王雪丹， 席靖雅， 田繼遠(yuǎn)， 陳 容??， 于 娟,3， 來敬廣， 王 蘇， 楊桂朋,3

(1. 中國海洋大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院， 海洋化學(xué)理論與工程技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 山東 青島 266100； 2. 中國海洋大學(xué) 深海圈層與地球系統(tǒng)前沿科學(xué)中心， 山東 青島 266100；3. 青島海洋科學(xué)與技術(shù)試點(diǎn)國家實(shí)驗(yàn)室 海洋生態(tài)與環(huán)境科學(xué)功能實(shí)驗(yàn)室， 山東 青島 266237； 4. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院， 山東 青島 266109)

全球塑料產(chǎn)量從20世紀(jì)50年代的200萬t增加到2019年的3.68億t，預(yù)計產(chǎn)量會逐年增加[1]，約有5%～10%的廢棄塑料會經(jīng)過各種途徑排放到海洋中，塑料垃圾引起的海洋污染問題是近十年來備受關(guān)注的熱點(diǎn)問題[2-4]。微塑料(粒徑 < 5 mm)是分布廣泛且降解緩慢的一種新型污染物，來源于化妝品和塑料工業(yè)生產(chǎn)的塑料顆粒(初級微塑料)[5-6]或較大塑料在環(huán)境條件下的破碎(次級微塑料)[7]。微塑料會直接影響浮游植物的生長、光合作用，改變其群落結(jié)構(gòu)[8]。此外，微塑料與浮游植物之間的相互作用會干擾浮游動物的攝食，進(jìn)而對更高營養(yǎng)級的濾食性生物產(chǎn)生潛在的威脅[8]。目前已在鯨類[9-10]、龜類[11]、魚類[12-14]、蝦貝類[15-16]以及深海生物[17-18]體內(nèi)發(fā)現(xiàn)塑料顆粒的存在，甚至在人體胎盤[19]和血液[20]中也發(fā)現(xiàn)了塑料顆粒。除此之外，微塑料的比表面積大、具有較強(qiáng)的吸附性，可以富集水環(huán)境中的重金屬、持久性有機(jī)污染物等有毒物質(zhì)，進(jìn)而對海洋生物造成不可逆的化學(xué)傷害[21]。

生源可揮發(fā)氣體二甲基硫是參與硫生物地球化學(xué)循環(huán)的重要物質(zhì)，DMS對全球溫室效應(yīng)具有負(fù)反饋?zhàn)饔肹22]。DMS的前體物質(zhì)-二甲基巰基丙酸內(nèi)鹽通過DMSP裂解酶1:1裂解產(chǎn)生DMS和丙烯酸鹽[23]。海洋微藻是DMSP的主要生產(chǎn)者[24]，微塑料對微藻的潛在危害可能會對全球生源硫循環(huán)產(chǎn)生間接影響。微藻作為海洋初級生產(chǎn)者，是檢測微塑料對海洋環(huán)境毒害作用的最佳選擇[25]。微塑料對微藻的生長、光合作用的負(fù)面影響已有相關(guān)報道[25]。微塑料粒徑越小、表面電荷越正、增塑劑含量越高、濃度越高對海洋微藻的損傷越大[26-28]。目前，微塑料對微藻產(chǎn)生海洋活性氣體-揮發(fā)性鹵代烴的影響已有報道[29]，對DMS的研究報道較少[30]。Yu等[30]指出，微塑料抑制海洋微藻的生長，進(jìn)而降低微藻DMS和DMSP的產(chǎn)生。

硅藻作為黃東海優(yōu)勢藻，是產(chǎn)DMSP的主要海洋微藻[31]。本論文選用旋鏈角毛藻暴露在不同濃度的聚苯乙烯(Polystyrene，PS)微塑料下，以及中肋骨條藻暴露在不同濃度的聚乙烯(Polyethylene，PE)微塑料下，研究微藻的生長、光合色素含量以及DMS、DMSP產(chǎn)量的變化，可以為探究不同類型和粒徑的微塑料對浮游植物釋放甲基硫化物的影響以及全球生源硫循環(huán)的變化提供參考。

1 材料與方法

1.1 海洋微藻

本文選用兩種硅藻-旋鏈角毛藻(Chaetoceroscurvisetus)和中肋骨條藻(Skeletonemacostatum)作為研究對象，藻種由中國海洋大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院海洋界面化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。實(shí)驗(yàn)海水取自東海，經(jīng)0.45 μm醋酸纖維濾膜過濾，121 ℃高壓滅菌20 min后使用。在溫度為(20±1)℃、光照強(qiáng)度為4 000 Lux、光周期為12 L∶12 D的條件下，f/2培養(yǎng)基培養(yǎng)至指數(shù)生長期后待用[32]。

1.2 微塑料

80 nm PS微塑料(2.5%，w/v)，購自天津賽爾群科技有限責(zé)任公司。將PS微塑料用滅菌的milli-Q水逐級稀釋至1.5、15、150、1 500 mg·L-1四種濃度的儲備液備用。PE微塑料購自Sigma公司，粒徑范圍為10～30 μm(平均粒徑：20 μm)。使用前用超聲波破碎儀(JY 92-IIN，寧波新芝生物科技)400 W下超聲20 min，保證微塑料均勻分散在f/2培養(yǎng)基中。

1.3 旋鏈角毛藻16 d培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

PS微塑料設(shè)置5個濃度梯度，分別為0、0.05、0.5、5、50 mg·L-1。以初始濃度約為10×104cells·mL-1將指數(shù)生長期的旋鏈角毛藻接入300 mL含有上述 5種濃度PS微塑料的f/2培養(yǎng)基中。玻璃無菌瓶密封培養(yǎng)16 d。實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個平行，避免頂空。每天按時搖勻，使用無菌注射器每2天在上午9:00取樣，分別測定細(xì)胞密度、葉綠素a(Chlorophylla，Chla)、葉綠素c(Chlorophyllc，Chlc)、類胡蘿卜素(Carotenoid，Car)、DMS和DMSP的濃度。

1.4 中肋骨條藻96 h暴露實(shí)驗(yàn)

PE微塑料設(shè)置5種 ，分別為0、12.5、25、50和100 mg·L-1。以初始濃度約為50×104cells·mL-1將指數(shù)生長期的中肋骨條藻接入150 mL含有上述 5種濃度PE微塑料的f/2培養(yǎng)基中，實(shí)驗(yàn)設(shè)置2個平行，每天按時搖勻，玻璃無菌瓶密封培養(yǎng)。分別在24、48、72和96 h取樣，并測定細(xì)胞密度、Chla、Chlc、Car、DMS和DMSP的濃度。

1.5 細(xì)胞密度、生長抑制率、比生長率和半數(shù)有效濃度EC50

用血球計數(shù)板在光學(xué)顯微鏡(CX31RTSF，Olympus)下測定微藻細(xì)胞密度。生長抑制率(IR)按照公式：IR= (1-T/C)×100% 計算，其中，T和C分別指實(shí)驗(yàn)組和對照組的細(xì)胞濃度。比生長率(μ)按以下公式計算：μ=(lnCn- lnC0)/(Tn-T0)，式中Cn和C0分別代表第n天和第0天的細(xì)胞密度，Tn和T0分別代表培養(yǎng)第n天和第0天。用概率單位法得到微藻的半數(shù)有效濃度EC50。

1.6 Chl a、Chl c和Car濃度的測定

取10 mL藻液過濾至0.7 μm Whatman GF/F濾膜上，用90%丙酮4 ℃ 避光冷藏24 h萃取。將提取液在4 000 r·min-1下離心10 min，取上清液用紫外可見分光光度計(UV-2550，日本島津)分別測定480、510、632、652、665和750 nm波長下的吸光度，Chla濃度采用Porra[33]的方法計算，Chlc濃度采用Ritchie[34]的方法計算，Car濃度采用Strickland和Parsons[35]的方法計算，計算公式如下：

Chla= 16.92 × (A665nm-A750nm) - 8.54 × (A652nm-A750nm)。

Chlc= - 6.01 × (A665nm-A750nm) + 28.82 × (A632nm-A750nm)。

Car = 7.6 × (A480nm-A750nm) - 1.49 × (A510nm-A750nm)。

1.7 DMS和DMSP濃度的測定

DMS參照楊桂朋等[36]吹掃捕集-冷阱富集前處理技術(shù)進(jìn)行測定。用乙醇配置一系列已知濃度的DMS標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)濃度和峰面積的對應(yīng)關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，DMS濃度由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到[37]。最小檢出限為0.15 ng S，標(biāo)準(zhǔn)偏差<5%。

DMSP在強(qiáng)堿(pH ≥ 13)條件下堿解產(chǎn)生DMS，向2 mL藻液中加入200 μL 10 mol·L-1KOH溶液，4 ℃冷藏24 h，DMSP以1∶1比例堿解為DMS，由測定的DMS濃度間接獲得DMSP濃度[36]。

1.8 熒光標(biāo)記微塑料對微藻細(xì)胞的影響

為探究微塑料對微藻的作用機(jī)理，將指數(shù)生長期的旋鏈角毛藻暴露于0、0.05、0.5、5、50 mg·L-1的80 nm PS熒光微塑料(購自天津賽爾群科技有限責(zé)任公司)，培養(yǎng)7 d后用熒光顯微鏡(RVL-100-G，ECHO)觀察并拍照，激發(fā)和發(fā)射波長分別為488和530 nm。

1.9 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，用數(shù)據(jù)分析軟件Excel處理數(shù)據(jù)，用origin 2018作圖，用SPSS 25.0分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 PS微塑料對旋鏈角毛藻的影響

2.1.1 細(xì)胞密度、比生長率和生長抑制率 0和0.05 mg·L-1PS微塑料暴露下旋鏈角毛藻在2～6 d處于指數(shù)生長期，在第6天細(xì)胞密度達(dá)到峰值，隨后緩慢降低；0.5和5 mg·L-1PS微塑料下旋鏈角毛藻在2～4 d處于指數(shù)生長期，在第4天細(xì)胞密度達(dá)到峰值，隨后緩慢降低；PS濃度為50 mg·L-1時，細(xì)胞密度顯著低于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料的細(xì)胞密度(P<0.01)(見圖1(A))。50 mg·L-1PS微塑料暴露的旋鏈角毛藻的生長抑制率隨培養(yǎng)時間的延長而逐漸增大，暴露2～16 d的生長抑制率變化范圍為41.4%～93.2%(見圖1(C))。0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料下，旋鏈角毛藻的比生長率和生長抑制率兩兩之間均無顯著性差異(P> 0.05)。50 mg·L-1PS微塑料暴露下，旋鏈角毛藻的比生長率和生長抑制率顯著低于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料的比生長率和生長抑制率(P< 0.01)(見圖1(B)、(C))。

圖1 不同濃度聚苯乙烯微塑料暴露下的旋鏈角毛藻細(xì)胞 密度(A)、比生長率(B)和生長抑制率(C)的變化

2.1.2 單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度 0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料暴露下，旋鏈角毛藻的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度均迅速下降達(dá)到最低值后趨于平穩(wěn)(見圖2)。與對照組相比，0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料暴露下的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度均無顯著性差異(P>0.05)。50 mg·L-1PS微塑料暴露下，單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度在第4 天開始逐漸升高，在第12 天達(dá)到高值后稍微降低(見圖2)。50 mg·L-1PS微塑料暴露下10～16 d的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度顯著高于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料的相應(yīng)光合色素濃度(P< 0.05)(見圖2)。

圖2 不同濃度聚苯乙烯微塑料暴露下的旋鏈角毛藻單細(xì)胞 Chl a (A)、Chl c (B)和Car (C)的濃度變化

2.1.3 單細(xì)胞DMS濃度 0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料暴露下，旋鏈角毛藻的單細(xì)胞DMS濃度在0～4 d逐漸降低，4～16 d下降達(dá)到最低值后趨于平穩(wěn)(見圖3)。0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料暴露下的單細(xì)胞DMS濃度兩兩之間無顯著性差異(P> 0.05)。50 mg·L-1PS微塑料暴露下的旋鏈角毛藻單細(xì)胞DMS濃度在0～6 d快速降低，6～12 d逐漸升高至4.9×10-2fmol·cell-1，隨后降低(見圖3)。50 mg·L-1PS微塑料暴露下旋鏈角毛藻的單細(xì)胞DMS濃度顯著高于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料的單細(xì)胞DMS濃度(P< 0.05)(見圖3)。

圖3 不同濃度聚苯乙烯微塑料暴露下的 旋鏈角毛藻單細(xì)胞DMS的濃度變化

2.1.4 熒光PS微塑料對旋鏈角毛藻影響的觀察 與對照組(見圖4A)相比，0.05、0.5、 5和50 mg·L-1PS微塑料暴露下的細(xì)胞內(nèi)有微弱的熒光(見圖4B-4I)。0.5、5和50 mg·L-1PS微塑料暴露下，藻細(xì)胞脫落的角毛附著大量的熒光PS微塑料(見圖4C、4D、4E和4I)。

2.2 PE微塑料對中肋骨條藻的影響

2.2.1 細(xì)胞密度和生長抑制率 0、12.5、25、50和100 mg·L-1PE微塑料暴露的中肋骨條藻細(xì)胞密度在96 h內(nèi)隨培養(yǎng)時間延長而增大(見圖5(A))。12.5和25 mg·L-1PE微塑料暴露48 h的細(xì)胞密度顯著高于100 mg·L-1PE微塑料濃度(P<0.05)。12.5 mg·L-1PE微塑料暴露48 h的細(xì)胞密度顯著高于25 mg·L-1的細(xì)胞密度(P>0.05)(見圖5(A))。50和100 mg·L-1PE微塑料暴露48 h對中肋骨條藻的生長抑制率最大，分別為36.1%和40.0%(見圖5(B))。PE微塑料對中肋骨條藻生長的24和96 h·EC50分別為632、378 mg·L-1(見表1)。

表1 不同濃度聚乙烯微塑料暴露96 h，中肋骨條 藻細(xì)胞密度的半數(shù)有效濃度EC50

2.2.2 單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度 0、12.5、25和50 mg·L-1PE微塑料暴露96 h的中肋骨條藻單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度兩兩之間無顯著性差異(P> 0.05)(見圖6)。100 mg·L-1PE微塑料暴露96 h的中肋骨條藻單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度隨時間延長先升高，在48 h時達(dá)到峰值，隨后降低(見圖6)。100 mg·L-1PE微塑料暴露48 h的中肋骨條藻單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度顯著高于0、12.5、25和50 mg·L-1PE微塑料的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度(P< 0.05)(見圖6)。

2.2.3 單細(xì)胞DMS 和DMSP濃度 0、12.5、25、50和100 mg·L-1PE微塑料暴露96 h的中肋骨條藻單細(xì)胞DMS濃度兩兩之間無顯著性差異(P> 0.05)(見圖7(A))。100 mg·L-1PE微塑料暴露48 h時的單細(xì)胞DMS濃度顯著高于對照組(P< 0.05)(見圖7(A))。12.5、25和50 mg·L-1PE微塑料暴露的單細(xì)胞DMSP濃度呈現(xiàn)先增加后降低的變化趨勢(見圖7(B))。0、12.5、25、50和100 mg·L-1PE微塑料暴露96 h的中肋骨條藻單細(xì)胞DMSP濃度兩兩之間無顯著性差異(P> 0.05)(見圖7(B))。

3 討論

3.1 微塑料對海洋微藻生長的影響

微塑料對海洋微藻的生長抑制作用與微藻的種類[38]和生長階段[39]、微塑料的類型[40]和粒徑[41]以及微塑料添加劑[42]有關(guān)。我們的結(jié)果顯示，PS微塑料濃度≤5 mg·L-1時，對旋鏈角毛藻的生長無明顯抑制作用；50 mg·L-1PS微塑料明顯抑制旋鏈角毛藻的生長。Mao等[39]和Prata等[43]的研究結(jié)果與我們的旋鏈角毛藻的結(jié)果相近。Mao等[39]研究表明，0.1和1 μm的PS微塑料濃度≥50 mg·L-1明顯抑制滯后期和指數(shù)生長初期小球藻的生長和光合作用。Prata等[43]研究發(fā)現(xiàn)，41.5 mg·L-1的1～5 μm的微塑料聚合物對朱氏四爿藻生長無顯著性影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，濃度<50 mg·L-1的PE微塑料暴露24～48 h，會刺激中肋骨條藻細(xì)胞密度升高。Canniff等[44]研究結(jié)果表明130 mg·L-1的63～75 μm PE微塑料暴露5 d的近頭狀尖胞藻(Raphidocelissubcapitata)細(xì)胞密度明顯高于對照組。Wu等[45]研究表明5 mg·L-1的1 μm PS微塑料暴露96 h時，能夠顯著促進(jìn)銅綠微囊藻的生長。低濃度微塑料促進(jìn)微藻生長的原因可能與微塑料和微藻的團(tuán)聚作用有關(guān)[44]。與本文結(jié)果相近，Zhao等[46]研究表明，100 mg·L-1的1 μm PVC微塑料暴露48 h的米氏凱倫藻(Kareniamikimotoi)的生長抑制率為45.8%，生長抑制率隨時間延長而減小。結(jié)果顯示，微塑料暴露使微藻的生長抑制率隨時間延長先升高后降低，與Ansari等[47]的結(jié)果吻合。

圖4 0 mg·L-1 (A)、0.05 mg·L-1 (B)、0.5 mg·L-1 (C)、5 mg·L-1 (D、E)和50 mg·L-1 (F、G、H和I) 熒光聚苯乙烯微塑料暴露7 d時旋鏈角毛藻的熒光顯微照片

圖5 不同濃度聚乙烯微塑料暴露96 h的中肋骨條藻細(xì)胞密度(A)和生長抑制率(B)的變化

圖6 不同濃度聚乙烯微塑料暴露下的中肋骨條藻單細(xì)胞 Chl a (A)、Chl c (B)和Car (C)的濃度變化

圖7 不同濃度聚乙烯微塑料暴露96 h的中肋骨條 藻單細(xì)胞DMS(A)和單細(xì)胞DMSP(B)的濃度變化

利用不同PE微塑料濃度的生長抑制率估算了PE微塑料不同暴露時間下中肋骨條藻生長的EC50。24和96 h·EC50分別為632 mg·L-1(1.6×108個/L)、387 mg·L-1(9.6×107個/L)。PS微塑料對旋鏈角毛藻的生長抑制影響未采用對數(shù)濃度，所以我們根據(jù)PS微塑料對旋鏈角毛藻暴露96 h的生長抑制率數(shù)據(jù)，估算得到96 h·EC50為41 mg·L-1。因此，與PE微塑料對中肋骨條藻相比，PS微塑料對旋鏈角毛藻生長的影響更大。Bergami等[48]研究表明0.07 μm PS-NH2(氨基改性的PS)微塑料暴露14 d下特氏杜氏藻(Dunaliellatertiolecta)的EC50為12.97 mg·L-1。與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相差較大，可能原因與暴露時間、微塑料的類型和粒徑有關(guān)。Song等[49]在韓國金海灣檢測出粒徑≥20 μm的微塑料濃度為88個/L。本研究所用的微塑料濃度遠(yuǎn)高于現(xiàn)場環(huán)境的濃度，僅做了96 h的EC50，因此在將結(jié)果推到現(xiàn)實(shí)環(huán)境時還需考慮濃度和暴露時間的影響。

Navarro等[50]認(rèn)為細(xì)胞壁中的納米尺度孔是細(xì)胞內(nèi)化(cellular internalization)的途徑。微塑料可能會透過微藻細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。Yan等[51]發(fā)現(xiàn)85 nm PS微塑料通過胞吞作用(Endocytosis)進(jìn)入萊茵衣藻細(xì)胞，而140 nm PS微塑料被萊茵衣藻排斥在細(xì)胞外。因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的微塑料數(shù)量與微塑料濃度和粒徑有關(guān)[52]，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的微塑料可能對細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器和細(xì)胞質(zhì)進(jìn)一步產(chǎn)生影響。

3.2 微塑料對海洋微藻光合色素濃度的影響

低濃度PS微塑料(≤5 mg·L-1)對旋鏈角毛藻單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度無明顯影響。50 mg·L-1PS微塑料暴露的旋鏈角毛藻單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度顯著高于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料，其原因是細(xì)胞密度減小。微塑料濃度≤50 mg·L-1的1 μm PE 96 h暴露下中肋骨條藻的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度無明顯變化。Yang等[53]研究表明，10 mg·L-1的80 nm PS微塑料影響蛋白核小球藻的氨基酰-tRNA合成酶的基因表達(dá)，抑制細(xì)胞生長；50 mg·L-1PS微塑料引起微藻細(xì)胞DNA損傷，增加細(xì)胞凋亡，并證實(shí)高濃度微塑料會抑制微藻細(xì)胞的光合作用。與此不同，Zhang等[54]研究表明50 mg·L-1的1 mm PVC微塑料對中肋骨條藻的生長和光合作用無明顯影響。因此，微藻的生長和光合作用與微塑料的類型、濃度和粒徑有關(guān)。

3.3 微塑料對海洋微藻DMS和DMSP產(chǎn)生的影響

目前關(guān)于微塑料對微藻DMSP和DMS的影響研究較少。結(jié)果顯示，50 mg·L-1PS微塑料下的單細(xì)胞DMS濃度顯著高于0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料，其原因可能與50 mg·L-1PS微塑料顯著降低細(xì)胞密度有關(guān)。與對照組相比，12.5、25、50和100 mg·L-1PE 微塑料暴露96 h的中肋骨條藻的單細(xì)胞DMS和DMSP濃度均無顯著性差異。陳曉華等[55]認(rèn)為微塑料通過團(tuán)聚作用、物理吸附等對生物體造成可逆的物理損傷；自然環(huán)境下微塑料釋放增塑劑和添加劑以及富集海水中的污染物，從而對海洋微藻造成不可逆的化學(xué)損傷；納米級微塑料可以透過膜蛋白或者胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞體內(nèi)，直接抑制微藻細(xì)胞的生長和色素含量。微塑料進(jìn)一步對微藻DMS和DMSP的產(chǎn)量可能會產(chǎn)生間接影響。Huang等[56]發(fā)現(xiàn)裸甲藻暴露于0.1 nm、1 μm和100 μm的微塑料時，活性氧含量增加，對微藻細(xì)胞膜造成損傷。Sunda等[57]研究發(fā)現(xiàn)，DMSP可以作為羥基自由基的有效細(xì)胞清除劑，DMS和丙烯酸鹽也可以構(gòu)成抗氧化系統(tǒng)以清除自由基。微塑料對微藻產(chǎn)生DMSP和釋放DMS影響的作用機(jī)制尚不明確，今后將進(jìn)一步研究微塑料對微藻的抗氧化系統(tǒng)的影響及其分子作用機(jī)制。

4 結(jié)論

(1) 微塑料對微藻的生長抑制作用與微塑料類型、粒徑、濃度、暴露時間有關(guān)。與0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料相比，50 mg·L-1的80 nm PS微塑料顯著抑制微藻生長。50和100 mg·L-1PE微塑料暴露48 h對中肋骨條藻的生長抑制率達(dá)到最大，分別為36.1%和40.0%。隨培養(yǎng)時間的延長，高濃度PE微塑料對中肋骨條藻的抑制作用減弱。

(2) 高濃度PS和PE微塑料暴露下旋鏈角毛藻和中肋骨條藻的單細(xì)胞Chla、Chlc和Car濃度顯著高于其他低濃度組。

(3) 與0、0.05、0.5和5 mg·L-1PS微塑料相比，50 mg·L-1PS暴露下的旋鏈角毛藻的單細(xì)胞DMS濃度顯著升高。