史玉東，劉夢(mèng)瑤，宋 晨，李勇枝，盧衛(wèi)紅*

（1 哈爾濱工業(yè)大學(xué)化工與化學(xué)學(xué)院 哈爾濱 150001 2 哈爾濱工業(yè)大學(xué)極端環(huán)境營(yíng)養(yǎng)與防護(hù)研究所 哈爾濱 150001 3 內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司研發(fā)中心 呼和浩特 011500 4 中國(guó)航天員科研訓(xùn)練中心 北京 100094）

營(yíng)養(yǎng)是影響嬰幼兒成長(zhǎng)發(fā)育的重要環(huán)境因素之一，生命早期1 000 d 營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)影響一生的健康[1]。世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦0～6月嬰兒純母乳喂養(yǎng)，母乳喂養(yǎng)的嬰幼兒發(fā)育水平也成為WHO建議的孩子發(fā)育標(biāo)準(zhǔn)[2-4]。斷乳期是從完全母乳喂養(yǎng)到充分利用家庭食物的過(guò)渡時(shí)期，也是嬰幼兒成長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期[5]。對(duì)于繼續(xù)母乳喂養(yǎng)的7～12月齡嬰兒，其所需要的部分能量，以及99%的鐵、75%的鋅、80%的維生素B6、50%的維生素C等必須從添加的輔食中獲得[6-7]。腸道菌群與人的生長(zhǎng)發(fā)育、健康情況息息相關(guān)，斷乳期是腸道菌群構(gòu)建的關(guān)鍵時(shí)期。最初，嬰兒腸道菌群多樣性差，輔食的添加會(huì)引起腸道菌群發(fā)生巨大改變并逐漸趨于穩(wěn)定，接近成人[8]。研究營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)了解斷乳期嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育影響十分重要。

鑒于嬰幼兒的脆弱敏感性以及調(diào)查的（倫理學(xué)）難度，幾乎沒(méi)有對(duì)健康嬰幼兒的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)性研究。對(duì)于嬰幼兒營(yíng)養(yǎng)攝入的了解主要依賴于一些觀察性研究，如不同喂養(yǎng)方式下的嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育研究。無(wú)菌動(dòng)物（Germ free animal，GF 動(dòng)物）作為微生物背景最清晰的動(dòng)物，可有效進(jìn)行菌群、基因及其它環(huán)境因素的控制，是研究腸道菌群對(duì)人類疾病及健康影響的最有效的動(dòng)物模型[9]。利用無(wú)菌動(dòng)物構(gòu)建攜帶斷乳期嬰兒腸道菌群的人源菌群動(dòng)物（Human floral-associated animal，HFA 動(dòng)物），可為飲食干預(yù)對(duì)腸道菌群的影響提供一個(gè)有效的模型。本文搭建了斷乳期人源菌群小鼠模型，并驗(yàn)證人源菌群對(duì)小鼠大腦、腸道發(fā)育及免疫等相關(guān)指標(biāo)的影響，為后續(xù)針對(duì)斷乳期嬰幼兒營(yíng)養(yǎng)干預(yù)性研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明GF 小鼠，10～15 g，18 只，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SYXK（鄂）2015-0084。

1.1.2 菌群來(lái)源 糞便樣本來(lái)源于順產(chǎn)母乳喂養(yǎng)且未接受過(guò)抗生素治療及服用益生菌類產(chǎn)品的6月齡健康女?huà)?，糞樣以每管200 mg 裝入無(wú)菌EP管中，裝若干管，液氮速凍，-80 ℃保存。

1.1.3 試劑 E.Z.N.A.?Soil DNA Kit 抽提試劑盒，美國(guó)Omega Bio-Tek 公司；小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-1 （Insulin-like growth factor-1，IGF-1）ELISA 試劑盒，中國(guó)聯(lián)科生物公司；小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3（In-sulin-like growth factor binding protein-3，IGFBP-3）ELISA 試劑盒，美國(guó)RD 公司；C10∶0 脂肪酸 （Fatty acid，F(xiàn)A）、C16∶0 FA、C17∶0 FA、C18∶0 FA、C18∶1 FA 標(biāo)品，美國(guó)Sigma 公司；甲醇、二氯甲烷、乙酰氯、正己烷、乙腈、正庚烷（色譜純級(jí)），天津市康科德公司；無(wú)水硫酸鈉、碳酸鉀、丁羥甲苯（分析純級(jí)），阿拉丁試劑（上海）有限公司；MRS 培養(yǎng)基，北京陸橋技術(shù)股份有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

無(wú)菌隔離器，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)；CP21GⅡ高速冷凍離心機(jī)，日立公司；超凈工作臺(tái)，新加坡ESCO公司；超低溫冰箱、HM325 石蠟切片機(jī)，美國(guó)Thermo 公司；PPTHK-21B 攤片烤片機(jī)、PPDB-21C電腦程控組織包埋機(jī)，襄樊徠克生物電子儀器廠；ECLIPSE 顯微鏡，美國(guó)尼康公司；K3 酶標(biāo)儀，上海歐穎實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；MX-S 可調(diào)式混勻儀，美國(guó)SCILOGEX 公司；I-Class 高效液相色譜，美國(guó)Waters 公司；TARGA C18 色譜柱 （20 mm×2.1 mm，5.0 μm），美國(guó)Higgins Analytical 公司；SCIEX QTRAP 4500 液質(zhì)質(zhì)聯(lián)用儀，美國(guó)AB SCIEX 公司；電子秤，梅特勒公司；ABI GeneAmpR9700 型PCR 儀，美國(guó)ABI 公司。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)方案 將1 周齡無(wú)菌仔鼠 （體質(zhì)量10～15 g）及對(duì)應(yīng)母鼠隨機(jī)置于2 臺(tái)隔離器中（每臺(tái)隔離器9 只仔鼠），分別用于建立人源腸道菌群模型（HMC）和無(wú)菌小鼠模型（GFC）。實(shí)驗(yàn)周期為7周，仔鼠3 周齡斷乳后與母鼠分離，實(shí)驗(yàn)期間小鼠在無(wú)菌隔離器中隨意進(jìn)食（基礎(chǔ)日糧）和飲水，控制溫度在（23±2）℃，保持相對(duì)濕度在（55±5）%之間，12 h 明暗交替周期，如圖1所示。本研究的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn) （批準(zhǔn)編號(hào)：HZAUMO-2020-0054），并且嚴(yán)格按照華中農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查委員會(huì)的管理要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

圖1 實(shí)驗(yàn)方案圖Fig.1 Schematic of experimental design

菌群移植步驟如下：取1 管200 mg 斷乳期嬰兒糞便樣本，于37 ℃水浴快速?gòu)?fù)蘇，然后轉(zhuǎn)入無(wú)菌小鼠隔離器內(nèi)，加2 mL 無(wú)菌生理鹽水搖勻至無(wú)明顯大顆粒，靜置5 min 取上清液灌胃；每只母鼠（產(chǎn)后1 周的母鼠）灌胃0.2 mL；灌胃后，將剩余菌液上清均勻涂抹至母鼠腹部乳頭及1 周齡仔鼠全身；每天按上述操作步驟進(jìn)行一次灌胃與涂抹，連續(xù)1 周，將小鼠糞便進(jìn)行革蘭氏染色，并使用MRS 培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)模型構(gòu)建是否成功。

建模成功后，每隔2 周測(cè)量小鼠體質(zhì)量1 次。收集產(chǎn)后2 周母鼠及3 周齡仔鼠糞便樣本，-80℃保存。8 周齡時(shí)，小鼠禁食12 h，稱取動(dòng)物體質(zhì)量后，采用眼球取血法采集每只小鼠血液1.5 mL，頸椎脫臼法處死小鼠。將所得血液室溫放置40 min以上，3 500 r/min 離心10 min，取上層血清于新的EP 管中，-80 ℃保存。

按以下步驟取小鼠組織樣本：解剖小鼠，取完整腦組織，手術(shù)刀分為兩半，一半最佳切削溫度（Optimal cutting temperature，OCT） 包埋，-80 ℃保存；另一半福爾馬林固定，室溫保存。取肝臟，放入凍存管，立即液氮速凍，隨后轉(zhuǎn)移至-80 ℃保存。取結(jié)腸，PBS 清洗，福爾馬林固定，室溫保存。

1.3.2 糞便中菌群組成的測(cè)定

1.3.2.1 DNA 抽提和PCR 擴(kuò)增 根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行微生物群落總DNA 抽提；使用338F （（5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3'） 和806R （5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3'） 對(duì)16S rRNA基因V3-V4 可變區(qū)進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。

1.3.2.2 Illumina Miseq 測(cè)序 利用Illumina 公司的Miseq PE300 平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序（上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司）。

1.3.2.3 數(shù)據(jù)處理 使用fastp （version 0.20.0）[10]軟件對(duì)原始測(cè)序序列進(jìn)行質(zhì)控，使用FLASH（version 1.2.7）[11]軟件進(jìn)行拼接。使用UPARSE（version 7.1）[12]軟件，根據(jù)97%[12-13]的相似度對(duì)序列進(jìn)行OTU 聚類并剔除嵌合體。利用RDP classifier（version 2.2）[14]對(duì)每條序列進(jìn)行物種分類注釋，比對(duì)Silva 16S rRNA 數(shù)據(jù)庫(kù)（version 138），設(shè)置比對(duì)閾值為70%。

1.3.3 海馬組織和結(jié)腸組織HE 染色病理檢測(cè)

1.3.3.1 組織包埋 將用福爾馬林固定好的組織放入包埋盒，浸入70%酒精，過(guò)夜；按照80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇Ⅰ、100%乙醇Ⅱ、100%乙醇+二甲苯（1∶1）、二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、石 蠟Ⅰ（54～56 ℃）、石 蠟Ⅱ（56～58 ℃）、石 蠟Ⅲ（58～60 ℃）順序?qū)M織進(jìn)行處理。

1.3.3.2 組織切片 將組織進(jìn)行連續(xù)切片（3 μm），64 ℃烤片30 min，于室溫保存。

1.3.3.3 HE 染色 將組織切片進(jìn)行脫蠟水化；隨后用蘇木精染色15 min，自來(lái)水洗，鹽酸酒精分化2 s，自來(lái)水返藍(lán)15 min，鏡下觀察反藍(lán)程度；伊紅染色3 min；放入100%酒精Ⅰ5 min，100%酒精Ⅱ5 min，二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ10 min；最后使用中性樹(shù)膠進(jìn)行封片（封片過(guò)程中應(yīng)避免氣泡的產(chǎn)生）；顯微鏡下觀察，并進(jìn)行拍照。

1.3.4 血清、肝臟IGF-1 與IGFBP-3 含量測(cè)定 采用夾心ELISA 方法檢測(cè)。將包被抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)，加待測(cè)樣品，樣品與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物；然后加酶標(biāo)記抗體，固相免疫復(fù)合物上的抗體與酶標(biāo)抗體結(jié)合。加底物顯色，固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。加入終止液終止顯色反應(yīng)并于波長(zhǎng)450 nm 處讀取OD 值。

1.3.5 大腦脂肪酸含量的測(cè)定

1.3.5.1 腦樣本制備 將大腦樣品制備成勻漿液，質(zhì)量濃度為100 mg/mL。取100 μL 勻漿液置于1.5 mL EP 管中；加入400 μL 正己烷，渦旋1 min，10 000×g 離心10 min。取上清液250 μL 旋干，加1 mL 甲醇復(fù)溶，渦旋3 min，取上清800 μL 于液相小瓶中用于LC-ESI MS 檢測(cè)FA。

1.3.5.2 色譜條件 TARGA C18 色譜柱（20 mm×2.1 mm，5.0 μm），流動(dòng)相為A（水，含5 mmol/L 乙酸銨）和B（乙腈），等度洗脫（0～10 min，30%A）。流速為0.2 mL/min，柱溫為35 ℃，進(jìn)樣量為5 μL，樣品盤(pán)溫度為4 ℃。

1.3.5.3 質(zhì)譜條件 離子源為ESI 源，檢測(cè)模式為負(fù)離子檢測(cè)模式，氣簾氣（CUR）172 kPa，碰撞氣（CAD）中等，離子源氣1（GS1）310 kPa，離子源氣2（GS2）345 kPa，電噴霧電壓-4 500 V，加熱器溫度350 ℃，碰撞電壓 （CE）-5 V，滯留時(shí)間35 ms。

小鼠大腦不同脂肪酸的LC-Qtrap MS 檢測(cè)條件見(jiàn)表1。

表1 FA 的LC-Qtrap MS 檢測(cè)條件Table 1 LC-Qtrap MS detection conditions for FA

1.3.5.4 FA 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密稱取FA標(biāo)準(zhǔn)品（C17∶0 FA）適量溶于甲醇溶液，配成濃度為10 mmol/L 的母液。取適量FA 母液混合，甲醇逐級(jí)稀釋為50，25，10，2，0.4，0.08 μmol/L 和0.016 μmol/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照上面的液質(zhì)檢測(cè)條件進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。以FA 標(biāo)準(zhǔn)品含量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，為樣品中FA 的定量檢測(cè)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 在本研究中，所有試驗(yàn)均獨(dú)立重復(fù)至少3 次，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差的形式表示結(jié)果。各組數(shù)據(jù)均通過(guò)SPSS 17.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），顯著性分析有Duncan's 檢驗(yàn)得到。P<0.05 表明結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠模型菌群定值效果評(píng)估

2.1.1 3 周齡小鼠糞便初步評(píng)估 將3 周齡小鼠糞便進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，如圖2所示。

從圖2可以看出，GFC 組小鼠糞便鏡檢為無(wú)菌，HMC 組小鼠糞便鏡檢顯示為陽(yáng)性。表明無(wú)菌小鼠模型（GFC）腸道中無(wú)活體微生物。

圖2 3 周齡小鼠糞便革蘭氏染色Fig.2 Gram staining of feces of mice aged 3 weeks

HMC 小鼠糞便經(jīng)MRS 培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)24 h后，結(jié)果如圖3所示。

圖3 HMC 組3 周齡小鼠糞便中雙歧桿菌培養(yǎng)結(jié)果Fig.3 Culture results of Bifidobacteria in feces of 3-weeks-old mice in HMC group

從圖3可以看出，HMC 組小鼠糞便中存在雙歧桿菌。雙歧桿菌作為嬰兒腸道菌群的代表菌株之一，該結(jié)果初步表明斷乳期人源小鼠模型搭建成功。

2.1.2 菌群組成分析 從圖4可以看出，母乳喂養(yǎng)的6月齡嬰兒腸道菌群以雙歧桿菌為優(yōu)勢(shì)菌，同時(shí)發(fā)現(xiàn)大腸桿菌、瘤胃球菌、腸球菌、韋榮球菌等。而菌群移植1 周后母鼠及9 只3 周齡斷乳模型小鼠腸道菌群中以大腸桿菌、亨蓋特拉菌、瘤胃球菌為主體，伴有雙歧桿菌、腸球菌、韋榮球菌等。對(duì)比發(fā)現(xiàn)斷乳期嬰兒、菌群移植1 周后母鼠及9只3 周齡斷乳模型鼠腸道菌群組成在屬水平有一定的相似度，特別是雙歧桿菌作為嬰兒腸道菌群的代表微生物在小鼠腸道的定植，說(shuō)明人源菌群移植成功，斷乳期人源菌群小鼠搭建成功，能夠部分模擬斷乳期嬰兒腸道菌群。

圖4 斷乳期嬰兒、母鼠和斷乳模型鼠屬水平菌群組成Fig.4 The microbial composition of weaning infants，mother mice and weaned model mice at the genus level

2.2 小鼠體質(zhì)量

從表2可以看出，2 個(gè)小鼠模型體質(zhì)量隨飼養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高。采用SPSS 17.0 數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間均數(shù)比較采用t 檢驗(yàn)。結(jié)果顯示，不同模型小鼠在不同飼養(yǎng)時(shí)期，組間無(wú)顯著差異，說(shuō)明腸道菌群的移植不影響小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)期間，各模型小鼠健康狀況良好，無(wú)腹瀉、增肥等不良現(xiàn)象，未發(fā)現(xiàn)小鼠有中毒或自然死亡。

表2 小鼠體質(zhì)量變化（n=9）Table 2 The change of body weight in mice （n=9）

2.3 小鼠大腦發(fā)育

2.3.1 小鼠海馬CA1 區(qū)形態(tài)結(jié)構(gòu) 從圖5可以看出，小鼠海馬CA1 區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)有明顯差異。HMC 組細(xì)胞排列緊密，細(xì)胞邊緣清晰，細(xì)胞內(nèi)核體著色深且很清楚；而在GFC 組中，細(xì)胞邊緣模糊，細(xì)胞大，核體小，著色不清晰，這說(shuō)明HMC組較GFC 組小鼠腦細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，更有活力。此外，神經(jīng)元突觸間隙也有明顯差異。在圖5中，HMC 組箭頭所指神經(jīng)元突觸間隙在單位空間內(nèi)的數(shù)量明顯多于GFC 組箭頭所指的數(shù)量，且HMC組的突觸發(fā)育良好，突觸長(zhǎng)度和密度都有明顯優(yōu)于GFC 組的趨勢(shì)，這也表明HMC 組小鼠大腦海馬組織神經(jīng)元細(xì)胞比GFC 組神經(jīng)元細(xì)胞具有活力、年輕、延緩衰老的特征。以上均說(shuō)明腸道菌群對(duì)小鼠海馬CA1 區(qū)發(fā)育影響顯著。

圖5 小鼠海馬CA1 區(qū)HE 染色Fig.5 HE staining of hippocampal CA1 region in mice

2.3.2 小鼠大腦脂肪酸含量 從圖6可以看出，兩模型小鼠大腦中的脂肪酸含量存在區(qū)別。其中HMC 組的單不飽和脂肪酸C16∶1（P<0.001）、C18∶1（P < 0.01）和多不飽和脂肪酸C18∶3（P < 0.05）、C20∶3（P<0.01）、C20∶4（P<0.001）、C22∶5（P<0.05）、C22∶6（P<0.01）含量較GFC 組顯著降低。飽和脂肪酸、部分不飽和脂肪酸 （C14∶1、C15∶1、C18∶2、C20∶5、C22∶1）含量組間差異均不顯著。DHA（C22∶6）和AA（C20∶4）是大腦中主要的長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸，DHA、AA 和EPA（C20∶5）及其衍生物參與腦細(xì)胞的形成和發(fā)育，促進(jìn)神經(jīng)蛋白合成及神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞軸突的延伸和新突觸的形成有重要作用，并參與大腦思維和記憶形成過(guò)程[15]。由上文可知，在營(yíng)養(yǎng)攝入相同的情況下，植入嬰兒腸道菌群的HMC 組小鼠大腦發(fā)育效果明顯高于GFC 組，而HMC 組小鼠大腦中多鏈不飽和酸含量明顯低于GFC 組，可能是由于小鼠大腦發(fā)育過(guò)程中消耗大量多鏈不飽和脂肪酸導(dǎo)致的。

圖6 小鼠大腦脂肪酸含量（n=6）Fig.6 Brain fatty acid content in mice （n=6）

2.4 小鼠結(jié)腸發(fā)育

小腸的腸絨毛高度是衡量小腸消化吸收功能的重要指標(biāo)。從圖7可以看出，兩個(gè)小鼠模型結(jié)腸組織的黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整清晰，腺體排列整齊，無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，其中HMC 小鼠腸內(nèi)絨毛發(fā)育水平和高度要優(yōu)于GFC 組?？赡苁怯捎跀嗄虘?yīng)激對(duì)小鼠腸黏膜形態(tài)有很大的影響，包括絨毛萎縮、高度下降、隱窩加深，腸絨毛上皮成熟細(xì)胞數(shù)量減少，分泌細(xì)胞（杯狀細(xì)胞）增多，吸收能力下降[16]。移植人源菌群中的雙歧桿菌等益生菌能夠促進(jìn)受損腸黏膜細(xì)胞的修復(fù)，使得腸絨毛高度增加，隱窩變淺。

圖7 小鼠結(jié)腸組織HE 染色Fig.7 HE staining of colon tissue sections in mice

2.5 小鼠免疫性能

小鼠肝臟IGF-1、IGFBP3 含量檢測(cè)結(jié)果，如圖8所示。

圖8 肝臟中IGF-1、IGFBP3 含量檢測(cè)結(jié)果Fig.8 The determination results of liver IGF-1 and IGFBP3 content

由圖8可以看出，HMC 組肝臟中的IGF-1 含量顯著高于GFC 組（P<0.05），表明菌群移植能夠明顯提高小鼠肝臟中的IGF-1 含量。HMC 組肝臟中的IGFBP3 含量與GFC 組差異不顯著。

小鼠血清IGF-1、IGFBP3 檢測(cè)結(jié)果，如圖9和10所示。

由圖9和10 可以看出，HMC 組血清中的IGF-1 含量顯著高于GFC 組（P<0.05），表明菌群移植能夠明顯提高小鼠血清中的IGF-1 含量。HMC 組血清中的IGFBP3 含量與GFC 組差異不顯著。

圖9 血清中IGF-1 含量檢測(cè)結(jié)果Fig.9 The determination results of serum IGF-1 content

圖10 血清中IGFBP3 含量檢測(cè)結(jié)果Fig.10 The determination results of serum IGFBP3 content

IGF-1 具有促進(jìn)淋巴組織增生、調(diào)節(jié)T 細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和效應(yīng)完成、控制胸腺素功能等免疫調(diào)節(jié)作用，上述結(jié)果表明腸道菌群可以顯著影響宿主的免疫能力[17]。

3 結(jié)論

將斷乳期嬰兒腸道菌群移植至無(wú)菌昆明小鼠建立斷乳期人源菌群小鼠模型，與無(wú)菌小鼠模型進(jìn)行對(duì)比，評(píng)價(jià)人源菌群移植對(duì)小鼠大腦、腸道發(fā)育及免疫等相關(guān)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示：斷乳期人源菌群小鼠健康狀況良好，能夠部分模擬斷乳期嬰兒腸道菌群；腸道菌群對(duì)小鼠大腦、結(jié)腸發(fā)育及免疫性能等相關(guān)指標(biāo)有顯著影響。斷乳期人源菌群模型的建立，為斷乳期嬰兒腸道菌群對(duì)宿主生理功能的影響、代謝性疾病發(fā)生、藥物代謝等研究領(lǐng)域提供了有效的動(dòng)物模型。