張 群，舒 楠，寧密密，李紹華

（1. 湖南省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，湖南 長沙 410125；2. 湖南大學研究生院隆平分院，湖南 長沙 410125；3. 岳陽峰嶺菁華果業(yè)股份有限公司，湖南 岳陽 414000）

獼猴桃果實營養(yǎng)豐富，有水果之王的美稱[1]，但其果實采后不耐貯藏，易軟化腐爛[2]。適度掛樹預貯[3]、適宜后熟處理[4]和適宜栽培方式均可提高獼猴桃的耐貯性和抗冷害能力，例如：采用氮肥+磷肥+農(nóng)家肥相結(jié)合的施肥方式可顯著延長秦美獼猴桃果實的貯藏期[5]，套袋可改善貴長獼猴桃的貯藏性[6]，但CPPU 處理對果實耐貯性的損害大于對照[7]。合適的采后保鮮技術(shù)可改善獼猴桃的貯藏性，例如：1-MCP處理[8]、哌珀霉素+1-MCP 處理[9]可保持獼猴桃的硬度，細胞分裂素（6-BA）處理[10]可保持華美2 號獼猴桃在貯藏保鮮期內(nèi)的硬度和果實品質(zhì)，茉莉酸甲酯處理[11]可提高貴長獼猴桃的貯藏性能，高氧、草酸、褪黑素和CO2高滲復合處理[12-15]均可延緩獼猴桃的衰老和品質(zhì)劣變。

目前，關(guān)于獼猴桃的貯藏研究主要集中在采前種植和采后保鮮處理2 個方面，在采果方法對獼猴桃貯藏性的影響方面，僅有王明召等[16]的研究表明，紅陽獼猴桃留果柄比去果柄具有較佳的貯藏性能。為了比較不同采果方法對獼猴桃貯藏性的影響，筆者選用東紅獼猴桃品種，采取留果柄和常規(guī)去果柄2 種采果方法，在室溫貯藏的條件下，探討了不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實品質(zhì)劣變和抗氧化能力的影響，以期為獼猴桃的采果方法優(yōu)選提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗在湖南省岳陽臨湘市五里牌鎮(zhèn)千針村土壤肥力中等的獼猴桃園中進行。供試獼猴桃品種為東紅，樹齡為5 a。

1.2 試驗方法

在獼猴桃果實達到生理成熟后分別采用2 種方法采果：一是常規(guī)的去果柄采摘，即手指輕推果柄法；二是留果柄采摘，即采果時用剪刀緊貼果蒂剪斷、保留連接果蒂處的基部果柄。從每種采果方法中各隨機選100 個果實，分別裝入打有透氣孔的塑料袋中置（25±1）℃的房間內(nèi)進行室溫貯藏，定期取樣測定果實的硬度、軟化率和腐爛率，同時將果實去皮切塊后置于液氮中速凍，于-80℃超低溫冰箱中保存用于果肉的品質(zhì)特性、衰老劣變指標、抗氧化酶活性和抗氧化能力的測定。每個處理重復3 次。

1.3 測定方法

1.3.1 果肉硬度采用TPA（CT3 Brookfield，美國）質(zhì)構(gòu)儀測定，使用P/2 探頭（直徑2 mm）測定果實赤道部位的硬度，測試深度為10 mm，測前、測中速度均為1 mm/s，測后速度為10 mm/s。

1.3.2 軟化率將有手感、可食用的獼猴桃計為軟化果，每隔3 d 統(tǒng)計1 次軟化獼猴桃的數(shù)量，按公式（1）計算獼猴桃的軟化率。

軟化率（%）=3 d 內(nèi)獼猴桃軟化果數(shù)/貯藏的獼猴桃果實總數(shù)×100 （1）

將每個處理每次的獼猴桃軟化果按次序排好，用于后期繼續(xù)觀察果實的腐爛情況。

1.3.3 腐爛率以出現(xiàn)肉眼可見的菌斑、果實出現(xiàn)腫脹、果皮顏色變黑或不同于本色的果實認定為腐爛果實，從軟化果中每3 d 統(tǒng)計1 次腐爛果數(shù)量，按公式（2）計算獼猴桃的腐爛率。

腐爛率（%）=3 d 內(nèi)腐爛果數(shù)/貯藏果實總數(shù)×100 （2）

1.3.4 果實營養(yǎng)指標可溶性固形物含量采用PAL-1便攜式手持折光儀測定，可滴定酸含量采用酸堿滴定法測定，VC 含量采用2,6-二氯靛酚滴定法測定。

1.3.5 丙二醛（MDA）含量參照曹建康等[17]的方法測定。

1.3.6 細胞膜透性參照姚丹等[18]的方法使用電導率儀測定。以相對電導率（%）來表示細胞膜透性的大小。

1.3.7 抗氧化酶活性超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和過氧化物酶（POD）活性參照曹建康等[17]的方法測定。

1.3.8 總抗氧化能力參照Pan 等[19]的方法，略作修改。磷鉬試劑為28 mmol/L 磷酸鈉、4 mmol/L 鉬酸銨和0.6 mol/L 濃硫酸溶液。在10 mL 比色管中分別加入4 mL 上述磷鉬試劑、0.4 mL 樣品液，在95℃水浴中恒溫90 min，然后在695 nm 波長下測定吸光度A。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Origin 2016 軟件進行作圖分析，SPSS 20.0軟件進行差異顯著性檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實硬度和軟化率的影響

果實硬度是果實的品質(zhì)指標，可以反映獼猴桃果實的耐貯性，硬度越高則果實的耐貯性越強[2]。如圖1 所示，不同采果方式的獼猴桃果實在室溫下貯藏時，果肉硬度總體都呈下降趨勢，這與CPPU 處理[7]、掛樹預貯[3]和不同施肥處理[5]后的獼猴桃果實在貯藏期間的硬度變化結(jié)果一致。當室溫貯藏18 d時，常規(guī)去果柄采摘處理的果實硬度僅為0.30 kg/cm2，而留果柄采摘處理的硬度為1.40 kg/cm2，留果柄采摘比去果柄采摘的果實硬度高366.67%，且留果柄采摘的果實硬度下降速率較緩，說明留果柄采摘可顯著提高貯藏期果實的商品率。

圖1 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期硬度的變化

隨著貯藏時間的延長，不同采果方式處理的獼猴桃果實軟化率都呈上升趨勢，這與不同保鮮劑處理后獼猴桃在貯藏期間的果實軟化率結(jié)果[8-12]一致，但不同處理間獼猴桃果實開始軟化和軟化完畢的時間差異較大（見圖2）。常規(guī)去果柄采摘處理在貯藏6、12 和15 d 時的軟化率分別為5%、85%和100%；而留果柄采摘處理在貯藏6 d 時，軟化率為0，到貯藏第21 d 時，軟化率才接近60%。常規(guī)去果柄采摘處理果實開始軟化的時間早于留果柄采摘，且其果實軟化完畢的時間也早于留果柄采摘。因此，留果柄采摘可推遲果實軟化的時間，并顯著降低軟化率，從而提果實的耐貯性。

圖2 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期軟化率的變化

2.2 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實腐爛率的影響

腐爛率是反映果實貯藏效果的一個重要指標[15-16]。隨著貯藏時間的延長，獼猴桃的果實腐爛率呈上升趨勢，但留果柄采摘處理果實出現(xiàn)腐爛的時間比去果柄采摘處理晚3 d，在貯藏6 d 內(nèi)留果柄采摘處理未發(fā)現(xiàn)果實腐爛，而去果柄采摘處理的果實腐爛率為2.5%；在貯藏18 d 時，去果柄采摘和留果柄采摘處理的腐爛率分別達65.0%和34.6%，去果柄采摘比留果柄采摘處理高30.4 個百分點；到貯藏至21 d 時，去果柄采摘處理的腐爛率達100%，而留果柄采摘處理的腐爛率只有52.0%，比去果柄采摘處理低48.0 個百分點；留果柄采摘處理的果實腐爛率在整個貯藏期間均低于去果柄采摘處理（見圖3）。這說明留果柄采摘可減緩果實的軟化，并降低腐爛率，從而保持果實較長的貯藏期。常規(guī)去果柄采摘由于獼猴桃果蒂處的保護性薄層被破壞，使水和氧氣的滲透失去了阻隔層，而且果實容易受到各種微生物的侵害，導致果實容易腐爛[16]。

圖3 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期腐爛率的變化

2.3 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實營養(yǎng)品質(zhì)的影響

可溶性固形物含量（SSC）是決定果實口感及風味的重要指標，同時也是反映果實耐貯性的重要指標[14-16]。在貯藏期間，獼猴桃果實的SSC 呈先上升、趨于平穩(wěn)后再下降的趨勢，但留果柄采摘處理的SSC達到穩(wěn)定所用時間比去果柄采摘處理的長，其SSC 達到峰值18.2%需要18 d，而去果柄采摘處理的SSC 達到峰值17.8%僅需12 d（圖4）。去果柄采摘處理的SSC 峰值出現(xiàn)早于留果柄采摘處理，可能是由于去果柄采摘使獼猴桃果蒂處的保護性薄層被破壞[16]，從而導致果實后熟加速。

圖4 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期的SSC 變化

可滴定酸（TA）含量影響果實的風味[8-10]。在貯藏過程中，果實呼吸代謝一般優(yōu)先利用有機酸類物質(zhì)[20]，所以隨著貯藏期的延長，后熟階段果實的可滴定酸濃度會逐漸降低[14-16]。因此，隨貯藏時間的延長，2 種采果方式處理的TA 含量均呈下降趨勢。當貯藏至18 d 時，留果柄采摘和去果柄采摘處理的果實TA含量，與貯藏初期相比分別下降17.86%和25.00%（圖5）。留果柄采摘的TA 含量下降緩慢，說明留果柄采摘可保持獼猴桃果實良好的貯藏性。

圖5 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期的TA 含量變化

獼猴桃果實富含VC，其含量變化可反映果實內(nèi)在品質(zhì)的變化[14-16]。在貯藏過程中，獼猴桃果實的VC 含量總體呈下降趨勢。當貯藏至18 d 時，留果柄采摘和去果柄采摘處理的果實VC 含量由剛采摘時的1.38 g/kg 分別降至0.45 和0.32 g/kg（圖6）。這說明留果柄采摘可延緩獼猴桃果實中VC 含量的下降。

圖6 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期的VC 含量變化

2.4 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實膜滲透性和MDA 含量的影響

在貯藏過程中，2 種采果方式處理果實的相對電導率均呈上升趨勢，這與葡萄[21]貯藏的結(jié)果一致，但留果柄采摘可使獼猴桃果實的相對電導率保持較低水平，果實的膜滲透性（相對電導率）在貯藏3、9 和18 d時，去果柄采摘處理分別為37.27%、45.53%和65.00%，而留果柄采摘處理分別為35.73%、42.60%和57.47%，差異達顯著水平（圖7）。這說明留果柄采摘可保持細胞膜良好的完整性，從而延緩衰老；而去果柄采摘由于獼猴桃果蒂處的保護性薄層被破壞，加速了獼猴桃組織的氧化，從而使膜的完整性被破壞[16]。

圖7 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期膜滲透性的變化

膜脂過氧化產(chǎn)物MDA 積累過多會破壞細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性，導致生物功能喪失和果實衰老[8]。隨著貯藏時間的延長，2 種采果方式處理獼猴桃果實中MDA 含量均快速增加，這與葡萄[21]貯藏結(jié)果一致。果實中MDA 含量在貯藏3、9 和18 d 時，去果柄采摘處理分別為0.52、1.26 和5.11 nmol/g，而留果柄采摘處理分別為0.41、0.61 和1.86 nmol/g，留果柄采摘比去果柄采摘處理的MDA 含量明顯低（圖8）。這說明留果柄采摘有利于保持果實細胞膜的完整性，延緩衰老。

圖8 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期MDA 含量的變化

2.5 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實抗氧化酶活性的影響

植物在正常代謝過程中或在各種環(huán)境脅迫下都會產(chǎn)生活性氧和自由基，且會啟動抗氧化酶系統(tǒng)清除這些物質(zhì)[22-23]。其中，第一個發(fā)揮作用的是SOD 酶，其可清除細胞中產(chǎn)生的O2-·，控制膜的過氧化水平，從而減輕膜被O2-·的傷害。在室溫貯藏條件下，獼猴桃果肉組織的SOD 活性呈先升后降的趨勢，這與何靖柳等[22-23]的研究結(jié)果一致。留果柄采摘與去果柄采摘的果實在貯藏期間SOD 活性的變化趨勢一致，均是從較低水平迅速上升達峰值后下降；但留果柄采摘可延緩SOD 活性峰值的出現(xiàn)，留果柄采摘處理在貯藏到12 d 時SOD 活性達峰值210 U/（g·min）,而去果柄采摘處理在貯藏至9 d 時SOD 活性就達峰值186 U/（g·min），其峰值較留果柄采摘低11.43%；且留果柄采摘可維持果實貯藏后期較高的SOD 活性，貯藏至18 d 時，留果柄采摘處理果實的SOD 活性雖降為180.33U/（g·min），但仍比去果柄采摘處理高38.07%（見圖9）。這說明留果柄采摘可減少活性氧的積累，較好地保持細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性。去果柄采摘比留果柄采摘果實的SOD 活性峰值出現(xiàn)更早，可能是去果柄采摘造成了一定的機械傷，加速了果實的氧化和衰老[24-25]。

圖9 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期SOD 活性的變化

CAT 是又一重要的抗氧化酶，其也可清除植物體內(nèi)的活性氧和自由基[22-23]。與SOD 活性變化趨勢一樣，CAT 活性整體也是呈先升后降的趨勢。去果柄采摘處理貯藏至9 d 時CAT 活性達峰值13.77 U/（g·min），而留果柄采摘處理貯藏至12 d 時才達峰值15.81 U/（g·min），其峰值比去果柄采摘高14.81%；留果柄采摘處理的CAT 活性在貯藏后期明顯高于常規(guī)去果柄采摘（見圖10）。留果柄采摘處理能維持貯藏后期較高的CAT 活性，從而可減少活性氧的積累，延長貯藏期。

圖10 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期CAT 活性的變化

POD 是植物體內(nèi)另一種重要的O2-·清除酶[22-23]。2 種采果方式處理獼猴桃果實的POD 活性均為先升后降；但留果柄采摘處理的POD 活性達到峰值的時間比去果柄采摘處理晚3 d，其峰值分別為0.76 和0.56 U/（g·min），留果柄采摘比去果柄采摘的峰值高35.71%；在整個貯藏期間，留果柄采摘處理的POD活性均高于去果柄采摘處理，特別是在貯藏后期表現(xiàn)明顯（見圖11）。這說明留果柄采摘處理能保持細胞內(nèi)較高的活性氧清除能力。

圖11 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期POD 活性的變化

2.6 不同采果方法對貯藏期獼猴桃果實總抗氧化能力的影響

在酸性條件下，Mo6+被提取液還原成Mo5+形成的綠色磷酸鋁在波長695 nm 處有最大吸收峰，其吸光度越大說明被還原的Mo6+越多，則待測樣液的總抗氧化能力越強[23]。獼猴桃果實在貯藏過程中，其總抗氧化能力表現(xiàn)為先增后降，留果柄采摘處理的果實貯藏至12 d 時總抗氧化能力達峰值0.32，而去果柄采摘處理貯藏到9 d 時總抗氧化能力就達峰值0.28；且留果柄采摘處理可維持貯藏后期果實較高的總抗氧化能力，其總抗氧化能力的峰值比去果柄采摘處理高14.29%（見圖12）。

圖12 不同采果方法獼猴桃果實在貯藏期總抗氧化能力的變化

3 小 結(jié)

隨著貯藏時間的延長，獼猴桃果實組織的SOD、CAT、POD 活性和總抗氧化能力均表現(xiàn)為先升后降，MDA 含量則表現(xiàn)為持續(xù)上升，說明獼猴桃果實組織的細胞膜透性逐漸增大，細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性也逐漸被破壞，在獼猴桃果實的表現(xiàn)上是其硬度下降、軟化率和腐爛率升高。

留果柄采摘處理由于保護了果蒂處的組織，降低了膜脂的過氧化作用，可維持果實較高的活性氧清除酶（SOD、POD 和CAT）的活性，能夠有效減少因活性氧在體內(nèi)的積累而對膜造成的損傷，從而明顯改善獼猴桃果實的貯藏性。