【摘要】 目的：探討慢性阻塞性肺疾?。–OPD）患者檢驗(yàn)血清克拉拉細(xì)胞分泌蛋白（CC16）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）水平的意義及其與肺功能間的相關(guān)性。方法：選取2020年1-12月漢川市第二人民醫(yī)院收治的55例COPD患者為研究組;選取同期行健康體檢的55例健康者為對照組。比較兩組的肺功能指標(biāo)[1秒全力呼氣量在全部呼氣量中的占比（FEV1/FVC%）及1秒全力呼氣容積所占的預(yù)計(jì)百分值（FEV1%pred）]、CC16及TGF-β1水平。比較研究組不同肺功能下的血清CC16水平及TGF-β1水平。分析研究組血清CC16水平及TGF-β1水平與肺功能指標(biāo)間的相關(guān)性。結(jié)果：研究組FEV1/FVC%水平及FEV1%pred水平均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組血清CC16水平低于對照組，TGF-β1水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。輕度組CC16水平高于中度組，且中度組高于重度組，重度組高于極重度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。輕度組TGF-β1水平低于中度組，且中度組低于重度組，重度組低于極重度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。血清CC16水平與FEV1%pred和FEV1/FVC%均呈正相關(guān)，血清TGF-β1水平與FEV1%pred和FEV1/FVC%均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：相比健康人群，COPD患者的血清CC16水平顯著降低，血清TGF-β1水平顯著升高;且血清CC16水平與COPD患者的肺功能之間呈正相關(guān)，血清TGF-β1水平與COPD患者的肺功能之間呈負(fù)相關(guān)。檢驗(yàn)血清CC16水平及TGF-β1水平可以輔助臨床醫(yī)生診斷COPD，為其提供更多的參考數(shù)據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 慢性阻塞性肺疾病 肺功能 CC16 TGF-β1

Significance of Testing Serum CC16， TGF-β1 Levels and Their Correlation with Lung Function in Patients with COPD/TONG Xiongbing. //Medical Innovation of China， 2022， 19（15）： -122

[Abstract] Objective： To investigate the significance of testing clara cell secretory protein （CC16）， transforming growth factor-β1 （TGF-β1） levels and their correlation with lung function in patients with chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. Method： A total of 55 COPD patients admitted to the Second People’s Hospital of Hanchuan City from January to December 2020 were selected as the study group， 55 healthy subjects who underwent physical examination at the same period were selected as the control group. Lung function indexes [ratio of full expiratory volume in 1 second to total expiratory volume （FEV1/FVC%） and estimated percentage of full expiratory volume in 1 second （FEV1%pred）]， CC16 and TGF-β1 levels were compared between two groups. The levels of serum CC16 and TGF-β1 in different lung function groups were compared. Correlation between serum CC16 level， TGF-β1 level and lung function index in study group were analyzed. Result： The levels of FEV1/FVC% and FEV1%pred in the study group were lower than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The level of serum CC16 in the study group was lower than that in the control group， and the level of TGF-β1 in the study group was higher than that in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. CC16 level in the mild group was higher than that in the moderate group， CC16 level in the moderate group was higher than that in the severe group， CC16 level in the severe group was higher than that in the very severe group， the differences were statistically significant （P<0.05）. TGF-β1 level in the mild group was lower than that in the moderate group， TGF-β1 level in the moderate group was lower than that in the severe group， TGF-β1 level in the severe group was lower than that in very severe group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Serum CC16 level was positively correlated with FEV1%pred and FEV1/FVC% ， and serum TGF-β1 level was negatively correlated with FEV1%pred and FEV1/FVC% （P<0.05）. Conclusion： Compared with the healthy population， serum CC16 levels were significantly lower in COPD patients， and a positive correlation occurred between serum CC16 levels and lung function in COPD patients， and a negative correlation between serum TGF-β1 levels and lung function in COPD patients. Examination of serum CC16 levels and TGF-β1 levels assists clinicians in the diagnosis of COPD， to provide more reference data.

[Key words] Chronic obstructive pulmonary disease Lung function CC16 TGF-β1

First-author’s address： The Second People’s Hospital of Hanchuan City， Hubei Province， Hanchuan 431602， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.15.029

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是臨床中較為常見的一種呼吸系統(tǒng)疾病，通常簡稱為慢阻肺[1]。COPD的主要特征表現(xiàn)為持續(xù)性的相關(guān)呼吸道癥狀及因?yàn)榉闻莺?或氣道異常而導(dǎo)致出現(xiàn)明顯性的氣流受限[2]。目前臨床中診斷COPD的金標(biāo)準(zhǔn)為肺功能檢查，其相關(guān)指標(biāo)：第一秒用力呼氣量占所有呼氣量的比例（FEV1/FVC%）及第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值的百分比（FEV1%pred），是臨床中對疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行評估的常用參考指標(biāo)[3]。在臨床診治COPD的過程中，肺功能檢查發(fā)揮著十分重要的作用，但是其在臨床實(shí)踐應(yīng)用過程中并不十分理想[4]。但是，COPD患者的肺組織損害程度較低時，并不會表現(xiàn)出明顯的肺功能指標(biāo)異常及呼吸困難[5]。因此，臨床中十分迫切的期望發(fā)現(xiàn)其相關(guān)輔助標(biāo)志物，這對患者診斷及病情評估都具有重要意義[6]。對COPD進(jìn)行及時、準(zhǔn)確的診斷，并及時治療，能夠最大程度使患者的肺功能得到有效康復(fù)[7]。臨床中長時間以來的一項(xiàng)研究焦點(diǎn)就是血液標(biāo)志物。克拉拉細(xì)胞分泌蛋白（clara cell secretory protein，CC16）主要是由機(jī)體氣道遠(yuǎn)端中的Clara細(xì)胞（一種無纖毛柱狀上皮細(xì)胞）分泌并產(chǎn)生，其十分容易在機(jī)體的血液循環(huán)中被檢測到，并表現(xiàn)出明顯的肺組織特異性;在COPD的整個發(fā)生及發(fā)展過程中，CC16的相關(guān)生物活性，如抗纖維化及抗炎等發(fā)揮著十分重要的保護(hù)作用[8]。轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）屬于多功能的一種細(xì)胞因子，能夠?qū)Χ喾N不同的生物過程產(chǎn)生誘導(dǎo)作用，可以在產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)、修復(fù)組織、細(xì)胞分化及生長等生物活動行為過程中發(fā)揮重要作用[9-10]。本研究選取2020年1-12月漢川市第二人民醫(yī)院收治的55例COPD患者為研究組;選取同期行健康體檢55例健康者為對照組;分析血清CC16及TGF-β1在COPD患者中的表達(dá)情況及與肺功能之間的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年1-12月本院收治的55例COPD患者為研究組;選取同期行健康體檢的55例健康者為對照組。研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合慢性阻塞性肺疾病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[11];（2）年齡40～80歲;（3）在入院前未接受相關(guān)治療及干預(yù);（4）可以正常溝通、交流;（5）精神正常。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：非過敏體質(zhì)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并支氣管哮喘;（2）合并其他相關(guān)的慢性氣道疾病，如嗜酸性粒細(xì)胞性支氣管炎等;（3）嚴(yán)重的臟器功能障礙及不全;（4）合并腫瘤;（5）有藥物濫用史。該研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，入組人員均自愿配合研究。

1.2 方法 （1）收集血液樣本，所有入組人員均抽取12 h空腹靜脈血液3～5 mL，在抗凝試管或無促凝試管中保管，在室溫環(huán)境條件下靜置1～2 h，常規(guī)離心，3 000 r/min，離心時間15 min。完成離心之后，使用微量吸量槍將上層的血清液進(jìn)行吸取后放置在試管中保存，冷凍待檢。檢驗(yàn)血清CC16水平及TGF-β1水平，在進(jìn)行檢驗(yàn)之前，將所有冷凍血清在室溫環(huán)境下放置30 min左右。檢測此次研究的細(xì)胞因子主要步驟包括：稀釋標(biāo)準(zhǔn)品、加樣、溫育、洗滌、加酶、顯色、終止及測定。檢驗(yàn)方法為酶聯(lián)免疫（ELISA）法。其主要的檢測原理為：在酶標(biāo)板上包被抗體，使得樣品與標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體與抗原發(fā)生互相結(jié)合，然后將生物素化的抗體加入，形成免疫復(fù)合物。然后在其中加入標(biāo)記過氧化物酶的抗體，得到抗體復(fù)合物（A-B-C法）。然后將TMB底物加入，顯示藍(lán)色，然后再將TMB終止液加入其中，通過酸化作用，會使得顏色變成黃色。樣品中的抗原含量與顏色深淺表示之間存在關(guān)系，呈正相關(guān)性。在450 nm波長位置對吸光度的OD值水平進(jìn)行檢測，最后對標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行繪制，得到最終檢測濃度水平。嚴(yán)格依據(jù)說明書來實(shí)施相關(guān)操作。（2）測定肺功能，儀器為肺功能檢測儀，在坐位狀態(tài)下對患者肺功能進(jìn)行檢測，包括1秒全力呼氣量在全部呼氣量中的占比（FEV1/FVC%）及1秒全力呼氣容積所占的預(yù)計(jì)百分值（FEV1%pred）。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）比較兩組肺功能指標(biāo)，包括FEV1/FVC%水平及FEV1%pred水平。（2）比較兩組血清CC16水平及TGF-β1水平。（3）比較研究組不同肺功能患者的血清CC16水平及TGF-β1水平。依據(jù)COPD患者的氣流受限情況來進(jìn)行分級，主要分為四組：FEV1%pred≥70%且<80%為輕度組、FEV1%pred≥50%且<70%為中度組、FEV1%pred≥30%且<50%為重度組、FEV1%pred<30%為極重度組。（4）分析研究組血清CC16水平及TGF-β1水平與肺功能指標(biāo)間的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn);采用Pearson相關(guān)分析研究組血清CC16水平及TGF-β1水平與肺功能指標(biāo)間的相關(guān)性。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 研究組男29例，女26例;年齡45～80歲，平均（61.7±1.6）歲。對照組男28例，女27例;年齡45～80歲，平均（61.4±1.3）歲。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組肺功能指標(biāo)比較 研究組FEV1/FVC%水平及FEV1%pred水平均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.3 兩組血清CC16水平及TGF-β1水平比較 研究組血清CC16水平低于對照組，TGF-β1水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.4 研究組不同肺功能患者的血清CC16水平及TGF-β1水平比較 輕度組CC16水平高于中度組，且中度組高于重度組，重度組高于極重度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=19.021、18.626、20.425，P<0.05）。輕度組TGF-β1水平低于中度組，且中度組低于重度組，重度組低于極重度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=17.225、19.335、19.735，P<0.05）。見表3。

2.5 研究組血清CC16水平及TGF-β1水平與肺功能指標(biāo)間的相關(guān)性 血清CC16水平與FEV1%pred和FEV1/FVC%均呈正相關(guān)，血清TGF-β1水平與FEV1%pred和FEV1/FVC%均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。見表4。

3 討論

COPD主要會累及機(jī)體的肺臟，但其不僅僅會誘發(fā)出現(xiàn)相關(guān)肺部癥狀，同時也會表現(xiàn)出肺外的相關(guān)不良效應(yīng)[12]。COPD在臨床中的病例數(shù)較多，且患者預(yù)后較差，會加重患者家庭及社會的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，成為十分重要的一個公共衛(wèi)生問題[13]。在肺實(shí)質(zhì)內(nèi)及肺外周氣道中，明顯浸潤的炎癥細(xì)胞會導(dǎo)致持續(xù)性的慢性炎癥，進(jìn)而使得氣道壁受損及修復(fù)這一過程循環(huán)反復(fù)性發(fā)生，使得肺組織結(jié)構(gòu)及氣道發(fā)生重塑，增加膠原含量、形成瘢痕組織，導(dǎo)致氣腔狹窄，引發(fā)氣道固定性的阻塞[14]。COPD中十分重要的一個病理特點(diǎn)為氣道重塑;一旦發(fā)生氣道重塑會導(dǎo)致降低肺部的彈性及回縮力，還會阻塞氣道，且在氣流受限中發(fā)揮著十分重要的作用[15]。

本次研究結(jié)果提示，研究組血清CC16水平低于對照組（P<0.05）。CC16的主要分泌細(xì)胞為在呼吸道中的Clara細(xì)胞，同時在泌尿道上皮細(xì)胞及人鼻上皮細(xì)胞中也會少量分泌[16]。在急性刺激下，如脂多糖、氯氣及香煙煙霧等會使得血清CC16水平顯著升高;暴露在臭氧條件下時同樣也會導(dǎo)致血清CC16水平升高，且能夠受到吸入丙酸氟替卡松的抑制[17]。合并機(jī)械通氣的重癥COPD患者，其明顯升高的血CC16水平，提示著可能發(fā)生急性肺損傷（ALI）與急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）[18]。所以，有研究指出，Clara細(xì)胞其相關(guān)功能及結(jié)構(gòu)發(fā)生減退時，會損傷氣道;同時還會進(jìn)一步加重患者的肺部炎癥情況。假如不能進(jìn)行及時的干預(yù)而任其繼續(xù)發(fā)展，會導(dǎo)致患者表現(xiàn)出不完全可逆性的限制氣流及氣道重塑，而這就是COPD的主要生理改變及病理改變[19]。同時有相關(guān)研究指出，COPD呼吸性小氣道及細(xì)支氣管中，Clara細(xì)胞的數(shù)量會顯著變少，其所分泌產(chǎn)生的CC16水平也會比健康人群顯著更低[20]。

本次研究結(jié)果提示，研究組血清TGF-β1水平高于對照組（P<0.05）。TGF-β屬于一種可以對多種細(xì)胞效應(yīng)進(jìn)行介導(dǎo)的細(xì)胞因子，其主要作用為維持機(jī)體內(nèi)呼吸系統(tǒng)的穩(wěn)定;而TGF-β1是其中的一個基因編碼蛋白[21]。TGF-β能夠促使機(jī)體合成相關(guān)細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞，同時還參與到機(jī)體的整個炎癥反應(yīng)中[22]。其中，公認(rèn)與呼吸系統(tǒng)相關(guān)疾病有關(guān)的一種亞型就是TGF-β1[23]。TGF-β信號傳導(dǎo)發(fā)生異常時，會在COPD的基質(zhì)重塑及氣道炎癥中有所參與，且損傷肺泡結(jié)構(gòu)[24]。與此同時，在EMT過程中TGF-β1起主導(dǎo)作用[25]。

綜上所述，相比健康人群，COPD患者的血清CC16水平較低，血清TGF-β1水平較高;且血清CC16水平與COPD患者的FEV1%pred和FEV1/FVC%呈正相關(guān)，血清TGF-β1水平與COPD患者的FEV1%pred和FEV1/FVC%呈負(fù)相關(guān)。檢驗(yàn)血清CC16水平及TGF-β1水平可以輔助臨床醫(yī)生診斷COPD，為其提供更多的參考數(shù)據(jù)。

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（收稿日期：2021-10-26） （本文編輯：張明瀾）

①湖北省漢川市第二人民醫(yī)院 湖北 漢川 431602

通信作者：童雄兵