李建中

(海鹽縣西塘橋街道農(nóng)業(yè)農(nóng)村辦公室，浙江 海鹽 314305)

豬瘟(Classical swine fever, CSF)，是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)引起豬的一種以高熱稽留、出血、梗死、壞死和高死亡率為主要特征的高度接觸性傳染病[1]，是國家現(xiàn)有強(qiáng)制免疫病種。因地制宜，制定生豬免疫程序，并定期進(jìn)行免疫抗體監(jiān)測(cè)，及時(shí)了解本地的CSF免疫情況，提高豬瘟抗體免疫合格率，是職責(zé)所在，為此，開展了豬瘟免疫效果試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)儀器與材料

1.1試驗(yàn)動(dòng)物 海鹽縣飼養(yǎng)管理水平較好的10個(gè)規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)，存欄數(shù)均大于500頭，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)選擇30日齡左右斷奶仔豬30頭，共計(jì)300頭。

1.2試驗(yàn)疫苗 豬瘟疫苗均為政府采購組織苗，分別由齊魯動(dòng)保、中牧實(shí)業(yè)、杭州薦量三家公司生產(chǎn)。疫苗生產(chǎn)批號(hào)依次為： 11090116-1、 1202007和1110107。

1.3試驗(yàn)試劑 豬瘟正向間接血凝試驗(yàn)抗原、豬瘟陰性對(duì)照血清、豬瘟陽性對(duì)照血清及豬瘟正向間接血凝試驗(yàn)稀釋液均為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，抗原兩個(gè)批次批號(hào)為：20120516和20120728。

2 試驗(yàn)方法及過程

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 將10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)的300頭豬按照?qǐng)鳇c(diǎn)分為10個(gè)小組，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)隨機(jī)選取一頭生豬血樣送檢，豬瘟抗原均呈陰性。10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)分別編號(hào)為A、B、C、D、E、F、G、H、I和J共10個(gè)小組。每個(gè)小組又分為Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)組每組8頭豬，對(duì)照組每組6頭豬。

2.2實(shí)驗(yàn)過程

2.2.1首免接種 試驗(yàn)組在30日齡左右(28日齡至35日齡)分別頸部肌肉接種齊魯動(dòng)保、中牧實(shí)業(yè)、杭州薦量三個(gè)不同廠家生產(chǎn)的豬瘟組織苗1頭份/頭，對(duì)照組均接種滅菌注射用水1 mL/頭。接種過程由助手保定，盡量減少仔豬因追趕和固定產(chǎn)生應(yīng)激。接種后1～2 d觀察試驗(yàn)組和對(duì)照組仔豬精神狀況，注射部位有無腫脹，采食量和飲水量有無增減，是否有體溫變化，有無肌肉震顫、可視黏膜充血、嘔吐、鼻孔出血等不良反應(yīng)。

2.2.2血清抗體檢測(cè) 首免28 d后前腔靜脈采集所有試驗(yàn)組和對(duì)照組豬血樣，分離血清，根據(jù)農(nóng)業(yè)部《豬瘟診斷技術(shù)規(guī)程》(NY/SY156-2000)進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，結(jié)果判定參考農(nóng)業(yè)部《2012年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)計(jì)劃》(農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2012〕2號(hào))。

根據(jù)農(nóng)業(yè)部相關(guān)文件要求，接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價(jià)達(dá)到1∶32(25)凝集判為合格。

2.2.3二免接種 首免28 d后，在采集血樣的同時(shí)進(jìn)行二次免疫接種，接種方法同首免，試驗(yàn)組豬瘟疫苗接種劑量為2頭份/頭，對(duì)照組滅菌生理鹽水接種劑量仍然為1 mL/頭，接種后1～2 d觀察精神狀況、體溫變化等。

2.2.4二免血清抗體檢測(cè) 待二免結(jié)束后28 d開始采集血樣，分離血清，并進(jìn)行血清抗體檢測(cè)，方法及判定依據(jù)等同2.2.2。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1首免應(yīng)激 首次免疫后1～2天試驗(yàn)組和對(duì)照組大多數(shù)整體精神狀況良好，無拉稀癥狀，采食量和飲水量無明顯變化，呼吸正常，無可視粘膜充血、嘔吐等現(xiàn)象，體重變化不明顯，沒有應(yīng)激死亡現(xiàn)象。試驗(yàn)組兩個(gè)試驗(yàn)場(chǎng)點(diǎn)的6頭出現(xiàn)注射部位腫脹，約占試驗(yàn)組總數(shù)的2.50%，且為不同廠家的疫苗；出現(xiàn)體溫一過性升高的約占體溫測(cè)量統(tǒng)計(jì)數(shù)量20頭的10%；試驗(yàn)組和對(duì)照組均有兩個(gè)場(chǎng)點(diǎn)出現(xiàn)扎堆現(xiàn)象；對(duì)照組有2頭注射部位有輕微腫脹，約占對(duì)照組3.33%。

3.2首免抗體檢測(cè)結(jié)果 詳見表1和圖1。由表1可見，首次免疫后試驗(yàn)組10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)的240份三個(gè)廠家疫苗的抗體整體合格率分別為41.25%、38.75%和40.00%，僅有1個(gè)場(chǎng)點(diǎn)的1個(gè)廠家的疫苗抗體合格率達(dá)到了70%(國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)為70%以上為合格)以上，其余均低于70%，試驗(yàn)組10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)抗體總合格率為40%。據(jù)圖1可見，抗體效價(jià)大多分布于1∶8～1∶128之間，占試驗(yàn)組總數(shù)73%以上。三個(gè)廠家均有抗體效價(jià)達(dá)到1∶512的血清樣品，抗體效價(jià)均無達(dá)到1∶1024及以上樣品。對(duì)照組沒有1份血樣抗體合格，其中抗體效價(jià)最高的為1∶16且只有6份，約占對(duì)照組的10%。

表1 首次免疫后試驗(yàn)組和對(duì)照組豬瘟抗體檢測(cè)合格率

3.3二免應(yīng)激 二免后1～2 d試驗(yàn)組和對(duì)照組均無明顯變化，但是70日齡后試驗(yàn)組和對(duì)照組均出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，其中試驗(yàn)組1頭，對(duì)照組2頭(為1個(gè)場(chǎng)點(diǎn))。死亡多以拉稀和呼吸道疾病為主，剖檢發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組死亡豬呈現(xiàn)肺臟病變，肺臟出血腫大，且伴有肺間質(zhì)增寬，一側(cè)肺間質(zhì)充滿膠凍樣物質(zhì)，可以排除豬瘟感染；對(duì)照組2頭均為拉稀導(dǎo)致脫水而死亡，經(jīng)檢測(cè)PEDV和TGEV均呈現(xiàn)陰性，具體原因不祥。其余均無異?，F(xiàn)象。

3.4二免抗體檢測(cè)結(jié)果 詳見表2和圖2。由表2可見，二次免疫后豬瘟抗體整體合格率得到了極大的提升，由40%提高到96.23%，增加了56個(gè)百分點(diǎn)以上，且三個(gè)廠家的豬瘟疫苗抗體整體合格率均達(dá)到95%以上(遠(yuǎn)高于國家要求的70%標(biāo)準(zhǔn))。由圖2可以看出，通過二次免疫后豬瘟抗體效價(jià)明顯升高，效價(jià)介于1∶32至1∶256的占試驗(yàn)組總數(shù)(239頭)的近90%，更有甚者抗體效價(jià)達(dá)到1∶1024及以上。其中效價(jià)低于1∶16的共計(jì)9份，占試驗(yàn)各組總數(shù)的3.77%。對(duì)照組58份樣品抗體合格率為零，且效價(jià)均小于1∶8。

表2 二免后試驗(yàn)組和對(duì)照組豬瘟抗體檢測(cè)合格率

4 結(jié)果分析

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)豬只首免后只有極少數(shù)抗體合格，絕大多數(shù)抗體效價(jià)偏低，很難有保護(hù)力，存在發(fā)生豬瘟疫病的風(fēng)險(xiǎn)，不利于豬瘟疫病防控。而經(jīng)過二次免疫后抗體整體保護(hù)力得到極大的提升，達(dá)到有效防控豬瘟的目的。對(duì)照組抗體在60日齡時(shí)抗體效價(jià)均低于1∶32，說明此時(shí)豬只完全處于免疫空白期，需要盡快免疫消除潛在隱患。因此，為有效防控豬瘟疫病的發(fā)生，商品育肥豬必須通過至少兩次豬瘟疫苗免疫接種方能達(dá)到有效保護(hù)水平。此試驗(yàn)結(jié)果與國家動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、疫苗生產(chǎn)廠家等有關(guān)機(jī)構(gòu)(單位)數(shù)據(jù)基本相似，為海鹽縣豬瘟疫病防控提供了參考。