin 1-gentiobioside）]、13（Jasminodiol）、20[順/反西紅花苷Ⅰ（trans-crocin Ⅰ/cis-crocin Ⅰ）]在梔子果仁中的含量更高。

2.2 色譜條件

1）首先根據(jù)王家會站1992—2016年最大流量，計算頻率并繪制頻率曲線，取頻率p為10%所對應(yīng)的流量10.0 m3/s為高水流量。

蘇東坡在《水調(diào)歌頭》中有“不應(yīng)有恨，何事長向別時圓”的句子。蘇軾責(zé)怪月亮：你為什么偏偏要在我和家人離別的時候又大又圓呢？月亮?xí)r圓時缺是自然現(xiàn)象，亙古不變，這種責(zé)備實在奇怪，毫無道理，但是，離別過的人卻對此句深有感觸，它正表達(dá)出了詞人懷念弟弟之情深，是為“無理有情”，是為“反常合道”。

將Thermo儀器產(chǎn)生的“.raw”格式的數(shù)據(jù)，通過Abf（Analysis Base File）Converter、MSFileReader軟件轉(zhuǎn)換成“.abf”格式的數(shù)據(jù)，然后利用MSDIAL 4.48軟件進(jìn)行參數(shù)設(shè)置（誤差范圍、保留時間范圍、加合物類型等），進(jìn)行峰提取、對齊操作，然后將歸一化之后的數(shù)據(jù)集導(dǎo)出，利用軟件SIMCA 14.1進(jìn)行多元統(tǒng)計分析、主成分分析（PCA）和OPLS-DA。再利用IBM SPSS Statistics 20.0軟件對梔子果皮、果仁兩組間的數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗（Kolmogorov-Smirnov）和基于均值的方差齊性檢驗（α＝0.05），然后根據(jù)正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗的結(jié)果進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗（正態(tài)檢驗P＞0.05）或獨(dú)立樣本Mann-Whitney U檢驗（正態(tài)檢驗P＜0.05），篩選出差異具有統(tǒng)計學(xué)意義的化合物。

2.3 質(zhì)譜條件

采用電噴霧離子源（ESI），在負(fù)離子模式下（ESI-）對梔子果實不同部位的樣品進(jìn)行分析，掃描范圍設(shè)定為m/z100～1500 Da。具體的質(zhì)譜條件參數(shù)：毛細(xì)管電壓3200 V；毛細(xì)管溫度為350℃，離子源溫度為350℃；采用高純N2作為鞘氣和輔助氣，鞘氣流速為35 L·h-1，輔助氣流速為15 L·h-1；采用Thermo Xcalibur 3.0工作站處理數(shù)據(jù)。

2.4 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換與分析

2.藝術(shù)范疇的毛筆書法作品。關(guān)于毛筆書法作品與藝術(shù)之間的關(guān)系是不用贅言的。古今名人字畫皆是書畫愛好者的賞析和收藏的寵兒，也是研究和發(fā)展東方藝術(shù)的不竭源泉。所謂藝術(shù)，即是人類在漫長的生產(chǎn)活動和社會活動中形成和創(chuàng)造的成果，是人們?yōu)榱藵M足自身的需求，以一定的物質(zhì)載體為中介，以豐富的情感來表現(xiàn)社會生活和審美情趣的審美形態(tài)。美術(shù)作品即是藝術(shù)的一種表現(xiàn)形式。而美術(shù)作品，是指繪畫、書法、雕塑等以線條、色彩或者其他方式構(gòu)成的平面或者立體的造型藝術(shù)作品。毛筆書法作為書法門類中一種獨(dú)特的表現(xiàn)形式，當(dāng)然屬于美術(shù)作品。因此，從藝術(shù)范疇的角度來看，毛筆書法作品應(yīng)該受到著作權(quán)法的保護(hù)是毋庸置疑的。

3 結(jié)果

3.1 UHPLC-Q-Exactive/MS分析

4.1.4 有機(jī)酸類 綠原酸易先脫去咖啡酰殘基，產(chǎn)生碎片離子m/z191.06[M-caffeoyl-H]-及咖啡酸特征離子m/z179.03 [M-quinate-H]-，然后脫去一分子H2O產(chǎn)生m/z173.04 [M-caffeoyl-H2O-H]-，同時咖啡?；槠琺/z179.03脫去一分子CO2得到m/z135.04 [caffeoyl-H-CO2]-碎片離子?；衔?、7、19的保留時間分別為1.32、1.93、9.14 min，準(zhǔn)分子離子峰均為m/z353.09 [M-H]-，三者的質(zhì)譜碎片離子數(shù)據(jù)相同（m/z191.06、179.03、173.04、135.04），說明這3個化合物互為同分異構(gòu)體，同分異構(gòu)體化合物無法通過質(zhì)譜分辨，只能結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)、保留時間和離子豐度差異區(qū)分，根據(jù)文獻(xiàn)報道新綠原酸裂解碎片強(qiáng)度：m/z191＞179＞135；綠原酸裂解碎片強(qiáng)度：m/z191最強(qiáng)，m/z179和m/z135強(qiáng)度相當(dāng)，較弱；隱綠原酸裂解碎片強(qiáng)度：m/z179＞191＞135[41-45]?；衔?的碎片離子m/z191.06響應(yīng)最強(qiáng)，m/z179.03、135.04強(qiáng)度較弱，與文獻(xiàn)報道的綠原酸裂解規(guī)律相符，推測化合物5為新綠原酸（5-O-caffeoylquinic acid），化合物7為綠原酸（3-O-caffeoylquinic acid），化合物19為隱綠原酸（4-O-caffeoylquinic acid）。異綠原酸A、B、C的結(jié)構(gòu)比綠原酸多一分子的咖啡酰基，具有相似的結(jié)構(gòu)碎片。在負(fù)離子模式下檢測到化合物15、17、18準(zhǔn)分子離子峰均為m/z515.12 [M-H]-，二級質(zhì)譜均有脫去一分子咖啡酰殘基的碎片離子m/z353.09 [M-caffeoyl-H]-，通過查閱保留時間及對比文獻(xiàn)，推測化合物15為異綠原酸B（3，4-di-O-caffeoylquinic acid），化合物17為異綠原酸A（3，5-di-O-caffeoylquinic acid），化合物18為異綠原酸C（4，5-di-O-caffeoylquinic acid），化合物18異綠原酸C的裂解途徑如圖6所示。

圖1 ESI-模式下梔子果皮（A）、果仁（B）的基峰色譜圖Fig 1 Base peak ion current of pericarp（A）and seeds（B）of Gardeniae fructus in negative ion mode

3.2 多元統(tǒng)計分析

采集福建同一批次的20顆梔子果皮、果仁的樣本信息，采用多元統(tǒng)計分析尋找差異成分。通過PCA剔除異常值后，利用OPLS-DA篩選梔子果皮、果仁組間貢獻(xiàn)率高的變量。如圖2中A1、B1所示，在PCA模型中可以觀察到一個異常值（P-13、R-9）。在剔除異常值的基礎(chǔ)上，建立了OPLS-DA模型。R2（cum）和Q2（cum）分別表示模型的真實性和預(yù)測能力。當(dāng)R2和Q2都小于1，且兩個參數(shù)接近1時，所建立的模型是穩(wěn)定合理的。在剔除異常值之后圖2 中A2、B2及表1統(tǒng)計分析的參數(shù)可以看出，本試驗建立的OPLS-DA模型R2和Q2值都小于1，保證了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，具體ESI-模式下交叉比較的多元統(tǒng)計分析模型相關(guān)參數(shù)見表1。為了進(jìn)一步驗證所建模型的穩(wěn)定性，采用置換試驗對所建模型進(jìn)行驗證。假設(shè)檢驗在n＝200時進(jìn)行，結(jié)果如圖2C所示。R2和Q2的左點(diǎn)均小于最右點(diǎn)，Q2截距為-0.469。該模型具有較好的可預(yù)測性，且無過擬合現(xiàn)象。

表1 梔子果皮、果仁比較的多元統(tǒng)計分析模型相關(guān)參數(shù)(ESI-) Tab 1 Parameters of multivariate analysis model of pericarp and seeds of Gardeniae fructus (ESI-)

3.3 梔子果皮、果仁差異化合物的識別

4.1.1 環(huán)烯醚萜類化合物質(zhì)譜解析 梔子中含有多種環(huán)烯醚萜類成分，這些成分在ESI-模式下，一般檢測到脫氫準(zhǔn)分子離子峰[M-H]-，當(dāng)流動相中含有酸時，環(huán)烯醚萜苷還會生成[M＋HCOO]-[35-37]，如化合物1山梔苷的一級質(zhì)譜圖中可見m/z437.13 [M＋HCOO]-，化合物3梔子新苷可見m/z419.10 [M＋HCOO]-，化合物8雞矢藤次苷甲酯可見m/z449.08 [M＋HCOO]-。

圖2 多元統(tǒng)計分析結(jié)果Fig 2 Results of multivariate statistical analysis

取20顆梔子干燥果實（福建同一批次），分離梔子果皮、果仁，分別粉碎，取各粉末（過一號篩）約0.5 g，精確稱定，置于50 mL離心管中，精密加入25 mL去離子水，40℃超聲提取1.5 h（300 W，40 kHz），減壓抽濾，將續(xù)濾液以9820 g離心10 min，取400 μL上清液，即得。

表2 梔子果實不同部位差異化合物的鑒定結(jié)果 Tab 2 Identification of compounds with statistical difference in different parts of Gardeniae fructus

4 討論

4.1 化學(xué)成分質(zhì)譜裂解分析

將采集到的兩組原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA 14.1進(jìn)行OPLS-DA分析，結(jié)果兩組數(shù)據(jù)出現(xiàn)明顯差異。如圖2中B2所示，梔子果實果皮、果仁樣品顯著分成兩群，結(jié)果提示梔子果實不同部位中含有的化學(xué)成分存在顯著差異。

在串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）中，化合物1山梔苷以m/z391.12458 [M-H]-作為準(zhǔn)分子離子峰，對其進(jìn)行MS2分析，碎片離子m/z229.07、211.06是由準(zhǔn)分子離子m/z391.12 [M-H]-依次脫去一分子葡萄糖殘基和脫去一分子H2O形成，從而推斷出其裂解途徑[28，38]，如圖3A所示?；衔?去乙酰車葉草苷酸主要脫去H2O、CO2、葡萄糖殘基或葡萄糖。碎片離子m/z345.12、209.04是由準(zhǔn)分子離子m/z389 [M-H]-分別脫去一分子CO2和葡萄糖殘基形成；碎片離子m/z209.04失去一分子CO2，形成碎片離子m/z165.05；碎片離子m/z165.05、147.04也有可能由其前體離子（m/z183.07、165.05）失去一分子H2O形成，由此推測出化合物4去乙酰車葉草苷酸可能的裂解途徑[22]如圖3B所示。化合物9梔子苷準(zhǔn)分子離子m/z387.16 [M-H]-，二級掃描中負(fù)離子模式可見失去葡萄糖殘基的碎片m/z225.08，說明環(huán)烯醚萜類化合物的裂解方式是以糖苷鍵斷裂為主，丟失一分子葡萄糖基和H2O，苷元再次通過逆狄爾斯-阿德爾反應(yīng)（RDA）方式裂解，生成碎片離子m/z123.04，符合梔子苷的裂解規(guī)律[30，40]，如圖3C所示。

圖3 環(huán)烯醚萜類化合物的質(zhì)譜裂解途徑Fig 3 Mass spectra and possible fragment pathways of iridoids

4.1.2 單萜苷類化合物質(zhì)譜解析 化合物12 jasminoside B、化合物13 jasminodiol是梔子單萜苷類成分，化合物12 Jasminoside B的碎片離子m/z183.10、301.27，是由準(zhǔn)分子離子m/z345.15 [M-H]-分別脫去一分子葡萄糖殘基和CO2形成；化合物13 Jasminodiol的準(zhǔn)分子離子m/z183.10 [M-H]-脫去一分子CO2產(chǎn)生碎片m/z139.11 [M-H-CO2]-?；衔?2的碎片離子m/z183.10 [M-H-C6H10O5]-進(jìn)一步產(chǎn)生碎片離子m/z165.09 [M-H-C6H10O5-H2O]-、121.10 [M-H-C6H10O5-H2OCO2]-[27]，裂解途徑如圖4所示。

圖4 單萜苷類化合物jasminoside B的質(zhì)譜裂解途徑Fig 4 Mass spectra and possible fragment pathways of monoterpenoids jasminoside B

4.1.3 二萜類化合物質(zhì)譜解析 梔子中二萜類化合物主要為色素類成分，其中包括西紅花苷（藏紅花素）及其衍生物，查閱文獻(xiàn)可以發(fā)現(xiàn)藏紅花素類成分有很明顯的裂解特征，主要是糖苷鍵的斷裂及脫去CO2分子[21，30，41]，化合物20西紅花苷Ⅰ分子離子峰m/z975.37 [M-H]-首先脫去兩端糖殘基得到碎片離子m/z651.26 [M-gen-H]-、327.16 [M-2gen-H]-，碎片離子進(jìn)一步脫去CO2分別產(chǎn)生碎片離子m/z283.17 [M-2gen-CO2-H]-、239.18 [M-2gen-2CO2-H]-，化合物21的一級質(zhì)譜的分子離子峰m/z813.32 [M-H]-與化合物20正好相差一個葡萄糖殘基的相對分子質(zhì)量（162 Da），推測其為trans-crocin Ⅱ/cis-crocin Ⅱ，即西紅花苷Ⅱ；化合物22的分子離子峰m/z651.27 [M-H]-與化合物20西紅花苷Ⅰ相差一個龍膽二糖殘基的相對分子質(zhì)量（324 Da），推測其為trans-crocin Ⅲ/cis-crocin Ⅲ，即西紅花苷Ⅲ?；衔?0的裂解途徑如圖5所示。

圖5 二萜類化合物西紅花苷Ⅰ的質(zhì)譜裂解途徑Fig 5 Mass spectra and possible fragment pathways of crocin Ⅰ

取梔子樣品，按“2.2”和“2.3”項下液質(zhì)條件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與分析，梔子不同部位樣品在負(fù)離子模式下的基峰離子流色譜圖（BPI）如圖1所示。

結(jié)合實際所能得到數(shù)據(jù)情況，以市州作為決策單元研究某一年的發(fā)展情況。選取化肥施用量(X1)、農(nóng)牧漁業(yè)從業(yè)人員(X2)、農(nóng)業(yè)機(jī)械總動力(X3)、有效灌溉面積(X4)、農(nóng)業(yè)機(jī)械總動力(X5)、農(nóng)業(yè)用電量(X6)為投入指標(biāo)，同時以農(nóng)牧漁業(yè)增加值(Y1)、農(nóng)民人均純收入(Y2)、糧食產(chǎn)量(Y3)為產(chǎn)出指標(biāo)來評價市州的農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)發(fā)展情況。

圖6 有機(jī)酸類化合物異綠原酸C的質(zhì)譜裂解途徑Fig 6 Mass spectra and possible fragment pathways of organic acids 4，5-di-O-caffeoylquinic acid

4.2 提取溶劑的選擇

在預(yù)試驗中，分別以70%甲醇、水兩種體系作為提取溶劑，按照“2.2”和“2.3”項下液質(zhì)條件進(jìn)行考察，結(jié)果表明梔子果皮、果仁的醇提物、水提取色譜圖大體相同，其中醇提物的質(zhì)譜響應(yīng)稍強(qiáng)，考慮到梔子入藥的使用方法及綠色環(huán)保的角度，故選擇水作為提取溶劑。

蔣大偉吹著口哨，驅(qū)車行駛在街道上。姑娘叫鄭馨，她的眼睛盯著窗外，額前的頭發(fā)被風(fēng)吹得亂飛。蔣大偉從后視鏡里看看鄭馨，沒話找話地：喂，美女，去蘭江大橋做啥？鄭馨瞥了他一眼，繼續(xù)看著窗外。蔣大偉猜測地：是來旅游吧？鄭馨伸手整理了一下頭發(fā)，還是一言未發(fā)。蔣大偉熱情不減地：蘭江大橋是咱這地界的標(biāo)志性建筑！旅游不去蘭江大橋等于沒來。蔣大偉瞥了一眼后視鏡，鄭馨瞪大眼睛在看著他，繼續(xù)說道：你坐我的車就對了！我保證不出一個鐘頭給你送到大橋頂上！鄭馨從耳朵上取下耳機(jī)，皺緊眉頭：你說什么？蔣大偉泄氣地：得，白說了。

4.3 梔子不同部位差異化合物的臨床意義

本研究在ESI-模式下篩選鑒定了22個差異成分，其中雞矢藤次苷甲酯、京尼平龍膽二糖苷、梔子苷、jasminodiol、西紅花苷Ⅰ在梔子果仁中的含量更高。研究表明梔子苷、西紅花苷都具有抗炎、保肝利膽等作用，并且對神經(jīng)系統(tǒng)和心腦血管疾病也有治療作用[3-4，46]，鑒于本試驗發(fā)現(xiàn)梔子苷及西紅花苷Ⅰ在梔子果皮、果仁中分布存在顯著差異，果仁中梔子苷及西紅花苷Ⅰ分別是果皮中的1.27、1.28倍，可以認(rèn)為梔子果仁在梔子苷和西紅花苷Ⅰ方面的藥效比梔子果皮的效果更好；綠原酸及其異構(gòu)體是一類具有抗氧化、抗菌、降血脂、降血壓、降血糖、抗抑郁和焦慮等多方面藥理作用的天然化合物[47]，雖然梔子質(zhì)控的藥效成分梔子苷在果仁中分布高于果皮，但綠原酸、異綠原酸及其異構(gòu)體在梔子果皮中分布遠(yuǎn)高于果仁，也可以認(rèn)為在有機(jī)酸類化合物藥效方面梔子果皮比果仁效果更好，說明梔子果皮、果仁分用有一定的科學(xué)依據(jù)。

4.4 局限與不足

本試驗在識別鑒定化合物過程中，缺少對照品進(jìn)行對比，只能通過質(zhì)譜二級碎片、保留時間、離子豐度及文獻(xiàn)信息作為參考，推測化合物的歸屬，可能存在一定的假陽性結(jié)果；同時，在對比梔子果皮、果仁成分差異時，只得出西紅花苷Ⅰ在梔子果仁中的相對含量更高，而西紅花苷Ⅱ在梔子果皮中的相對含量更高，與文獻(xiàn)研究結(jié)果不完全一致[17]，未使用不同產(chǎn)地不同批次的梔子藥材，試驗條件有待進(jìn)一步優(yōu)化；其次，本研究鑒定梔子所含有的22種化學(xué)成分都是文獻(xiàn)中報道的已知化合物，仍存在部分離子峰沒有確定歸屬，可通過分離純化等手段對含量較低的成分進(jìn)行富集，鑒別出更多差異化合物；在選擇離子模式時，預(yù)試驗圖譜顯示負(fù)離子模式信號強(qiáng)度更高，選擇梔子文獻(xiàn)中常用的負(fù)離子模式，結(jié)果可能具有片面性。

5 小結(jié)

本研究應(yīng)用UHPLC-Q-Exactive/MS技術(shù)對梔子果皮、果仁不同部位中化合物進(jìn)行分析與鑒定，共鑒定出22種差異具有統(tǒng)計學(xué)意義的化合物，其中雞矢藤次苷甲酯、京尼平龍膽二糖苷、梔子苷、jasminodiol、西紅花苷 Ⅰ 5種成分在梔子果仁中的相對含量更高，山梔苷、京尼平苷酸、梔子新苷、去乙酰車葉草苷酸甲酯、異羥梔子苷、京尼平、jasminoside B、蘆丁、金絲桃苷/異槲皮苷、西紅花苷Ⅰ、綠原酸、異綠原酸及其異構(gòu)體等17種成分在梔子果皮中的相對含量更高。該方法的建立為中藥不同部位入藥的的物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供了一定的參考，也為梔子果皮、果仁分用的科學(xué)性及臨床應(yīng)用的合理性提供一定的研究基礎(chǔ)。