袁明 余春平

摘 要：目的：建立了高效液相色譜法測(cè)定食品中肉桂酸鉀含量的方法。方法：甲醇-0.5%磷酸（50∶50，V/V）溶液為流動(dòng)相，流速1 mL/min，UVD檢測(cè)器檢測(cè)光源285 nm。采用外標(biāo)法測(cè)量食品中肉桂酸鉀的添加量。結(jié)果：肉桂酸鉀濃度在0～1.0 mg/mL，外標(biāo)曲線擬合度為0.999 4，擬合度高且具有較寬的線性范圍，檢測(cè)過程中主峰與雜質(zhì)峰能較好地分離，設(shè)備的重復(fù)性，樣品處理方法的穩(wěn)定性和處理過程中肉桂酸鉀的回收率，樣品配制后的穩(wěn)定性均滿足分析要求，測(cè)得香辣蘿卜干中肉桂酸鉀的添加量為0.329 0 mg/g。結(jié)論：該方法能較高效、穩(wěn)定、無毒的檢測(cè)出食品中肉桂酸鉀的含量。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法（HPLC）;食品;肉桂酸鉀

Detection of Potassium Cinnamate in the Food by HPLC

YUAN Ming， YU Chunping

（Wuhan Landmark Industrial Co.， Ltd.， Wuhan 430010， China）

Abstract： Objective： To establish a method for the determination of potassium cinnamate in food by high performance liquid chromatography. Method： Methanol-0.5% phosphoric acid （50∶50，V/V） solution was used as

the mobile phase， the flow rate was 1 mL/min， and the UVD detector detected the light source at 285 nm. The external standard method was used to measure the addition of potassium cinnamate in food. Result： The concentration of potassium cinnamate was 0～1.0 mg/mL， and the fitting degree of the external standard curve was 0.999 4. The fitting degree was high and had a wide linear range. During the detection process， the main peak and impurity peak could be well separated. The repeatability， the stability of the sample treatment method， the recovery rate of potassium cinnamate during the treatment process， and the stability of the sample after preparation all meet the analysis requirements.The added amount of potassium cinnamate in spicy dried radish was measured to be

0.329 0 mg/g. Conclusion： This method can detect the content of potassium cinnamate in food with high efficiency， stability and non-toxicity.

Keywords： High Performance Liquid Chromatography（HPLC）; food; potassium cinnamate

肉桂酸鉀在食品添加劑、香精香料、畜牧業(yè)、日化用品等工農(nóng)業(yè)領(lǐng)域有著極其廣泛的應(yīng)用。肉桂酸鉀具有較強(qiáng)的抑菌能力，尤其是對(duì)引起食品腐敗的霉菌、細(xì)菌和酵母菌作用明顯，且由于其良好的溶解性，是一種廣泛使用的食品防腐保鮮劑，且屬于無公害的環(huán)保防腐劑，可替代苯甲酸鈉，山梨酸鉀等產(chǎn)品[1-3]。張志軍等[4]研究了用乙醇和硫酸將食品中的肉桂酸鉀衍生為肉桂酸后提取，利用高效氣相色譜儀來測(cè)定提取后得到的肉桂酸含量，從而計(jì)算出食品中的肉桂酸鉀含量，并通過正交試驗(yàn)對(duì)衍生條件進(jìn)行了優(yōu)化，最終肉桂酸鉀的回收率達(dá)到了97.51%，但衍生過程比較煩瑣，不夠簡(jiǎn)便。王李平等[5]同樣是通過將食品中的肉桂酸鉀用酸衍生為肉桂酸，再通過二氯甲烷來萃取肉桂酸，利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀來測(cè)定肉桂酸的含量，從而計(jì)算得到食品中肉桂酸鉀的含量，取得了較好的效果，但上述方法檢測(cè)過程同樣比較煩瑣，且質(zhì)譜儀設(shè)備昂貴，無法大規(guī)模推廣，且尚未見到肉桂酸鉀的液相檢測(cè)方法的相關(guān)報(bào)道，本文通過檢測(cè)過程中液相色譜設(shè)備的重復(fù)性，樣品處理方法的穩(wěn)定性和肉桂酸鉀的回收率，樣品配制后的穩(wěn)定性等來研究該方法的可行性，建立了一種高效、穩(wěn)定、無毒的檢測(cè)食品中肉桂酸鉀含量的高效液相色譜法，提高肉桂酸鉀測(cè)定的準(zhǔn)確度。

1 材料與方法

1.1 材料

食品樣品香辣蘿卜干由客戶提供。

1.2 儀器與試劑

南京科捷高效液相色譜儀LC600，配備了UVD檢測(cè)器;色譜柱為南京杰島C18反相柱，規(guī)格為

250 mm×4.6 mm，5 μm;語(yǔ)盟超聲波清洗機(jī);肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，純度99.81%;蒸餾水為自制二重蒸餾水;甲醇為色譜級(jí);其他試劑均為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 色譜條件

流動(dòng)相：甲醇-0.5%磷酸（50∶50，V/V）溶液;流動(dòng)相流速：1 mL/min;檢測(cè)器光源波長(zhǎng)：285 nm;柱溫：室溫;進(jìn)樣量：20 μL。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

精密稱取肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品100.0 mg，置于100 mL

潔凈的容量瓶中，加適量甲醇溶解并定容至刻度線，搖勻并超聲脫氣，作為儲(chǔ)備液，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，移液管精密移取一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液稀釋成一系列所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3.3 樣品的制備

精密稱取待測(cè)樣品若干，使用潔凈的研缽將樣品搗碎后轉(zhuǎn)移至燒杯中，適量甲醇沖洗研缽后，向燒杯中添加15 mL甲醇，混合物超聲提取后離心，收集上清液，離心得到的固體再次使用15 mL甲醇沖洗，混合物超聲提取后離心，收集上清液，重復(fù)上述步驟3次，提取樣品中的肉桂酸鉀，集合所收集的上清液，經(jīng)0.22 μm微孔過濾膜過濾，定容至100 mL容量瓶，超聲脫氣，作為待測(cè)液。

1.3.4 測(cè)定方法

（1）高效液相色譜儀重復(fù)性測(cè)試方法。取同一標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)樣3次，測(cè)定肉桂酸鉀峰面積，計(jì)算峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

（2）樣品處理方法重復(fù)性測(cè)試方法。精密稱取同一樣品3份，按上述樣品處理方法進(jìn)行處理，測(cè)定肉桂酸鉀峰面積，計(jì)算峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

（3）樣品中肉桂酸鉀的回收率測(cè)試方法。采用樣品加標(biāo)回收率驗(yàn)證，精密稱取同一樣品6份，向3份樣品中加入一定量的肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品，3份樣品作為對(duì)照品，6份樣品均按上述樣品的制備方法處理樣品，測(cè)定肉桂酸鉀峰面積，計(jì)算肉桂酸鉀的回收率以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

（4）樣品穩(wěn)定性測(cè)試方法。精密稱取待測(cè)樣品1份，按上述樣品處理方法處理樣品，每隔3 h進(jìn)樣，測(cè)定肉桂酸鉀峰面積，計(jì)算峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

配制濃度為0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL和1.0 mg/mL的肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定肉桂酸鉀峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1。由圖1可知，肉桂酸鉀濃度在0～1.0 mg/mL，外標(biāo)曲線擬合度達(dá)到0.999 4，肉桂酸鉀濃度與峰面積的線性關(guān)系較好。

2.2 HPLC重復(fù)性驗(yàn)證

取0.2 mg/mL的肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣3次，肉桂酸鉀的峰面積和保留時(shí)間如表1所示。由表1可知，肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣3次的峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.94%，保留時(shí)間基本一致，說明HPLC設(shè)備的重復(fù)性較好。

2.3 樣品處理方法重復(fù)性和肉桂酸鉀回收驗(yàn)證

精密稱取香辣蘿卜干6份，每份10.000 0 g，編號(hào)為1～6號(hào)樣品，其中4～6號(hào)樣品中均添加肉桂酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品20.0 mg，1～3號(hào)樣品為對(duì)照樣品，4～6號(hào)樣品為加標(biāo)樣品，6份樣品均按上述樣品處理方法進(jìn)行處理，1～3號(hào)樣品的肉桂酸鉀的峰面積和保留時(shí)間結(jié)果如表2所示。4～6號(hào)樣品的肉桂酸鉀的回收率結(jié)果如表3所示。

由表2、表3可知，1～3號(hào)樣品按上述樣品處理方法處理后，所測(cè)得的肉桂酸鉀相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.89%，保留時(shí)間基本一致，4～6號(hào)樣品的肉桂酸鉀的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.23%，說明上述樣品處理方法穩(wěn)定、可靠，能較好地提取出待測(cè)樣品中的肉桂

酸鉀。

2.4 樣品穩(wěn)定性驗(yàn)證

將上述1號(hào)樣品分別靜置3 h和6 h后進(jìn)樣，測(cè)得的肉桂酸鉀峰面積和保留時(shí)間如表4所示。

由表4可知，其峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.98%，保留時(shí)間基本一致，說明樣品的穩(wěn)定性較好，放置6 h并不會(huì)對(duì)樣品中肉桂酸鉀含量的測(cè)定造成影響。

2.5 樣品中肉桂酸鉀含量的測(cè)定

精密稱取香辣蘿卜干1.000 0 g，按上述樣品處理方法處理后上機(jī)檢測(cè)，樣品中肉桂酸鉀含量測(cè)定的液相譜圖見圖2。將峰面積帶入到式（1）計(jì)算樣品中肉桂酸鉀添加量為0.329 0 mg/g。

（1）

式中：w為肉桂酸鉀的添加量，mg/g;m為樣品的質(zhì)量，g;A為峰面積，mAu·s。

3 結(jié)論

該方法能較高效、穩(wěn)定、無毒地檢測(cè)出食品中肉桂酸鉀的含量，所測(cè)得的數(shù)據(jù)可靠性高，對(duì)于測(cè)定食品及其他化工品中肉桂酸鉀的含量和鑒定商品肉桂酸鉀的質(zhì)量具有一定的參考作用。

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