張明芳 趙楠楠 屠婷婷 孫國威

作者單位：150000 黑龍江哈爾濱，黑龍江迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司（張明芳、趙楠楠、屠婷婷、孫國威）

150000 黑龍江哈爾濱，羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司（張明芳）

兒童的健康成長受到家庭和社會的高度關(guān)注，孕前和孕期女性身體檢查對胎兒的生長發(fā)育至關(guān)重要，也為生育健康嬰兒、提高人口質(zhì)量進行充分準(zhǔn)備。TORCH檢測是對一組影響胎兒生長發(fā)育和引起圍產(chǎn)期感染的病原體進行檢測，包括剛地弓形蟲（Toxoplasma gondii，TOX）、風(fēng)疹病毒（rubella virus，RV）、巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus，CMV）、單純皰疹病毒（herpes simplex virus，HSV）。備孕和孕期女性作為TORCH病原體的易感人群，在感染后會導(dǎo)致胎兒發(fā)育停滯，甚至流產(chǎn)、死胎，也可能在生產(chǎn)過程中感染新生兒，造成新生兒眼疾、聽力障礙、智力缺陷，嚴(yán)重者會發(fā)生偏癱等后遺癥［1-3］。本研究對黑龍江部分地區(qū)育齡女性TORCH檢測結(jié)果展開分析，旨在探討該檢測對優(yōu)生優(yōu)育的重要性，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2020年1月—2021年8月送檢于黑龍江迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司的2849份TORCH項目樣本，來源于婦產(chǎn)科就診的孕期和備孕女性，年齡18～48歲，平均（30.47±6.29）歲。根據(jù)年齡將受檢者分為4組，分別為18～25歲（426名）、26～35歲（2075名）、36～45歲（280名）、≥46歲組（68名）。

1.2 儀器與試劑 使用瑞士羅氏公司cobas e601電 化學(xué)發(fā)光分析儀，所用檢測試劑、定標(biāo)液、質(zhì)控品和耗材均為原裝配套產(chǎn)品；篩查樣本使用煙臺艾德康生物科技有限公司生產(chǎn)的艾德康全自動酶聯(lián)免疫分析儀，以及北京貝爾生物工程有限公司提供的優(yōu)生試劑盒。當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均在控。

1.3 研究方法 使用無抗凝劑的標(biāo)準(zhǔn)管采集血液標(biāo)本5 mL，血液凝固后以3500 r/min（離心半徑為20 cm）離心5 min分離血清。由配送人員使用冷鏈運輸至實驗室，所有樣本經(jīng)cobas e601電化學(xué)發(fā)光分析儀測定TORCH八項，包括單純皰疹病毒Ⅰ抗體（herpes simplex virusⅠantibody，HSV1-IgG）、單純皰疹病毒Ⅱ抗體（herpes simplex virusⅡantibody，HSV2-IgG）、RV免疫球蛋白M（RV immunoglobulin M，RV-IgM）、RV免疫球蛋白G（RV immunoglobulin G，RV-IgG）、CMV-IgM、CMV-IgG、TOX-IgM和TOX-IgG。樣本同時使用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linkedimmunosorbent assay，ELISA）檢測TORCH八 項，記錄結(jié)果。電化學(xué)發(fā)光檢測法中，除陰性和陽性結(jié)果外，有一部分結(jié)果處于臨界值，臨界值結(jié)果介于陽性和陰性之間，無法排除未感染情況，因此需格外關(guān)注。HSV1-IgG的臨界值為0.6～＜1.0 COI，HSV2-IgG的臨界值為0.51～＜1.0 COI，RV-IgM的臨界值為0.8～＜1.0 COI，CMV-IgM的臨界值為0.7～＜1.0 COI，CMV-IgG臨界值為0.5～＜1.0 kU/L，TOX-IgM的臨界值為0.8～＜1.0 COI，TOX-IgG的臨界值為1～＜3 kU/L，對檢測所得的臨界值結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

1.4 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)黑龍江迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司倫理批準(zhǔn)（審批號：20211025）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以例（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 采用電化學(xué)發(fā)光法檢測不同年齡組TORCH八項結(jié)果比較 不同年齡組間HSV1-IgG、HSV2-IgG、RV-IgG、TOX-IgG水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。在生育高峰年齡段（26～35歲組和36～45歲組），36～45歲組HSV1-IgG（χ2＝3.972，P＝0.000）、HSV2-IgG（χ2＝6.823，P＝0.000）、TOXIgG（χ2＝2.244，P＝0.025）的陽性檢出率均明顯高于26～35歲組。見表1。

表1 不同年齡育齡期女性TORCH八項指標(biāo)陽性檢出率

2.2 電化學(xué)發(fā)光法檢測TORCH八項指標(biāo)的臨界值結(jié)果比較 電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果有一部分臨界值樣本，在26～35歲年齡組RV-IgM臨界值結(jié)果占比達1.11%，僅次于≥46歲組的1.47%；26～35歲組和≥46歲組CVM-IgM的臨界值結(jié)果占比高于其他兩組；各組TOX-IgM臨界值占比與陽性率一致。見表2。

表2 不同年齡育齡期女性TORCH八項指標(biāo)臨界值占比

2.3 電化學(xué)發(fā)光法與ELISA對TORCH八項指標(biāo)的陽性檢出率比較 除了RV-IgG外，其他項目電化學(xué)發(fā)光法檢測的陽性率均高于ELISA法。見表3。

表3 電化學(xué)發(fā)光法與ELISA法檢測TORCH八項指標(biāo)陽性檢出率比較

3 討論

免疫學(xué)檢測的聯(lián)合應(yīng)用在孕產(chǎn)婦產(chǎn)前檢查中可以早期評估妊娠高危因素，從而在必要時采取措施，降低妊娠和生產(chǎn)的危險，提高生育質(zhì)量［4-5］。孕前及孕期檢查的病原微生物除了乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒螺旋體和人類免疫缺陷病毒外，還有RV、CMV、HSV、TOX等。妊娠女性在孕期或圍產(chǎn)期由于免疫功能以及激素水平的變化，更易于微生物的入侵或感染，這類病原微生物可引起垂直傳播，導(dǎo)致孕婦流產(chǎn)、早產(chǎn)，胎兒畸形或死亡，也可能導(dǎo)致新生兒智力障礙或截癱等后遺癥［6-7］。

飛沫中的RV經(jīng)呼吸道傳播，新生兒若在出生后感染，則很少發(fā)生并發(fā)癥，但孕婦若在妊娠初期 3個月感染RV則后果嚴(yán)重，因為病毒能通過胎盤，導(dǎo)致胎兒嚴(yán)重殘障，如失明、耳聾、先天性心臟病和智力遲緩，稱為先天性風(fēng)疹綜合征，嚴(yán)重者甚至造成死亡［8-10］。RV-IgM陽性提示急性RV感染，RV-IgG 陽性提示接種疫苗或既往存在RV感染，但是當(dāng)兩次測定滴度增加時，也支持RV急性感染。本研究統(tǒng)計結(jié)果顯示，無論是電化學(xué)發(fā)光法還是ELISA，檢測RV-IgG均有較高的陽性率，分析原因可能是由于疫苗接種導(dǎo)致人群產(chǎn)生免疫力，從而造成陽性率較高。電化學(xué)發(fā)光法檢測人群主要是孕產(chǎn)婦，因此需定期復(fù)查，觀察結(jié)果變化，確定是否為RV急性感染，必要時給予適當(dāng)?shù)闹委煷胧?。RV-IgM檢測結(jié)果顯示，電化學(xué)發(fā)光法的檢測陽性率明顯高于ELISA，分析原因為電化學(xué)發(fā)光法的敏感度較高，因此檢出的RV-IgM陽性率高于ELISA法。另外，電化學(xué)發(fā)光法產(chǎn)生一部分處于臨界值的結(jié)果，由于臨界值無法排除感染病毒，因此要在7 d內(nèi)采集第2份樣本，若病毒滴度較第1次增高，則提示RV急性感染，因此臨界值結(jié)果應(yīng)該引起重視。

CMV可感染任何年齡人群，引起長期隱匿性感染，感染者的唾液和尿液是主要傳染源，也可通過血液、生殖道分泌物和乳汁傳播［11-13］。本研究中，兩種方法檢測的CMV-IgG陽性率分別達到了99.72%和97.91%，陽性率較高可能與疫苗接種有關(guān)。CMV容易感染，CMV-IgG對其幾乎不具有保護力，檢出陽性提示急性或既往感染，且孕婦CMV-IgG陽性可能具有垂直傳播的危險性，因此應(yīng)通過親和力實驗確定是否為4個月內(nèi)的原發(fā)感染。若3～4周后再次采血檢測，CMV-IgG滴度明顯升高，則提示為急性CMV感染。本研究中電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果顯示，CMV-IgM陽性率達到0.88%，而處于臨界值的樣本占比達到1.16%，這部分受檢者應(yīng)在14 d內(nèi)重新采集血液再次檢測，以確定是否感染，而ELISA檢測的陽性率為0.65%，兩種檢測方法所得結(jié)果也提示電化學(xué)發(fā)光法敏感度更高，尤其在臨界值范圍內(nèi)的樣本更應(yīng)得到臨床重視。感染CMV后僅有輕微癥狀或癥狀不明顯，但孕婦感染CMV容易引起宮內(nèi)感染，導(dǎo)致胎兒感染，可能造成新生兒永久性中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙［14］。HSV家族的兩個重要成員HSV1和HSV2的流行病學(xué)特點和臨床表現(xiàn)有許多相似之處，但兩者的傳播途徑和感染部位不同。HSV1首先感染口咽部，然后以潛伏狀態(tài)定植于三叉神經(jīng)節(jié)。HSV2主要通過性接觸傳播，在生殖器官繁殖，潛伏于骶神經(jīng)節(jié)。新生兒皰疹是一種嚴(yán)重的感染性疾病，由HSV1和HSV2感染所致，均在分娩時通過產(chǎn)道獲得。新生兒皰疹可累及皮膚、眼部、口腔，嚴(yán)重者會發(fā)生器官及中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染［15-16］。本研究表明，隨年齡增長，HSV1-IgG和HSV2-IgG陽性率升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，36歲以上兩組均有較高的陽性率，因此年齡較大的女性在備孕階段和孕期更應(yīng)警惕，避免不良妊娠。

TOX可以通過胎盤，如果女性在孕前或孕期感染，則有可能造成胎兒損傷，多數(shù)先天感染的嬰兒在出生時沒有癥狀，但是后來有可能會發(fā)展為脈絡(luò)視網(wǎng)膜炎，造成視力和聽力損傷，也可能會導(dǎo)致智力、運動障礙［17-18］。因此，妊娠期間對TOX感染的早期診斷和正確處理對新生兒健康是非常必要的。對TOX感染的檢測指標(biāo)有TOX-IgM和TOX-IgG，前者可以反映急性期感染或新感染，后者則表示潛伏期或者急性感染［19］。本研究結(jié)果顯示，TOX-IgG陽性率與生育年齡有關(guān)，而26～35歲組TOX-IgM陽性率最高，可見TOX感染在高峰生育年齡段的孕產(chǎn)婦中更應(yīng)受到重視。同時，電化學(xué)發(fā)光法的陽性檢出率高于ELISA，有利于感染者的篩查，早期進行干預(yù)與治療，更有益于新生兒健康。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光法檢測TORCH八項的陽性率高于ELISA，還檢測到一部分臨界值樣本，此類受檢者需進一步跟進，以排除不良情況。電化學(xué)發(fā)光法敏感度較高，適合早期診斷，但考慮到檢測成本及受試人群，ELISA方法也是比較適合婚前檢查的檢測手段。如備孕或孕期檢查，使用敏感度高的方法測定則是更恰當(dāng)?shù)倪x擇。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突