茍 婧 胡凌云 顏 璐

四川省廣安市人民醫(yī)院(638000)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因較復(fù)雜，治療也較困難[1]。相關(guān)研究[2]顯示，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)多與內(nèi)分泌失調(diào)、自身免疫系統(tǒng)紊亂以及染色體異常等有關(guān)。甲胎蛋白(AFP)為胚胎期血漿蛋白中一種主要成分，伴隨著胚胎發(fā)育和細(xì)胞分裂旺盛過程，推測可能是胚胎發(fā)育過程中促進(jìn)細(xì)胞生長的內(nèi)源性物質(zhì)[3]。人絨毛膜促性腺激素(HCG)中α亞基與黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)亞基相同，受精卵著床后胎盤絨毛膜的合體滋養(yǎng)層細(xì)胞開始分泌HCG，在妊娠婦女體內(nèi)水平升高，為促進(jìn)月經(jīng)黃體繼續(xù)發(fā)育而成為妊娠黃體，確保妊娠過程完整[4]。另外由于妊娠及胎兒發(fā)育均與豐富的血液供應(yīng)和血管生成關(guān)系密切，而血管生成素(Ang)于妊娠早期即有表達(dá)[5]。本研究通過檢測血清AFP、HCG及Ang素水平，探討其與孕早期復(fù)發(fā)流產(chǎn)的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2019年5月-2020年5月本院行負(fù)壓吸宮術(shù)女性112例為研究對象，將60例正常妊娠行人工流產(chǎn)為對照組，流產(chǎn)≥2次的自然流產(chǎn)者52例為流產(chǎn)組。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)超聲檢測確診為早孕；②既往有過正常妊娠史；③本次妊娠無流產(chǎn)癥狀。流產(chǎn)組納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)超聲檢查子宮發(fā)育正常且確定為早孕；②夫婦雙方染色體核型檢測均正常；③流產(chǎn)組既往有過≥2次流產(chǎn)。兩組排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能出現(xiàn)明顯異常；②合并患有婦科腫瘤；③宮頸功能不全及多胎妊娠。

1.2 檢測方法

①血清AFP和HCG水平：取晨空腹靜脈血，取上清于全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀-羅氏cobase411檢測。②Ang含量：取流產(chǎn)者新鮮絨毛和蛻膜組織，使用生理鹽水漂洗后，用10%甲醛溶液固定過夜，石蠟包埋切片，采用免疫組化SP法檢測組織中Ang-1和Ang-2表達(dá)，免疫組化試劑購于北京博奧森生物科技有限公司；采用病理圖像分析系統(tǒng)對病理圖像掃描并截圖，每張切片截圖的陽性區(qū)域采用Image-ProPlusVersion6.0圖像分析軟件定量檢測，測定陽性產(chǎn)物的積分光密度值(IOD值)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般情況

對照組年齡(29.7±2.5)歲(20～38歲)，孕周(10.2±1.3)周(8～12周)；流產(chǎn)組年齡(30.0±2.4)歲(21～39歲)，孕周(10.4±1.3)周(8～12周)。兩組年齡及孕周無差異(P>0.05)。

2.2 兩組血清AFP和HCG水平

流產(chǎn)組血清AFP和HCG水平均低于對照組(P<0.04)。利用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析，兩組血清AFP與HCG均呈正相關(guān)(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清AFP和HCG水平相關(guān)性

2.3 兩組不同組織中Ang-1和Ang-2 IOD值

病理學(xué)切片分析發(fā)現(xiàn)，Ang-1和Ang-2在兩組絨毛組織的滋養(yǎng)層細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞的胞漿內(nèi)以及蛻膜組織腺上皮細(xì)胞及基質(zhì)胞胞漿內(nèi)均有表達(dá)，但流產(chǎn)組在絨毛組織中表達(dá)高于對照組、在蛻膜組織中表達(dá)低于對照組(均P<0.05)。見表2。

表3 兩組孕婦不同組織中Ang-1和Ang-2 IOD值比較

3 討論

相關(guān)研究[6]顯示，誘導(dǎo)孕婦發(fā)生自然流產(chǎn)的因素主要包括遺傳因素缺陷、染色體異常、胎盤內(nèi)分泌以及母體健康等。對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性早期妊娠流產(chǎn)采取有效診斷，有助于制定合理的預(yù)防以及處理對策。

由于AFP基本生理功能為運輸功能，同時與不飽和脂肪酸具有高度親和性，還能與膽紅素和雌激素進(jìn)行結(jié)合，因此被認(rèn)為其在向增殖細(xì)胞運送這些物質(zhì)中起一定作用[7]。魏柏等[8]研究證明，AFP對人乳腺細(xì)胞有增殖作用，能夠與生長因子協(xié)同促進(jìn)豬卵巢顆粒細(xì)胞的增殖分化，對子宮的生長調(diào)節(jié)具有一定作用。相關(guān)研究[9]顯示，AFP能有效抑制母體對胚胎發(fā)育的免疫應(yīng)答，可以與人精液進(jìn)行選擇性結(jié)合，作為一種頂體反應(yīng)相關(guān)因子阻止早熟的頂體反應(yīng)。有報道[10]指出，血清β-HCG一般在婦女受孕后第9～11天即出現(xiàn)顯著升高，在妊娠第8～10周時水平達(dá)到頂峰，在第12周后開始下降并逐漸趨于穩(wěn)定。本研究結(jié)果顯示，流產(chǎn)組孕婦血清AFP和HCG水平均低于對照組，相關(guān)性分析也顯示兩組孕婦血清AFP與HCG均呈正相關(guān)，說明血清HCG及AFP水平與早期妊娠流產(chǎn)有一定關(guān)系，提示有助于臨床診斷早孕預(yù)后。妊娠是一個復(fù)雜過程，在妊娠早期胚胎發(fā)育過程中，血管系統(tǒng)的形成主要與血管發(fā)生和血管新生有關(guān)，而血管生成一般受多種血管相關(guān)因子協(xié)調(diào)作用，因此認(rèn)為影響血管系統(tǒng)形成的因素均可能導(dǎo)致流產(chǎn)[11]。血管生成素家族主要包括Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4 4種因子，其中Ang-1和Ang-2均可作用于內(nèi)皮特異性受體酪氨酸激酶2(Tie-2)，影響血管內(nèi)皮形成[12]。郭維娟等[13]研究發(fā)現(xiàn)，妊娠過程中Ang-1及Ang-2的正常表達(dá)有助于胚胎正常生長發(fā)育，而過度表達(dá)可能會造成血管缺陷，從而導(dǎo)致胚胎死亡，引發(fā)流產(chǎn)。本研究病理學(xué)切片分析發(fā)現(xiàn)，Ang-1和Ang-2在兩組孕婦絨毛組織的滋養(yǎng)層細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞的胞漿內(nèi)以及蛻膜組織腺上皮細(xì)胞及基質(zhì)胞胞漿內(nèi)均有表達(dá)，但Ang-1和Ang-2在絨毛組織中的表達(dá)流產(chǎn)組高于對照組，認(rèn)為導(dǎo)致孕婦流產(chǎn)的原因可能與Ang-1和Ang-2的過度表達(dá)有關(guān)，過度表達(dá)可能會造成絨毛血管形成障礙，對胚胎發(fā)育造成一定影響；另外Ang-1和Ang-2在蛻膜組織中的表達(dá)則是流產(chǎn)組低于對照組，認(rèn)為當(dāng)其水平降低時，可能導(dǎo)致血管生成減少，從而影響胚胎的營養(yǎng)供給，最終造成流產(chǎn)發(fā)生。

綜上所述，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性血清AFP和HCG水平異常降低，二者呈正相關(guān)。孕早期檢測血清AFP和HCG水平，有助于診斷早孕預(yù)后。本研究發(fā)現(xiàn)在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者絨毛蛻膜組織中Ang-1和Ang-2過度表達(dá)，提示其正常表達(dá)對維持正常妊娠可能有重要作用。