張永欣，楊 燚，崔紅軍，劉冠星，蘇建東

（天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司，天津 300308）

為了確定Ⅰ型鴨病毒性肝炎卵黃抗體的最小預(yù)防劑量，將2批Ⅰ型鴨病毒性肝炎卵黃抗體以不同劑量注射不同日齡健康易感雛鴨，通過攻毒保護(hù)試驗來確定卵黃抗體最小預(yù)防劑量，現(xiàn)將試驗結(jié)果報道如下。

1 材 料

1.1 試驗動物

1、4、5、7日齡健康易感雛鴨各100只，由卵黃抗體中和效價檢測陰性的種蛋孵化。

1.2 飼料

試驗鴨用飼料購自北京榮達(dá)興飼料技術(shù)有限公司。

1.3 卵黃抗體

Ⅰ型鴨病毒性肝炎卵黃抗體（批號為201801和201802），卵黃抗體中和效價分別為1∶298、1∶286，由天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司制備。

1.4 攻毒用強(qiáng)毒

Ⅰ型鴨肝炎病毒RP-Z 株，由天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司制備。

1.5 注射器

1 mL、5 mL 注射器，購自上海治宇醫(yī)療器械有限公司。

2 方 法

2.1 1日齡和4日齡雛鴨攻毒試驗

用生理鹽水將201801 批和201802 批卵黃抗體中和效價稀釋為1∶256，取1 日齡和4 日齡健康易感雛鴨各100 只，注射卵黃抗體，劑量分別為0.1、0.3、0.5、1.0 mL·只-1，每個批次每個劑量注射不同日齡健康易感雛鴨10 只，為試驗抗體組。同時另設(shè)同批不同日齡健康雛鴨各10 只作為攻毒對照，10只作為健康對照。注射抗體后24 h，攻毒對照組鴨和試驗抗體組鴨各肌肉注射RP-Z 株強(qiáng)毒0.2 mL（含100 LD50）。各組鴨同條件下隔離飼養(yǎng)觀察10 d，記錄結(jié)果。試驗分組及攻毒情況見表1。

表1 1日齡和4日齡雛鴨分組及攻毒情況

2.2 5日齡和7日齡雛鴨攻毒試驗

用生理鹽水將201801 批和201802 批卵黃抗體中和效價稀釋為1∶256，取5 日齡和7 日齡健康易感雛鴨各100 只，注射卵黃抗體，劑量分別為0.3、0.5、1.0、1.5 mL·只-1，每個批次每個劑量注射不同日齡健康易感雛鴨10 只，為試驗抗體組。同時另設(shè)同批不同日齡健康雛鴨各10 只作為攻毒對照，10 只作為健康對照。注射抗體后24 h，攻毒對照組鴨和試驗抗體組鴨各肌肉注射RP-Z株強(qiáng)毒0.2 mL（含100 LD50）。各組鴨同條件下隔離飼養(yǎng)觀察10 d并記錄結(jié)果。試驗分組攻毒情況見表2。

表2 5日齡和7日齡雛鴨分組及攻毒情況

3 結(jié)果與分析

3.1 1日齡和4日齡雛鴨試驗結(jié)果

1日齡和4日齡雛鴨攻毒試驗結(jié)果見表3。

表3 1日齡和4日齡雛鴨不同劑量抗體攻毒保護(hù)試驗結(jié)果

由表3可知，2批卵黃抗體注射1日齡、4日齡健康易感雛鴨后，注射0.1 mL 時，攻毒保護(hù)率為30%～50%；注射0.3 mL 時，攻毒保護(hù)率為80%～90%；注射0.5 和1.0 mL 時，攻毒保護(hù)率為100%；攻毒對照組死亡率為100%；健康對照組100%健活。

3.2 5日齡和7日齡雛鴨試驗結(jié)果

5 日齡和7 日齡雛鴨攻毒試驗結(jié)果見表4。由表4可知，2批卵黃抗體注射5日齡和7日齡健康易感雛鴨，注射0.3 mL 時，攻毒保護(hù)率為50%～70%；注射0.5 mL 時，攻毒保護(hù)率為80%～90%；注射1.0和1.5 mL時，攻毒保護(hù)率為100%；攻毒對照組死亡率為90%～100%；健康對照組100%健活。

綜合分析表3 和表4 結(jié)果得出，卵黃抗體注射1、4、5、7日齡健康易感雛鴨，1日齡和4日齡雛鴨注射量≥0.3 mL時，攻毒保護(hù)率≥80%。5日齡和7日齡雛鴨注射量≥0.5 mL時，攻毒保護(hù)率≥80%。

表4 5日齡和7日齡雛鴨不同劑量抗體攻毒保護(hù)試驗結(jié)果

4 結(jié) 論

以攻毒保護(hù)率達(dá)到80%作為判定標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ型鴨肝炎病毒卵黃抗體對1日齡和4日齡鴨的最小預(yù)防劑量為0.3 mL·只-1，對5 日齡和7 日齡鴨的最小預(yù)防劑量為0.5 mL·只-1。

為了確保本制品臨床使用效果，5日齡以下雛鴨臨床緊急預(yù)防使用劑量確定為0.5 mL·只-1，5日齡及以上確定為1.0 mL·只-1。