李秋葉，陳麗莎，張玉潔

（1.文山州食品藥品檢驗(yàn)研究院，云南 文山 663099；2.文山學(xué)院 文山三七研究院，云南 文山 663099）

三七為五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根和根莖，是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材?！拔纳饺摺弊鳛閲业乩順?biāo)志產(chǎn)品受到了人們的廣泛認(rèn)可?！镀呤N藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》中將三七劃分為春三七和冬三七兩種規(guī)格，并分別將這兩種規(guī)格劃分為13個(gè)等級(jí)[1]；劉大會(huì)等將三七藥材按照不同部位和采收時(shí)間劃分為主根（又分春七和冬七）、筋條和剪口4種規(guī)格，春七和冬七又按個(gè)頭大小簡(jiǎn)化為20頭、30頭、40頭、60頭、80頭、無數(shù)頭和等外8個(gè)等級(jí)[2]；《中華人民共和國藥典》里收載的三七為秋季花開前采挖，洗凈，分開主根、支根及根莖，干燥。支根習(xí)稱“筋條”，根莖習(xí)稱“剪口”[3]；春三七為摘除花苔后采挖的三七，冬三七為留種后采挖的三七[4]；由此可見《中華人民共和國藥典》里收載的三七為春三七。春三七在外觀上飽滿健壯，細(xì)紋緊實(shí)無裂紋內(nèi)在堅(jiān)實(shí)不空泡，質(zhì)重；冬三七外觀上干癟瘦小，皺縮不飽滿，內(nèi)在稀疏松泡，質(zhì)輕；結(jié)合文山本地區(qū)的實(shí)際種植采挖銷售來看，主要是采挖春三七為主，冬三七僅是三七種植戶需要留種才會(huì)延遲采挖的三七，產(chǎn)量較小， 所以在本地區(qū)的三七市場(chǎng)中，一般意義上的三七指的是春三七，本文所討論的三七也僅限春三七。通過多次走訪文山三七市場(chǎng)發(fā)現(xiàn)，市場(chǎng)中對(duì)三七的劃分與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中劃分略有不同，例如存在不少標(biāo)注為50頭的三七；還有一部分三七的剪口和主根部分并沒有分離開，這樣顯得三七個(gè)頭更大，在當(dāng)?shù)厮追Q“戴帽三七”，與之相對(duì)應(yīng)的只有主根部位的三七俗稱“滑頭三七”，相同頭數(shù)時(shí)，在價(jià)格上帶剪口的三七明顯低于不帶剪口的三七；另外不同頭數(shù)規(guī)格的三七價(jià)格差異更是顯著，甚至每斤相差數(shù)倍價(jià)格。鑒于此本研究選取了文山當(dāng)?shù)夭煌唐芬?guī)格的三七，通過對(duì)其皂苷成分含量的分析，以對(duì)商品規(guī)格劃分進(jìn)行相關(guān)性討論，為合理使用不同規(guī)格的三七提供一定的理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

高效液相色譜儀（U3000，賽默飛）、色譜柱（Waters C18，250 mm×4.6 mm，5 μm）、電子分析天平（BP211D，北京賽多利斯）、電熱恒溫水浴鍋（HWS-24型，上?；萏?，電熱恒溫干燥箱（DHG-9101-2A，上海三發(fā)）。

1.2 材料

三七購于文山市三七國際交易市場(chǎng)，分別為不同商家隨機(jī)購買，共9種規(guī)格，每種規(guī)格三七樣品3批次，總計(jì)27批次；對(duì)照品人參皂苷Rg1（110703-201933，純度93.4%，中國食品藥品檢定研究院）、人參皂苷Rb1（110704-202028，純度93.1%，中國食品藥品檢定研究院）、三七皂苷R1（110745-201921，純度90.4%，中國食品藥品檢定研究院）；乙腈、甲醇均為色譜純，水為超純水。

2 方法

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及三七皂苷R1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含人參皂苷Rg10.4 mg、人參皂苷Rb10.4 mg、三七皂苷R10.1 mg的混合溶液，即得。

2.2 供試品溶液的制備

三七樣品粉碎，精密稱取粉末（過四號(hào)篩）約0.6 g，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，放置過夜，置80 ℃水浴上保持微沸2 h，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失量，搖勻，取續(xù)濾液，即得。[3]

2.3 色譜條件

采樣Waters C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，梯度洗脫條件為：0～12 min，19% A，81% B ；12～60 min，19%～36% A，81%～64% B。檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm，流速1 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。理論板數(shù)按三七皂苷R1峰計(jì)算應(yīng)不低于4 000。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

精密稱取三七皂苷R12.89 mg、人參皂苷Rg111.72 mg、人參皂苷Rb112.18 mg于25 mL容量瓶中，配置成對(duì)照品混合溶液，分別吸取對(duì)照品溶液2、5、10、15、20、25 μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰以進(jìn)樣x（μL）為橫坐標(biāo)，峰面積y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱定已知含量的同一批三七6份，每份約0.3 g，精密加入混合對(duì)照品溶液適量，分別照“2.2”項(xiàng)下方法操作，照“2.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算回收率。

2.6 樣品測(cè)定

每組樣品選取參照“2.2”方法制作樣品溶液，參照“2.3”方法進(jìn)行色譜測(cè)定，本次所檢樣品中，共9種規(guī)格，每種規(guī)格三七樣品3批次，總計(jì)27批次。

3 結(jié)果

3.1 三種皂苷對(duì)照品

吸取“2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液10 μL，按“2.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果表明三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的分離度均較好，三種皂苷的HPLC色譜圖見圖1。

圖1 三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1對(duì)照品的HPLC色譜圖

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性關(guān)系

按“2.4”項(xiàng)下以進(jìn)樣量x（μL）為橫坐標(biāo)，峰面積y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，結(jié)果表明三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1這3種皂苷成分線性關(guān)系良好，線性回歸方程及線性關(guān)系見表1。

表1 三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性關(guān)系

3.3 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

按“2.5”項(xiàng)下測(cè)定加樣回收率，三七皂苷R1的平均回收率為99.41%，RSD值為2.88%；人參皂苷Rg1的平均回收率為100.31%，RSD值為1.47%；人參皂苷Rg1的平均回收率為97.35%，RSD值為1.85%，表明該方法準(zhǔn)確度較好，結(jié)果見表2。

表2 加樣回收率

3.4 樣品測(cè)定結(jié)果

本次所測(cè)樣品中，商品規(guī)格為20頭、30頭、40頭的三七，存在兩種類型，分別為僅有主根部分的三七及主根和剪口兩部分相連的三七，商品規(guī)格為50頭、60頭的三七，僅有主根部分。每種規(guī)格三七樣品3個(gè)批次，總計(jì)27批次，經(jīng)檢測(cè)，27批次樣品的總皂苷含量在5.73%～9.84%之間，均符合《中國藥典》三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的總量不得少于5.0%的規(guī)定，其中20頭主根和剪口兩部分相連的三七總皂苷含量最高，3批次的平均值為9.33%，50頭三七總皂苷含量最低，3批次的平均值為7.45%，其余商品規(guī)格的三七總皂苷含量介于這二者之間，其總皂苷含量與其商品規(guī)格無規(guī)律性的對(duì)應(yīng)關(guān)系，結(jié)果見表3。

表3 皂苷含量測(cè)定

4 討論

（1）在本地三七市場(chǎng)中普遍存在著僅有主根部分的三七及主根和剪口兩部分相連的三七，在外觀形態(tài)上前者更受消費(fèi)者青睞，所以相同頭數(shù)時(shí)，一般前者價(jià)格高于后者價(jià)格。本次分別測(cè)定了這兩種類型的20頭、30頭、40頭三七，結(jié)果顯示，相同頭數(shù)時(shí)，主根和剪口兩部分相連的總皂苷含量高于僅有主根部分的三七，推測(cè)可能與剪口有關(guān)；相關(guān)前期研究證實(shí)三七的剪口部分皂苷含量高于主根部分[5-6]。

（2）傳統(tǒng)市場(chǎng)分類按照1市斤三七含幾頭來劃分的商品規(guī)格，頭數(shù)越少價(jià)格越高，20頭與60頭三七相比，價(jià)格甚至相差數(shù)倍。

本文分別選取了僅有主根部分的20頭、30頭、40頭、50頭、60頭三七進(jìn)行總皂苷的含量測(cè)定，結(jié)果顯示，40頭平均皂苷含量最高，為8.45%，50頭平均皂苷含量最低，為7.45%；同時(shí)還對(duì)價(jià)格最便宜的筋條進(jìn)行了含量測(cè)定，平均皂苷含量為7.89%，其含量高于本次所檢測(cè)的50頭三七；另外早在1999年秦雪梅等[7]就曾用薄層鑒別的方法證實(shí)了僅用個(gè)頭大小不能鑒別三七藥材的優(yōu)劣；本研究采用HPLC法證實(shí)了三七中的人參類皂苷含量與其商品規(guī)格無顯著相關(guān)性。由此可以看出，人們普遍認(rèn)為的三七個(gè)頭越大質(zhì)量越好以及筋條質(zhì)量較差的說法并不可靠，就文山本地三七市場(chǎng)而言，三七總皂苷含量與其商品規(guī)格的劃分并無明顯相關(guān)性，對(duì)于消費(fèi)者來說，沒有必要盲目追求個(gè)頭大的三七。