余松平　詹宇亮　涂偉玲　孫漢俊　李彬

【摘要】 目的：探討丹紅注射液治療肺動脈高壓（pulmonary hypertension， PH）的分子生物學(xué)機(jī)制。方法：選擇雄性SD大鼠36只，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為Normal組、MCT組、MCT+BT組、MCT+BT+DHI組，每組9只。采用腹腔注射野百合堿法復(fù)制PH大鼠模型，采用右心導(dǎo)管法測定大鼠平均肺動脈壓，采用免疫組織化學(xué)方法測定肺組織中血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）的表達(dá)，HE染色觀測肺動脈平滑肌細(xì)胞組織病理學(xué)變化，運用蛋白免疫印跡（Western blot）方法檢測肺組織中細(xì)胞內(nèi)磷酸化絲/蘇氨酸激酶（Akt）、內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶（eNOS）蛋白的表達(dá)。結(jié)果：與Normal組比較，MCT組大鼠的mPAP明顯上升（P<0.05）;與MCT組比較，MCT+BT組、MCT+BT+DHI組大鼠的mPAP均明顯下降（P<0.05）;MCT+BT組與MCT+BT+DHI組大鼠的mPAP比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。與Normal組的WT比較，MCT組的WT明顯上升（P<0.05）;與MCT組比較，MCT+BT組、MCT+BT+DHI組的WT均明顯下降（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組的WT明顯下降（P<0.05）。與Normal組的VEGFA平均光密度值比較，MCT組的VEGFA 平均光密度值明顯上升（P<0.05）;與MCT組比較，MCT+BT組、MCT+BT+DHI組的VEGFA平均光密度值均明顯上升（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組VEGFA蛋白平均光密度值明顯上升（P<0.05）。與Normal組比較，MCT組Akt、eNOS蛋白的相對表達(dá)量均明顯下降（P<0.05）;與MCT組比較，MCT+BT組、MCT+BT+DHI組的Akt、eNOS蛋白的相對表達(dá)量均明顯上升（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組的Akt、eNOS蛋白的相對表達(dá)量均明顯上升（P<0.05）。結(jié)論：丹紅注射液不僅能夠改善PH模型大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)變化，促進(jìn)血清VEGFA的生成和釋放，并且能夠調(diào)節(jié)Akt、eNOS蛋白的表達(dá)，從而抑制肺血管重塑，調(diào)節(jié)肺動脈舒張功能。

【關(guān)鍵詞】 肺動脈高壓 丹紅注射液 VEGFA PI3K/Akt/eNOS信號通路

Effect and Mechanism of Danhong Injection on Pulmonary Hypertension in Rats/YU Songping， ZHAN Yuliang， TU Weiling， SUN Hanjun， LI Bin. //Medical Innovation of China， 2022， 19（14）： 0-015

[Abstract] Objective： To explore the molecular biological mechanism of Danhong Injection in the treatment of pulmonary hypertension （PH）. Method： A total of 36 male SD rats were randomly divided into Normal group， MCT group， MCT + BT group and MCT + BT + DHI group， with 9 rats in each group. The PH rat model was established by intraperitoneal injection of monocrotaline. The mean pulmonary artery pressure was measured by right cardiac catheterization. The expression of VEGFA in lung tissue was measured by immunohistochemical method. The histopathological changes of pulmonary artery smooth muscle cells were observed by HE staining. The expression of Akt and eNOS protein in lung tissue was detected by Western blot. Result： Compared with Normal group， mPAP in MCT group increased significantly （P<0.05）; compared with MCT group， mPAP in MCT + BT group and MCT + BT + DHI group decreased significantly （P<0.05）; there was no significant difference in mPAP between MCT + BT group and MCT + BT + DHI group （P>0.05）. Compared with WT in Normal group， WT in MCT group increased significantly （P<0.05）; compared with MCT group， WT in MCT + BT group and MCT + BT + DHI group decreased significantly （P<0.05）; compared with MCT + BT group， WT in MCT + BT + DHI group decreased significantly （P<0.05）. Compared with the average optical density of VEGFA of Normal group， the average optical density of VEGFA of MCT group increased significantly （P<0.05）; compared with MCT group， the average optical density of VEGFA in MCT + BT group and MCT + BT + DHI group increased significantly （P<0.05）; compared with MCT + BT group， the average optical density of VEGFA protein in MCT + BT + DHI group increased significantly （P<0.05）. Compared with Normal group， the relative expression of Akt and eNOS protein in MCT group decreased significantly （P<0.05）; compared with MCT group， the relative expression of Akt and eNOS protein in MCT + BT group and MCT + BT + DHI group increased significantly （P<0.05）; compared with MCT + BT group， the relative expression of Akt and eNOS protein in MCT + BT + DHI group increased significantly （P<0.05）. Conclusion： Danhong Injection can not only improve the pathological changes of pulmonary artery smooth muscle cells in PH model rats， promote the production and release of serum VEGFA， but also regulate the expressions of Akt and eNOS proteins， thereby inhibiting pulmonary vascular remodeling and regulating pulmonary artery diastolic function.

[Key words] Pulmonary hypertension Danhong Injection VEGFA PI3K/Akt/eNOS signaling pathway

First-author’s address： Jiangxi Provincial People’s Hospital， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.14.003

肺動脈高壓（pulmonary hypertension，PH）是以肺血管阻力進(jìn)行性增高為主要特征的一種臨床綜合征，主要由于通過肺循環(huán)的血流受阻，導(dǎo)致肺動脈壓力病理性升高，可造成右心衰竭[1]。PH患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)為，以海平面大氣壓為參照，在靜息狀態(tài)下，經(jīng)右心插入導(dǎo)管測得平均肺動脈壓（mean pulmonary artery pressure，mPAP）≥25 mmHg[2]。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，超過85%的PH患者由左心疾病、肺部疾病和/或缺氧引起[3]。目前應(yīng)用于臨床的抗PH藥物有波生坦（Bosentan，BT）、依前列醇（Epoprostenol，EP）等，雖然能夠調(diào)節(jié)肺動脈收縮功能，但對于靶向肺動脈重構(gòu)過程仍有待進(jìn)一步研究[4]。研究發(fā)現(xiàn)，丹紅注射液（Danhong Injection，DHI）可以通過多途徑作用于血管內(nèi)皮，促進(jìn)血管的生成和修復(fù)[5]。為進(jìn)一步探究DHI對肺動脈血管內(nèi)皮的靶向作用，本研究擬觀察DHI對PH大鼠模型肺動脈平滑肌細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)及血管內(nèi)皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA），細(xì)胞內(nèi)磷酸化絲/蘇氨酸激酶（Akt），內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表達(dá)的影響，探究DHI治療PH的可能作用機(jī)制?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 （1）實驗動物。雄性清潔級SD大鼠36只，平均（2.03±0.26）月齡，體重（220±20）g，由南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心提供[許可證號：SYXK（贛）2015-0001]。按照國家科委頒布的《實驗動物管理條例》進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。（2）藥物和試劑。波生坦片（生產(chǎn)廠家：加拿大Patheon Inc，批準(zhǔn)文號：注冊證號H20170013，規(guī)格：

125 mg/片）;丹紅注射液（生產(chǎn)廠家：山東丹紅制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20026866，規(guī)格：10 mL/支）;98%野百合堿（美國 Sigma），蘇木素-伊紅（HE）染液（美國Solarbio）;大鼠VEGFA單克隆抗體（英國Abcam）;抗Akt、eNOS抗體（美國Cell signaling）。（3）儀器。YP-200型壓力換能器（北京新航興業(yè)科貿(mào)有限公司）;MedlabU/4C生物信號釆集處理器（南京美易科技有限公司）;BX51光學(xué)顯微鏡（日本 Olympus 電子公司）;LEICACM-1950冰凍切片機(jī)（德國徠卡公司）;H3-18K臺式高速離心機(jī)離心力（德國Sigma 公司）;Western-blot儀（美國Bio-Rad公司）。

1.2 方法

1.2.1 模型建立 選擇雄性SD大鼠36只，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為Normal組、MCT組、MCT+BT組、MCT+BT+DHI組，每組9只。MCT給藥劑量（MCT組、MCT+BT組、MCT+BT+DHI組）按1 mL/200 g

比例一次性腹腔注射2%中鏈甘油三酯（MCT），Normal組按1 mL/200 g比例一次性腹腔注射0.9%氯化鈉注射液。常規(guī)飼養(yǎng)4周后，禁食、水24 h，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，備皮充分暴露右側(cè)頸部皮膚，常規(guī)消毒后進(jìn)行右側(cè)頸靜脈穿刺，穿刺成功后將注入適量肝素的導(dǎo)管沿頸外靜脈插入右心房，連接YP-200型壓力換能器，接入MedlabU/4C生物信號釆集處理器，觀察計算機(jī)反饋的圖像和波形，確認(rèn)導(dǎo)管經(jīng)右心室進(jìn)入肺動脈，待波形穩(wěn)定后，記錄大鼠mPAP數(shù)值，以波形穩(wěn)定狀態(tài)下mPAP≥25 mmHg為造模成功。

1.2.2 分組及給藥 MCT+BT組同時注射MCT?1 mL/200 g與BT 50 mg/（kg·d）、MCT+BT+DHI組同時注射MCT 1 mL/200 g、BT 50 mg/（kg·d）、DHI 50 mg/（kg·d），其他組（Normal組和MCT組）按同等劑量予以0.9%氯化鈉注射液腹腔注射，連續(xù)干預(yù)2周。

1.2.3 標(biāo)本采集及測定 （1）干預(yù)結(jié)束后，禁食、水24 h，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，右側(cè)頸靜脈穿刺后經(jīng)右心房向肺動脈送入導(dǎo)管，測得大鼠mPAP數(shù)值。放血法處死大鼠，迅速取出肺組織并分離肺動脈，用生理鹽水沖凈后再經(jīng)梯度酒精脫水，留取部分肺組織-80 ℃冰箱凍存，另外一部分肺組織和肺動脈用4%多聚甲醛固定后，依次進(jìn)行透明、浸蠟、包埋和制片。選擇較粗的肺動脈主干部位的切片進(jìn)行HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞組織病理學(xué)變化，并將肺動脈管壁厚度與血管外徑的橫截面拍攝并轉(zhuǎn)換為數(shù)字圖像，計算管壁厚度與血管外徑比值WT。（2）選取合適的肺組織切片，依次進(jìn)行脫蠟、修復(fù)、冷卻、沖洗和稀釋后，先加入5%正常山羊血清，室溫封閉條件下孵育30 min，然后進(jìn)行一抗孵育，去掉血清，滴加1︰1 000 VEGFA單克隆抗體，室溫4 ℃過夜再進(jìn)行二抗孵育，1 h后在光學(xué)顯微鏡下采集圖像，光鏡下血管周圍顯現(xiàn)棕黃色的顆粒物，則為陽性反應(yīng)。將采集的圖像導(dǎo)入Image-Pro Plus軟件中檢測平均光密度值（IOD/Area），以IOD/Area的大小表示VEGFA表達(dá)的水平。（3）稱取200 mg冰凍的肺組織，加入1 mL裂解液在4 ℃下充分勻漿，30 min后轉(zhuǎn)移充分裂解后的勻漿液至離心管中，在室溫4 ℃，以12 000 r/min離心10 min后得到上層清液，并測定蛋白含量。再以每孔20 μL進(jìn)行上樣，經(jīng)電泳2 h后轉(zhuǎn)至PVDF膜上進(jìn)行常規(guī)抗體孵育，待二抗孵育完成1 h后，于暗室中加入曝光液，充分曝光30 min后獲得底片顯影圖像，利用Adobe Photoshop CC軟件對掃描底片顯影圖像所得的條帶進(jìn)行灰度值分析，以β-actin蛋白條帶積分光密度值為參照，目標(biāo)蛋白的相對表達(dá)量P=目標(biāo)蛋白條帶積分光密度值/β-actin蛋白條帶積分光密度值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 利用SPSS 24.0對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠mPAP比較 與Normal組的mPAP（9.21±6.79）mmHg比較，MCT組的（31.28±10.37）mmHg明顯上升（P<0.05）;與MCT組的mPAP比較，MCT+BT組的（23.43±8.58）mmHg、MCT+BT+DHI組的（20.69±9.38）mmHg均明顯下降（P<0.05）;MCT+BT組與MCT+BT+DHI組大鼠的mPAP比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見圖1。

2.2 大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞病理變化 大鼠肺動脈血管典型病理變化見圖2。與Normal組的WT（17.43±4.93）%比較，MCT組的（38.24±7.52）%明顯上升（P<0.05）;與MCT組的WT比較，MCT+BT組的（25.33±5.14）%、MCT+BT+DHI組的（18.73±4.32）%均明顯下降（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組的WT明顯下降（P<0.05）。見圖3。

2.3 對大鼠肺組織VEGFA蛋白平均光密度值的影響 免疫組化法檢測結(jié)果顯示，與Normal組的VEGFA蛋白平均光密度值（0.86±0.06）比較，MCT組的（1.33±0.01）明顯上升（P<0.05）;與MCT組的VEGFA蛋白平均光密度值比較，MCT+BT組的（1.42±0.05）、MCT+BT+DHI組的（1.77±0.02）均明顯上升（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組VEGFA蛋白平均光密度值明顯上升（P<0.05）。見圖4。

2.4 對大鼠Akt、eNOS蛋白表達(dá)的影響 P-Akt、P-eNOS蛋白的相對表達(dá)量分別為（0.96±0.04）、（0.98±0.05），與Normal組比較，MCT組（0.63±0.03）、（0.62±0.06）均明顯下降（P<0.05）;與MCT組的P-Akt、P-eNOS蛋白的相對表達(dá)量比較，MCT+BT組（0.75±0.05）、（0.72±0.05），MCT+BT+DHI組（0.97±0.06）、（0.99±0.06）均明顯上升（P<0.05）;與MCT+BT組比較，MCT+BT+DHI組的Akt、eNOS蛋白的相對表達(dá)量均明顯上升（P<0.05）。見圖5、6。

3 討論

根據(jù)最新流行病學(xué)調(diào)查顯示，占全球1%的人口深受PH的困擾，尤其是在65歲以上人群中患病率高達(dá)5%～10%[6]，且PH預(yù)后極差，被稱為“心血管系統(tǒng)的惡性腫瘤”。關(guān)于引起PH的病因較為復(fù)雜，約有40種疾病的發(fā)生發(fā)展與PH相關(guān)，并且根據(jù)其臨床特征大致可分為五類，分別為與動脈相關(guān)的PH、由左心疾病導(dǎo)致的PH、由肺部疾病和/或低氧導(dǎo)致的PH、由慢性血栓栓塞導(dǎo)致的PH以及不明因素或多因素綜合作用導(dǎo)致的PH[1，7]。目前關(guān)于PH的發(fā)生發(fā)展，大多數(shù)研究認(rèn)為與肺動脈血管重構(gòu)有關(guān)，而引起肺動脈血管重構(gòu)的主要病理改變?yōu)榉蝿用}平滑肌細(xì)胞異常增殖和肥大。研究表明，肺動脈平滑肌細(xì)胞的增殖機(jī)制受多種生長因子受體水平改變及相關(guān)信號通路調(diào)節(jié)的影響[8-11]。

VEGFA是公認(rèn)的促進(jìn)血管生成的重要因子，參與并調(diào)節(jié)了胚胎的發(fā)育及血管的生成過程[12]。體外研究發(fā)現(xiàn)，VEGF的增加可減少人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)皮素-1（endothelin-1，ET-1）表達(dá)，從而抑制肺血管重塑[13]。PI3K是一種磷脂酰肌醇酶，Akt是一種絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，eNOS是一種一氧化氮合酶，近年來研究發(fā)現(xiàn)，PI3K可通過激活下游的Akt調(diào)控eNOS的活性，而血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的被激活的eNOS作用于L-精氨酸，在分子氧的參與下可合成具有調(diào)節(jié)肺血管的內(nèi)皮源性血管舒張因子一氧化氮（nitric oxide，NO）[14]。

目前應(yīng)用于臨床的抗PH藥物波生坦通過拮抗內(nèi)皮素受體A/B（endothelial receptor A/B，ETR-A/B），阻止ET-1與肺動脈平滑肌細(xì)胞ETR-A/B結(jié)合，使ET-1無法產(chǎn)生強(qiáng)烈的收縮血管作用，進(jìn)而改善患者血流動力學(xué)參數(shù)[15]。盡管波生坦在抗PH的作用上療效確切，但有研究表明，聯(lián)合波生坦的多靶向治療較單藥治療更能改善患者預(yù)后[16]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，DHI可以調(diào)節(jié)多個疾病相關(guān)的途徑，實現(xiàn)促血管新生、改善血管內(nèi)皮功能、改善血管血流、保護(hù)血管內(nèi)皮等過程[17]。DHI含有五種活性成分，分別為丹參素、原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B和羥基紅花黃色素A，研究發(fā)現(xiàn)，這五種活性成分均可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)VEGAF的表達(dá)，并且丹參素和羥基紅花黃色素A促進(jìn)新生血管活性較顯著[18]。還有研究發(fā)現(xiàn)，DHI可通過激活心肌細(xì)胞PI3K/Akt信號通路，抑制心肌缺血-再灌注過程中心肌細(xì)胞的凋亡[19]。但目前關(guān)于DHI激活肺組織PI3K/Akt信號通路發(fā)揮肺動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)的報道較少。

本研究通過復(fù)制大鼠PH模型，應(yīng)用BT和DHI干預(yù)2周后，大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞病理變化改善明顯;檢測VEGFA的含量及PI3K、Akt、eNOS蛋白的表達(dá)，結(jié)果顯示BT+DHI能夠促進(jìn)血清VEGFA的生成和釋放，抑制肺血管重塑，調(diào)節(jié)肺動脈舒張功能，抑制肺血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，進(jìn)而改善肺動脈平滑肌細(xì)胞病理變化。另外，本次實驗僅觀測了BT+DHI調(diào)節(jié)肺動脈血管內(nèi)皮個別因子，雖然反映了BT與DHI聯(lián)合的多靶向調(diào)節(jié)作用，但有關(guān)BT與DHI聯(lián)合應(yīng)用是否會增加單獨應(yīng)用BT不良反應(yīng)的發(fā)生率仍有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會肺栓塞與肺血管病學(xué)組，中國醫(yī)師協(xié)會呼吸醫(yī)師分會肺栓塞與肺血管病工作委員會，全國肺栓塞與肺血管病防治協(xié)作組，等.中國肺動脈高壓診斷與治療指南（2021版）[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2021，101（1）：11-51.

[2] GALIè N，HUMBERT M，VACHIERY J L，et al.2015 ESC/ERS Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension： The Joint Task Force for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Hypertension of the European Society of Cardiology （ESC） and the European Respiratory Society （ERS）： Endorsed by： Association for European Paediatric and Congenital Cardiology （AEPC），International Society for Heart and Lung Transplantation （ISHLT）[J].Eur Heart J，2016，37（1）：67-119.

[3] STRANGE G，PLAYFORD D，STEWART S，et al.Pulmonary hypertension：prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort[J].Heart，2012，98（24）：1805-1811.

[4]梁寧，杜冠華，抗肺動脈高壓藥物研究進(jìn)展[J].中國藥理學(xué)通報，2019，35（7）：902-906.

[5]陳寅螢，李華，吳萍，等.丹紅注射液治療心腦血管疾病的藥理作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2021，27（15）：188-196.

[6] HOEPER M M，HUMBERT M，SOUZA R，et al.A global view of pulmonary hypertension[J].Lancet Respir Med，2016，4（4）：306-322.

[7] SWISTON J R，JOHNSON S R，GRANTON J T.Factors that prognosticate mortality in idiopathic pulmonary arterial hypertension： a systematic review of the literature[J].Respir Med，2010，104（11）：1588-1607.

[8] YAMAMURA A，NAYEEM M J，AL M A，et al.Platelet-derived growth factor up-regulates Ca2+-sensing receptors in idiopathic pulmonary arterial hypertension[J].FASEB J，2019，33（6）：7363-7374.

[9] ZEHENDNER C M，VALASARAJAN C，WERNER A，et al.

Long noncoding RNA TYKRIL plays a role in pulmonary hypertension via the p53-mediated regulation of PDGFRβ[J].Am J Respir Crit Care Med，2020，202（10）：1445-1457.

[10] XIAO Y，PENG H，HONG C，et al.PDGF promotes the warburg effect in pulmonary arterial smooth muscle cells via activation of the PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signaling pathway[J].Cell Physiol Biochem，2017，42（4）：1603-1613.

[11] YAO Y，LI H，DA X，et al.SUMOylation of Vps34 by SUMO1 promotes phenotypic switching of vascular smooth muscle cells by activating autophagy in pulmonary arterial hypertension[J].Pulm Pharmacol Ther，2019，1（7）：38-49.

[12] TAMMELA T，ENHOLM B，ALITALO K，et al.The biology of vascular endothelial growth factors[J].Cardiovasc Res，2005，65（3）：550-563.

[13] STAR G P，GIOVINAZZO M，LAMOUREUX E，et al.Effects of vascular endothelial growth factor on endothelin-1 production by human lung microvascular endothelial cells in vitro[J].Life Sci，2014，118（2）：191-194.

[14] ZHENG Z Q，YU S P，ZHANG W，et al.Genistein attenuates monocrotaline-induced pulmonary arterial hypertension in rats by activating PI3K/Akt/ENOS signaling[J].Histol Histopathol，2017，32（1）：35-41.

[15]陳波，白波，李廣洪，等.波生坦治療新生兒缺氧性肺動脈高壓的臨床觀察[J].中國藥房，2020，31（10）：1247-1252.

[16]劉冰洋，熊長明.波生坦治療成人肺動脈高壓研究進(jìn)展[J].臨床藥物治療雜志，2018，16（2）：13-17.

[17]付長庚，劉龍濤，王躍飛，等.丹紅注射液臨床應(yīng)用中國專家共識[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018，38（4）：389-397.

[18]衛(wèi)國，殷英，段佳林，等.丹紅注射液中5種主要活性成分促血管新生作用研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2017，17（17）：3230-3233，3249.

[19]王佩，張玉東.丹紅注射液對大鼠心肌缺血-再灌注損傷中細(xì)胞凋亡的影響[J].江蘇醫(yī)藥，2012，38（2）：143-145.

（收稿日期：2021-10-18） （本文編輯：占匯娟）