劉馨憶,孫興忠
(1.吉林工程職業(yè)學(xué)院,吉林四平 136001;2.吉林省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院,吉林長春 130062)
在肉雞養(yǎng)殖中,部分養(yǎng)殖企業(yè)為了加速肉雞生長,在其日糧中添加過量蛋白質(zhì),導(dǎo)致肉雞體內(nèi)蛋白含量過剩,造成腎臟組織損傷,繼發(fā)相關(guān)疾?。ǚ队⒀?,2019)。此外,蛋白過量還會引起血清相關(guān)指標(biāo)異常,抗氧化能力下降,造成氧化應(yīng)激,嚴(yán)重影響肉雞的生長性能。通過本試驗的研究可以為飼喂高蛋白質(zhì)日糧引起肉雞腎損傷提供相關(guān)的參考依據(jù),確保飼料的質(zhì)量和安全,避免因飼料蛋白過盛所引起的經(jīng)濟損失,進而促進畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。
1.1 試驗動物 試驗選用1日齡白羽肉雞1200只,要求健康良好,體重相近,公母各半,購自吉林雙利孵化場。
1.2 試驗日糧 試驗基礎(chǔ)日糧按照NRC(1998)配制,其余日糧按照粗蛋白質(zhì)水平進行調(diào)整,其組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.3 試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理 將1200只白羽肉雞隨機分為4組,分別為試驗I組,即對照組(粗蛋白質(zhì)含量19%),試驗II組(粗蛋白質(zhì)含量22%)、試驗III組(粗蛋白質(zhì)含量25%)和試驗IV組(粗蛋白質(zhì)含量28%),每組5個重復(fù),每個重復(fù)60只雞。試驗前對雞舍進行全面消毒處理,各試驗組肉雞自由采食、飲水,溫度和濕度等條件均保持一致,按照常規(guī)免疫程序進行免疫,試驗期21 d。
1.4 樣本采集及測定 試驗結(jié)束前1 d對肉雞禁食,次日清晨每個重復(fù)取6只肉雞頸部放血處死,收集血液,迅速解剖,取兩側(cè)腎臟,用10%甲醛溶液固定,石蠟包埋切片,HE染色,顯微鏡下觀察病理變化,將血液離心后取血清置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.5 試驗指標(biāo)及測定
1.5.1 生長性能 具體指標(biāo)計算公式如下:
平均日增重(ADG):平均日增重=(試驗后體重-試驗前體重)/試驗天數(shù);
平均日采食量(ADFI):平均日采食量=試驗期間各組的總采食量/試驗天數(shù)。
料肉比(F/G):料肉比=消耗飼料總重(kg)/增重總量(kg)。
1.5.2 血清中相關(guān)指標(biāo)的含量和活性測定 按照尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒的說明書進行相關(guān)指標(biāo)測定,以上試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。
1.6 統(tǒng)計分析 用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析,采用Duncan法進行多重比較,計算結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
2.1 不同蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞生長性能的影響 由表2可知,與試驗I組相比,試驗結(jié)束后III組和IV組肉雞的末重顯著降低(P<0.05);試驗III組肉雞的ADG比對照組顯著降低(P<0.05),而試驗IV組ADG比對照組極顯著降低(P<0.01);各試驗組與對照組相比,F(xiàn)/G均顯著增加(P<0.05),ADFI無顯著變化(P>0.05)。
表2 日糧蛋白質(zhì)水平對肉雞生長性能的影響
2.2 不同蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞腎臟組織及血清指標(biāo)的影響 由表3可知,與試驗I組相比,試驗III組和試驗IV組肉雞血清中Cr濃度顯著升高(P<0.05);試驗IV組肉雞血清中BUN的濃度極顯著高于試驗I組(P<0.01),其他試驗組與對照組之間無顯著差異(P>0.05);各試驗組肉雞血清中UA含量均無顯著差異(P>0.05)。
表3 日糧蛋白質(zhì)水平對肉雞血清中UA、Cr和BUN含量的影響
由圖1可知,對照組腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)正常;試驗II組腎臟輕度腫脹,可見少量浸潤的炎性細(xì)胞及細(xì)小散在的尿鹽;試驗III組腎小球結(jié)構(gòu),形態(tài)紊亂,腎實質(zhì)有少量間隙,近端小管與遠(yuǎn)端小管有少量浸潤的炎性細(xì)胞及沉積的尿鹽;試驗IV組腎臟皮質(zhì),腎小球結(jié)構(gòu)松散形態(tài)紊亂,腎實質(zhì)有大量的間隙,間質(zhì)血管擴張,腎小管及間質(zhì)內(nèi)可見大量的棕黑色尿酸鹽結(jié)晶沉積,及浸潤的炎性細(xì)胞。
2.3 不同蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞血清氧化和抗氧化指標(biāo)的影響 由表4可知,試驗IV組血清MDA含量相對于其他3組含量極顯著增高(P<0.01);試驗III組和試驗IV組血清SOD活性比試驗I組顯著降低(P<0.05);試驗III組血清GSH-Px活性比試驗I組顯著降低(P<0.05),試驗IV組比試驗I組血清GSH-Px活性極顯著降低(P<0.01);試驗IV組血清T-AOC含量比試驗I組顯著降低(P<0.05)。
圖1A 對照組(×400)
圖1B 22%蛋白含量(×400)
圖1C 25%蛋白含量(×400)
圖1D 28%蛋白含量(×400)
表4 日糧蛋白質(zhì)水平對肉雞血清中氧化和抗氧化指標(biāo)含量的影響
3.1 高蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞生長性能的影響 試驗結(jié)果表明,隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高,試驗結(jié)束后III組和IV組肉雞的體重和ADG較對照組顯著降低,各試驗組F/G明顯增加。馮焯等(2016)研究發(fā)現(xiàn),隨粗蛋白質(zhì)水平的升高(17%、18.5%、20%),太行雞末期體重、平均日增重有增加趨勢,平均日采食量和料重比有降低趨勢,這與本研究結(jié)果相反,原因可能是其添加的蛋白質(zhì)水平在雞生理需求之內(nèi),故而隨著蛋白質(zhì)水平的增加,有助其生產(chǎn)性能的提高。
3.2 高蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞腎臟組織形態(tài)的影響 試驗結(jié)果表明,飼料中蛋白質(zhì)含量過多會導(dǎo)致腎小球結(jié)構(gòu)松散、形態(tài)紊亂、炎性細(xì)胞增多,可見棕黑色的尿酸鹽沉積。添加高劑量蛋白試驗組肉雞的腎小球萎縮、腎小囊擴張、腎小管上皮細(xì)胞壞死,局部出現(xiàn)浸潤炎性細(xì)胞,腎臟損傷明顯(駱建兵,2006)。在鵝的研究中發(fā)現(xiàn),日糧中粗蛋白質(zhì)含量為24%時鵝的腎臟就已出現(xiàn)病變,主要表現(xiàn)為腎小管空泡、腎小球萎縮及炎性浸潤等(李曼曼等,2019)。飼喂過量的蛋白質(zhì)其代謝產(chǎn)生的氨在不能完全通過鳥氨酸循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩嘏懦鲶w外時,會在肝臟中合成嘌呤后再轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩峤?jīng)腎臟排出,當(dāng)尿酸的合成超出腎臟最大排泄量時會導(dǎo)致腎臟功能衰退(Nasoori等,2015)。
3.3 高蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞血液生化指標(biāo)的影響 試驗結(jié)果表明,隨著日糧中粗蛋白質(zhì)含量的增加,與對照組相比,試驗III組和試驗IV組肉雞血清中Cr濃度顯著升高,試驗IV組肉雞血清中BUN的濃度極顯著增加,表明日糧蛋白質(zhì)含量過高,增加了腎臟負(fù)擔(dān),長此以往造成其損傷。UA含量也有所增加,其原因可能是日糧中蛋白含量過高會引起Ca的異位沉積,使尿酸排泄受阻,從而使血清中尿酸含量升高(朱小甫等,2013)。由此表明,飼喂高蛋白質(zhì)日糧能造成肉雞腎臟組織損傷及血清腎功能相關(guān)指標(biāo)異常。
3.4 高蛋白質(zhì)水平日糧對肉雞血液氧化和抗氧化指標(biāo)的影響 試驗結(jié)果表明,隨著日糧中蛋白含量的增加,血清中MDA的活性顯著增加,SOD和GSH-Px的活性顯著降低。谷春梅等(2007)使用高蛋白質(zhì)日糧飼喂小鼠,研究其對消化系統(tǒng)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,高蛋白質(zhì)日糧顯著提高了消化系統(tǒng)中超氧陰離子和MDA的含量,SOD、GSH-Px的活性及T-AOC顯著下降,結(jié)果表明,高蛋白質(zhì)日糧誘導(dǎo)小鼠消化系統(tǒng)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)。雖然研究對象和組織不同,但與本研究結(jié)果一致。還有相關(guān)研究表明,隨著飼喂高蛋白質(zhì)日糧時間的延長,大鼠血清中T-SOD活性逐漸下降,高蛋白質(zhì)日糧飼喂大鼠在試驗不同階段引起了腦、肝、腎不同程度的氧化損傷,其中腎臟的氧化應(yīng)激最為嚴(yán)重(秦學(xué)燕,2009)。
本研究結(jié)果表明,高蛋白質(zhì)日糧能降低肉雞生產(chǎn)性能,加重腎臟負(fù)擔(dān),造成腎臟組織損傷。此外,高蛋白質(zhì)日糧還能引起血清腎功能相關(guān)指標(biāo)異常,使得氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡,從而導(dǎo)致氧化損傷。