亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        基于TGFβ1/Smad7 通路觀察麻黃堿對(duì)肺心病大鼠血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)及功能的影響

        2022-05-24 06:59:02楊利萍張友蘭唐鳳鳴
        西部中醫(yī)藥 2022年4期
        關(guān)鍵詞:麻黃堿肺動(dòng)脈內(nèi)皮

        楊利萍,張友蘭,唐鳳鳴,歐 揚(yáng),李 瑩

        四川省人民醫(yī)院溫江醫(yī)院/成都市溫江區(qū)人民醫(yī)院,四川 成都 611000

        肺心病即慢性肺源性心臟病,主要是由于肺組織結(jié)構(gòu)和功能病變,使肺血管的阻力和肺動(dòng)脈壓力升高,從而造成右心室肥厚,并最終導(dǎo)致右心功能衰竭[1],是一種高患病率、高死亡率的繼發(fā)性心臟病。研究[2]表明,肺血管病變誘發(fā)的肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension,PAH)是肺心病發(fā)病過(guò)程中的中心環(huán)節(jié)和先決條件。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)皮細(xì)胞損傷(endothelial cell damage,ECD)導(dǎo)致的內(nèi)皮功能失調(diào)是PAH 血管病變的基礎(chǔ)病理改變,因此尋找合適的藥物對(duì)ECD進(jìn)行干預(yù)治療,是PAH 治療領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一[3]。麻黃是我國(guó)寶貴的藥用植物,性味辛苦,具有宣肺平喘、發(fā)汗散寒、活血通絡(luò)等作用。研究[4]表明,麻黃堿能通過(guò)抑制炎癥減輕肺損傷和肺纖維化,有效抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖。然而,麻黃堿對(duì)肺動(dòng)脈高壓的保護(hù)作用及機(jī)制研究尚未報(bào)道。研究[5]表明轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(signal transduction molecule 7,Smad7)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在血管平滑肌細(xì)胞遷移、動(dòng)脈壁脂質(zhì)沉積、動(dòng)脈的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、血管壁的氧化應(yīng)激等血管生物學(xué)行為發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。ZENG Z 等[6]研究發(fā)現(xiàn),TGFβ1/Smad7 在血管內(nèi)皮損傷動(dòng)物模型中表達(dá)異常。本研究通過(guò)腹腔注射野百合堿構(gòu)建肺動(dòng)脈高壓模型,從TGFβ1/Smad7 信號(hào)通路出發(fā),探討麻黃堿對(duì)PAH 血管內(nèi)皮的作用機(jī)制,從而為臨床提供新的數(shù)據(jù)支撐。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12~13 周齡的雄性SD 大鼠60只,體質(zhì)量在200~220 g,由四川省人民醫(yī)院溫江醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào):2019-0005A。飼養(yǎng)條件:依照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦法,室溫下標(biāo)準(zhǔn)飼料、自由飲水、分籠(4 籠)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn)。

        1.2 試劑與儀器野百合堿(美國(guó)Sigma 公司,批號(hào):012K7042);鹽酸麻黃堿(赤峰制藥廠,北京中順制藥分裝,農(nóng)工藥準(zhǔn)字1996 第000116 號(hào));(transforming growth factorβ1,TGF-β1)特異性抑制劑SB431542(美國(guó)Selleck 公司,批號(hào):265412m);TGF-β1、p-Smad2、p-Smad7 探針(Santa公司,批號(hào):0502384);二喹啉甲酸濃度測(cè)定試劑盒(bicin-choninic acid,BCA,批號(hào):SP256421);3,3-二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)化學(xué)發(fā)光試劑盒(Sigma 公司,批號(hào):SB382415);蘇木精-伊紅(hematoxylin eosin,HE)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)檢測(cè)試劑盒(上海碧云天生物技術(shù)公司,批號(hào):SM654388);TGF-β1、p-Smad2、p-Smad7 抗體、兔抗3-磷酸甘油醛脫氫酶(glyceralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)及山羊抗兔IgG(美國(guó)abcam 公司,批號(hào):ab264432);TUNEL、Western blot 試劑盒(德國(guó)Rebstock 公司,批號(hào):2562224)。蘇凈Airtech 超凈工作臺(tái)(北京六一儀器廠);LEICAEG1150 型組織包埋機(jī)(德國(guó)Leica 公司);H-7650 型Nikon Ti-U/Ti-s 倒置熒光顯微鏡(日本三菱公司);5810R型高速離心機(jī)(日本島津公司);生物電鏡(美國(guó)Corning 公司);E-Gel Imager 凝膠成像儀(美國(guó)Beckma公司)。

        1.3 實(shí)驗(yàn)方法

        1.3.1 造模及分組 選擇12~13周齡的SD大鼠60 只,隨機(jī)分為正常組、模型組、治療組、抑制劑組,每組15 只。除正常組外,其余各組大鼠用無(wú)水乙醇與生理鹽水(2∶3)配成1%的野百合堿溶液,腹腔一次性注射構(gòu)建肺心病大鼠模型,正常組注射等體積生理鹽水。

        1.3.2 給藥方法 造模后治療組和抑制劑組大鼠分別定時(shí)以10 mg/kg 麻黃堿和SB431542 灌胃給藥;正常組和模型組給予等劑量生理鹽水,所有大鼠每日給藥1次,連續(xù)給藥4周。

        1.4 觀察指標(biāo)

        1.4.1 大鼠血壓及右心肥厚指數(shù) 連續(xù)給藥4周后,各組大鼠腹腔注射30 mg/kg 戊巴比妥鈉麻醉,參照文獻(xiàn)方法[7]采集記錄大鼠右心室收縮壓(right ventricular systolic pressure,RVSP)和肺動(dòng)脈壓(pulmonary artery pressure,PAP),計(jì)算右心肥厚指數(shù)(right ventricular hypertrophy index,RVHI)。測(cè)量完畢后,腹動(dòng)脈采血,低溫離心后,獲得血清,檢測(cè)血清中一氧化氧(nitricoxide,NO)和血漿中內(nèi)皮素1(endothelin-1,ET-1)的水平。將大鼠斷頭處死,留取各組大鼠的左側(cè)肺葉,液氮封存,轉(zhuǎn)移至深冷冰箱備用待測(cè)。

        1.4.2 大鼠肺動(dòng)脈病理學(xué)表現(xiàn) 從冰箱中取出各組大鼠肺動(dòng)脈,制成石蠟切片,進(jìn)行蘇木素伊紅、馬松染色,光鏡下觀察各組大鼠肺動(dòng)脈血管的病理改變。

        1.4.3 大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) 從冰箱中取出各組大鼠肺動(dòng)脈,分別制成0.3 cm×0.5 cm大小的超薄組織切片:采用2.5%戊二醛固定8 h,生理鹽水清洗3 次,梯度濃度乙醇脫水,維持-20℃冷凍干燥過(guò)夜,透射電鏡下觀察各組大鼠肺動(dòng)脈血管的內(nèi)皮細(xì)胞超微病理結(jié)構(gòu)改變。

        1.4.4 大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡 從冰箱中取出各組大鼠肺動(dòng)脈,常規(guī)方法固定,冰凍切片,二甲苯浸洗兩次,梯度酒精浸洗5 min,風(fēng)干后3%雙氧水-甲醇浸泡10 min,PBS漂洗3次,每次3 min,然后4℃預(yù)冷乙醇進(jìn)行如下操作:0.1%TritonX-100、0.1%緩沖液處理2 min,PBS 漂洗3 次,每次3 min,加入TUNNEL 反應(yīng)混合液,加封口膜在暗濕盒中反應(yīng)1 h,溫度37℃,PBS 漂洗,梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)脂封片,熒光顯微鏡進(jìn)行觀察,每組切片6 個(gè)不同的視野,并通過(guò)Image-Pro 6.2 軟件處理圖像[6],進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析得到各組大鼠的肺動(dòng)脈血管的內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率。

        1.4.5 氧化應(yīng)激相關(guān)底物和酶 從大鼠眼眶取血,各組血清樣本在蛋白酶抑制劑作用下超聲溶解,以離心半徑15 cm,4000 r/min 離心5 min,收集上清液進(jìn)行分析。采用蛋白測(cè)定試劑盒測(cè)定上清液蛋白濃度。參照試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作步驟,分別檢測(cè)各組血清樣本中總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、SOD 水平及MDA、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。

        1.4.6 熒光原位雜交檢測(cè)各組大鼠肺動(dòng)脈TGFβ1、Smad2、Smad7的mRNA的表達(dá) 從冰箱中取出各組大鼠肺動(dòng)脈,10%甲醛固定,制成0.5μm石蠟切片,脫蠟,風(fēng)干,加入蛋白酶K 反應(yīng)液(100 mmol/l Tris-HCL,50 mmol/L EDTA 和1μg/mL 蛋白酶K,各1 mL 的混合液),在37°C 水浴中孵育20 min,用緩沖液沖洗3 次,通過(guò)酒精梯度脫水。加入1 mL 變性溶液(70%甲酰胺,2X SSC和0.1 mmol/L的EDTA,各1 mL的混合液),在75℃下孵育8 min,同時(shí)雜交含目的蛋白mRNA探針的溶液,在75℃下孵育8 min。每個(gè)載玻片區(qū)域覆蓋有50 μL 雜交混合物,將溶液置于濕箱中,并在42℃的烤箱中雜交過(guò)夜[7-8]。雜交后,幻燈片被洗脫,通過(guò)酒精梯度脫水并風(fēng)干,在顯微鏡下觀察。

        1.4.7 Western blot 檢測(cè)各組大鼠肺動(dòng)脈TGFβ1、p-Smad2、p-Smad7 的表達(dá)水平 從冰箱中取出各組大鼠肺動(dòng)脈,PBS 緩沖液沖洗2 次,研磨勻漿,冰上裂解30 min 后,離心獲得上清,蛋白濃度采用BCA試劑盒測(cè)定,每個(gè)樣品取50μg,然后進(jìn)行SDS-PAGE 電泳、PVDF 轉(zhuǎn)膜、TBST 液封閉,維持4℃過(guò)夜孕育,然后分別加入一抗(TGFβ1,p-Smad2,p-Smad7)(1∶1500),孕育1 h,洗滌加入抗辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG(1∶10000),加入ECL顯色30 min,以GAPDH 作為內(nèi)參表示蛋白相對(duì)表達(dá)水平。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用軟件SPSS 16.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用±s進(jìn)行表示,多組間比較采用單因素方差分析,兩兩間比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 大鼠血壓及RVHI水平與正常組比較,模型組大鼠RVSP、PAP和RVHI水平均顯著升高(P<0.05)。與模型組比較,藥物干預(yù)后,治療組和抑制劑組RVSP、PAP 和RVHI 水平均顯著下降(P<0.05);兩組各項(xiàng)指標(biāo)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

        表1 各組大鼠血壓及RVHI水平比較(±s)

        表1 各組大鼠血壓及RVHI水平比較(±s)

        注:1 mm Hg≈0.133 kPa;*表示與正常組比較,P<0.05;#表示與模型組比較,P<0.05

        組別正常組模型組治療組抑制劑組鼠數(shù)15 15 15 15 RVSP(mm Hg)34.31±3.24 97.61±8.06*54.74±5.18*#56.16±6.09*#PAP(mm Hg)21.65±2.52 60.15±3.32*31.69±2.96*#33.31±2.12*#RVHI(%)0.29±0.02 0.69±0.08*0.42±0.04*#0.44±0.05*#

        2.2 大鼠血清NO、ET-1 含量與正常組比較,模型組大鼠血清NO 含量顯著下降(P<0.05),ET-1的含量顯著上升(P<0.05)。經(jīng)藥物干預(yù)后,與模型組比較,治療組、抑制劑組大鼠血清NO 含量顯著上升,ET-1 含量顯著下降(P<0.05);兩組各項(xiàng)指標(biāo)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

        表2 各組大鼠血清中NO和ET-1含量比較(±s)

        表2 各組大鼠血清中NO和ET-1含量比較(±s)

        注:*表示與正常組比較,P<0.05;#表示與模型組比較,P<0.05

        組別正常組模型組治療組抑制劑組鼠數(shù)15 15 15 15 NO(μmol/L)45.38±5.12 21.60±3.07*34.21±3.26*#37.24±3.18*#ET-1(pg/L)93.27±11.29 136.19±15.74*109.87±12.87*#115.28±12.67*#

        2.3 大鼠肺動(dòng)脈氧化應(yīng)激指標(biāo)與正常組比較,模型組大鼠肺動(dòng)脈ROS、MDA水平顯著增加,而SOD和T-AOC 水平顯著降低;與模型組比較,治療組、抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈ROS 和MDA 水平顯著降低,SOD和T-AOC水平顯著增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);治療組、抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈ROS、MDA、SOD 和T-AOC 水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1。

        圖1 各組大鼠氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)變化情況

        2.4 大鼠肺動(dòng)脈組織病理變化正常組HE 染色結(jié)果顯示,大鼠肺動(dòng)脈血管壁光滑且富有彈性,血管壁厚度與血管管腔面積正常,內(nèi)膜層連續(xù)排列規(guī)整,通過(guò)Masson 染色,發(fā)現(xiàn)在視野中顯示出少量膠原纖維;模型組大鼠肺動(dòng)脈血管僵硬度明顯增加,內(nèi)膜增厚明顯,管腔明顯變窄,管腔內(nèi)大量炎癥細(xì)胞填充,內(nèi)膜結(jié)構(gòu)不規(guī)則,內(nèi)皮凸起、缺損嚴(yán)重,Masson 染色顯示血管壁和周?chē)M織中顯示出許多無(wú)序增殖的膠原纖維;治療組和抑制劑組大鼠的肺動(dòng)脈在內(nèi)皮結(jié)構(gòu)、厚度、內(nèi)膜完整性,以及膠原纖維增生方面較模型組有明顯改善。見(jiàn)圖2。

        圖2 各組大鼠肺動(dòng)脈病理變化情況(A1-D1為HE染色,×400;A2-D2為Masson染色,×400)

        2.5 大鼠肺動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)改變正常組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,排列規(guī)整、連續(xù),細(xì)胞間連接緊密,基底膜完整,無(wú)隆起與脫落現(xiàn)象,內(nèi)膜厚薄均勻,內(nèi)膜力膜平直,無(wú)彎曲,平滑肌細(xì)胞分布致密,彈力板未出現(xiàn)斷裂現(xiàn)象,胞漿內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)完整,性狀正常;模型組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增生,形狀失去穩(wěn)定結(jié)構(gòu),基底膜斷裂明顯,平滑肌細(xì)胞肥大,彈力板結(jié)構(gòu)不完整且斷裂,胞漿內(nèi)線粒體腫脹明顯,結(jié)構(gòu)缺損嚴(yán)重;治療組和抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞扁平、較為完整,線粒體空泡樣變性明顯好轉(zhuǎn),內(nèi)膜力膜連續(xù),厚度趨于均勻,中膜平滑肌細(xì)胞略見(jiàn)增生,彈力板結(jié)構(gòu)清晰,排列較為整齊。見(jiàn)圖3。

        圖3 各組大鼠透射電鏡下肺動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)變化(×6000)

        2.6 大鼠肺動(dòng)脈中內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率與正常組比較,模型組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率顯著升高(P<0.05)。與模型組比較,經(jīng)過(guò)藥物干預(yù)后,治療組和抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率顯著降低(P<0.05);治療組和抑制劑組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖4。

        圖4 各組大鼠肺動(dòng)脈中內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率

        2.7 大 鼠 肺 動(dòng) 脈 中TGFβ1、p-Smad2 及p-Smad7mRNA及蛋白表達(dá)與正常組比較,模型組大鼠肺動(dòng)脈中TGFβ1、p-Smad2及p-Smad7的mRNA熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)(P<0.05),蛋白表達(dá)量顯著升高(P<0.05)。與模型組比較,治療組和抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈中TGFβ1和p-Smad2 的mRNA 熒光強(qiáng)度明顯減弱,蛋白表達(dá)量顯著降低(P<0.05);p-Smad7 的mRNA 熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),蛋白表達(dá)量顯著升高(P<0.05);治療組和抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈的TGFβ1、p-Smad2及p-Smad7的mRNA及蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖5—6。

        圖5 各組大鼠肺動(dòng)脈TGFβ1、p-Smad2及p-Smad7蛋白表達(dá)

        圖6 各組大鼠肺動(dòng)脈TGFβ1、p-Smad2 及p-Smad7 mRNA 表達(dá)(A1-D1,×200;A2-D2,×400;A3-D3,×800)

        3 討論

        肺心病是一種嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)疾病,具有較高的患病率及病死率。相關(guān)研究[8]表明,PAH 是肺心病發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而血管結(jié)構(gòu),特別是內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能改變是PAH 的基礎(chǔ)病理生理因素。因此,近年來(lái)越來(lái)越多的研究開(kāi)始針對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),用以治療PAH。麻黃堿是中藥麻黃的主要成分,研究[9]報(bào)道麻黃堿可通過(guò)抑制血管炎癥來(lái)減輕肺損傷和肺纖維化,對(duì)肺心病有一定的治療作用。本研究采用腹腔注射野百合堿構(gòu)建肺動(dòng)脈高壓模型,然后觀察麻黃堿治療PAH的效果。結(jié)果顯示模型組大鼠的RVSP、PAP和RVHI 水平均顯著升高,而藥物干預(yù)后,治療組的RVSP、PAP和RVHI水平均顯著下降,結(jié)果提示麻黃堿對(duì)PAH大鼠具有一定的保護(hù)作用。

        相關(guān)研究[10]表明,NO和ET-1兩者的平衡對(duì)于血管舒縮功能的維持具有重要意義。STEVEN S[11]研究報(bào)道,肺動(dòng)脈高壓患者血漿中ET-1 升高,NO水平降低,肺動(dòng)脈血管處于高度收縮狀態(tài),形成肺動(dòng)脈高壓,導(dǎo)致血管功能障礙。本研究中,PAH 模型組大鼠血清中ET-1的水平顯著升高,NO水平顯著下降,藥物干預(yù)后可顯著降低大鼠血清ET-1 水平,升高NO 水平,說(shuō)明麻黃堿改善內(nèi)皮功能的作用機(jī)制與降低血清ET-1 水平、升高NO 水平有關(guān)。ROS 是一類(lèi)廣泛存在于生物體中富含有氧元素的物質(zhì),當(dāng)機(jī)體受到刺激后,過(guò)剩的ROS 可導(dǎo)致多種組織出現(xiàn)氧化應(yīng)激損傷[12]。SOD 是氧化應(yīng)激反應(yīng)中主要的抗氧化劑,機(jī)體抗氧化系統(tǒng)主要受SOD和MDA 的動(dòng)態(tài)平衡維持。許良葵[13]研究表明,麻黃堿可通過(guò)抑制ROS 的產(chǎn)生來(lái)抑制細(xì)胞凋亡,從而幫助血管內(nèi)皮細(xì)胞抵抗H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激。本研究發(fā)現(xiàn),應(yīng)用麻黃堿干預(yù)后,大鼠ROS 和MDA水平顯著降低,而SOD 和T-AOC 水平顯著升高,說(shuō)明麻黃堿對(duì)PAH 引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)具有一定的緩解作用,該結(jié)果與既往實(shí)驗(yàn)結(jié)果[13]一致,再次證實(shí)了藥物的治療效果。

        PAH 發(fā)病機(jī)制尚未明確,文獻(xiàn)報(bào)道[14]稱(chēng)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡在PAH 發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要作用,內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)度凋亡會(huì)促進(jìn)循環(huán)系統(tǒng)障礙,因此阻斷內(nèi)皮細(xì)胞凋亡可以改善PAH。本研究染色結(jié)果顯示,模型組大鼠肺動(dòng)脈血管僵硬度明顯增加,內(nèi)膜增厚明顯,管腔明顯變窄,管腔內(nèi)有大量炎癥細(xì)胞填充,內(nèi)皮凸起、缺損嚴(yán)重,且血管壁和周?chē)M織中顯示出許多無(wú)序增殖的膠原纖維。進(jìn)一步觀察超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),模型組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增生,失去穩(wěn)定結(jié)構(gòu),基底膜斷裂明顯,平滑肌細(xì)胞肥大,彈力板結(jié)構(gòu)不完整且斷裂,胞漿內(nèi)線粒體腫脹明顯,結(jié)構(gòu)缺損嚴(yán)重,這提示PAH 大鼠的肺動(dòng)脈組織結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯改變。治療組肺動(dòng)脈在內(nèi)皮結(jié)構(gòu)、厚度、內(nèi)膜完整性,以及膠原纖維增生方面較模型組有明顯改善,提示麻黃堿可以明顯改善PAH 大鼠肺動(dòng)脈組織。李中燕[15]研究顯示,麻黃堿可以明顯抑制支氣管哮喘內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,本研究中TUNNEL 染色結(jié)果顯示,模型組大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡明顯,凋亡指數(shù)明顯高于正常組,而藥物干預(yù)處理后,凋亡指數(shù)明顯下降,提示麻黃堿能夠抑制肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,起到保護(hù)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)的作用。

        文獻(xiàn)報(bào)道[16]顯示,TGFβ1/Smad7 是與血管生物學(xué)行為密切相關(guān)的信號(hào)通路,在血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)維持、平滑肌細(xì)胞黏附與遷移以及血管中膜細(xì)胞收縮等多種細(xì)胞生物學(xué)行為發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用。YAO W 等[17]研究表明抑制TGFβ1的表達(dá)、上調(diào)p-Smad7 的表達(dá)能明顯改善由炎性因子誘導(dǎo)的內(nèi)皮功能障礙。本研究中,用TGFβ1/Smad7信號(hào)通路特異性抑制劑SB431542灌胃處理PAH大鼠來(lái)觀察TGFβ1/Smad7 信號(hào)通路的作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)抑制劑組的結(jié)果與治療組大鼠無(wú)明顯差異,能夠改善PAH 大鼠中肺動(dòng)脈血管的內(nèi)皮損傷。原位熒光和Western blot 結(jié)果表明,模型組大鼠肺動(dòng)脈中TGFβ1、p-Smad2 及p-Smad7 的mRNA 熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),各蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著升高;治療組和抑制劑組大鼠肺動(dòng)脈中TGFβ1、p-Smad2 的mRNA 熒光強(qiáng)度明顯減弱,p-Smad7 的mRNA 熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),TGFβ1、p-Smad2 蛋白的表達(dá)顯著下降,p-Smad7蛋白的表達(dá)顯著升高。推斷麻黃堿可能通過(guò)抑制TGFβ1和p-Smad2 的表達(dá),上調(diào)p-Smad7 的表達(dá)來(lái)發(fā)揮其對(duì)PAH脈血管內(nèi)皮的保護(hù)作用。

        綜上所述,麻黃堿對(duì)PAH 肺動(dòng)脈血管內(nèi)皮的保護(hù)作用,與TGFβ1/Smad7 信號(hào)通路有關(guān),其機(jī)制可能是抑制TGFβ1和p-Smad2的表達(dá),上調(diào)p-Smad7的表達(dá),來(lái)降低氧化應(yīng)激反應(yīng),抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,發(fā)揮對(duì)PAH肺動(dòng)脈血管內(nèi)皮的保護(hù)作用。

        猜你喜歡
        麻黃堿肺動(dòng)脈內(nèi)皮
        81例左冠狀動(dòng)脈異常起源于肺動(dòng)脈臨床診治分析
        肺動(dòng)脈肉瘤:不僅罕見(jiàn)而且極易誤診
        Wnt3a基因沉默對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖的影響
        體外膜肺氧合在肺動(dòng)脈栓塞中的應(yīng)用
        氯麻黃堿的檢驗(yàn)研究
        內(nèi)皮祖細(xì)胞在缺血性腦卒中診治中的研究進(jìn)展
        羥芐羥麻黃堿用于先兆早產(chǎn)50例療效及用藥護(hù)理
        肺癌合并肺動(dòng)脈栓塞癥的CTA表現(xiàn)
        新鮮生雞蛋殼內(nèi)皮貼敷治療小面積燙傷
        麻黃堿,是毒還是藥
        亚洲最大天堂无码精品区| 欧美日本精品一区二区三区| 制服丝袜中文字幕在线| 国产精品麻豆aⅴ人妻| 成人午夜免费福利| 日本一二三区在线不卡| 少妇高潮av久久久久久| 国内精品伊人久久久久影院对白| 亚洲另在线日韩综合色| 日本高清一区二区三区不卡| 极品少妇被黑人白浆直流| 国产伦久视频免费观看视频| 无码人妻一区二区三区免费手机| 国产自拍伦理在线观看| 久久午夜精品人妻一区二区三区| 日韩人妻无码精品-专区| 日日摸夜夜欧美一区二区| 国产青春草在线观看视频| 蜜桃视频在线看一区二区三区| 国产真实老熟女无套内射| 无码Av在线一区二区三区| 女同亚洲一区二区三区精品久久 | 少妇内射视频播放舔大片| 亚洲一区二区三区在线中文| 蜜桃臀av一区二区三区| 蜜桃久久精品成人无码av| 一本久道久久综合久久| 中文字幕日韩一区二区不卡| 人人妻人人澡人人爽国产| 乱人伦视频中文字幕| 国产视频嗯啊啊啊| 成人性生交大片免费5| 国产精品泄火熟女| 日韩爱爱网站| 亚洲一区二区三区厕所偷拍| 中国杭州少妇xxxx做受| 欧美日韩精品一区二区三区不卡| 久久久久久人妻一区精品| 久久综合九色综合97婷婷| 99久久人妻精品免费二区| 亚洲女同成av人片在线观看|