袁忠，王科軍，馬海南

(邵陽學(xué)院附屬第一醫(yī)院乳甲外科，湖南 邵陽 422000)

乳腺癌是發(fā)生于乳腺導(dǎo)管上皮組織的惡性腫瘤，約占女性常見惡性腫瘤的23%，近年來發(fā)病率、病死率有上升趨勢，對女性生命健康、生活質(zhì)量構(gòu)成嚴(yán)重威脅[1]。乳腺癌根治術(shù)是治療乳腺癌的常見術(shù)式，通過手術(shù)切除病灶及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的同時最大限度地保留胸大肌、胸小肌，并在切除乳腺的同時放入假體以保證乳腺外形與手術(shù)前基本相同，臨床接受度較高[2-3]。乳腺癌發(fā)生機(jī)制復(fù)雜多樣，有研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌的發(fā)生進(jìn)展除與第13號染色體乳腺癌易感基因2、第17號染色體乳腺癌易感基因1突變密切相關(guān)外，還與多種轉(zhuǎn)錄因子密切相關(guān)[4]。核因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)作為哺乳動物重要的核轉(zhuǎn)錄因子，可調(diào)控血管生成蛋白的表達(dá)，影響細(xì)胞增殖分化、凋亡、癌變等進(jìn)程，與腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[5]。有研究發(fā)現(xiàn)，通過抑制NF-κB信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)可阻礙乳腺癌進(jìn)展，NF-κB有望成為乳腺癌潛在預(yù)后生物標(biāo)志物和基因治療的靶點(diǎn)[6]。本研究主要分析乳腺癌患者改良根治術(shù)后NF-κB表達(dá)水平與生存時間及生活質(zhì)量的關(guān)系，旨在為改善乳腺癌患者預(yù)后提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2018年3月于邵陽學(xué)院附屬第一醫(yī)院接受改良根治術(shù)治療的82例乳腺癌患者為研究對象，均為女性，年齡38～60歲，平均(48±6)歲；病程9～18個月，平均(14.1±3.5)個月。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范(2015版)》[7]中乳腺癌相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)且經(jīng)術(shù)后病理證實為乳腺癌；②孕激素受體或雌激素受體呈陽性；③術(shù)后接受輔助內(nèi)分泌藥物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肝腎功能異常、心腦血管疾病或造血系統(tǒng)疾病者；②合并糖尿病、酒精藥物濫用史或其他惡性腫瘤者；③曾接受過系統(tǒng)放化療、內(nèi)分泌治療或靶向治療者；④存在認(rèn)知功能障礙且依從性差者；⑤主動退出研究或失訪者。入組患者均簽署了知情同意書，本研究經(jīng)邵陽學(xué)院附屬第一醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2觀察指標(biāo)和檢測方法 收集患者臨床資料，包括年齡、腫塊部位、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，分析NF-κB不同表達(dá)水平與乳腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系；記錄乳腺癌組織、癌旁組織NF-κB表達(dá)情況；隨訪3年，比較不同NF-κB表達(dá)水平的乳腺癌患者累積生存率和生活質(zhì)量。

1.2.1NF-κB表達(dá)水平檢測 改良根治術(shù)中取患者乳腺癌組織、相應(yīng)癌旁組織，將癌組織、癌旁組織分別進(jìn)行切片，厚度約為5 μm，于恒溫箱烘烤2 h后常規(guī)脫蠟至水，然后依次采用蒸餾水、磷酸鹽緩沖液沖洗，再采用檸檬酸緩沖液抗原熱修復(fù)10 min，冷卻至室溫后采用3%過氧化氫作用10 min。過氧化氫作用完畢后分別滴加一抗(兔抗人單克隆抗體)，于4 ℃條件下孵育過夜，然后滴加二抗(辣根過氧化物酶)，于室溫下作用20 min后再次使用磷酸鹽緩沖液沖洗，最后滴加二氨基聯(lián)苯胺染色、蘇木精復(fù)染，依次經(jīng)75%、95%、無水乙醇脫水，采用中性樹脂封片，于顯微鏡下觀察。一抗(批號：20160106)、二抗(批號：20160119)均購自上海酶連生物科技有限公司，二氨基聯(lián)苯胺(批號：20160124)、蘇木精(批號：20160116)、乙醇(批號：20160130)均購自上?？笊锛夹g(shù)有限公司。

1.2.2結(jié)果判定 按照切片中陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比、癌細(xì)胞染色強(qiáng)度評估，切片中無陽性細(xì)胞計0分，陽性細(xì)胞數(shù)≤10%計1分，10%<陽性細(xì)胞數(shù)≤50%計2分，陽性細(xì)胞數(shù)>50%計3分；癌細(xì)胞未著色計0分，癌細(xì)胞呈淺黃色計1分，癌細(xì)胞呈棕黃色計2分，癌細(xì)胞呈棕褐色計3分[8]。切片中陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比計分與切片中癌細(xì)胞染色強(qiáng)度計分相乘>3分判定為NF-κB高表達(dá)，≤3分判定為NF-κB低表達(dá)。

1.2.3隨訪 通過定期復(fù)診記錄乳腺癌患者術(shù)后生存情況，采用乳腺癌患者生活質(zhì)量測定量表(functional assessment of cancer therapy-breast cancer，F(xiàn)ACT-B)于每次復(fù)診時評估乳腺癌患者術(shù)后生活質(zhì)量，F(xiàn)ACT-B從生理狀況、情感狀況、功能狀況、社會/家庭狀況、附加關(guān)注情況5個維度評估，共包含36個條目，采用Liken 5級評分法分為5個等級，分別賦值0～4分，量表總得分越高提示患者術(shù)后生活質(zhì)量越好[9]。

2 結(jié) 果

2.1乳腺癌組織、癌旁組織NF-κB表達(dá)水平比較 乳腺癌組織中NF-κB高表達(dá)率高于癌旁組織[60.98%(50/82)比8.54%(7/82)](χ2=49.719，P<0.001)，見圖1。

注：NF-κB為核因子κB

2.2改良根治術(shù)后患者NF-κB不同表達(dá)水平與癌臨床病理特征的關(guān)系 NF-κB高表達(dá)組(50例)組織學(xué)分級Ⅲ級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的比例高于NF-κB低表達(dá)組(30例)(P<0.05)，兩組年齡、腫塊部位、腫瘤大小、腫瘤TNM分期比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 乳腺癌改良根治術(shù)后NF-κB不同表達(dá)水平與患者臨床病理特征的關(guān)系

2.3改良根治術(shù)后患者NF-κB表達(dá)水平與生存時間的關(guān)系 隨訪3年，82例乳腺癌患者失訪6例，其中癌組織NF-κB高表達(dá)4例、低表達(dá)2例。乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)患者術(shù)后累積生存率低于NF-κB低表達(dá)患者[60.87%(28/46)比83.33%(25/30)](χ2=4.342，P=0.037)，見圖2。

注：NF-κB為核因子κB

2.4乳腺癌改良根治術(shù)后NF-κB表達(dá)水平與生活質(zhì)量的關(guān)系 乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)患者FACT-B評分低于NF-κB低表達(dá)患者[(92±5)分比(101±6)分](t=6.945，P<0.001)。

3 討 論

癌癥是影響全球范圍內(nèi)疾病發(fā)病率、死亡率的重要原因，其中乳腺癌是引發(fā)女性癌癥死亡的常見惡性腫瘤之一，相關(guān)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，我國乳腺癌發(fā)病率、死亡率分別約占世界的12.2%、9.6%[10-11]。改良根治術(shù)是治療乳腺癌的有效術(shù)式之一，Xiang等[12]研究發(fā)現(xiàn)，改良根治術(shù)對乳腺癌患者圍手術(shù)期血清應(yīng)激激素、炎癥應(yīng)激指標(biāo)的影響較小，有助于患者術(shù)后恢復(fù)。但近年來研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者術(shù)后受到相關(guān)治療引起的各種癥狀困擾，精神負(fù)擔(dān)較重，易增加術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移風(fēng)險，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，甚至危及生命安全，改善乳腺癌患者預(yù)后是臨床研究的重點(diǎn)[13]。

NF-κB信號通路與乳腺癌發(fā)生、疾病進(jìn)展密切相關(guān)，不僅參與血管內(nèi)皮生長因子、趨化因子受體等下游靶基因調(diào)控，還可促進(jìn)癌細(xì)胞有絲分裂活動，是引發(fā)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的重要因素。Wilson等[14]研究核糖核苷酸還原酶亞基M2、NF-κB、突變體腫瘤蛋白p53的分子靶向治療三陰性乳腺癌發(fā)現(xiàn)，體外NF-κB活性降低患者激素治療效果優(yōu)于NF-κB活性升高患者，且生存率高于NF-κB活性升高患者。也有研究在探討鈣蛋白酶小亞基1與NF-κB在乳腺癌中表達(dá)及與乳腺癌患者臨床特征的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)率明顯高于癌旁組織[56.12%(55/98)比8.16%(8/98)]，證實NF-κB蛋白在乳腺癌組織中高表達(dá)[15]。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織中NF-κB高表達(dá)率高于癌旁組織(P<0.01)，與上述文獻(xiàn)觀點(diǎn)相符，表明NF-κB表達(dá)與乳腺癌發(fā)生有關(guān)。NF-κB是轉(zhuǎn)錄蛋白家族成員之一，乳腺癌實體腫瘤微環(huán)境中含有的大量炎癥細(xì)胞因子刺激NF-κB向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移，繼而調(diào)節(jié)下游靶基因轉(zhuǎn)錄、翻譯等。Aktepe等[16]研究發(fā)現(xiàn)，許多致癌因素可通過活化NF-κB信號促進(jìn)癌細(xì)胞生長、增殖分化、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，同時可調(diào)控部分細(xì)胞周期基因而加速細(xì)胞周期循環(huán)，且NF-κB體外活性越高，癌細(xì)胞增殖越活躍。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)組組織學(xué)分級Ⅲ級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的比例高于NF-κB低表達(dá)組(P<0.05)，且隨訪3年發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)患者術(shù)后累積生存率低于NF-κB低表達(dá)患者，證實NF-κB表達(dá)水平與乳腺癌患者改良根治術(shù)后生存時間有關(guān)。有研究認(rèn)為，NF-κB表達(dá)水平影響乳腺癌患者術(shù)后生存時間的機(jī)制可能是NF-κB高表達(dá)激活機(jī)體相關(guān)炎癥細(xì)胞因子后間接刺激第17號染色體乳腺癌易感基因1突變，繼而改變血管通透性，癌細(xì)胞血行轉(zhuǎn)移率升高，患者術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險增加，從而影響乳腺癌患者術(shù)后生存情況[17]；也有研究認(rèn)為，NF-κB通過與機(jī)體多種蛋白相互作用形成的結(jié)合物可調(diào)控下游靶基因表達(dá)，繼而調(diào)節(jié)癌細(xì)胞生長增殖相關(guān)通路，使調(diào)節(jié)信號到達(dá)細(xì)胞核內(nèi)，進(jìn)一步活化后促進(jìn)癌細(xì)胞遷移[18]。臨床可進(jìn)一步探索NF-κB表達(dá)水平與乳腺癌患者發(fā)生、疾病進(jìn)展的關(guān)系。

生活質(zhì)量是臨床評估癌癥患者健康及病情變化的常用指標(biāo)，可全面反映機(jī)體健康狀況，而乳腺癌患者術(shù)后常需內(nèi)分泌藥物治療，軀體、心理、社會功能等方面均受到一定影響，評估乳腺癌患者術(shù)后生活質(zhì)量具有重要臨床意義[19]。大量研究顯示，乳腺癌患者改良根治術(shù)后藥物治療過程中易產(chǎn)生焦慮、抑郁等負(fù)性情緒，從而引起一系列免疫、神經(jīng)等系統(tǒng)功能紊亂，患者惡性心理應(yīng)激狀態(tài)風(fēng)險升高，嚴(yán)重影響術(shù)后生活質(zhì)量[20-21]。本研究結(jié)果還顯示，乳腺癌組織NF-κB高表達(dá)患者FACT-B評分低于NF-κB低表達(dá)患者，表明NF-κB高表達(dá)患者術(shù)后生活質(zhì)量較差。既往研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后化療、術(shù)后放療、部分核轉(zhuǎn)錄因子水平等均為影響乳腺癌術(shù)后生活質(zhì)量的因素，而NF-κB作為調(diào)控細(xì)胞凋亡、惡性轉(zhuǎn)化過程的重要轉(zhuǎn)錄因子，在癌細(xì)胞中高表達(dá)對腫瘤壞死因子介導(dǎo)的凋亡具有抵抗作用，可一定程度上促進(jìn)癌癥復(fù)發(fā)，這可能是NF-κB高表達(dá)乳腺癌患者改良根治術(shù)后生活質(zhì)量降低的原因[22]。臨床可進(jìn)一步探索影響乳腺癌患者術(shù)后生活質(zhì)量的危險因素，以改善患者預(yù)后。

綜上所述，乳腺癌改良根治術(shù)后NF-κB低表達(dá)患者累積生存率和生活質(zhì)量高于NF-κB高表達(dá)患者，乳腺癌患者改良根治術(shù)后遠(yuǎn)期預(yù)后與NF-κB表達(dá)相關(guān)，臨床可進(jìn)一步探討NF-κB表達(dá)水平與乳腺癌進(jìn)展的關(guān)系。但因本研究選取樣本量有限，相關(guān)結(jié)論仍需大樣本多中心臨床試驗進(jìn)一步佐證。