康永剛， 陳永亮， 廖云瓊

（徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇徐州221006）

微生物發(fā)酵飼料是利用微生物繁殖和代謝，將飼料原料中部分多糖、脂肪、蛋白質(zhì)、纖維素等復(fù)雜的大分子物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為單糖、 有機(jī)酸和小肽等易于消化吸收的小分子物質(zhì)， 不僅能夠改善飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、腸道健康，調(diào)節(jié)免疫功能，還能減少因長(zhǎng)期使用抗生素造成的細(xì)菌耐藥、 免疫力下降、環(huán)境污染和藥物殘留等問(wèn)題（徐輝等，2021；孫波等，2021；隋潔等，2018；劉艷新等，2017）。 當(dāng)前在飼料工業(yè)中用于生產(chǎn)發(fā)酵飼料的微生物主要有酵母菌、芽孢桿菌、鏈球菌、乳酸桿菌、米曲霉和黑曲霉等（翟曉莉，2011），其中枯草芽孢桿菌能夠改善動(dòng)物腸道的菌群，抑制或殺滅致病菌，促進(jìn)機(jī)體的消化吸收， 增強(qiáng)機(jī)體免疫力和提高抗應(yīng)激能力（Molnar 等，2011）。 目前，以枯草芽孢桿菌和酵母菌為混合菌用來(lái)生產(chǎn)發(fā)酵飼料在白羽肉雞中的應(yīng)用報(bào)道較少。 本試驗(yàn)擬在基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的復(fù)合微生物發(fā)酵飼料， 探究發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能、腸道菌群及氮磷排泄的影響，為復(fù)合微生物發(fā)酵飼料在肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用提供實(shí)踐參考和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 復(fù)合微生物由枯草芽孢桿菌N-8、 枯草芽孢桿菌N-10 和酵母菌按4∶4∶3 比例混合而成（活菌數(shù)平均為1.0×1010cfu/g，由徐州市隆興生物科技有限公司提供）。

發(fā)酵飼料的制備： 在基礎(chǔ)日糧中加入40%水，以40 mL/kg 將復(fù)合微生物均勻噴灑在基礎(chǔ)日糧上，邊噴灑邊攪拌均勻，裝入發(fā)酵塑料袋（規(guī)格為50 kg）中，排出空氣，在溫度為30 ℃的條件下發(fā)酵3 d， 發(fā)酵結(jié)束后將其烘干即得復(fù)合微生物發(fā)酵飼料。 發(fā)酵飼料營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 發(fā)酵飼料的營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)隨機(jī)選取健康、體重相近的600 只1 日齡愛拔益加（AA＋）肉仔雞，公母各半，隨機(jī)分成5 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20 只。 對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧， 各試驗(yàn)組依次用25%、50%、75%和100%發(fā)酵飼料替代基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2，試驗(yàn)期為42 d。 試驗(yàn)動(dòng)物由湯陰縣全達(dá)家禽育種有限公司提供。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)前徹底清掃并消毒雞舍、雞籠及飼喂設(shè)備等，采用層疊式雞籠飼養(yǎng)，每籠5 只雞，定時(shí)飼喂，自由采食、飲水，定期清掃雞舍，及時(shí)通風(fēng)換氣，每天早晚觀察雞只采食及精神狀況，嚴(yán)格按照肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)飼喂及按照免疫程序接種疫苗。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 分別在試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)每只雞空腹稱重，詳細(xì)記錄飼料消耗量，計(jì)算平均日采食量、平均日增重、料重比。 平均日增重/g=（末重-始終）/試驗(yàn)天數(shù)， 料重比=平均日采食量/平均日增重。

1.4.2 腸道菌群測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后， 隨機(jī)抽取接近平均體重且健康的60 只雞（每個(gè)重復(fù)2 只），于次日08：00 頸靜脈放血屠宰， 在無(wú)菌條件下采集盲腸內(nèi)容物，按照孫波等（2021）采用的平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定盲腸內(nèi)大腸桿菌、沙門氏菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量， 由徐州市動(dòng)物疫病工程技術(shù)研究中心進(jìn)行檢測(cè)。

1.4.3 氮磷排泄率測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束前， 連續(xù)3 d采集每個(gè)重復(fù)新鮮糞樣，每天采集3 次，剃除異物并分別混勻后，各取糞樣100 g，加入10%硫酸10 mL并混合均勻，于溫度為65 ~ 70 ℃條件下烘干至恒重，回潮、粉碎后制成風(fēng)干樣品。采用凱氏定氮法測(cè)定糞樣中氮的含量， 用分光光度法測(cè)定磷的含量，參照 《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》（張麗英，2007）中方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算氮磷排泄率。由徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院飼料分析實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理 采用Excel 2020 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步統(tǒng)計(jì)處理，SPSS 20.0 進(jìn)行單因素方差分析，并進(jìn)行Duncan 氏多重比較，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表3 可知，100%發(fā)酵飼料組平均日增重與75%發(fā)酵飼料組相比差異不顯著 （P＞0.05），100%發(fā)酵飼料組比對(duì)照組、25%、50%、75%發(fā)酵飼料組分別高5.37、4.91、3.71、1.6 g，增重率分別為9.21%、8.35%、6.19%、2.58%，差異顯著（P＜0.05）；100%、75%、50%發(fā)酵飼料組料重比顯著低于對(duì)照組和25%發(fā)酵飼料組 （P＜0.05），100%、75%、50%發(fā)酵飼料組組間差異不顯著（P＞0.05），100%發(fā)酵飼料組比對(duì)照組、25%、50%、75%發(fā)酵飼料組分別低0.04、0.03、0.01、0.01。

表3 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞腸道菌群的影響 由表4 可知，復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞腸道菌群影響顯著，100%發(fā)酵飼料組大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），且隨著日糧中發(fā)酵飼料比例的增加逐漸減少；100%發(fā)酵飼料組乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量最高，顯著高于對(duì)照組、25%、50%發(fā)酵飼料組（P＜0.05），與75%發(fā)酵飼料組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表4 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞腸道菌群的影響lg cfu/g

2.3 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞氮磷排泄的影響 由表5 可知，100%發(fā)酵飼料組氮排泄率比對(duì)照組、25%、50%發(fā)酵飼料組分別低7.94、6.43、2.45 個(gè)百分點(diǎn)（P＜0.05），比75%發(fā)酵飼料組低0.1 個(gè)百分點(diǎn) （P＞0.05）；100%發(fā)酵飼料組磷排泄率最低， 顯著低于對(duì)照組、25%、50%發(fā)酵飼料組（P＜0.05），與75%發(fā)酵飼料組相比差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響 微生物菌劑可使發(fā)酵后的飼料更容易被消化吸收（吳逸飛等，2016），同時(shí)可去除抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、適口性及消化能力，從而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能（梁天柱等，2021），但由于受到微生物菌劑種類、配比、試驗(yàn)動(dòng)物、飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)管理模式等影響， 微生物發(fā)酵飼料在肉雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用有著不同的飼喂效果（趙永玉，2021）。葉成智等（2021）研究認(rèn)為，日糧添加2.5%發(fā)酵飼料可提高肉雞的日采食量和日增重。Ashayerizadeh等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，飼用發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、肉質(zhì)和脂質(zhì)代謝能等產(chǎn)生了有益影響。 本試驗(yàn)研究表明， 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料100%添加時(shí)能顯著提高白羽肉雞平均日采食量和日增重，降低料重比，這可能是因?yàn)榘l(fā)酵飼料通過(guò)微生物發(fā)酵產(chǎn)生了特殊的香味，提高了適口性，增加了肉雞的采食量，同時(shí)枯草芽孢桿菌和酵母菌可通過(guò)消耗腸道游離氧和競(jìng)爭(zhēng)腸內(nèi)養(yǎng)分等抑制有害菌生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，穩(wěn)定pH，通過(guò)分泌有益活性代謝物質(zhì)，改善腸道形態(tài)和促進(jìn)消化酶分泌來(lái)提高日糧養(yǎng)分的利用率，從而提高動(dòng)物生產(chǎn)性能（楊榮等，2019；陳繼發(fā)等，2019；劉晶晶等，2014）。

3.2 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞腸道菌群的影響 腸道是動(dòng)物消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要場(chǎng)所，并且對(duì)外來(lái)病原菌有著一定的抵抗能力（張小鳳等，2018）。通常情況下，動(dòng)物腸道中的菌群結(jié)構(gòu)保持著一種微生態(tài)環(huán)境平衡（于明等，2021），但隨著外界環(huán)境的改變， 腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境也會(huì)隨之發(fā)生相應(yīng)變化。 本試驗(yàn)結(jié)果顯示，100%發(fā)酵飼料組大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量均顯著低于對(duì)照組，且隨著日糧中發(fā)酵飼料比例的增加逐漸減少，而乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量逐漸增加， 說(shuō)明當(dāng)微生物菌劑進(jìn)入腸道后，就會(huì)使乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌大量繁殖，在增殖時(shí)可以產(chǎn)生乳酸、乙酸等有機(jī)酸，降低腸道pH，使有害菌生長(zhǎng)受到抑制，從而保證微生態(tài)環(huán)境平衡（司振書，2005；王建輝等，2004）。 有研究認(rèn)為，在肉雞日糧中添加微生物發(fā)酵飼料可以增加腸道有益菌數(shù)量、 減少有害菌數(shù)量（陳曉春等，2021；羅利龍，2020），Shayerizadeha等（2018） 研究發(fā)現(xiàn)， 日糧中用發(fā)酵菜籽粕代替50%豆粕飼喂肉雞可以顯著增加肉雞腸道乳酸含量和乳酸菌的數(shù)量，降低沙門氏菌的定植，降低回腸中大腸桿菌數(shù)量。劉鳳美等（2018）研究表明，日糧中添加乳酸菌、 枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌可以改善腸道微生物區(qū)系，促進(jìn)有益菌增殖，抑制有害菌生長(zhǎng)，與單菌種相比，復(fù)合菌的使用效果更佳。

3.3 復(fù)合微生物發(fā)酵飼料對(duì)白羽肉雞氮磷排泄的影響 畜禽糞污已經(jīng)成為農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的主要污染源之一， 而糞尿中的氮磷是污染物中關(guān)注最多的，過(guò)多的氮會(huì)引起空氣質(zhì)量下降，水源和土壤氮元素富營(yíng)養(yǎng)化， 磷會(huì)導(dǎo)致土壤硬化和水體富營(yíng)養(yǎng)化，因此，降低畜禽氮磷的排放是減少環(huán)境污染的有效途徑之一 （張善媚等，2016； 郭冬生等，2012；Spephen 等，2005）。 有研究發(fā)現(xiàn)，微生物發(fā)酵飼料具有調(diào)節(jié)機(jī)體腸道微生態(tài)平衡， 降低腸道酸堿度的功效， 且在發(fā)酵中產(chǎn)生的大量有益菌能夠高效地消化飼料中的物質(zhì)，減少氨、磷的排放，進(jìn)而 改善飼養(yǎng)環(huán)境 （鄭紫 薇，2020；Deng 等，2012）。 呂月琴等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵飼料， 蛋雞腸道中乳酸桿菌數(shù)量顯著提高，氮磷排泄量降低，禽舍環(huán)境得到改善。 易中華等（2005）研究表明，在肉仔雞低蛋白質(zhì)日糧中添加復(fù)合酶和植酸酶可顯著改善肉仔雞生產(chǎn)性能，降低氮、磷的排放量。 本試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)合微生物發(fā)酵飼料100%添加時(shí)，氮、磷排泄率最低，隨著日糧中發(fā)酵飼料比例的增加氮磷排泄率逐漸減少，與劉敬盛（2016）、趙玉娥（2018）研究結(jié)果相似， 說(shuō)明枯草芽孢桿菌和酵母菌能有效改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，提高消化吸收飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，進(jìn)而提高白羽肉雞對(duì)氮磷的利用率，降低氮磷排放。

4 結(jié)論

復(fù)合微生物發(fā)酵飼料可顯著提高肉雞的生長(zhǎng)性能、改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，降低氮磷排泄率，當(dāng)添加100%復(fù)合微生物發(fā)酵飼料時(shí)效果最好， 值得推廣應(yīng)用。