陳麗楠，付輝政，王蘭欣，鐘 蘭，楊甲璽，肖小武，任 琦，羅躍華*

覆盆子莖中1個(gè)新的半日花烷型二萜苷

陳麗楠1, 2，付輝政2*，王蘭欣1, 2，鐘 蘭1, 2，楊甲璽1, 2，肖小武2，任 琦2，羅躍華1, 2*

1.南昌大學(xué)藥學(xué)院，江西 南昌 330006 2.江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，國(guó)家藥監(jiān)局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，江西 南昌 330029

研究華東覆盆子莖的化學(xué)成分。利用硅膠、ODS柱色譜、Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱色譜、高效制備液相色譜等色譜方法進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)分析鑒定化合物結(jié)構(gòu)。從覆盆子莖中分離得到17個(gè)化合物，分別鑒定為松脂素（1）、黑麥草內(nèi)酯（2）、催吐蘿芙木醇（3）、(?)-丁香脂素（4）、13-對(duì)映-半日花烷-8(17),13-二烯-3β,15,18-三醇（5）、3β,18-di-hydroxy-manool（6）、(＋)-兒茶素（7）、(?)-兒茶素（8）、鄰苯二甲酸二丁酯（9）、goshonoside-F1（10）、3β-hydroxy-manool-18--β--glucoside（11）、goshonoside-F2（12）、goshonoside-F5（13）、goshonoside-F4（14）、goshonoside-F3（15）、goshonoside-F7（16）、異槲皮素（17）?；衔?1為新化合物，命名為覆盆子苷B；化合物6為新的天然產(chǎn)物，化合物1～4為首次從該植物中分離得到，化合物1～17為覆盆子莖中首次分離。

華東覆盆子；二萜苷；覆盆子苷B；松脂素；黑麥草內(nèi)酯；催吐蘿芙木醇；(?)-丁香脂素

懸鉤子屬植物種類多樣分布廣泛，目前世界范圍內(nèi)有700多種。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)有懸鉤子屬植物194種及88變種[1]。實(shí)際上中國(guó)境內(nèi)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的種類有201種98變種[2]。覆盆子是薔薇科懸鉤子屬植物華東覆盆子Hu的干燥未成熟果實(shí)，具有益腎固精縮尿、養(yǎng)肝明目之功效，臨床常用于治療遺精滑精、遺尿、尿頻、陽(yáng)痿早泄、目暗昏花等癥[3]。且覆盆子為江西重要藥材，在江西德興進(jìn)行了規(guī)模化栽培，德興覆盆子是國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品，具有藥食同源特性。目前對(duì)覆盆子果實(shí)已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究，結(jié)果表明覆盆子富含黃酮類、萜類、酚酸類等成分，具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤、抗真菌、抗血栓、抗骨質(zhì)疏松、降血糖和調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用[4-5]，其中萜類成分抗腫瘤作用較為顯著[5]。為了進(jìn)一步開發(fā)利用該藥用資源并尋找有效的抗腫瘤成分，闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，在本課題組前期對(duì)覆盆子研究的基礎(chǔ)上[6]，繼續(xù)對(duì)覆盆子莖進(jìn)行化學(xué)成分研究。利用各種色譜技術(shù)從覆盆子莖水煎液中分離出17個(gè)化合物，分別為松脂素（pinoresinol，1）、黑麥草內(nèi)酯（loliolide，2）、催吐蘿芙木醇（vomifoliol，3）、(?)-丁香脂素 [(?)- syringaresinol，4]、13-對(duì)映-半日花烷-8(17),13-二烯-3β,15,18-三醇 [13-ent-labda-8(17),13-diene-3β, 15,18-triol，5]、3β,18-di-hydroxy-manool（6）、(＋)-兒茶素 [(＋)-catechin，7]、(?)-兒茶素 [(?)-catechin，8]、鄰苯二甲酸二丁酯（dibutylphthalate，9）、goshonoside-F1（10）、3β-hydroxy-manool-18--β--glucoside（11）、goshonoside-F2（12）、goshonoside-F5（13）、goshonoside-F4（14）、goshonoside-F3（15）、goshonoside-F7（16）、異槲皮苷（isoquercetin，17）。化合物11為新化合物，命名為覆盆子苷B，化合物6為新的天然產(chǎn)物，化合物1～4為首次從該植物中分離得到，化合物1～17為覆盆子莖中首次分離。

1 儀器與材料

島津LC-2030C 3D Plus型液相色譜儀（日本島津公司）；Agilent 8890型氣相色譜儀（安捷倫公司）；島津20-AD型制備高效液相色譜儀（日本島津公司）；Buchi中壓液相制備色譜儀（瑞士步琪公司）；Sartorius BP211D型電子天平（德國(guó)賽托利斯集團(tuán)）；Autopol IV-T/V型旋光儀（美國(guó)DKSH公司）；Varian UNITY INOVA 600型超導(dǎo)核磁共振儀（美國(guó)Varian公司）；Micromass ZabSpec質(zhì)譜儀（美國(guó)Micromass公司）；Waters ACQUITY UPLC/Xevo G2 Q TOF高分辨質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）；電熱恒溫水浴鍋（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；EYELA SB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，EYELA A-1000 S型循環(huán)水真空泵（日本EYELA公司）。Sephadex LH-20（瑞典Amersham Biosciences公司）；C18反相填料為日本YMC產(chǎn)品；制備色譜柱為YMC（250 mm×20 mm，10 μm）；柱色譜硅膠、薄層色譜硅膠為青島海洋化工廠生產(chǎn)；水為Milli-Q一級(jí)水；色譜所用試劑為色譜級(jí)試劑；-無(wú)水葡萄糖（批號(hào)11833-201908）對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；其他所用試劑均為分析純。

華東覆盆子莖采自江西省撫州市崇仁縣，經(jīng)江西省藥品檢測(cè)研究院付輝政副研究員鑒定為懸鉤子屬華東覆盆子Hu的莖，標(biāo)本（20200526）保留在江西省藥品檢測(cè)研究院標(biāo)本室。

2 提取與分離

取干燥覆盆子莖去葉（5.5 kg），室溫下經(jīng)粉粹、水煎煮提取2次，每次2 h、減壓濃縮等步驟得覆盆子莖濃縮液（3 L）。將濃縮液用適量水稀釋，依次用二氯甲烷、醋酸乙酯和水飽和正丁醇各萃取3次，減壓濃縮得二氯甲烷部位（8.4 g）、醋酸乙酯部位（42.1 g）、正丁醇部位（205.0 g）。

二氯甲烷部位經(jīng)正相硅膠柱色譜，石油醚-醋酸乙酯（5∶1→1∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC檢測(cè)合并相似流分，濃縮得到16個(gè)組分A1～A16。其中A12經(jīng)Sephadex LH 20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（36∶64，10 mL/min），得到化合物1（5.4 mg，R＝36.4 min）。A13經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（20∶80，10 mL/min），得到化合物2（2.5 mg，R＝41.0 min）。A14經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)合并得3個(gè)流分Fr.1～3。Fr.1經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（22∶78，10 mL/min），得到化合物3（3.5 mg，R＝27.1 min）；Fr.2經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（38∶62，10 mL/min），得到化合物4（5.0 mg，R＝21.8 min）。A15經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（30∶70，10 mL/min），得到化合物5（11.1 mg，R＝33.7 min）和6（5.1 mg，R＝35.4 min）。

醋酸乙酯部位經(jīng)正相硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（體積比12∶1→4∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC檢測(cè)合并相似流分，得到8個(gè)部分B1～B7。B2經(jīng)正相硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（體積比12∶1→4∶1）梯度洗脫，得到8個(gè)部分Fr.1～8。其中Fr.4經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（20∶80，10 mL/min），得到化合物7（8.7 mg，R＝14.1 min）和8（40.1 mg，R＝10.9 min）；其中Fr.2經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（66∶34，10 mL/min），得到化合物9（4.5 mg，R＝24.5 min）。B4經(jīng)過(guò)反相ODS柱色譜分離，甲醇-水（10∶100→100∶0）梯度洗脫，經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)后，合并相同組分，體積分?jǐn)?shù)100%甲醇洗脫的流分，經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)過(guò)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為乙腈-水（24∶76，10 mL/min），得到化合物10（96.7 mg，R＝43.3 min）、11（8.7 mg，R＝53.2 min）、12（84.5 mg，R＝79.6 min）。B6經(jīng)過(guò)反相ODS柱色譜分離，甲醇-水（10∶100→100∶0）梯度洗脫，經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)后，合并相同組分，體積分?jǐn)?shù)100%甲醇洗脫的流分，經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為乙腈-水（27∶73，10 mL/min），得到化合物13（140.0 mg，R＝9.8 min）、14（47.4 mg，R＝44.5 min）、15（27.4 mg，R＝25.3 min）、16（27.4 mg，R＝25.3 min）。B7經(jīng)過(guò)反向ODS柱色譜分離，甲醇-水（10∶100→100∶0）梯度洗脫，經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)后，合并相同組分，體積分?jǐn)?shù)50%甲醇洗脫的流分，經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫后，經(jīng)TLC檢測(cè)得主斑點(diǎn)，經(jīng)反相制備高效液相色譜，流動(dòng)相為甲醇-水（30∶70，10 mL/min），得到化合物17（27.4 mg，R＝45.7 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物6：白色無(wú)定形粉末，溶于吡啶、甲醇，[α]25 D?10° (0.025, CH3OH)，(nm): 201。超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜給出準(zhǔn)分子離子峰/345.239 2 [M＋Na]+（計(jì)算值345.240 6，C20H34O3Na），結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜確定其分子式為C20H34O3。

1H-NMR譜低場(chǎng)區(qū)顯示2組雙鍵質(zhì)子信號(hào)H6.23 (1H, m, H-14),5.62 (1H, dd,= 10.8, 2.0 Hz, H-15a), 5.21 (1H, dd,= 10.8, 2.0 Hz, H-15b)；4.98 (1H, s, H-17a), 4.83 (1H, s, H-17b)；此外，1H-NMR譜還給出3組甲基信號(hào)H0.84 (3H, s), 1.04 (3H, s), 1.52 (3H, s)。13C-NMR譜顯示20個(gè)碳信號(hào)，其中2對(duì)雙鍵信號(hào)C149.6, 117.7；147.8, 107.4。將化合物6的核磁數(shù)據(jù)與已知化合物(?)-3β-hydroxymanool[7]進(jìn)行比較，兩者核磁數(shù)據(jù)相似，且旋光度都為左旋，但化合物6的18號(hào)位的碳譜數(shù)據(jù)往低場(chǎng)移動(dòng)。18號(hào)氫是在3.69 (1H, d,= 10.7 Hz, H-18a) 和4.18 (1H, d,= 10.7 Hz, H-18b)，表明化合物6在已知化合物(?)-3β-hydroxymanool的基礎(chǔ)上18號(hào)位多1個(gè)羥基。并且在HMBC中，氫信號(hào)(H3.69,H4.18) 和二萜苷元C-18 (C67.8) 相關(guān)，進(jìn)一步表明羥基連接在18號(hào)位置。所以化合物6的平面結(jié)構(gòu)為3,18-dihydroxy-manool。

NOESY譜中觀察到H-5與H-9、H-18相關(guān)，表明C-18為β型，H-9為β型，則C-19為α型。H-3與H-19相關(guān)，H-3為α型，OH-3為β型。綜上化合物6鑒定為3β,18-dihydroxy-manool，結(jié)構(gòu)如圖1所示。具體核磁數(shù)據(jù)見表1。

圖1 化合物6的結(jié)構(gòu)主要的HMBC相關(guān)圖

化合物11：白色無(wú)定形粉末，溶于吡啶、甲醇，[α]25 D?56° (0.03, CH3OH)，(nm): 201。超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜給出準(zhǔn)分子離子峰/507.293 3 [M＋Na]+（計(jì)算值507.303 6，C26H44O8Na），結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜確定其分子式為C26H44O8。酸水解和衍生化氣相分析檢出-葡萄糖，與對(duì)照品-無(wú)水葡萄糖出峰時(shí)間一致。且水解后的母核[α]25 D?13° (0.01, CH3OH)，與化合物6的比旋度基本一致，且都為左旋，所以連接的糖為型葡萄糖。

酸水解過(guò)程：取化合物11 2 mg，加入2 mol/L HCl 2 mL，封口，80攝氏度水浴中反應(yīng)4 h，用等體積氯仿萃取2次，將水層減壓濃縮至干，即得皂苷樣品的完全酸水解物。

1H-NMR譜低場(chǎng)區(qū)顯示2組雙鍵質(zhì)子信號(hào)H6.21 (1H, dd,= 17.2, 10.8 Hz, H-14), 5.61 (1H, dd,= 10.8, 2.0 Hz, H-15a), 5.19 (1H, dd,= 10.8, 2.0 Hz, H-15b); 4.95 (1H, s, H-17a), 4.79 (1H, s, H-17b)；1個(gè)糖的端基質(zhì)子信號(hào)H4.89 (1H, d,= 7.8 Hz)。并且根據(jù)端基氫相對(duì)較大的3H-1, H-2偶合常數(shù)值也表明糖的端基碳構(gòu)型為β-型。此外，1H-NMR譜還給出3組甲基信號(hào)H0.79 (3H, s), 0.94 (3H, s), 1.49 (3H, s)。13C-NMR譜顯示26個(gè)碳信號(hào)，其中2對(duì)雙鍵信號(hào)C150.4, 112.3; 148.5, 108.0；1個(gè)糖分子碳信號(hào)C106.9 (C-1′), 75.7 (C-2′), 79.7 (C-3′), 73.0 (C-4′), 79.9 (C-5′), 64.1 (C-6′)。對(duì)比化合物11與化合物6碳?xì)渥V數(shù)據(jù)，化合物11比6多了1個(gè)葡萄糖單元。

表1 化合物6、11的1H-NMR和13C-NMR波譜數(shù)據(jù)(600/150 MHz, C5D5N)

在HMBC（圖2）中，葡萄糖的端基氫信號(hào)H-1′ (H4.89) 和二萜苷元碳信號(hào)C-18 (C76.3) 相關(guān)，表明葡萄糖單元連接在苷元的C-18位。

圖2 化合物11的結(jié)構(gòu)和主要的HMBC相關(guān)圖

NOESY譜中觀察到H-5與H-9、H-18相關(guān)，表明C-18為β型，H-9為β型，則C-19為α型。H-3與H-19相關(guān)，H-3為α型，OH-3為β型。H-19與H-20相關(guān)，表明C-20為α型。H-9（H1.54）、H-17（H4.98）、H-17（H4.83）與H-16相關(guān)，則C-16為α型，OH-13為β型。

綜上所述，化合物11結(jié)構(gòu)鑒定為3β-hydroxy- manool-18--β--glucoside，為1個(gè)新化合物，命名為覆盆子苷B。結(jié)構(gòu)見圖2。具體核磁數(shù)據(jù)見表1。

化合物1：白色粉末。ESI-MS/: 381.4 [M＋Na]+, 357.4 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.92 (4H, m, H-2, 2′, 6, 6′), 6.82 (2H, dd,= 8.2, 2.1 Hz, H-5, 5′), 5.64 (2H, s, 6, 6′-OH), 4.74 (2H, d,= 4.4 Hz, H-7, 7′), 4.29～4.20 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.90 (8H, m, 3, 3′-OCH3, H-9a, 9′a), 3.11 (2H, m, H-8, 8′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 132.9 (C-1, 1′), 108.5 (C-2, 2′), 146.6 (C-3, 3′), 145.2 (C-4, 4′), 114.2 (C-5, 5′), 118.9 (C-6, 6′), 85.8 (C-7, 7′), 54.1 (C-8, 8′), 71.6 (C-9, 9′), 55.9 (3, 3′-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[8]，故鑒定化合物1為松脂素。

化合物2：無(wú)色晶體（甲醇）。ESI-MS/: 197.2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.69 (1H, s, H-7), 4.33 (1H, s, H-3), 2.46 (1H, d,= 14.5 Hz, H-4a), 1.97 (1H, d,14.5 Hz, H-2a), 1.74 (1H, d,14.4 Hz, H-4b), 1.76 (3H, s, H-11), 1.51 (1H, dd,14.5, 3.5 Hz, H-2b), 1.47 (3H, s, H-9), 1.27 (3H, s, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 35.9 (C-1), 47.3 (C-2), 66.8 (C-3), 45.6 (C-4), 86.6 (C-5), 182.3 (C-6), 112.9 (C-7), 171.8 (C-8), 26.4 (C-9), 30.6 (C-10), 27.0 (C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[9]，故鑒定化合物2為黑麥草內(nèi)酯。

化合物3：無(wú)色晶體（甲醇）。ESI-MS/: 225.3 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.90 (1H, s, H-2), 5.85 (1H, dd,= 15.6, 5.4 Hz, H-2′), 5.79 (1H, d,= 15.6 Hz, H-1′), 4.41 (1H, m, H-3′), 2.44 (1H, d,= 17.0 Hz, H-6a), 2.24 (1H, d,= 17.0 Hz, H-6b), 1.89 (3H, s, H-3), 1.30 (3H, d,= 6.4 Hz, H-3′), 1.08 (3H, s, H-5a), 1.01 (3H, s, H-5b)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 197.9 (C-1), 126.9 (C-2), 162.6 (C-3), 79.0 (C-4), 41.1 (C-5), 49.7 (C-6), 18.8 (C-7), 22.9 (C-8), 23.7 (C-9), 135.7 (C-1′), 128.9 (C-2′), 68.0 (C-3′), 24.0 (C-4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[10]，故鑒定化合物3為催吐蘿芙木醇。

化合物4：無(wú)色油狀液體。ESI-MS/: 441.4 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.67 (4H, s, H-2, 2′, 6, 6′), 4.66 (2H, d,= 3.0 Hz, H-7, 7′), 4.22 (2H, m, H-9a, 9′a), 3.83 (12H, s, 3, 3′, 5, 5′-OCH3), 3.82 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.08 (2H, m, H-8, 8′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 131.9 (C-1, 1′), 104.4 (C-2, 2′), 148.6 (C-3, 3′), 133.2 (C-4, 4′), 148.6 (C-5, 5′), 104.4 (C-6, 6′), 86.8 (C-7, 7′), 55.3 (C-8, 8′), 72.3 (C-9, 9′), 56.6 (3, 3′, 5, 5′-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[11]，故鑒定化合物4為(?)-丁香脂素。

化合物5：白色粉末。ESI-MS/: 322.2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.80 (1H, t,= 6.7 Hz, H-14), 4.96 (1H, s, H-17a), 4.67 (1H, s, H-17b), 4.51 (2H, d,= 6.6 Hz, H-15), 4.24 (1H, m, H-3), 4.16 (1H, d,= 10.5 Hz, H-18a), 3.68 (1H, d,= 10.5 Hz, H-18b), 1.74 (3H, s, H-16), 1.24 (1H, m, H-1), 1.04 (3H, s, H-19), 0.84 (3H, s, H-20)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 38.6 (C-1), 28.6 (C-2), 73.1 (C-3), 43.5 (C-4), 47.8 (C-5), 24.5 (C-6), 37.5 (C-7), 149.0 (C-8), 56.7 (C-9), 39.8 (C-10), 22.6 (C-11), 39.0 (C-12), 137.7 (C-13), 126.1 (C-14), 59.2 (C-15), 16.6 (C-16), 106.8 (C-17), 67.5 (C-18), 13.1 (C-19), 15.4 (C-20)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物5為13-對(duì)映-半日花烷-8(17),13-二烯- 3β,15,18-三醇。

化合物6：白色無(wú)定形粉末。核磁數(shù)據(jù)見表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)類似[7]，故鑒定化合物6為3β,18-di-hydroxy-manool。經(jīng)系統(tǒng)查閱文獻(xiàn)，該化合物僅由人工合成得到，未從植物分離得到。

化合物7：黃色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 291.2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CH3OD): 6.73 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 6.66 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.61 (1H, dd,= 8.1, 2.0 Hz, H-6′), 5.82 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 5.75 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 4.46 (1H, d,= 7.5 Hz, H-2), 3.87 (1H, td,= 7.9, 5.4 Hz, H-3), 2.74 (1H, dd,= 16.1, 5.4 Hz, H-4a), 2.40 (1H, dd,= 16.1, 8.2 Hz, H-4b)；13C-NMR (150 MHz, CH3OD): 81.1 (C-2), 67.0 (C-3), 26.7 (C-4), 155.8 (C-5), 93.7 (C-6), 156.0 (C-7) 94.4 (C-8), 155.1 (C-9), 99.0 (C-10), 130.4 (C-1′), 114.2 (C-2′), 144.48 (C-3′), 144.50 (C-4′), 113.4 (C-5′), 118.2 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[13]，故鑒定化合物7為(＋)-兒茶素。

化合物8：棕黃色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 291.2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 6.72 (1H, s, H-2′), 6.68 (1H, d,8.0 Hz, H-5′), 6.60 (1H, d,= 7.9 Hz, H-6′), 5.89 (1H, s, H-6), 5.69 (1H, s, H-8), 4.88 (1H, brs, OH), 4.48 (1H, d,= 7.4 Hz, H-2), 3.83 (1H, q,= 7.1 Hz, H-3), 2.66 (1H, dd,= 16.0, 5.3 Hz, H-4eq), 2.35 (1H, dd,= 16.0, 8.0 Hz, H-4ax)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 81.0 (C-2), 66.3 (C-3), 27.9 (C-4), 156.2 (C-5), 93.8 (C-6), 156.4 (C-7), 95.1 (C-8), 155.3 (C-9), 99.1 (C-10), 130.6 (C-1′), 115.1 (C-2′), 144.8 (C-3′), 144.8 (C-4′), 114.5 (C-5′), 118.4 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[14]，鑒定化合物8為(?)-兒茶素。

化合物9：淡黃色油狀物。ESI-MS/: 301.3 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.67 (2H, dd,= 5.8, 3.3 Hz, H-2, 5), 7.72 (2H, dd,= 5.8, 3.3 Hz, H-3, 6), 4.24 (4H, t,= 6.6 Hz, H-8, 8′), 1.63 (4H, m, H-9, 9′), 1.35 (4H, m, H-10, 10′), 0.93 (6H, m, H-11, 11′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 131.7 (C-1, 2), 131.5 (C-4, 5), 128.6 (C-3, 6), 167.2 (C-7, 7′), 65.0 (C-8, 8′), 30.0 (C-9, 9′), 18.6 (C-10, 10′), 13.5 (C-11, 11′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[15-16]，故鑒定化合物9為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物10：白色粉末。ESI-MS/: 507.2 [M＋Na]+, 483.2 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.61 (1H, t,= 6.1 Hz, H-14), 4.98 (1H, d,= 7.8 Hz, 15--Glc-H-1), 4.94 (1H, s, H-17a), 4.62 (1H, s, H-17b), 3.70 (1H, dd,= 10.5, 3.4 Hz, H-18a), 4.19 (1H, dd,= 10.5, 4.2 Hz, H-18b), 1.66 (3H, s, 16-CH3), 1.05 (3H, s, 19-CH3), 0.83 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 39.6 (C-1), 29.7 (C-2), 73.9 (C-3), 44.6 (C-4), 48.6 (C-5), 25.5 (C-6), 38.5 (C-7), 115.0 (C-8), 57.4 (C-9), 40.8 (C-10), 23.3 (C-11), 39.8 (C-12), 141.8 (C-13), 122.5 (C-14), 66.9 (C-15), 17.7 (C-16), 107.8 (C-17), 68.3 (C-18), 14.2 (C-19), 16.4 (C-20), 104.6 (C-1 of 15--Glc), 76.4 (C-2 of 15--Glc), 79.8 (C-3 of 15--Glc), 72.9 (C-4 of 15--Glc), 79.8 (C-5 of 15--Glc), 64.0 (C-6 of 15--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物10為goshonoside-F1。

化合物12：白色粉末。ESI-MS/: 507.2 [M＋Na]+, 483.2 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.79 (1H, t,= 5.9 Hz, H-14), 4.92 (1H, s, H-17a), 4.89 (1H, d,= 7.8 Hz, 18--Glc-H-1), 4.62 (1H, s, H-17b), 4.48 (1H, d,= 5.9 Hz, H-15), 3.51 (1H, d,= 9.9 Hz, H-18), 1.70 (3H, s, 16-CH3), 0.95 (3H, s, 19-CH3), 0.77 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 39.3 (C-1), 29.4 (C-2), 73.1 (C-3), 44.6 (C-4), 48.1 (C-5), 25.5 (C-6), 38.3 (C-7), 150.1 (C-8), 57.6 (C-9), 40.7 (C-10), 23.7 (C-11), 40.1 (C-12), 138.8 (C-13), 126.9 (C-14), 60.2 (C-15), 17.6 (C-16), 107.7 (C-17), 75.8 (C-18), 14.1 (C-19), 16.4 (C-20), 107.0 (C-1 of 18--Glc), 76.3 (C-2 of 18--Glc), 79.7 (C-3 of 18--Glc), 73.1 (C-4 of 18--Glc), 79.8 (C-5 of 18--Glc), 64.1 (C-6 of 18--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物12為goshonoside-F2。

化合物13：白色粉末。ESI-MS/: 669.3 [M＋Na]+, 645.3 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.57 (1H, d,7.6 Hz, H-14), 4.93 (1H, d,7.8 Hz, H-1 of 15--Glc), 4.88 (1H, s, H-17a), 4.86 (1H, d,7.8 Hz, H-1 of 18--Glc), 4.58 (1H, s, H-17b), 4.46 (1H, d,10.0 Hz, H-18a), 3.50 (1H, d,10.0 Hz, H-18b), 1.64 (3H, s, H-16), 0.92 (3H, s, H-19), 0.73 (3H, s, H-20)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 36.8 (C-1), 26.9 (C-2), 70.4 (C-3), 42.1 (C-4), 45.6 (C-5), 23.1 (C-6), 35.8 (C-7), 148.2 (C-8), 55.1 (C-9), 38.2 (C-10), 21.0 (C-11), 37.5 (C-12), 139.2 (C-13), 119.8 (C-14), 64.7 (C-15), 15.3 (C-16), 105.2 (C-17), 73.4 (C-18), 11.6 (C-19), 14.0 (C-20), 102.4 (C-1 of 15--Glc), 73.8 (C-2 of 15--Glc), 77.2 (C-3 of 15--Glc), 70.6 (C-4 of 15--Glc), 77.3 (C-5 of 15--Glc), 61.5 (C-6 of 15--Glc), 104.5 (C-1 of 18--Glc), 73.8 (C-2 of 18--Glc), 77.3 (C-3 of 18--Glc), 70.7 (C-4 of 18--Glc), 77.4 (C-5 of 18--Glc), 61.6 (C-6 of 18--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物13為goshonoside-F5。

化合物14：白色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 653.3 [M＋Na]+, 629.3 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.60 (1H, t,= 6.7 Hz, H-14), 4.96 (1H, d,= 7.7 Hz, 15--Glc-H-1), 4.90 (1H, s, H-17a), 4.82 (1H, d,= 7.7 Hz, 18--Glc-H-1), 4.57 (1H, s, H-17b), 3.74 (1H, d,= 9.6 Hz, H-18a), 3.44 (1H, d,= 9.6 Hz, H-18b), 1.63 (3H, s, H-16), 0.77 (3H, s, H-19), 0.71 (3H s, H-20)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 39.2 (C-1), 19.5 (C-2), 37.0 (C-3), 38.4 (C-4), 48.7 (C-5), 25.1 (C-6), 38.7 (C-7), 149.5 (C-8), 56.9 (C-9), 40.2 (C-10), 22.6 (C-11), 39.1 (C-12), 141.1 (C-13), 121.5 (C-14), 66.3 (C-15), 17.1 (C-16), 106.9 (C-17), 79.9 (C-18), 18.5 (C-19), 15.6 (C-20), 104.0 (C-1 of 15--Glc), 75.7 (C-2 of 15--Glc), 79.0 (C-3 of 15--Glc), 72.2 (C-4 of 15--Glc), 79.1 (C-5 of 15--Glc), 63.3 (C-6 of 15--Glc), 106.2 (C-1 of 18--Glc), 75.6 (C-2 of 18--Glc), 79.0 (C-3 of 18--Glc), 72.2 (C-4 of 18--Glc), 79.1 (C-5 of 18--Glc), 63.3 (C-6 of 18--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物14為goshonoside-F4。

化合物15：白色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 644.7 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.58 (1H, t,= 7.0 Hz, H-14), 4.97 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1 of 15--Glc), 4.85 (1H, s, H-17a), 6.35 (1H, d,= 7.2 Hz, 18--Glc-H-1), 4.56 (1H, s, H-17b), 4.45 (2H, m, H-15), 1.65 (3H, s, 16-CH3), 1.26 (3H, s, 19-CH3), 0.69 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 38.6 (C-1), 18.9 (C-2), 37.1 (C-3), 48.3 (C-4), 49.9 (C-5), 27.3 (C-6), 38.3 (C-7), 148.6 (C-8), 56.9 (C-9), 39.4 (C-10), 22.3 (C-11), 38.9 (C-12), 141.1 (C-13), 121.3 (C-14), 66.2 (C-15), 17.0 (C-16), 107.4 (C-17), 177.8 (C-18), 17.3 (C-19), 15.6 (C-20), 103.9 (C-1 of 15--Glc), 75.4 (C-2 of 15--Glc), 79.0 (C-3 of 15--Glc), 72.9 (C-4 of 15--Glc), 79.9 (C-5 of 15--Glc), 63.6 (C-6 of 15--Glc), 96.5 (C-1 of 18--Glc), 74.5 (C-2 of 18--Glc), 78.8 (C-3 of 18--Glc), 71.2 (C-4 of 18--Glc), 79.1 (C-5 of 18--Glc), 62.3 (C-6 of 18--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故鑒定化合物15為goshonoside-F3。

化合物16：白色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 653.7 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 5.62 (1H, t,= 6.5 Hz, H-14), 4.97 (1H, d,= 7.8 Hz, 15--Glc-H-1), 4.92 (1H, s, H-17a), 5.00 (1H, d,= 7.8 Hz, 3--Glc-H-1), 4.59 (1H, s, H-17b), 3.70 (1H, dd,= 11.6, 4.1 Hz, H-3), 4.52～4.61 (2H, m, H2-15), 1.72 (3H, s, 16-CH3), 1.26 (3H, s, 18-CH3), 0.91 (3H, s, 19-CH3), 0.69 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 38.2 (C-1), 24.7 (C-2), 85.0 (C-3), 39.1 (C-4), 55.8 (C-5), 24.6 (C-6), 37.3 (C-7), 148.8 (C-8), 55.2 (C-9), 39.7 (C-10), 22.1 (C-11), 38.0 (C-12), 141.2 (C-13), 121.7 (C-14), 65.6 (C-15), 16.7 (C-16), 107.1 (C-17), 28.9 (C-18), 17.2 (C-19), 15.0 (C-20), 102.7 (C-1 of 3--Glc), 75.5 (C-2 of 3--Glc), 78.6 (C-3 of 3--Glc), 72.4 (C-4 of 3--Glc), 79.1 (C-5 of 3--Glc), 63.1 (C-6 of 3--Glc), 103.1 (C-1 of 15--Glc), 75.4 (C-2 of 15--Glc), 78.3 (C-3 of 15--Glc), 72.0 (C-4 of 15--Glc), 78.8 (C-5 of 15--Glc), 63.0 (C-6 of 15--Glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故鑒定化合物16為goshonoside-F7。

化合物17：黃色粉末。ESI-MS/: 463.1 [M－H]?。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 6.22 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 6.43 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 7.59 (2H, m, H-6′, 2′), 6.86 (1H, d,= 8.8 Hz, H-5′), 5.48 (1H, d,= 7.0 Hz, Glc-H-1′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 156.5 (C-2), 133.1 (C-3), 177.5 (C-4), 161.2 (C-5), 98.7 (C-6), 164.5 (C-7), 93.5 (C-8), 156.2 (C-9), 104.0 (C-10), 121.2 (C-1′), 116.2 (C-2′), 144.8 (C-3′), 148.5 (C-4′), 115.2 (C-5′), 121.6 (C-6′), 100.9 (C-1′′), 74.1 (C-2′′), 76.5 (C-3′′), 69.9 (C-4′′), 77.6 (C-5′′), 61.0 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18]，故鑒定化合物17為異槲皮苷。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志 (第三十七卷) [M].北京: 科學(xué)出版社, 1985: 118.

[2] 顧姻.懸鉤子屬植物資源及其利用 [J].植物資源與環(huán)境, 1992, 1(2): 50-60.

[3] 中國(guó)藥典 [S].一部.2020: 399-400.

[4] 程丹, 李潔, 周斌, 等.覆盆子化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展 [J].中藥材, 2012, 35(11): 1873-1876.

[5] Yu G H, Luo Z Q, Wang W B,.Hu: A review of the phytochemistry and pharmacology [J]., 2019, 10: 799.

[6] Zhong R J, Guo Q, Zhou G P,.Three new labdane-type diterpene glycosides from fruits ofand their cytotoxic activities against five humor cell lines [J]., 2015, 102: 23-26.

[7] Tiansheng Lu, Vargas D, Franzblau S G,.Diterpenes from[J]., 1995, 38(2): 451-456.

[8] 劉志華, 王金蘭, 趙明, 等.工業(yè)大麻地上部分化學(xué)成分研究 [J].中草藥, 2021, 52(15): 4463-4472.

[9] 查顯進(jìn), 石強(qiáng), 邵峰, 等.澤漆化學(xué)成分研究 [J].中草藥, 2021, 52(2): 341-348.

[10] 毛華麗, 占扎君, 錢捷.黑面神化學(xué)成分的研究 [J].中草藥, 2009, 40(S1): 100-102.

[11] 齊曼, 鄭曉珂, 曹彥剛, 等.皂角刺醋酸乙酯部位化學(xué)成分研究 [J].中草藥, 2018, 49(23): 5510-5515.

[12] Tanaka T, Kawamura K, Kitahara T,.Ent-labdane-type diterpene glucosides from leaves of[J]., 1984, 23(3): 615-621.

[13] Moyo F, Gashe B A, Majinda R R T.A new flavan from[J]., 1999, 70(4): 412-416.

[14] Nechepurenko I V, Polovinka M P, Komarova N I,.Low-molecular-weight phenolic compounds fromroots [J]., 2008, 44(1): 31-34.

[15] 李小輝, 袁名睿, 陸雪萍, 等.麥冬的化學(xué)成分研究 [J].中草藥, 2021, 52(13): 3804-3809.

[16] 萬(wàn)仲賢, 吳建國(guó), 吳飛, 等.白花鬼針草化學(xué)成分研究[J].世界中醫(yī)藥, 2020, 15(10): 1391-1394.

[17] Ohtani K, Yang C R, Miyajima C,.Labdane-type diterpene glycosides from fruits of[J]., 1991, 39(9): 2443-2445.

[18] 謝朋飛, 鄒錄惠, 邱莉, 等.華山礬地上部分的化學(xué)成分研究 [J].中草藥, 2014, 45(20): 2895-2899.

A new labdane diterpene glycoside from stems of

CHEN Li-nan1, 2, FU Hui-zheng2, WANG Lan-xin1, 2, ZHONG Lan1, 2, YANG Jia-xi1, 2, XIAO Xiao-wu2, REN Qi2, LUO Yue-hua1,2

1.School of Pharmacy, Nanchang University, Nanchang 330006, China 2.Jiangxi Institute for Drug Control, NMPA Key Laboratory of Quality Evaluation of Traditional Chinese Patent Medicine, Jiangxi Engineering Research Center for Drug and Medical Device Quality, Nanchang 330029, China

To study the chemical constituents of the stems of.The chemical constituents were isolated and purified by column chromatography on silica gel, ODS, Sephadex LH-20 and MPLC.Their structures were elucidated on basis of physicochemical properties and spectroscopic analysis.Seventeen compounds were isolated from the stems of,and identified as pinoresinol (1), loliolide (2), vomifoliol (3), (?)-syringaresinol (4), 13--labda-8(17),13-diene-3β,15,18-triol (5), 3β,18-di-hydroxy-manool (6), (＋)-catechin (7), (?)-catechin (8), dibutylphthalate (9), goshonoside-F1 (10), 3β-hydroxy-manool-18--β--glucoside (11), goshonoside-F2 (12), goshonoside-F5 (13), goshonoside-F4 (14), goshonoside-F3 (15), goshonoside-F7 (16), isoquercetin (17).Compound 11 is a new compound named as goshonoside B and compound 6 is a new natural product, compounds 1—4 were isolated from the plant for the first time, compounds 1—17 were isolated from the stems offor the first time.

Hu; diterpene glycoside; goshonoside B; pinoresinol; loliolide; vomifoliol; (?)-syringaresinol

R284.1

A

0253 - 2670(2022)10 - 2941 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.10.002

2021-09-26

江西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（20192BAB205115）；江西省中醫(yī)藥標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目（2021A05）；江西省衛(wèi)生健康委科技計(jì)劃項(xiàng)目（SKJP_220219796）

陳麗楠（1994—），女，在讀碩士，主要從事中藥活性成分研究。

通信作者：付輝政，研究員。Tel: (0791)88158716 E-mail: fhzfhz620@sohu.com

羅躍華，主任中藥師。Tel: (0791)88158689 E-mail: emailluo@sohu.com

[責(zé)任編輯 王文倩]