楊偉麗 王賢文 李里 王斐 李思鑫 朱鎮(zhèn)華

〔摘要〕 目的 利用中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)及網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，獲取田道法教授治療放療后氣陰虧虛型鼻咽癌中醫(yī)藥防治方劑，分析其作用機(jī)制，為放療后氣陰虧虛型鼻咽癌的中醫(yī)藥防治提供理論依據(jù)。方法 采用數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)等多學(xué)科交叉方法，對(duì)放療后氣陰虧虛型鼻咽癌的中醫(yī)藥防治策略進(jìn)行探討。整合中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)V3.0、中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)、中藥綜合數(shù)據(jù)庫(kù)、PubChem、Swiss Target Prediction、GeneCards、STRING等多數(shù)據(jù)庫(kù)資源，對(duì)放療后氣陰虧虛型鼻咽癌疾病靶點(diǎn)/中藥靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，從蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)、基因本體及京都基因與基因組百科全書(shū)富集的角度，對(duì)中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)數(shù)據(jù)挖掘獲取的氣陰虧虛型鼻咽癌基礎(chǔ)方的作用機(jī)制進(jìn)行探討。結(jié)果 納入田道法教授治療放療后氣陰虧虛型鼻咽癌中醫(yī)藥防治方劑74首;得到氣陰虧虛型鼻咽癌基礎(chǔ)方，由黃芪、黃連、白芍、天花粉、鎖陽(yáng)、川芎、瓜蔞皮、射干、皂角刺、茯苓、鹽補(bǔ)骨脂、炒蒼耳子12味中藥組成;獲得鼻咽癌防治靶點(diǎn)291個(gè)，如MET、PIK3CA、EGFR、CTNNB1、BRAF、ERBB2;防治靶點(diǎn)富集于172條信號(hào)通路，主要與PI3K-Akt、MAPK、HIF-1等信號(hào)通路相關(guān)。結(jié)論 田道法教授治療放療后氣陰虧虛型鼻咽癌以益氣補(bǔ)陰、扶正祛邪為核心，可能通過(guò)介導(dǎo)PI3K-Akt、MAPK、HIF-1等信號(hào)通路發(fā)揮作用。

〔關(guān)鍵詞〕 名老中醫(yī);鼻咽癌;基因表達(dá)綜合數(shù)據(jù)庫(kù);中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng);中醫(yī)藥;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

〔中圖分類(lèi)號(hào)〕R273，R276.1 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A ? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.06.016

Professor TIAN Daofa's prescription and medication strategy in the treatment of nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency after radiotherapy

YANG Weili1， WANG Xianwen1， LI Li1， WANG Fei2， LI Sixin2， ZHU Zhenhua1*

（1. The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410007， China;

2. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China）

〔Abstract〕 Objective To obtain professor TIAN Daofa's traditional Chinese medicine prevention and treatment prescriptions for nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency after radiotherapy， and analyze the action mechanism， so as to provide a theoretical basis for the traditional Chinese medicine prevention and treatment of nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency after radiotherapy by using the traditional Chinese medicine inheritance auxiliary system and network pharmacology methods. Methods The interdisciplinary methods of data mining and network pharmacology was used to explore the prevention and treatment strategy of Qi and Yin deficiency nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy. Multiple database resources such as traditional Chinese medicine inheritance auxiliary platform v 3.0， traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform， traditional Chinese medicines integrated database， PubChem， Swiss Target Prediction， GeneCards， STRING were integrated to screen the disease targets/traditional Chinese medicine targets of nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency. From the perspective of protein-protein interaction network， gene ontologyand enrichment of Kyoto encyclopedia of genes and genomes to explore the mechanism of the basic formula of Qi and Yin deficiency nasopharyngeal carcinoma obtained by data mining of traditional Chinese medicine inheritance auxiliary system. Results A total of 74 prevention and treatment prescriptions for nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency after radiotherapy were treated by professor TIAN Daofa. The basic prescription for nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency was obtained， which was composed of 12 traditional Chinese medicines： Huangqi （Astragali Radix）， Huanglian （Coptidis Rhizoma）， Baishao （Paeoniae Radix Alba）， Tianhuafen （Trichosanthis Radix）， Suoyang （Cynomorii Herba）， Chuanxiong （Chuanxiong Rhizoma）， Gualoupi （Trichosanthis Pericarpium）， Shegan （Belamcandae Rhizoma）， Zaojiaoci （Gleditsiae Spina）， Fuling （Poria）， Yanbuguzhi （Psoraleae Fructus）， Chaocangerzi （Xanthii Fructus）. A total of 291 nasophary?328914AB-F61E-4124-8E19-47EC583A36D2

ngeal carcinoma prevention and treatment targets were obtained， such as MET， PIK3CA， EGFR， CTNNB1， BRAF and ERBB2. The prevention and treatment targets were enriched in 172 signaling pathways， mainly related to PI3K-Akt， MAPK， HIF-1 and other signaling pathways. Conclusion Professor TIAN Daofa's treatment of nasopharyngeal carcinoma with Qi and Yin deficiency after radiotherapy focuses on replenishing Qi and Yin and strengthening the body resistance to eliminate pathogenic factors， which may play a role through mediating PI3K-Akt， MAPK， HIF-1 and other signaling pathways.

〔Keywords〕 famous veteran teran doctors of traditional Chinese medicine; nasopharyngeal carcinoma; comprehensive database of gene expression; traditional Chinese medicine inheritance auxiliary system; traditional Chinese medicine; network pharmacology

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma， NPC）是具有地域色彩的頭頸部惡性腫瘤，在東亞及東南亞地區(qū)高發(fā)[1]。我國(guó)國(guó)內(nèi)發(fā)病率高的地區(qū)以廣東、廣西、湖南、福建等南方地區(qū)為主，其發(fā)病原因主要與環(huán)境、EB病毒感染、遺傳等因素有關(guān)[2]。NPC臨床治療上以放療、化療為主[3]，結(jié)合靶向藥物治療、免疫治療、手術(shù)以及中醫(yī)藥治療。田道法教授師從陶正德教授，是全國(guó)名老中醫(yī)藥專(zhuān)家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)傳承工作室指導(dǎo)老師，湖南省名中醫(yī)，享受?chē)?guó)務(wù)院政府特殊津貼，在NPC基礎(chǔ)研究及臨床防治、康復(fù)方面研究專(zhuān)、精、深，接診NPC患者始終以“氣虛染毒”學(xué)說(shuō)為理論依據(jù)[4]，臨床療效令人滿意。隨著時(shí)代發(fā)展及科技進(jìn)步，利用計(jì)算機(jī)使用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)[5]及基因數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)2020年3月至2021年9月田道法教授治療放療后氣陰虧虛型NPC方劑進(jìn)行整理，探討其中醫(yī)藥組方規(guī)律及放療后氣陰虧虛型NPC潛在靶點(diǎn)進(jìn)行系統(tǒng)分析，為后續(xù)深入研究及臨床藥物提供理論及實(shí)踐依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 ?方劑組方規(guī)律及基礎(chǔ)方探討

選取湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科田道法教授門(mén)診處方，采用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)系統(tǒng)中數(shù)據(jù)挖掘功能，以分析其用藥規(guī)律。

方劑篩選：（1）由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院信息科選取2020年3月至2021年9月田道法教授門(mén)診診斷為“NPC治療后”“NPC放療后”的病人中藥處方。（2）中醫(yī)辨證為“氣陰虧虛”證。（3）排除資料不完整、無(wú)明確藥物組成及藥物不全的處方。

錄入及分析：采用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V3.0）錄入上述方劑，參照《中華人民共和國(guó)藥典》[6]對(duì)中藥藥名進(jìn)行歸一化處理，由兩人審核以確保錄入數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。采用“數(shù)據(jù)-方劑”分析功能對(duì)方劑藥物頻次及組方規(guī)律進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并篩選出放療后氣陰虧虛型NPC的中醫(yī)藥新基礎(chǔ)方劑，為放療后氣陰虧虛型NPC防治的基礎(chǔ)方。

1.2 ?氣陰虧虛型NPC基礎(chǔ)方中藥潛在靶點(diǎn)篩選

基于中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)頻次統(tǒng)計(jì)、關(guān)聯(lián)分析及熵層次聚類(lèi)分析，同時(shí)結(jié)合新方劑中各中藥功效主治及治法，篩選出黃芪、黃連、白芍、天花粉、鎖陽(yáng)、川芎、瓜蔞皮、射干、皂角刺、茯苓、補(bǔ)骨脂、蒼耳子12味中藥作為防治氣陰虧虛型NPC的基礎(chǔ)方。

放療后氣陰虧虛型NPC基礎(chǔ)方的有效成分收集：（1）利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform， TCMSP）[7]（https：//tcmsp-e.com/）及中藥綜合數(shù)據(jù)庫(kù)（traditional Chinese medicines integrated database， TCMID）[8]（http：//bidd.group/TCMID/），以人體藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)中口服生物利用度≥30%;藥物類(lèi)藥性≥0.18為條件[9]，獲取放療后氣陰虧虛型NPC基礎(chǔ)方黃芪、黃連、白芍、天花粉、鎖陽(yáng)、川芎、瓜蔞皮、射干、皂角刺、茯苓、鹽補(bǔ)骨脂、炒蒼耳子12味中藥的有效成分。（2）通過(guò)PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)[10]（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）收集各有效成分的結(jié)構(gòu)式或簡(jiǎn)化分子線性輸入規(guī)范（simplified molecular linear input specification， SMILES）。（3）將有效組分結(jié)構(gòu)式或SMILES導(dǎo)入Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫(kù)[11]（http：//www.swisstargetprediction.ch/index.php），將所有中藥成分的潛在靶點(diǎn)收集獲取，并通過(guò)Excel去除重復(fù)值保留唯一值，得到12味中藥的潛在藥物靶點(diǎn)。

1.3 ?NPC疾病靶點(diǎn)篩選328914AB-F61E-4124-8E19-47EC583A36D2

通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)[12]（https：//www.genecards.org/），以“nasopharyngeal carcinoma”為檢索詞，獲得NPC疾病的相關(guān)靶點(diǎn)。

取材料與方法1.2中所有中藥成分的潛在靶點(diǎn)（以下簡(jiǎn)稱(chēng)中藥靶點(diǎn)）與NPC疾病靶點(diǎn)交集，獲取NPC中醫(yī)藥防治靶點(diǎn)（以下簡(jiǎn)稱(chēng)防治靶點(diǎn)），并繪制韋恩圖。

1.4 ?NPC中醫(yī)藥防治靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)（protein-protein interaction， PPI）的構(gòu)建

將防治靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)[13]（https：//cn.string-db.org/），設(shè)定中度可信度（即得分≥0.4分），獲取PPI。采用Cytoscape 3.8.1軟件對(duì)PPI進(jìn)行可視化，并進(jìn)行度值（Degree）、網(wǎng)絡(luò)中心性（Betweenness）、接近中心性（Closeness）算法拓?fù)浞治鼍劢筆PI。

1.5 ?基因本體（gene ontology， GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書(shū)（Kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）富集分析

采用R語(yǔ)言clusterProfiler[14]、org.Hs.eg.db包對(duì)防治靶點(diǎn)進(jìn)行GO、KEGG富集分析，根據(jù)P值排序情況，可視化前10位生物進(jìn)程（biological process，BP）、細(xì)胞組分（cellular component， CC）、分子功能（molecular function， MF）及KEGG富集分析結(jié)果，繪制氣泡圖。

2 結(jié)果

2.1 ?放療后氣陰虧虛型NPC方劑組方規(guī)律及基礎(chǔ)方探討

2.1.1 ?中藥頻次統(tǒng)計(jì)結(jié)果 ?本研究納入74首方劑，含中藥119味，采用“頻次統(tǒng)計(jì)”方法，得到頻次≥48次的中藥共12味。詳見(jiàn)表1。

2.1.2 ?NPC組方規(guī)律關(guān)聯(lián)分析結(jié)果 ?采用關(guān)聯(lián)規(guī)則分析法對(duì)NPC組分中藥使用頻次進(jìn)行分析，關(guān)聯(lián)分析網(wǎng)絡(luò)的支持度為25，置信度0.7，獲取常用中藥藥組共634組，其中有30組頻次≥42次，并繪制關(guān)聯(lián)分析網(wǎng)絡(luò)圖。詳見(jiàn)表2、圖1。

2.1.3 ?NPC處方聚類(lèi)新方分析結(jié)果 ?采用方劑Kemeans算法對(duì)NPC處方進(jìn)行聚類(lèi)分析，分5類(lèi)，得到NPC的新方核心組結(jié)果。核心組1：黃芪，白芍，瓜蔞皮，黃連，射干，皂角刺。核心組2：黃芪，黃連，牡丹皮，茯苓，山藥，鹽澤瀉。核心組3：白芍，鎖陽(yáng)，黃芪，石菖蒲，瓜萎皮，川芎。核心組4：郁金，鹽補(bǔ)骨脂，天花粉，鎖陽(yáng)，黃連，山慈菇。核心組5：牡丹皮，茯苓，山藥，酒山茱萸，鹽澤瀉，熟地黃。統(tǒng)計(jì)中藥藥物功效，以補(bǔ)虛類(lèi)及清熱類(lèi)為主，其次為化痰止咳類(lèi)中藥、活血化瘀類(lèi)中藥、利水滲濕類(lèi)中藥。詳見(jiàn)圖2。

2.2 ?NPC基礎(chǔ)方中藥靶點(diǎn)篩選

利用TCMSP和TCMID獲取基礎(chǔ)方中12味中藥有效成分，其中有效成分有黃芪20個(gè)，黃連14個(gè)，白芍13個(gè)，天花粉2個(gè)、鎖陽(yáng)25個(gè)、川芎7個(gè)、瓜蔞皮11個(gè)、射干17個(gè)、皂角刺11個(gè)、茯苓15個(gè)、補(bǔ)骨脂39個(gè)、蒼耳子11個(gè)。通過(guò)Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)獲取各有效成分結(jié)構(gòu)式或SMILES，于Swiss數(shù)據(jù)庫(kù)獲得12味中藥靶點(diǎn)共8243個(gè)，去除重復(fù)值后得到949個(gè)中藥靶點(diǎn)。

2.3 ?NPC疾病靶點(diǎn)及防治靶點(diǎn)篩選結(jié)果

通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)獲取NPC疾病基因靶點(diǎn)2106個(gè)，如TP53、MET、PIK3CA、PTEN、EGFR、CDKN2A等。

取949個(gè)中藥靶點(diǎn)與2106個(gè)NPC疾病靶點(diǎn)的交集，共獲得防治靶點(diǎn)291個(gè)，如MET、PIK3CA、EGFR、CTNNB1、BRAF、ERBB2等。韋恩圖可視化結(jié)果詳見(jiàn)圖3。

2.4 ?NPC中醫(yī)藥防治靶點(diǎn)PPI的構(gòu)建

通過(guò)STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建NPC中醫(yī)藥防靶點(diǎn)的PPI，采用Cytoscape軟件進(jìn)行Degree、Closeness、Betweenness拓?fù)浞治?，并進(jìn)行可視化。PPI中共291個(gè)節(jié)點(diǎn)，5634條邊。詳見(jiàn)圖4。采用Degree、Closeness、Betweenness算法對(duì)PPI進(jìn)行拓?fù)浜诵木W(wǎng)絡(luò)分析，根據(jù)評(píng)分大小依次排序，在度值核心網(wǎng)絡(luò)中AKT1（186分）>CTNNB（163分）>TNF（163分）等;在接近中心性網(wǎng)絡(luò)中AKT1（236.33分）>TNF（224.92）>CTNNB1（224.83）等;在網(wǎng)絡(luò)中心性網(wǎng)絡(luò)中AKT1（6217.20分）>TNF（4383.68分）>CTNNB1（3548.42）等，對(duì)前20位排序進(jìn)行打分。詳見(jiàn)表3。

2.5 ?NPC中藥防治靶點(diǎn)GO和KEGG富集分析結(jié)果

采用R語(yǔ)言對(duì)防治靶點(diǎn)進(jìn)行GO、KEGG富集分析，BP結(jié)果顯示291個(gè)防治靶點(diǎn)富集于3323個(gè)生物過(guò)程，主要與氧化應(yīng)激及絲氨酸/蘇氨酸激酶、MAP激酶活性的調(diào)節(jié)等有關(guān)。CC結(jié)果顯示291個(gè)防治靶點(diǎn)富集于132個(gè)細(xì)胞組分，主要與囊泡、膜區(qū)、受體復(fù)合物等細(xì)胞組分相關(guān);MF結(jié)果顯示291個(gè)防治靶點(diǎn)富集于249個(gè)分子功能，主要與蛋白酪氨酸激酶、絲氨酸/蘇氨酸激酶的活性及磷酸酶結(jié)合率有關(guān)。KEGG結(jié)果顯示291個(gè)防治靶點(diǎn)富集于172條信號(hào)通路，主要與PI3K-Akt、MAPK、HIF-1等信號(hào)通路等有關(guān)。詳見(jiàn)圖5-8。

3 討論

NPC疾病的中醫(yī)病名為“頏顙巖”，歸屬于中醫(yī)學(xué)“矢榮”“巖”“上石疽”等范疇[15]，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為癌腫的發(fā)生多因正氣虧虛，復(fù)染邪毒所致，所謂“正氣存內(nèi)、邪不可干”“正氣虛則成巖”[16]。田道法教授亦是基于此形成了成熟有效的NPC防治理論體系[17]，田老師認(rèn)為臨床上可據(jù)NPC不同時(shí)期分為5個(gè)階段，在發(fā)病初期多表現(xiàn)為氣血瘀阻，此時(shí)可以活血化瘀、化痰散結(jié)為治法，用山慈菇、土茯苓、黃連、白花蛇舌草等藥以攻毒為主，兼以黃芪、黨參扶正;當(dāng)邪毒入里，火毒困結(jié)，治療以瀉火解毒、化瘀消腫為宜，可選用法半夏、牡丹皮、貓爪草、菊花等;邪正相持階段治宜益氣滋陰、兼清余毒，常用黃芪、黨參、白芍、鎖陽(yáng)等扶正，兼以黃連、半枝蓮等藥清余毒;在放化療后常表現(xiàn)為氣陰兩傷，治宜益氣解毒、扶正散結(jié)，多用黃芪、鎖陽(yáng)、鹽補(bǔ)骨脂、菟絲子等扶助正氣，天花粉、枸杞子、玄參、麥冬類(lèi)滋養(yǎng)陰液;而NPC在病程晚期，表現(xiàn)為陽(yáng)衰毒播，中藥治宜益氣溫陽(yáng)、化瘀散結(jié)，常選益氣解毒方加人參、黨參、龍眼肉等補(bǔ)益之品。并于治療全程始終貫穿“益氣解毒”思路，并結(jié)合不同階段病機(jī)證候特點(diǎn)辨證處方?；诖怂邪l(fā)的醫(yī)院自制藥“鼻咽解毒膠囊”已于本院臨床使用數(shù)十載，價(jià)廉效驗(yàn)[18]。本研究擬探究放療后氣陰虧虛型NPC所適宜的中藥方劑，并尋找其配伍變化規(guī)律，對(duì)近1年半門(mén)診就診的放療后NPC中藥處方進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，得出常用配伍中藥，然作用機(jī)制尚不明確，為理想客觀化程度，并為辨證論治理論指導(dǎo)下的臨床加減提供基礎(chǔ)，精準(zhǔn)篩選放療后NPC疾病的中醫(yī)藥防治基礎(chǔ)方，并探討其作用機(jī)制具有重要意義。328914AB-F61E-4124-8E19-47EC583A36D2

整合本研究中方劑的頻次、關(guān)聯(lián)及新方結(jié)果，提出黃芪、黃連、白芍、天花粉、鎖陽(yáng)、川芎、瓜蔞皮、射干、皂角刺、茯苓、鹽補(bǔ)骨脂、炒蒼耳子12味藥為NPC放療后氣陰虧虛基礎(chǔ)方。12味藥性味多為辛、苦、甘，蓋辛可散邪、苦可降泄，甘可補(bǔ)益、和中之意。其中黃芪補(bǔ)氣，黃連清熱邪兼解余毒，兩藥配伍，扶正祛邪。白芍?jǐn)筷?，天花粉養(yǎng)陰生津利咽。茯苓滲濕利水，協(xié)助川芎通絡(luò)止頭痛，鎖陽(yáng)、補(bǔ)骨脂補(bǔ)腎壯陽(yáng)、扶助正氣補(bǔ)脾健胃。皂角刺、射干、蒼耳子合用通竅利咽止痛。合方標(biāo)本兼顧，共奏益氣補(bǔ)陰，扶正祛邪之功，為放療后氣陰虧虛型NPC的中醫(yī)藥防治提供了藥物治療方案。

為進(jìn)一步探討放療后氣陰虧虛型NPC基礎(chǔ)方的防治作用機(jī)制，本研究整合TCMSP、TCMID、PubChem等多個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選出基礎(chǔ)方的中藥靶點(diǎn)，通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)獲取NPC疾病靶點(diǎn)，取中藥靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)獲取共同的防治靶點(diǎn)，并對(duì)防治靶點(diǎn)進(jìn)行PPI、GO、KEGG作用機(jī)制探討，結(jié)果顯示共有291個(gè)防治靶點(diǎn)在放療后氣陰虧虛型NPC基礎(chǔ)方防治中發(fā)揮作用。結(jié)合PPI Degree、Closeness、Betweenness算法拓?fù)浞治鼋Y(jié)果提示，其防治作用主要與AKT1、CTNNB1、TNF、EGFR、STAT3、IL-6、VEGFA、HSP90AA1、HRAS、SRC、HIF1A、CASP3等靶點(diǎn)相關(guān)。CHEN等[19]研究發(fā)現(xiàn)NPC細(xì)胞中高VEGF水平與腫瘤侵襲和遷移之間存在關(guān)聯(lián)，NPC細(xì)胞分泌VEGF促進(jìn)了細(xì)胞侵襲、遷移和血管生成，并從機(jī)制上論述VEGF所介導(dǎo)的EMT標(biāo)記的增加促進(jìn)了NPC細(xì)胞的侵襲和遷移。YANG等[20]發(fā)現(xiàn)在NPC疾病中Akt是涉及控制細(xì)胞增殖、凋亡和癌變的信號(hào)分子和關(guān)鍵生存因子，這表明Akt1作為Akt家族成員，是參與腫瘤發(fā)展和進(jìn)展的信號(hào)通路，Akt1可以在體外和體內(nèi)抑制多個(gè)關(guān)鍵的致瘤過(guò)程。CHEN等[21]發(fā)現(xiàn)VEGFA在所有NPC細(xì)胞中的表達(dá)均有增強(qiáng)，因此可以將VEGFA做為靶點(diǎn)進(jìn)行治療。這恰從另一方面印證了本研究結(jié)果。

結(jié)合GO和KEGG富集分析結(jié)果顯示，其主要作用方式為：在受體復(fù)合物、囊泡、膜區(qū)、轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物等細(xì)胞組分，通過(guò)發(fā)揮絲氨酸/蘇氨酸激酶活性，酪氨酸激酶活性，磷酸酶結(jié)合等分子功能介導(dǎo)的PI3K-Akt、MAPK、HIF-1等信號(hào)通路，致肽基酪氨酸的改變，血管生成、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的正調(diào)控，小分子代謝調(diào)節(jié)的生物過(guò)程。有文獻(xiàn)報(bào)道，化香樹(shù)果序乙醇提取物可通過(guò)調(diào)控RAS/MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)人NPC細(xì)胞CNE1、CNE2發(fā)生methuosis死亡，導(dǎo)致細(xì)胞相互融合，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量空泡[22]。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)沉默HIF-1α可以抑制NPC細(xì)胞增殖、遷移[23]。正與本研究結(jié)果相符。

綜上所述，基于中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)對(duì)放療后氣陰虧虛型NPC中醫(yī)藥防治方劑進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘及規(guī)律分析，篩選出臨床基礎(chǔ)方，由黃芪、黃連、白芍、天花粉、鎖陽(yáng)、川芎、瓜蔞皮、射干、皂角刺、茯苓、鹽補(bǔ)骨脂、炒蒼耳子12味中藥組成，具有益氣補(bǔ)陰，扶正祛邪之功。而后對(duì)放療后氣陰虧虛型NPC篩選方進(jìn)行作用機(jī)制預(yù)測(cè)分析，得出其可能通過(guò)調(diào)控防治靶點(diǎn)AKT1、CTNNB1、TNF、EGFR、STAT3、IL6、VEGFA，以多組分、多功能、多途徑的形式，介導(dǎo)PI3K-Akt、MAPK、HIF-1等信號(hào)通路對(duì)放療后氣陰虧虛型NPC疾病發(fā)揮作用。本研究為中醫(yī)藥治療放療后氣陰虧虛型NPC提供了理論方法上的依據(jù)，對(duì)推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究及NPC中醫(yī)藥治療有重要意義。

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