亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        固態(tài)發(fā)酵對(duì)金針菇菌渣品質(zhì)改良及發(fā)酵品貯藏條件的探究

        2022-06-27 03:44:38楊家軍宋春雷王辰汝杜振宇劉國(guó)芳
        糧食與飼料工業(yè) 2022年3期
        關(guān)鍵詞:菌渣金針菇枯草

        楊家軍,陳 明,宋春雷,王辰汝,杜振宇,劉國(guó)芳

        (江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇 句容 212400)

        我國(guó)食用菌栽培發(fā)展迅猛,目前已成為世界食用菌生產(chǎn)第一大國(guó)。工廠化栽培中,食用菌經(jīng)采收后,其培養(yǎng)料即成菌渣。每生產(chǎn)1 kg食用菌,會(huì)產(chǎn)生0.6 kg菌渣[1]。菌渣是秸稈、木屑等原料培養(yǎng)出食用菌的剩余物,也稱菌糠。菌渣中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分:如微量元素、礦物質(zhì)、菌體蛋白質(zhì)、多種代謝產(chǎn)物及未被充分利用的有機(jī)質(zhì),是較好的堆肥原料[2]。但其通常也含有害物質(zhì),如:青霉菌、白曲霉菌、黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵、鈣、汞、鉛、銅、鎘等。如直接用于飼喂動(dòng)物,會(huì)阻礙動(dòng)物生長(zhǎng),降低生產(chǎn)性能[3-4]。因此,菌渣需適當(dāng)處理后,才能更好地飼喂動(dòng)物[5]。

        益生菌為動(dòng)物體內(nèi)固有的微生物,主要包括芽孢桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌、丁酸梭菌、放線菌等,具有提高機(jī)體免疫力、抗氧化水平、優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu)、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和生產(chǎn)性能等功效[6]。益生菌可被用于常規(guī)飼料的發(fā)酵,也可被用于青貯飼料如玉米秸稈、黑麥草、苜蓿、三葉草、紫云英等的發(fā)酵。物料發(fā)酵后,不僅改善了口感,還提高了可吸收蛋白質(zhì)、糖、氨基酸的含量,易被機(jī)體吸收。在物料發(fā)酵時(shí),添加適當(dāng)?shù)囊嫔?,還可起到脫毒、分解轉(zhuǎn)化的作用[7]。

        發(fā)酵制品生產(chǎn)后,如果貯藏方式選擇不當(dāng),活菌數(shù)量會(huì)顯著降低,且易發(fā)生霉變。畜禽采食后,造成采食量下降,生長(zhǎng)速度減慢,飼料報(bào)酬率降低,甚至中毒,給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的危害[3]。

        本試驗(yàn)選擇枯草芽孢桿菌和乳酸桿菌作為發(fā)酵菌種,添加到金針菇菌渣中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵,檢測(cè)經(jīng)固態(tài)發(fā)酵后樣品中消化酶活性、益生菌活菌數(shù)量、霉菌數(shù)量、磷元素含量、水分、黃曲霉毒素B1含量;評(píng)價(jià)金針菇菌渣固態(tài)發(fā)酵品質(zhì);同時(shí)探究4種不同貯藏條件對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品活菌數(shù)量和霉變的影響,篩選出最佳貯藏方式,為金針菇菌渣的資源化和飼料化利用提供參考依據(jù)。

        1 材料方法

        1.1 材料

        1.1.1試驗(yàn)菌種與菌渣

        枯草芽孢桿菌和唾液乳桿菌菌種由江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院益生菌教研組提供,專利保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏編號(hào)為CGMCC17718和14246;金針菇菌渣由南京金萬(wàn)辰生物科技有限公司提供。

        1.1.2培養(yǎng)基制備

        普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂、孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基、乳酸菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)基(MRS),分別用于測(cè)定枯草芽孢桿菌數(shù)、霉菌數(shù)以及乳酸菌數(shù)。培養(yǎng)基按配方制備后,高壓滅菌,制備成平板,冷卻凝固后,倒置放入4 ℃冰箱,備用。

        1.2 方法

        1.2.1固態(tài)發(fā)酵

        使用枯草芽孢桿菌和唾液乳桿菌混合菌種,進(jìn)行金針菇菌渣固態(tài)發(fā)酵。菌渣與菌種的接種比例為10∶6,發(fā)酵溫度34 ℃,需氧發(fā)酵20 h。發(fā)酵完成后,稱量發(fā)酵產(chǎn)品2 g,加入18 ml無(wú)菌生理鹽水,充分混勻,備測(cè)。

        1.2.2貯藏方式

        稱取100 g經(jīng)固態(tài)發(fā)酵的金針菇菌渣,裝入自封袋。根據(jù)飼料貯藏的3種因素:光照、溫度、密閉,設(shè)計(jì)4種貯藏方式:①室溫、不透氣、避光,②室溫、不透氣、不避光,③室溫、透氣、避光,④低溫、不透氣、避光。分用有孔灰色編織袋包裝設(shè)置為透氣包裝,無(wú)孔不透氣自封袋包裝設(shè)置為不透氣包裝。每個(gè)處理制作6個(gè)平行樣。樣品稱量后,按照4種方式進(jìn)行貯藏。未發(fā)酵的金針菇菌渣采用室溫、透氣、不避光保存,作為對(duì)照。在樣品貯藏7、15和30 d,分別取2 g樣品,加入18 ml無(wú)菌生理鹽水,充分混勻。備測(cè)。

        1.2.3檢測(cè)方法

        1.2.3.1水分和消化酶檢測(cè)

        使用水分測(cè)定儀測(cè)定水分。蛋白酶、脂肪酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所,按照說(shuō)明書(shū),進(jìn)行各消化酶測(cè)定。

        1.2.3.2益生菌活菌數(shù)和霉菌計(jì)數(shù)

        將樣品充分混勻后,分別取1 ml混懸液,加入9 ml生理鹽水,進(jìn)行倍比稀釋,至106倍稀釋后取100 μl,分別涂布在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂、MRS瓊脂、孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基上,用于計(jì)數(shù)枯草芽孢桿菌、唾液乳桿菌活菌數(shù)量和霉菌數(shù)量。

        1.2.3.3固態(tài)發(fā)酵后益生菌形態(tài)鑒定

        分別取純培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、唾液乳桿菌和固態(tài)發(fā)酵計(jì)數(shù)時(shí)培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、唾液乳桿菌,先肉眼觀察菌種活化與計(jì)數(shù)培養(yǎng)所得細(xì)菌的菌落,2種情況是否存在差異;后用接種針,挑取菌落,采用革蘭氏染色,等待干燥、固定后,鏡檢,觀察形態(tài)差異[8]??莶菅挎邨U菌是革蘭氏陽(yáng)性菌,染色鏡檢呈紫色,桿狀;乳酸菌是革蘭氏陽(yáng)性菌,染色鏡檢呈紫色,短桿稍細(xì)。

        1.2.3.4鈣、磷和黃曲霉毒素B1測(cè)定

        鈣測(cè)定采用鈣測(cè)試盒微板法,磷測(cè)定采用磷測(cè)試盒比色法,試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所;黃曲霉毒素B1采用ELISA法檢測(cè)[9],試劑盒購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司,按照說(shuō)明書(shū),進(jìn)行測(cè)定。

        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        所有數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,Duncan氏法進(jìn)行多重比較,以“P<0.05”作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

        2 結(jié)果

        2.1 固態(tài)發(fā)酵對(duì)金針菇菌渣營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響

        菌渣經(jīng)固態(tài)發(fā)酵后,營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生了顯著變化(見(jiàn)表1)。水分顯著下降,由發(fā)酵前52.02%降至46.11%(P<0.05)。發(fā)酵后,枯草芽孢桿菌和唾液乳桿菌活菌數(shù)量分別達(dá)到2.1×109CFU/g和1.8×109CFU/g(P<0.01);蛋白酶、脂肪酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶活力水平顯著升高(P<0.01),分別達(dá)到165.19、10.68、472.09、215.09 U/g。霉菌顯著下降(P<0.05),由發(fā)酵前1.8×108CFU/g降低至9.8×106CFU/g(P<0.05)。黃曲霉毒素B1含量下降至0.043 pg/g(P<0.01)。鈣含量顯著下降,由19.93 mol/g降低至12.27 mol/g(P<0.05);磷含量有下降趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05)。

        表1 營(yíng)養(yǎng)成分變化

        2.2 固態(tài)發(fā)酵后益生菌形態(tài)鑒定

        比較2種途徑下枯草芽孢桿菌的菌落形態(tài),發(fā)現(xiàn)菌落形態(tài)一致,為干燥、褶皺、中型菌落。打開(kāi)平皿蓋,有特殊的蠟燭氣味。經(jīng)革蘭氏染色,均為藍(lán)紫色短桿狀,中間含有濃染芽孢體,如圖1所示。

        圖1 枯草芽孢桿菌菌落形態(tài)與革蘭氏染色鏡檢結(jié)果(100×)

        同時(shí)比較了唾液乳桿菌純培養(yǎng)與固態(tài)發(fā)酵計(jì)數(shù)時(shí)唾液乳桿菌的形態(tài),結(jié)果表明,菌落形態(tài)一致,為針尖狀、濕潤(rùn)、小型菌落。革蘭氏染色呈藍(lán)紫色,球狀和短桿狀,如圖2所示。

        圖2 唾液乳桿菌菌落形態(tài)與革蘭氏染色鏡檢結(jié)果(100×)

        2.3 不同貯藏條件對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品品質(zhì)的影響

        采用4種不同的方式進(jìn)行貯藏。發(fā)酵產(chǎn)品在采取方式①貯藏3 d后,與其他組相比,水分顯著下降(P<0.05),唾液乳桿菌和枯草桿菌數(shù)量無(wú)顯著變化(P>0.05)。方式③水分極顯著下降(P<0.01),唾液乳桿菌和枯草桿菌數(shù)量無(wú)顯著變化(P>0.05),霉菌數(shù)量顯著下降(P<0.05)。方式④唾液乳桿菌和霉菌數(shù)量都顯著下降(P<0.05),見(jiàn)表2。黃曲霉毒素B1含量,方式②最高(P<0.01),其他3個(gè)方式之間沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。

        表2 貯藏3 d后4種貯藏方式下的微生物變化情況

        發(fā)酵產(chǎn)品貯藏7 d后,結(jié)果見(jiàn)表3。與其他貯藏相比,方式①水分仍保持下降(P<0.05),室溫保存的3個(gè)方式唾液乳桿菌和枯草桿菌數(shù)量無(wú)顯著變化(P>0.05),與貯藏3 d相比,呈下降趨勢(shì)。方式③水分極顯著下降(P<0.01),唾液乳桿菌和枯草桿菌數(shù)量皆無(wú)顯著變化(P>0.05),而霉菌數(shù)量與其他組相比,顯著下降(P<0.05)。方式④乳桿菌和霉菌數(shù)量,皆為顯著降低(P<0.05)。黃曲霉毒素B1含量:方式②組最高(P<0.01),方式①高于方式③和④組(P<0.01),方式③最低(P<0.01)。

        表3 貯藏7 d時(shí)4種貯藏方式下的微生物變化情況

        發(fā)酵產(chǎn)品經(jīng)貯藏15 d后,結(jié)果如表4所示。方式①水分與7 d相比下降了2個(gè)百分點(diǎn);唾液乳桿菌和枯草桿菌數(shù)量無(wú)顯著變化(P<0.05)。方式③水分極顯著低于其他組(P<0.01),乳桿菌和枯草芽孢桿菌數(shù)量沒(méi)有發(fā)生顯著變化(P>0.05),霉菌數(shù)量顯著低于其他組(P<0.05)。常溫保存的3個(gè)組,益生菌活菌數(shù)量與7 d相比,呈一定上升。方式④唾液乳桿菌、枯草芽孢桿菌和霉菌數(shù)量顯著低于其他組(P<0.05)。方式②黃曲霉毒素B1含量最高(P<0.01)。

        表4 貯藏15 d后4種貯藏方式下的微生物變化情況

        發(fā)酵樣品貯藏30 d后,結(jié)果如表5所示。方式①水分顯著低于方式②組;與貯藏15 d相比,無(wú)變化。唾液乳桿菌數(shù)量顯著高于方式②(P<0.05)。方式③水分最低(P<0.01),枯草芽孢桿菌數(shù)量顯著高于其他組(P<0.05),霉菌數(shù)量顯著低于方式①和②(P<0.05)。方式④唾液乳桿菌、枯草芽孢桿菌和霉菌數(shù)量與方式①和②相比,顯著下降(P<0.05)。方式①、③和④黃曲霉毒素B1含量極顯著低于方式②(P<0.01)。

        表5 30天時(shí)四種貯藏方式下的三種菌的數(shù)據(jù)

        3 討論

        新鮮金針菇菌渣含水量高,容易霉變。故常使用固態(tài)發(fā)酵的方法進(jìn)行處理,從而減少水分,便于烘干。在選擇發(fā)酵菌種時(shí),使用具有產(chǎn)消化酶的益生菌。益生菌利用金針菇菌渣中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生消化酶,降解金針菇菌渣中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),供自身生長(zhǎng)繁殖需要;同時(shí)益生菌被動(dòng)物采食后,進(jìn)入消化道,其生長(zhǎng)繁殖時(shí),所產(chǎn)生的消化酶可幫助機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化,促進(jìn)吸收。此外選擇抗逆性強(qiáng)的菌株,菌體能夠在不利生存的環(huán)境下,仍能生存,提高了活菌數(shù)量,可增強(qiáng)發(fā)酵效果。

        本研究選擇了2株獲得國(guó)家專利保藏的菌株:枯草芽孢桿菌和唾液乳桿菌,具有產(chǎn)消化酶和抗逆性強(qiáng)的特征[10-11]。在固態(tài)發(fā)酵完成后,產(chǎn)品中水分與發(fā)酵前相比顯著下降,說(shuō)明固態(tài)發(fā)酵時(shí),產(chǎn)生熱量,使水分部分散發(fā),便于貯藏[12]。由于益生菌繁殖生長(zhǎng),發(fā)酵后產(chǎn)品中的蛋白酶、脂肪酶活力、α-淀粉酶、β-淀粉酶活力水平升高。對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品中這2株益生菌與原菌種進(jìn)行比較,經(jīng)過(guò)菌落形態(tài)和細(xì)菌形態(tài)觀察,證明發(fā)酵產(chǎn)品中為原添加的2株益生菌生長(zhǎng)繁殖而形成。發(fā)酵產(chǎn)品中鈣含量顯著下降,而磷元素含量沒(méi)有顯著變化。

        本著便于實(shí)際生產(chǎn)為目的,設(shè)計(jì)了4種不同的貯藏方式。結(jié)果表明,在貯藏7 d內(nèi),益生菌可以利用金針菇中殘留的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),繼續(xù)緩慢生長(zhǎng)。貯藏時(shí)間為3~7 d,各貯藏處理組中,益生菌活菌數(shù)量呈現(xiàn)一定程度的下降。細(xì)菌的適宜生長(zhǎng)溫度為37℃,而室溫為20~25℃。室溫下不利于細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖,菌體繁殖和死亡達(dá)不到平衡,此時(shí)益生菌繁殖生長(zhǎng)數(shù)量低于死亡數(shù)量,因此結(jié)果顯示兩種益生菌活菌數(shù)量下降。在7 d后,細(xì)菌通過(guò)降低自身代謝,適應(yīng)了貯藏環(huán)境,繁殖數(shù)量超過(guò)死亡數(shù)量,活菌數(shù)量上升。尤其是抗逆性強(qiáng)的芽孢桿菌[13]。

        霉菌生長(zhǎng)時(shí)受到水分的影響,在一定范圍內(nèi),水分越大,霉菌生長(zhǎng)越快;同時(shí)霉菌生長(zhǎng)受到益生菌生長(zhǎng)的抑制。在發(fā)酵起始過(guò)程,2種益生菌的接種數(shù)量大,快速的利用菌渣中的營(yíng)養(yǎng)成分,不斷生長(zhǎng)繁殖。益生菌產(chǎn)生的活性物質(zhì),可有效分解菌渣原有的霉菌毒素,降低發(fā)酵菌渣中毒素含量,與先前報(bào)道一致[14]。另外,從微生態(tài)角度分析,在發(fā)酵過(guò)程中,大量的益生菌迅速建立優(yōu)勢(shì)菌群,明顯抑制霉菌的生長(zhǎng)繁殖,有效減少了霉菌毒素的產(chǎn)生。這兩方面,皆有利于發(fā)酵產(chǎn)品后期的貯藏[15]。

        方式①水分散失慢,易滋生霉菌,方式②霉菌一直維持較高數(shù)量,黃曲霉毒素B1含量高于其他3個(gè)組。方式③益生菌不斷緩慢生長(zhǎng),在貯藏15 d后,隨著發(fā)酵產(chǎn)品貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),益生菌生長(zhǎng)繁殖與死亡數(shù)量基本維持平衡,數(shù)量穩(wěn)定。益生菌長(zhǎng)期處于優(yōu)勢(shì)菌,抑制霉菌生長(zhǎng),使得霉菌數(shù)量持續(xù)下降,菌渣中的霉菌毒素進(jìn)一步分解,含量進(jìn)一步下降。結(jié)果表明:黃曲霉毒素B1隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),濃度出現(xiàn)下降,且低于飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[16]。益生菌發(fā)酵不斷產(chǎn)熱,加上透氣,逐漸減少發(fā)酵產(chǎn)品中的水分,使得水分下降至7.69%,遠(yuǎn)低于國(guó)家飼料標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍。方式④是發(fā)酵食品常用的貯藏方式,該方式由于溫度低,可有效降低發(fā)酵品中的霉菌數(shù)量和黃曲霉毒素B1含量;但4℃同樣不利于益生菌的生長(zhǎng)繁殖,益生菌生長(zhǎng)繁殖數(shù)量低于死亡數(shù)量,導(dǎo)致益生菌活菌數(shù)量明顯下降,以唾液乳桿菌最為顯著,因此方式④不建議采用。

        4 小結(jié)

        本研究使用枯草芽孢桿菌和唾液乳桿菌對(duì)金針菇菌渣進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵,改善了金針菇菌渣的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì),提高了益生菌活菌數(shù)量,降低了霉菌數(shù)量和黃曲霉毒素B1含量,有效提高了消化酶活力,降低了金屬鈣的含量。采用室溫、透氣、避光對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品進(jìn)行貯藏,可以有效維持益生菌活菌數(shù)量,30 d內(nèi)仍達(dá)到109CFU/g,超過(guò)國(guó)家發(fā)酵飼料標(biāo)準(zhǔn)。水分降至7.69%,可抑制霉菌生長(zhǎng)。霉菌含量和黃曲霉毒素含量均符合國(guó)家飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求。

        猜你喜歡
        菌渣金針菇枯草
        抗生素菌渣(危廢)減量化現(xiàn)狀、存在問(wèn)題及對(duì)策
        枯草芽孢桿菌在養(yǎng)雞生產(chǎn)中的應(yīng)用
        湖南飼料(2021年4期)2021-10-13 07:32:46
        歲末
        我國(guó)抗生素菌渣資源化研究新進(jìn)展
        微生物菌渣管理分析
        抗生素制藥菌渣的處理技術(shù)探究
        化工管理(2017年29期)2017-03-03 09:19:22
        金針菇家常吃法
        金針菇轉(zhuǎn)潮期管理七要點(diǎn)
        野生與人工栽培的金針菇營(yíng)養(yǎng)成分比較
        食藥用菌(2016年6期)2016-03-01 03:24:30
        草坪枯草層的成因和控制技術(shù)
        无码精品人妻一区二区三区漫画| 草莓视频在线观看无码免费| 国内精品久久人妻互换| 视频在线观看免费一区二区| 把女邻居弄到潮喷的性经历| 国产精品一区二区暴白浆| 大肥婆老熟女一区二区精品| 亚洲女人的天堂网av| 欧美一区二区三区视频在线观看| 国产成人无码一二三区视频| 国产熟女自拍视频网站| 加勒比精品视频在线播放| 久久精品欧美日韩精品| 久久伊人影院| 视频福利一区二区三区| 国产毛片黄片一区二区三区| 九九精品国产亚洲av日韩| 91国在线啪精品一区| 女同舌吻互慰一区二区| 97久人人做人人妻人人玩精品| 精品国产三级在线观看| 中文无码免费在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲中文字幕无码一久久区| 国产人成无码中文字幕| 国产自产在线视频一区| 男吃奶玩乳尖高潮视频| 孩交精品xxxx视频视频| 黄色大片一区二区中文字幕| 在线观看一区二区中文字幕| 白丝兔女郎m开腿sm调教室| 欧洲中文字幕| 亚洲天堂线上免费av| 亚洲素人av在线观看| 日本久久视频在线观看 | 亚洲日韩中文字幕无码一区| 麻豆精品久久久久久久99蜜桃| av网址大全在线播放| 亚洲夫妻性生活免费视频 | 久久这里只精品国产99热| 日本一区二区日韩在线|