劉麗娜， 申愛(ài)榮， 沈?qū)毭鳎?譚 云， 譚著明

(湖南省林業(yè)科學(xué)院， 湖南 長(zhǎng)沙 410004)

干臍菇屬(XeromphalinaKühner & Maire)是Kühner和Maire于1934年將Tricholomaceae中擔(dān)子體亞臍菇型、菌柄基部被黃褐色或金色菌絲體和擔(dān)孢子淀粉質(zhì)的種分離出來(lái)而成立的，當(dāng)時(shí)命名為(XeromphaliaKühner & Maire)，但當(dāng)時(shí)未對(duì)該屬的種作任何說(shuō)明和處理。同年6月，Kühner和Maire將其更名為(XeromphalinaKühner & Maire)，且記載了(X.campanella(Batsch: Fr.) Kühner & Maire)和(X.cauticinalis(Fr.) Kühner & Maire)2個(gè)種[1]。隨后，屬名“Xeromphalina”得到廣泛認(rèn)可[2-6]。因此Antonín[7]提出舍棄“Xeromphalia”，保留“Xeromphalina”，該提議得到接受。干臍菇屬是小菇科中的一個(gè)小屬，分布廣泛，全世界各大洲均有分布，但該屬的分類學(xué)研究主要集中在歐洲和美洲地區(qū)。Singer[8]對(duì)分布于南美洲的干臍菇進(jìn)行了報(bào)道。Miller[2]記載了分布于歐洲和北美的干臍菇屬的12個(gè)種，包括1個(gè)新種。Redhead[3]對(duì)分布于加拿大的11個(gè)種進(jìn)行了詳細(xì)的描述并繪制了相應(yīng)的線條圖。Antonín等[9]對(duì)在歐洲有分布的8個(gè)干臍菇種進(jìn)行了詳細(xì)的描述并編寫檢索表。大洋洲、亞洲和非洲對(duì)干臍菇的分類學(xué)研究相對(duì)較少。Horak[10]對(duì)分布于新西蘭、巴布亞新幾內(nèi)亞和印度尼西亞的干臍菇進(jìn)行了研究，共發(fā)現(xiàn)8個(gè)新種。我國(guó)對(duì)干臍菇的分類學(xué)研究起步較晚，主要以圖鑒或地區(qū)菌物志的形式出現(xiàn)[11-12]，直到2021年，圖力古爾等[13]對(duì)我國(guó)小菇科真菌進(jìn)行系統(tǒng)研究時(shí)，記載了我國(guó)分布的6種干臍菇。

1 發(fā)現(xiàn)地自然地理概況

湖南省地處長(zhǎng)江中游以南，屬云貴高原向江南丘陵和南嶺山脈向江漢平原過(guò)渡的地帶，在自西向東呈梯級(jí)降低的云貴高原東延部分和東南山丘轉(zhuǎn)折線南端。其地貌類型多樣，有半高山、低山、丘陵、崗地、盆地和平原。湖南氣候具有“氣候濕潤(rùn)、四季分明、熱量充足、雨量集中、春溫多變、夏秋多旱、嚴(yán)寒期短、暑熱期長(zhǎng)”的特點(diǎn)。湖南省具有良好的亞熱帶濕潤(rùn)氣候和森林生態(tài)環(huán)境，其境內(nèi)大型真菌資源豐富[14-15]。

中國(guó)新記錄種——金錢菌型干臍菇被發(fā)現(xiàn)于炎陵縣中村瑤族鄉(xiāng)。該鄉(xiāng)位于炎陵縣最南端，東界下村鄉(xiāng)，西依資興市，南接桂東縣，北靠水口鎮(zhèn)，由中村鄉(xiāng)、龍?jiān)幾遴l(xiāng)、平樂(lè)鄉(xiāng)成建制合并設(shè)立中村瑤族鄉(xiāng)。該鄉(xiāng)為長(zhǎng)株潭地區(qū)唯一的少數(shù)民族鄉(xiāng)鎮(zhèn)，總面積281 km2，森林覆蓋率90.6%。中村瑤族鄉(xiāng)是國(guó)家級(jí)生態(tài)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，境內(nèi)野生動(dòng)植物資源豐富，有野生古桑、銀杉、銀杏、紅豆杉、水鹿、石羊等珍稀動(dòng)植物。豐富的植物資源和適宜的生態(tài)環(huán)境給大型真菌的生長(zhǎng)提供了有利條件。在對(duì)湖南省大型真菌資源的調(diào)查過(guò)程中，我們?cè)谠撪l(xiāng)1株杉屬樹(shù)種的腐木上采集到1份形似干臍菇屬的標(biāo)本。

2 新記錄種的鑒定

采集到的標(biāo)本在宏觀形態(tài)上與我國(guó)已報(bào)道的干臍菇種區(qū)別明顯，因此，我們通過(guò)形態(tài)學(xué)結(jié)合分子系統(tǒng)學(xué)的多相分類法對(duì)其進(jìn)行鑒定。具體鑒定方法如下。

采用硅膠干燥法制作標(biāo)本；采用傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分類方法進(jìn)行顯微特征觀察。以5% KOH作為浮載劑，用1%剛果紅染色，隨機(jī)測(cè)量30個(gè)成熟擔(dān)孢子，測(cè)量的數(shù)值小數(shù)點(diǎn)后保留2位。擔(dān)子、緣生囊狀體、柄生囊狀體等特征均隨機(jī)選取20個(gè)測(cè)量并記錄其形狀、大小、有無(wú)內(nèi)含物。采用試劑盒法對(duì)所制作的分子材料提取DNA，選用 ITS4 和 ITS5為引物[16]，以及25 μL PCR 擴(kuò)增體系和Touchdown程序進(jìn)行DNA擴(kuò)增。參照Mrmodeltest 2.3 選擇最優(yōu)模型[17]，構(gòu)建貝葉斯系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)[18]。

3 金錢菌型干臍菇形態(tài)特征、分布及生境

金錢菌型干臍菇(XeromphalinacampanelloidesRedhead， Can.J.Bot.66(3): 488 (1988))的擔(dān)子體較小，為金錢菌型。菌蓋直徑4～16 mm，幼時(shí)凸鏡形，后平展，赭色或赭黃色，中部顏色較深，邊緣淡黃色或淡金黃色，具條紋。菌肉淡黃色，無(wú)明顯氣味，具苦味。菌褶延生，L=15～24，I=1～3，淡黃色，褶間有不規(guī)則橫脈相連。菌柄中生，長(zhǎng)2～5 cm，粗0.7～1.3 mm，圓柱形，常彎曲，紅褐色至褐色，中部顏色較深，中空，纖維質(zhì)，基部被紅褐色絮狀菌絲，具菌索。擔(dān)孢子6.9～7.8 μm × 3.5～4.1 μm，Q=1.7～2.0，長(zhǎng)橢圓形，無(wú)色，光滑，薄壁，內(nèi)含油滴，淀粉質(zhì)。擔(dān)子 21～25 μm× 4～6 μm， 棒狀，具4小梗，偶具2小梗。擬擔(dān)子12～23 μm × 3～5 μm，棒狀。緣生囊狀體25～36 μm × 4～6 μm，紡錘形、棒狀或圓柱形，常不規(guī)則。菌蓋表皮寬2～6 μm，圓柱形，最外層菌絲無(wú)色或淡黃色，光滑或具被小塊結(jié)痂，內(nèi)層菌絲被大塊暗色結(jié)痂，內(nèi)含色素，在水中呈淡黃色至淡棕色，放入5%KOH溶液中立即變成黃棕色至紅棕色;蓋生囊狀體17～54 μm× 5～10 μm，近棒狀或圓柱形，內(nèi)含淡黃色色素。菌柄皮層寬3～7 μm，圓柱形，被大塊暗色結(jié)痂，內(nèi)含色素，在水中呈淡黃色至淡棕色，放入5%KOH溶液中立即變成紅棕色；柄生囊狀體22～68 μm× 2～5 μm，棒狀或圓柱形，頂端常不規(guī)則或具珊瑚狀分支，厚壁，內(nèi)含色素，在水中呈淡黃色，放入5%KOH溶液中呈紅棕色，所有組織有鎖狀聯(lián)合且非淀粉質(zhì)。其形態(tài)特征見(jiàn)圖1。

注： a為擔(dān)子體；b為擔(dān)子；c為擔(dān)孢子；d為緣生囊狀體；e為菌蓋表皮；f為柄上囊狀體。 標(biāo)尺a=10 mm，b-f=10 μm。

金錢菌型干臍菇群生于針葉林中腐木上(見(jiàn)圖 2)；分布于中國(guó)湖南和歐洲 (奧地利)、美洲 (美國(guó)、加拿大)。

憑證標(biāo)本：湖南省株洲市炎陵縣中村瑤族鄉(xiāng)，群生于腐木(杉屬)上，劉麗娜，2021年11月19日，HVIF50214。

圖2 金錢菌型干臍菇的生境

4 金錢菌型干臍菇的系統(tǒng)發(fā)育分析

選取自測(cè)及 GenBank下載的19條干臍菇屬 ITS 序列(見(jiàn)表 1)，以(MycenacahayaA.L.C.Chew & Desjardin)作為外類群，采用貝葉斯分析法重建其系統(tǒng)框架(見(jiàn)圖3)。圖3結(jié)果顯示，該拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)中，金錢菌型干臍菇的ITS序列與模式序列(holotype，MK169367)、副模式序列(paratype，MK169367)聚在一個(gè)分支上，并獲得高支持率(BPP=0.99)。

表1 系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)中自測(cè)和GenBank中下載的ITS序列Tab.1 Sequences downloaded from GenBank and newly generated sequences obtained in phylogenetic analysis種名憑證號(hào)Genbank號(hào)種名憑證號(hào)Genbank號(hào)Xeromphalina austroandinaTENN:055026KY352638X.austroandinaTENN-F-054960KM011856X.austroandinaTENN-F-054961KM011855X.austroandinaTENN-F-055089KM011854X.brunneolaTENN-F-061945 clone 1KM024578X.brunneolaTENN-F-061945 clone 2KM024579X.brunneolaTENN-F-061945 clone 2KM024580X.campanellaTENN F-069178NR154623X.campanelloidesDAOM 193576MK169367X.campanelloidesMICH 187222MK169376X.campanelloidesNN214OL872743X.enigmaticaTENN-F-061476 clone 1KM024592X.enigmaticaTENN-F-061476 clone 3KM024593X.enigmaticaTENN-F-061928 clone 1KM024590X.enigmaticaTENN-F-061476 clone 3KM024593X.enigmaticaTENN-F-061476 clone 1 KM024592X.enigmaticaTENN-F-061928 clone 1KM024590X.junipericolaAH19695GU320007X.junipericolaAH19696GU320008X.podocarpiPDD:105558KM975433X.setulipesAH36724GQ890701Mycena cahayaKLU M 1221NR154168

圖3 基于ITS序列構(gòu)建的干臍菇屬系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

5 討論

因金錢菌型干臍菇幼時(shí)在野外與干臍菇屬的模式種鐘型干臍菇(Xeromphalinacampanella)極其相似，Redhead[3]在加拿大采得該種時(shí)，給其命名為“campanelloides”，且因其成熟擔(dān)子體為金錢菌型、具苦味，其組織放入KOH溶液中變成紅棕色，可與(X.campanella)明顯區(qū)分。因其subpileipellis 放入KOH溶液中變成紅棕色，該種可歸入 sect.Mutabiles[19]。與已報(bào)道的種相比，其與(X.cauticinalis)最為相似，但后者菌柄不彎曲且具不同形狀的緣生囊狀體與柄生囊狀體[9]。

原始文獻(xiàn)記載的(X.campanelloides)擔(dān)孢子為球形至寬橢圓形，且緣生囊狀體頂端常具珊瑚狀分支，這與我們采集到的標(biāo)本形態(tài)存在差異。但是兩者的ITS序列僅9個(gè)堿基有差異，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)時(shí)聚在一個(gè)分支上且獲得高支持率。我們與該種的發(fā)現(xiàn)者Redhead教授進(jìn)行了討論，對(duì)于中國(guó)材料的緣生囊狀體不具有珊瑚狀分支的特征，Redhead教授也很詫異。因分子數(shù)據(jù)結(jié)果支持中國(guó)材料與模式標(biāo)本為1個(gè)種，且目前多數(shù)研究者對(duì)變種或變型的界定持謹(jǐn)慎態(tài)度，我們暫將采得的材料定名為(X.campanelloides)。

金錢菌型干臍菇目前僅在加拿大、美國(guó)和奧地利有分布記載[20]。我們?cè)谘琢昕h發(fā)現(xiàn)了該種，使其在世界的分布區(qū)域有了新的記載。