崔 薇，孫炳欣，李晨光，宋亞男，初 秋，隋天卓，孫 宇，王宇冰，喬鳳娟，張興國(guó)

(長(zhǎng)春市疾病預(yù)防控制中心，吉林 長(zhǎng)春 130033)

流感病毒屬于正粘病毒科，它是分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒。其中甲型流感病毒含有8個(gè)基因節(jié)段，分別編碼RNA聚合酶復(fù)合體(PB1、PB2及PA)，血凝素(haemagglutinin，HA)，NP核蛋白(NP)，神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase，NA)，M1基質(zhì)蛋白，M2離子通道蛋白，非結(jié)構(gòu)蛋白1(NS1)以及非結(jié)構(gòu)蛋白2(NS2)等，每種蛋白在流感病毒感染、增殖、釋放、擴(kuò)散及傳播過(guò)程中都行使不同的功能[1]。

2009年墨西哥、美國(guó)等地暴發(fā)的甲型H1N1流感，造成了全球疫情。經(jīng)分析，甲型H1N1流感病毒是一種由南美 H1N1禽流感病毒、人H3N2流感病毒、南美H1N1經(jīng)典豬流感病毒以及歐亞類禽 H1N1豬流感病毒4種不同宿主來(lái)源的流感病毒基因片段重配產(chǎn)生的新的流感病毒亞型，目前它已取代早前的季節(jié)性H1N1流感病毒，成為在人群中流行的主要亞型[2-4]。

長(zhǎng)春市CDC通過(guò)流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，從2018-2020年度長(zhǎng)春市甲型H1N1流感病毒核酸陽(yáng)性樣本中分離到1株神經(jīng)氨酸酶H275Y突變株，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行全基因組序列分析，了解該毒株的遺傳進(jìn)化特征和變異情況，為甲型H1N1流感病毒的耐藥監(jiān)測(cè)、防控和臨床治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

對(duì)長(zhǎng)春市CDC 2018-2020年度甲型H1N1流感病毒分離株進(jìn)行神經(jīng)氨酸酶(NA)基因特征分析，從中篩選出一株神經(jīng)氨酸酶H275Y突變株A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)。

1.2 甲型H1N1流感病毒毒株核酸提取和NA基因擴(kuò)增

用碩世病毒核酸快速提取試劑盒在自動(dòng)核酸提取儀上提取流感病毒毒株RNA，將提取到的病毒RNA先反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再用設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行神經(jīng)氨酸酶(NA)基因擴(kuò)增，對(duì)PCR產(chǎn)物用毛細(xì)管電泳方法進(jìn)行確認(rèn)。

1.3 甲型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶(NA)基因序列測(cè)定及分析

神經(jīng)氨酸酶(NA)基因PCR產(chǎn)物送至上海生工生物工程公司進(jìn)行基因測(cè)序和拼接。拼接后的序列經(jīng)NCBI中的GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)Blast比對(duì)確認(rèn)為甲型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶(NA)基因序列。使用Mega6.0軟件進(jìn)行NA蛋白重要位點(diǎn)氨基酸突變分析，篩選出甲型H1N1流感病毒A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)，為神經(jīng)氨酸酶H275Y突變株。

1.4 全基因組序列測(cè)定及分析

對(duì)A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)病毒株進(jìn)行全基因組序列測(cè)定。參照NCBI和GISAID網(wǎng)站上提供的甲型H1N1序列，對(duì)其全基因組各節(jié)段分別進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。參照早期疫苗株A/California/07/2009和同期疫苗株A/Brisbane/02/2018，進(jìn)行同源性和各節(jié)段中重要氨基酸位點(diǎn)變異情況分析。

2 結(jié)果

2.1 全基因組序列確定

通過(guò)全基因組序列測(cè)定，獲得8個(gè)節(jié)段的編碼序列：PB2：2 280 bp；PB1：2 274 bp；PA：2 151 bp； HA：1 701 bp；NP：1 497 bp；NA：1 410p； M：982 bp(其中M1為759 bp；M2為 294 bp)；NS：838 bp(其中NS1為 660 bp；NS2為366 bp)。序列經(jīng)NCBI網(wǎng)站基因數(shù)據(jù)庫(kù)BLAST比對(duì)后，均提示為甲型H1N1流感病毒基因。

2.2 全基因組同源性分析結(jié)果

流感病毒A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1) 8個(gè)節(jié)段與早期疫苗A/California/07/2009相比，核苷酸的同源性為96.1%- 98.3%，氨基酸同源性為94.9%- 99.2%；與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，核苷酸的同源性為98.8%-99.7%，氨基酸同源性為98.7%-100%，詳見(jiàn)表1。

表1 A/Jilin-Chaoyang /SWL112 /2019(H1)流感病毒與疫苗株同源性比較

2.3 HA、NA基因系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果

從GenBank和GISAID上下載WHO推薦的2010-2017年疫苗株A/California/07/2009、2017-2019年疫苗株A/Michigan/45/2015、2019-2020年北半球疫苗株A/Brisbane/02/2018、2020-2021年北半球疫苗株A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019(H1N1)、國(guó)內(nèi)代表株A/Shanghai- Jiading/SWL1970/2015、國(guó)內(nèi)分離的第1株甲型H1N1流感毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1)、耐藥參考株A/Texas/23/2012(H275Y)以及國(guó)內(nèi)外部分地區(qū)不同年份的甲型H1N1流感全基因組序列，對(duì)本次研究的流感病毒A/Jilin-Chaoyang /SWL112/2019(H1)全基因組各節(jié)段進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。結(jié)果顯示，該病毒株基因組8個(gè)節(jié)段都與2020-2021年北半球疫苗株A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019(H1N1)屬于同一進(jìn)化簇，且HA基因在系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)上屬于6B.1A5簇，NA基因在系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)上也屬于6B.1A5簇，全基因組進(jìn)化分析情況詳見(jiàn)圖1。

圖1 A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)的遺傳進(jìn)化分析

2.4 氨基酸位點(diǎn)分析

2.4.1血凝素蛋白(HA)氨基酸位點(diǎn)分析

與早期的參考疫苗株A/California/07/2009相比，本次研究的A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)流感毒株HA蛋白發(fā)生了較大的變異。HA蛋白信號(hào)肽發(fā)生了A13T位點(diǎn)突變，由疏水性的丙氨酸(A)變異為極性的蘇氨酸(T)，可能影響信號(hào)肽的疏水性，進(jìn)而影響 HA蛋白表達(dá)和定位。其HA蛋白(不計(jì)信號(hào)肽)共發(fā)生了23處突變，分別是R45K、A48S、S74R、P83S、S84N、D97N、N129D、S162N、K163Q、S164T、S183P、S185T、S203T、I216T、A256T、N260D、K283E、I295V、I321V、E374K、F415L、S451N、E499K。其中，S162N、K163Q、S164T 變異位點(diǎn)位于Sa抗原決定簇，S185T變異位點(diǎn)位于Sb抗原決定簇，S203T變異位點(diǎn)位于Ca抗原決定簇，S74R變異位點(diǎn)位于Cb抗原決定簇，共有6個(gè)氨基酸位點(diǎn)變異涉及到4個(gè)抗原決定簇。

而與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，其HA蛋白(不計(jì)信號(hào)肽)僅發(fā)生7處突變，分別是G45K、A48S、N129D、N260D、A282P、V298I和F415L，且未涉及到HA抗原決定簇相關(guān)位點(diǎn)的變化。

經(jīng)分析還發(fā)現(xiàn)，A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)流感毒株HA蛋白潛在的糖基化位點(diǎn)有9處，分別為10NNS、11NST、23NVT、87NGT、162NQT、276NTT、287NTS、481NGT 和540NGS，與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018一致。而相對(duì)于早期的疫苗株A/California/07/2009，增加了1處潛在的糖基化位點(diǎn)162NQT。

甲型H1N1流感病毒在宿主間的傳播主要取決于HA蛋白的受體特異性結(jié)合位點(diǎn)。位于HA蛋白頭部的受體結(jié)合位點(diǎn)由190螺旋(187-195)、220環(huán)(218-225)和130環(huán)(132-135) 3個(gè)結(jié)構(gòu)域構(gòu)成[5]。毒株A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)的受體結(jié)合位點(diǎn)以及口袋底部的重要氨基酸位點(diǎn)高度保守，仍為190螺旋(187-DQQSLYQNA-195位)、130環(huán)(132-VTAA-135位)、220環(huán)(218-PKVRDQEG-225位) 以及口袋底部的Y91、W150、H180和Y192。

2.4.2神經(jīng)氨酸酶蛋白(NA)和膜蛋白(M)氨基酸位點(diǎn)分析

與流感病毒耐藥相關(guān)的蛋白主要是離子通道蛋白(M2)和神經(jīng)氨酸酶蛋白(NA)。其中M2蛋白跨膜區(qū)出現(xiàn)L26F、V27A、A30T/V、S31N、G34E中的1個(gè)或以上的突變，就會(huì)導(dǎo)致金剛烷胺類藥物耐藥株的出現(xiàn)。經(jīng)分析，A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)流感毒株M2跨膜區(qū)的第31位氨基酸為天冬酰胺(N)，提示其對(duì)金剛烷胺類藥物耐藥。除此之外，與早期的參考疫苗株 A/California/07/2009相比，M2蛋白僅發(fā)生D21G突變。而與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，M2蛋白僅出現(xiàn)H10P位點(diǎn)的突變。

M1上與毒力相關(guān)的位點(diǎn)139位仍為T(mén)，215位上仍為A，未發(fā)生變異。且M1與早期的參考疫苗株A/California/07/2009相比，發(fā)生了4處突變，分別是V80I、M192V、Q208K和K230R。與同期的參考疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，未出現(xiàn)突變。

NA蛋白與早期的參考疫苗株A/California/07/2009相比，共發(fā)生了24處變異，分別是V13I、I34V、L40I、N44S、Q51K、G77R、Q78L、V81A、I188T、N200S、V241I、N248D、V264I、N270K、H275Y、I314M、I321V、Y351F、N369K、N386K、D416N、K432E、N449D和T452I。而與同期的參考疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，NA僅有6處氨基酸位點(diǎn)變異，分別是T13I、Q51K、Q78L、H275Y、D416N和T452I。由于NA蛋白與神經(jīng)氨酸酶抑制劑作用位點(diǎn)相關(guān)的第275位氨基酸出現(xiàn)H275Y的突變，提示流感病毒A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)為奧司他韋耐藥株。

2.4.3其他蛋白氨基酸位點(diǎn)分析

甲型H1N1流感病毒的其他蛋白包括堿性聚合酶2(PB2)、堿性聚合酶1(PB1)、酸性聚合酶(PA)、核蛋白(NP)和非結(jié)構(gòu)蛋白(NS)。其中聚合酶PB2、PB1和PA共同構(gòu)成RNA聚合酶復(fù)合體，同時(shí)具有轉(zhuǎn)錄酶活性和核酸內(nèi)切酶活性。而 RNA聚合酶復(fù)合體又與NP蛋白、病毒RNA共同構(gòu)成病毒核糖核蛋白體復(fù)合物(vRNP)，參與流感病毒基因組的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄[6]。本次研究的流感病毒PB2、PB1、PA和NP蛋白中影響病毒致病性的幾個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)均未發(fā)生改變，如PB2蛋白中仍為89V、158E[7]、590S、591R、627E[8]、701D[9]和714S[10-11]；PB1蛋白中的622G、709V以及PB1-F蛋白的66N也未發(fā)生改變[12]；PA蛋白中仍表現(xiàn)為36A、154E[13]、157T[14]、353K和638R[15]。NP蛋白中仍表現(xiàn)為148Y、355R和361R。非結(jié)構(gòu)蛋白NS1中與病毒復(fù)制能力相關(guān)的69L、77L[16]和與病毒毒力有關(guān)的42S、92D、103F、106M[17]也未發(fā)生變化。各蛋白的氨基酸位點(diǎn)分別與早期疫苗株A/California/07/2009及同期疫苗株A/Brisbane/02/2018比對(duì)，變異情況詳見(jiàn)表2。

表2 A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)病毒株全基因組突變氨基酸位點(diǎn)變異情況

3 討論

通過(guò)對(duì)長(zhǎng)春市2018-2020年度甲型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶(NA)基因特征進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)1株甲型H1N1流感病毒株A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)，其N(xiāo)A蛋白出現(xiàn)H275Y位點(diǎn)突變，提示此毒株為奧司他韋耐藥株。本研究對(duì)其全基因組8個(gè)節(jié)段的基因特征及重要的氨基酸位點(diǎn)進(jìn)行分析，了解其抗原性、致病性及耐藥性。

甲型H1N1流感病毒的抗原性主要是針對(duì)其表面的HA和NA蛋白而言。一般認(rèn)為，甲型H1N1流感病毒的HA蛋白內(nèi)部有4個(gè)抗原決定簇[18]，分別是(不計(jì)信號(hào)肽)：Sa(124、153-157、159-164)、Sb(184-195)、Ca(137-142、166-170、203、221、235) 以及 Cb(70-75)，這44個(gè)氨基酸是與宿主免疫系統(tǒng)相互作用的重要位點(diǎn)，因此突變可能使病毒逃避宿主免疫細(xì)胞的識(shí)別，引起流行。以上位點(diǎn)若出現(xiàn)4個(gè)以上氨基酸突變，且突變涉及到2個(gè)及以上抗原決定簇位點(diǎn)；或1個(gè)涉及到抗原決定簇，另1個(gè)涉及到受體結(jié)合位點(diǎn)，就可以認(rèn)為是具有流行病學(xué)意義的抗原變異株[19-20]。本次研究的毒株，與早期的參考疫苗株A/California/07/2009相比，HA蛋白的S162N、K163Q、S164T變異位于Sa 抗原決定簇，S185T 變異位于Sb抗原決定簇，S203T變異位于Ca抗原決定簇，S74R變異位于Cb抗原決定簇，共有6個(gè)氨基酸位點(diǎn)變異涉及到4個(gè)抗原決定簇，出現(xiàn)了抗原漂移現(xiàn)象。而與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，HA蛋白(不計(jì)信號(hào)肽)僅發(fā)生了7處突變，并未涉及到HA抗原決定簇相關(guān)位點(diǎn)的變化，說(shuō)明同期的疫苗A/Brisbane/02/2018對(duì)此毒株具有一定的免疫保護(hù)效果。

而甲型H1N1流感病毒NA蛋白的抗原決定簇主要有7個(gè)氨基酸區(qū)域，分別是N端的第152位、198-200位、328-334位、337-344位、364-367位、369-399位和431-434位，除此之外，還有研究認(rèn)為140-157位也是甲型H1N1流感病毒NA蛋白的抗原決定簇所在[21-22]。與之前WHO推薦的國(guó)際疫苗株A/California/07/2009相比，流感毒株A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)的NA蛋白的N200S、N369K、N386K、K432E位點(diǎn)的突變，位于抗原區(qū)和抗體結(jié)合位點(diǎn)。而與同期疫苗株A/Brisbane/02/2018相比，NA蛋白發(fā)生了6處突變，分別是T13I、Q51K、Q78L、H275Y、D416N和T452I，但未涉及到NA抗原決定簇相關(guān)位點(diǎn)的變化。

甲型H1N1流感病毒的致病性與多種因素密切相關(guān)。HA蛋白裂解位點(diǎn)、受體結(jié)合位點(diǎn)，PB2、PB1、PA以及NS1上的一些重要位點(diǎn)的突變都會(huì)影響其致病性。通常甲型H1N1流感病毒的HA可水解成HA1和HA2兩個(gè)獨(dú)立的肽鏈，二者通過(guò)二硫鍵相連，流感病毒HA斷裂成HA1和HA2是具有感染性的先決條件。HA蛋白中HA1和HA2裂解位點(diǎn)的堿性氨基酸的數(shù)量直接影響HA蛋白對(duì)宿主細(xì)胞體內(nèi)蛋白水解酶的敏感性，進(jìn)而影響流感病毒的致病性[23]。流感病毒HA裂解位點(diǎn)氨基酸序列中如果含有多個(gè)堿性氨基酸，則表現(xiàn)為高致病性；如果只含有1個(gè)堿性氨基酸位點(diǎn)則表現(xiàn)為低致病性。而毒株A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)的HA蛋白裂解位點(diǎn)氨基酸序列為VPSIQSR↓GLFGAIA，只含有1個(gè)堿性氨基酸為精氨酸R，未出現(xiàn)多個(gè)堿性氨基酸(R、K、H)，因此，仍保持低致病性特征。

甲型H1N1流感病毒的HA1蛋白第222位氨基酸位點(diǎn)突變也被證實(shí)與病毒致病性密切相關(guān)[24-26]。HA1第222位為D時(shí)，病毒主要識(shí)別人上呼吸道α-2,6-半乳糖唾液酸受體，HA1蛋白第222位一旦出現(xiàn)D222E、D222N或D222G突變，病毒就會(huì)更容易與下呼吸道α-2,3-半乳糖唾液酸受體結(jié)合，增加感染人下呼吸道的可能，從而使患者出現(xiàn)肺炎等嚴(yán)重的下呼吸道癥狀，此毒株A/Jilin-Chaoyang /SWL112/2019(H1)的HA1蛋白未出現(xiàn)D222E、D222N或D222G的突變，因此，引起患者的主要癥狀還是上呼吸道癥狀。

PB2和PB1基因分別位于流感病毒基因組第1個(gè)和第2個(gè)RNA節(jié)段上，編碼堿性聚合酶PB2和堿性聚合酶PB1，與酸性聚合酶 PA 共同組成RNA聚合酶復(fù)合物，參與流感病毒基因組的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄[27]。有研究發(fā)現(xiàn)，PB2蛋白出現(xiàn)E627K突變，會(huì)使甲型H1N1流感病毒的致病力增強(qiáng)[28]。而PB2蛋白出現(xiàn)D701N突變，可增強(qiáng) PB2核定位能力，且S714R在D701N出現(xiàn)時(shí)也可顯著地提高病毒在宿主細(xì)胞的增殖能力，從而提高病毒的致病力。而PB1蛋白中如果出現(xiàn)G622D突變，會(huì)影響PB1蛋白與病毒RNA結(jié)合的能力，進(jìn)而降低病毒的毒力。此外，NS基因位于病毒基因組第8個(gè)RNA節(jié)段上，主要編碼非結(jié)構(gòu)蛋白，其中最重要的是NS1蛋白和NS2蛋白。NS1蛋白如果出現(xiàn)D92E突變，會(huì)使流感病毒對(duì)IFN等細(xì)胞因子的耐受性增強(qiáng)，從而影響流感病毒的致病力[29-30]。而NS2蛋白是一種核輸出蛋白，調(diào)節(jié)vRNP復(fù)合體從細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的過(guò)程[31]。有研究發(fā)現(xiàn)NS2的酶功能中心周?chē)还劝彼酔環(huán)繞，如果E67S/E74S/E75S突變同時(shí)出現(xiàn)，會(huì)抑制流感病毒RNA聚合酶的活性，進(jìn)而導(dǎo)致H1N1人流感病毒在小鼠體內(nèi)的毒力減弱[32]。經(jīng)分析，此毒株A/Jilin-Chaoyang /SWL112/2019(H1)未出現(xiàn)上述重要位點(diǎn)突變。

甲型H1N1流感病毒的耐藥性也與病毒重要氨基酸位點(diǎn)的變異密切相關(guān)，分析與流感病毒耐藥相關(guān)氨基酸位點(diǎn)的變異情況對(duì)臨床治療具有十分重要的指導(dǎo)意義。目前,常用的抗流感病毒的藥物有：神經(jīng)氨酸酶(NA)抑制劑類藥物，如奧司他韋；M2 蛋白抑制劑類藥物，如金剛烷胺；以及聚合酶抑制劑類藥物，如巴洛沙韋等，這幾類藥物針對(duì)流感病毒不同的蛋白，也具有不同的作用機(jī)制。神經(jīng)氨酸酶抑制劑藥物奧司他韋作用位點(diǎn)在NA蛋白，特別是NA蛋白H275Y的突變會(huì)引起奧司他韋的耐藥，已經(jīng)得到證實(shí)[33-34]。本次研究的A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)毒株，出現(xiàn)神經(jīng)氨酸酶H275Y的突變，并伴有可能會(huì)改變H275Y突變株適應(yīng)性的V241I，N369K同時(shí)突變[35]。除此之外，該毒株還出現(xiàn)N248D位點(diǎn)突變，可能會(huì)協(xié)同H275Y突變，改變與藥物作用的關(guān)鍵位點(diǎn)E277的結(jié)構(gòu)，促進(jìn)奧司他韋耐藥的發(fā)生[36]。而M2蛋白是烷胺類藥物的作用靶蛋白。M2蛋白跨膜區(qū)出現(xiàn)L26F、V27A、A30T/V、S31N、G34E中的1個(gè)或以上的突變，就會(huì)導(dǎo)致金剛烷胺類藥物耐藥株的出現(xiàn)。經(jīng)分析，此毒株M2跨膜區(qū)的第31位氨基酸為天冬酰胺(N)，提示其對(duì)金剛烷胺類藥物耐藥。聚合酶抑制劑類藥物巴洛沙韋作用位點(diǎn)在PA蛋白上，甲型H1N1流感病毒PA蛋白第38位出現(xiàn)I38T、I38M或I38F突變中的1個(gè)，都會(huì)使其對(duì)巴洛沙韋的敏感性降低[37-38]。此毒株P(guān)A蛋白未出現(xiàn)I38T、I38M或I38F突變，提示此毒株仍對(duì)聚合酶抑制劑類藥物巴洛沙韋敏感。

此外，系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析發(fā)現(xiàn)A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)病毒株的HA和NA基因均與2018年美國(guó)康涅狄格州的病毒株A/Connecticut/41/2018親緣關(guān)系最近，而且出現(xiàn)在病毒株A/Connecticut/41/2018之后。進(jìn)一步對(duì)A/Jilin- Chaoyang/SWL112/2019(H1)病毒株的HA和NA基因進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，A/Jilin-Chaoyang/SWL112/2019(H1)與A/Connecticut/41/2018的變異情況非常相似，不同之處是其HA基因在A/Connecticut/41/2018 的基礎(chǔ)上多了A48S 和F415L變異，而NA基因則多了Q78L和H275Y變異。

目前，新冠病毒疫情在全球范圍內(nèi)肆虐，新冠病毒的持續(xù)變異使得其傳染性和致病性都發(fā)生了很大變化。在警惕新冠病毒變異株的同時(shí)，還應(yīng)加強(qiáng)對(duì)流感病毒的抗原性、致病性、耐藥性等方面的監(jiān)測(cè)，防止由于流感病毒的變異和重組，引起新冠和流感“雙重大流行”。隨著流感病毒和新冠病毒的合并感染病例的出現(xiàn)，如何防止流感病毒和新冠病毒的合并感染，也將是我們今后需要研究的重要課題。