李 秀,謝玉文,陳會(huì)榮

(湖北省漢川市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,湖北 孝感 431600)

地中海貧血癥也可稱為海洋性貧血，因血紅蛋白之中珠蛋白鏈生成數(shù)量減少所致。以往調(diào)查顯示，我國地中海貧血疾病基因攜帶者主要集中于廣西以及廣東等地區(qū)，分別占當(dāng)?shù)厝丝跀?shù)目約20%-25%[1-2]。地中海貧血癥在發(fā)病初期癥狀具有一定隱匿性，隨著病情惡化，會(huì)產(chǎn)生慢性溶血性貧血癥，使得機(jī)體血液運(yùn)氧能力減弱。有報(bào)道稱，地中海貧血一般具有貧血癥狀、無效紅細(xì)胞生成以及鐵過載所致骨質(zhì)疏松或者內(nèi)分泌失調(diào)等[3-4]。地中海貧血癥可以分為兩大類，分別為α-地貧及β-地貧?，F(xiàn)階段，臨床對(duì)于β-地中海貧血癥仍無有效治療手段。了解β-地中海貧血癥患者預(yù)后相關(guān)因素，對(duì)改善其預(yù)后具有重要指導(dǎo)意義。以往研究表明，鐵調(diào)素hepcidin能夠通過抑制腸對(duì)鐵元素的吸收與人體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)對(duì)其的釋放，有效調(diào)控鐵代謝狀態(tài)，在地中海貧血發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用[5]。生長分化因子15(GDF15)是聯(lián)系“紅系”細(xì)胞生成以及hepcidin調(diào)控鐵代謝水平重要分子蛋白。有報(bào)道稱，GDF15能夠用于評(píng)估人體無效造血情況[6]。當(dāng)前，關(guān)于β-地中海貧血癥患者預(yù)后相關(guān)因素的研究較少。本研究主要探究β-地中海貧血癥患者血清hepcidin、GDF15表達(dá)水平，并分析其與預(yù)后關(guān)系，旨在為臨床診治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2017年2月-2019年2月漢川市人民醫(yī)院106例β-地中海貧血癥患者作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)與《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[7]中β-地中海貧血癥有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)相符；(2)初次就診，以往無輸血或者相關(guān)治療史。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并重要臟器(比如心、肝、腎等)功能異常；(2)合并感染性疾病、白血病或者糖尿病等；(3)腫瘤患者；(3)沒有按要求接受治療。并選取同期50例體檢健康者納入對(duì)照組。所有研究對(duì)象或其家屬對(duì)研究知情，簽署知情同意書。研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核。依據(jù)《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[7]，將β-地中海貧血癥患者分為輕型組、重型組與中間型組。

1.2 方法

1.2.1臨床資料收集 以自擬調(diào)查表收集2組臨床資料，主要為性別、年齡、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)、網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)、紅細(xì)胞分布寬度(RDW)等。

利用Au-5800全自動(dòng)生化分析儀(購自貝克曼公司)進(jìn)行血清ALT、AST水平檢測(cè)；采用CAL8000血液細(xì)胞分析儀(購自邁瑞公司)檢測(cè)血清Hb、RET及RDW；Vi-CELL XR全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(購自貝克曼庫爾特公司)檢測(cè)PLT。抽取兩組晨起空腹靜脈血3 ml，15 min離心處理后分離血清樣本，3 000 r/min，置于-80℃條件下保存待測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行hepcidin與GDF15水平檢測(cè)。

1.2.2隨訪 對(duì)患者進(jìn)行2年隨訪，詳細(xì)記錄其生存情況，分為生存組與死亡組。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組一般資料比較見表1。2組性別、年齡比較無顯著差異(P>0.05)。

表1 一般資料比較[例

2.2 4組血清hepcidin、GDF15水平比較見表2。輕型組、重型組與中間型組血清hepcidin水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，輕型組、重型組與中間型組比較無顯著差異(P>0.05)；GDF15為：重型組>中間型組>輕型組>對(duì)照組(P<0.05)。

表2 4組血清hepcidin、GDF15水平比較

2.3 不同預(yù)后組臨床資料比較見表3。兩組性別、年齡、ALT、AST、Hb、PLT、RET、RDW比較無顯著差異(P>0.05)；死亡組Hb、hepcidin水平明顯低于生存組(P<0.05)，且GDF15水平明顯高于生存組(P<0.05)。

表3 不同預(yù)后組臨床資料比較[例

2.4 預(yù)后影響因素Logistic回歸分析預(yù)后為因變量，取單因素分析結(jié)果中有顯著差異因素作為自變量，變量與賦值見下表4；Hb、hepcidin為預(yù)后獨(dú)立保護(hù)因素(P<0.05)，GDF15為預(yù)后獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表5。

表4 變量與賦值

表5 Logistic回歸分析

3 討論

hepcidin能夠靶向作用于人體內(nèi)膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，從而負(fù)性調(diào)節(jié)鐵水平，因此被稱為鐵調(diào)素[8]。有報(bào)道稱，hepcidin結(jié)合相應(yīng)膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白之后，一方面導(dǎo)致鐵通道關(guān)閉，從而影響十二指腸吸取鐵原素，另一方面，可減少單核巨噬細(xì)胞鐵原素釋放量，最終降低血清鐵水平[9]。以往有研究表明，相較于健康人群，β-地中海貧血癥患者h(yuǎn)epcidin水平更低，且重型地貧患者稍低于中間型[10]。本研究中，輕型組、重型組與中間型組血清hepcidin水平較對(duì)照組明顯降低，且不同分型組間比較無顯著差異，與上述研究結(jié)論基本一致。說明β-地中海貧血癥患者血清hepcidin水平呈異常降低趨勢(shì)。hepcidin表達(dá)水平影響因素眾多，比如鐵缺乏、“紅系”細(xì)胞增多、感染、缺氧以及貧血等，均能對(duì)hepcidin的表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，使得血清鐵水平升髙[11]。

以往研究表明，GDF15可作為多種病變的有效生物標(biāo)志物，包括多種腫瘤、心血管疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、糖尿病以及慢性腎臟病等[12]。人體處于正常生理狀態(tài)時(shí)，各器官中GDF15呈現(xiàn)為低表達(dá)[13]。有報(bào)道稱，GDF15表達(dá)水平升高與GDF15介導(dǎo)的相應(yīng)信號(hào)通路活化有關(guān)，亦有可能對(duì)鐵調(diào)素產(chǎn)生抑制作用，由此提高無效造血以及鐵吸收過量所致多種疾病發(fā)生機(jī)率[14]。亦有研究表明，GDF15基因可能屬于可調(diào)控基因，相關(guān)因素(比如腫瘤、急性損傷或者炎癥等)能夠誘導(dǎo)其表達(dá)[15]。有報(bào)道稱，無效造血增加所致疾病中，GDF15水平明顯升高，可見于白血病前期綜合征與地中海貧血等[16]。本研究顯示，GDF15水平為：重型組>中間型組>輕型組>對(duì)照組，組間差異顯著，與上述報(bào)道基本一致，進(jìn)一步證實(shí)了β-地中海貧血癥患者存在血清GDF15異常升高變化，且重型患者升高程度最大。地中海貧血癥產(chǎn)生機(jī)制主要為珠蛋白合成障礙使得α與非α珠蛋白動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，其中α珠蛋白增加，β珠蛋白大量聚集于紅系細(xì)胞膜表面，引起細(xì)胞膜氧化損傷，同時(shí)對(duì)骨髓造成損害，形成惡性循環(huán)(未成熟“紅系”細(xì)胞髓內(nèi)調(diào)亡-大量無效紅細(xì)胞產(chǎn)生-貧血)。有研究指出，生理濃度GDF15能夠適當(dāng)促進(jìn)hepcidin合成與分泌，但過高濃度GDF15能夠?qū)epcidin表達(dá)產(chǎn)生明顯抑制作用，引起鐵過載[17]。在無效紅系生成過程中，原紅細(xì)胞調(diào)亡可以對(duì)GDF15表達(dá)產(chǎn)生誘導(dǎo)作用，使其表達(dá)水平升高，有效抑制鐵調(diào)素，加快腸道鐵吸收，并使巨噬細(xì)胞釋放更多鐵，造成鐵過載。本研究經(jīng)Logistic分析發(fā)現(xiàn)，Hb、Hepcidin屬于患者預(yù)后保護(hù)因素，而GDF15則為預(yù)后危險(xiǎn)因素，表明Hb、Hepcidin水平越低，GDF15水平越高，β-地中海貧血癥患者死亡風(fēng)險(xiǎn)越大。應(yīng)對(duì)地貧患者血清Hepcidin及GDF15水平予以重視，根據(jù)其檢測(cè)結(jié)果及時(shí)采取針對(duì)性治療措施，有助于改善患者預(yù)后。

綜上，β-地中海貧血癥患者血清hepcidin與GDF15表達(dá)水平分別呈異常降低、異常升高趨勢(shì)，均屬于患者預(yù)后獨(dú)立影響因素，在指導(dǎo)臨床治療與預(yù)后評(píng)估方面具有重要價(jià)值。本研究具有樣本量較少的局限性，且為單中心研究，有待后續(xù)大樣本及多中心研究進(jìn)一步補(bǔ)充、完善與論證。