＊邵廣晴 方慶

（1.萬博科技職業(yè)學院 安徽 230031 2.安徽中醫(yī)藥大學 安徽 230031）

馬來酸氟伏沙明片為薄膜衣劃痕片，除去包衣后顯白色或類白色，其主要成分馬來酸氟伏沙明（Fluvoxamine Maleate，F(xiàn)ML）（C15H21F3N2O2·C4H4O4），化學名為（E）-5-甲氧基-1-（4-三氟甲苯基）-O-（2-胺乙肟基）-1-戊酮馬來酸鹽，在甲醇或乙醇中易溶，在水中略溶。它是一種選擇性作用于腦神經(jīng)細胞的5-羥色胺再攝取抑制劑，對非腎上腺素過程影響很小，對α-腎上腺素能、β-腎上腺素能、組胺、M-膽堿能、多巴胺能或6-羥色胺受體幾乎不具有親和性。作用譜廣，能對焦慮、激動、失眠和精神病產(chǎn)生有利的作用，能有效治療各種類型的抑郁癥和強迫癥，并能有效用于社交焦慮癥、驚恐性障礙、身體變形障礙等。副作用小，不會出現(xiàn)性功能障礙、視力模糊等癥狀。臨床上用于抑郁癥及相關癥狀的治療，強迫癥癥狀治療。在美國藥典USP43-NF38中，馬來酸氟伏沙明片含量測定使用的是高效液相色譜法，其流動相為乙腈-緩沖液（8g的1-戊烷磺酸鈉鹽和1.0g磷酸二氫鉀，加1000ml水溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.00±0.05）=38:62。在中國藥典2020版中，馬來酸氟伏沙明片含量測定同樣使用高效液相色譜法，但流動相為磷酸鹽緩沖液（含1.25%磷酸氫二銨與0.275%庚烷磺酸鈉的水溶液，用磷酸調(diào)pH值至3.0）-甲醇=45:55。兩種方法中均使用了離子對試劑，且使用了較大濃度的緩沖鹽濃度，從降低實驗成本并減少離子對試劑對環(huán)境污染及色譜系統(tǒng)使用壽命等方面考慮，本文參照USP43中有關物質測試2方法，調(diào)整流動相中鹽濃度及有機相比例，以0.01mol/L的醋酸鈉溶液-乙腈-甲醇=40:40:20為流動相，每升流動相中加入2ml三乙胺，用冰醋酸調(diào)pH至4.5，并驗證此方法是否能準確可靠地進行馬來酸氟伏沙明片中馬來酸氟伏沙明含量的測定。結果表明，此方法穩(wěn)定性好，實驗結果準確可靠，靈敏度高。

1.材料

(1)儀器

高效液相色譜儀（Waters 2695）：美國Waters公司；FE28 pH計：梅特勒-托利多有限公司；超聲波清洗機：昆山超聲儀器有限公司；MS105分析天平：日本島津。

(2)試劑

甲醇（HPLC級）：TEDIA公司；乙腈（HPLC級）：TEDIA公司；醋酸鈉（AR級）：天津永大試劑有限公司；冰醋酸（AR級）：國藥集團；三乙胺：西隴化學試劑有限公司；純化水：娃哈哈純凈水。馬來酸氟伏沙明對照品：批號：100792- 201902；含量：99.9%；中國藥品生物制品檢定研究院。

2.方法

(1)色譜條件

Welch XB-C8色譜柱（4.6×250mm，5μm），流動相：0.01mol/L的醋酸鈉溶液-乙腈-甲醇=40:40:20為流動相，每升流動相中加入2ml三乙胺，用冰醋酸調(diào)pH至4.5；流速：1.0ml/min；檢測波長：254nm；柱溫：30℃；進樣體積：10μl。

(2)樣品配制

①對照品溶液配制：精密稱取馬來酸氟伏沙明對照品約10mg置100ml量瓶中，加甲醇-水（60:40）溶解并稀釋至刻度。②供試品溶液配制：取馬來酸氟伏沙明片20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于馬來酸氟伏沙明0.1g），置100ml量瓶中，加甲醇-水（60:40）適量，超聲溶解15min后，用甲醇-水（60:40）稀釋至刻度，用0.22μm濾膜濾過，取續(xù)濾液5ml置50ml量瓶中，用甲醇-水（60:40）稀釋至刻度。

3.結果

(1)專屬性實驗

分別量取空白溶劑甲醇-水=60:40，對照品溶液及供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖(圖1）。在此色譜條件下，空白溶劑無干擾，理論板數(shù)以氟伏沙明峰計，不低于2000，氟伏沙明與相鄰峰分離度大于1.5。

圖1 空白溶劑、對照品溶液和供試品溶液圖譜

(2)線性關系

取馬來酸氟伏沙明對照品100.37mg置100ml量瓶中，加甲醇-水（60:40）溶解并稀釋至刻度，作為對照品貯備液。再用甲醇-水（60:40）稀釋制成每1ml含0.05mg、0.08mg、0.1mg、0.12mg、0.15mg、0.20mg的溶液。量取各濃度對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。濃度與峰面積關系見表1。

表1 馬來酸氟伏沙明線性關系

以峰面積為橫坐標，對照品濃度為縱坐標，作線性回歸方程。得回歸方程為：Y=17398771x-7984，r=0.9999。

結果表明：在0.05mg/ml～0.20mg/ml范圍內(nèi)，馬來酸氟伏沙明濃度與峰面積呈良好的線性關系。

(3)精密度試驗

取同一標準濃度對照品溶液，連續(xù)進樣6針，記錄色譜圖，數(shù)據(jù)見表2。

表2 馬來酸氟伏沙明進樣精密度試驗

結果：6針對照品溶液峰面積均值為1737455，RSD為0.23%，說明儀器精密度良好。

(4)檢測限定量限試驗

取標準濃度對照品溶液，用甲醇-水（60:40）逐級稀釋制成氟伏沙明峰信噪比S/N約為10的溶液，作為定量限測試溶液；用甲醇-水（60:40）逐級稀釋制成氟伏沙明峰信噪比S/N約為3的溶液，作為檢測限測試溶液。

結果：馬來酸氟伏沙明定量限濃度約為0.025μg/ml；檢測限濃度約為0.013μg/ml。

(5)穩(wěn)定性試驗

取新配制的供試品溶液及對照品溶液，室溫放置，分別于0h、2h、4h、8h、12h進樣，記錄色譜圖。數(shù)據(jù)見表3。

表3 馬來酸氟伏沙明溶液穩(wěn)定性試驗

結果：供試品溶液室溫放置12h，峰面積RSD為5.53%；對照品溶液室溫放置12h，峰面積RSD為3.85%。溶液不穩(wěn)定。

(6)重復性試驗

取馬來酸氟伏沙明片適量，按供試品溶液配制法平行配制6份供試品溶液，進樣，記錄色譜圖。數(shù)據(jù)見表4。

表4 馬來酸氟伏沙明重復性試驗

結果：6份供試品溶液平均含量為99.8%，RSD為0.38%，重復性良好。

(7)回收率試驗

取馬來酸氟伏沙明對照品適量，按馬來酸氟伏沙明片處方加入各輔料，按供試品溶液制備方法分別制成每1ml含馬來酸氟伏沙明0.08mg、0.10mg、0.12mg的溶液各3份。量取各測試溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算回收率。數(shù)據(jù)見表5。

表5 馬來酸氟伏沙明回收率試驗

續(xù)表

結果：9份測試溶液平均回收率為100.43%，RSD為0.84%。

4.討論

（1）中國藥典2020年版及USP43中，馬來酸氟伏沙明片含量測定采用的方法均為高效液相色譜法，在色譜法中均使用了離子對試劑，且使用了較大濃度的緩沖鹽濃度。盡管離子對試劑可以增加樣品在色譜柱上的保留時間、改善分離性質。但是離子對試劑對儀器傷害很大，會對色譜柱造成不可逆的損傷，另外離子對試劑也很難從色譜柱上沖洗干凈，色譜柱的使用壽命也會大大縮短。并且離子對試劑的價格較為昂貴，又污染環(huán)境。本方法使用的試劑均為常規(guī)試劑，大大降低了檢測成本，對環(huán)境的污染也較小。

（2）本品供試品溶液及對照品溶液不穩(wěn)定，室溫放置12h，供試品溶液峰面積RSD為5.53%，對照品溶液峰面積RSD為3.85%，均大于2.0%。故應臨用前新制。