張宇亮，徐靈，李仁杰，董成林，崔邦銓，吳成志

上海中冶醫(yī)院檢驗科，上海 200941

白細(xì)胞是一種抵抗感染的免疫細(xì)胞，它主要由人體骨髓中的造血干細(xì)胞分化形成。在醫(yī)學(xué)上根據(jù)其形態(tài)與功能將其分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、中性粒細(xì)胞五大類。各類細(xì)胞的檢測在血液檢測中均有重要的作用，在臨床上各類細(xì)胞的檢測值對于患者的診斷與治療均有重要意義[1-3]。參考區(qū)間是一種供醫(yī)學(xué)臨床上對患者疾病與身體狀況做出準(zhǔn)確評估的一個依據(jù)，在國內(nèi)已出臺了關(guān)于成人的白細(xì)胞各參數(shù)的參考區(qū)間，而對于兒童的白細(xì)胞參考區(qū)間一直在引用成人的區(qū)間范圍。因兒童處于生長發(fā)育階段，使兒童的白細(xì)胞各參數(shù)值處于一種不穩(wěn)定狀態(tài)，且目前在國內(nèi)對于兒童白細(xì)胞各參數(shù)參考區(qū)間的指導(dǎo)沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)[4-5]。本研究通過對上海市寶山區(qū)2～6歲的健康兒童白細(xì)胞參數(shù)的參考區(qū)間進(jìn)行統(tǒng)計、分析與研究，為本地區(qū)兒童白細(xì)胞參數(shù)的參考區(qū)間提供一定的臨床指導(dǎo)，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取上海市寶山區(qū)2019年4～8月進(jìn)行幼托體檢的18 501例2～6歲健康兒童作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床體檢所有兒童均發(fā)育正常；②經(jīng)測量兒童的體溫均≤37.5℃。排除標(biāo)準(zhǔn)：①在近2周內(nèi)有發(fā)熱、服藥史的兒童；②依從性較差的兒童。將18 501例健康兒童按不同年齡段分為5組，其中男童9 199 例，女童9 302 例；年齡2～6 歲，平均(5.0±1.0)歲；2 歲474 例，3 歲4 575 例，4 歲5 234 例，5 歲4 718 例，6歲3 500例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，兒童家屬均知情并簽署同意書。

1.2 檢測方法 對所需的儀器進(jìn)行校準(zhǔn)檢驗，確定其結(jié)果均在范圍內(nèi)后再進(jìn)行使用，采用Sysmex XS 500i全自動血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑，原廠校準(zhǔn)品和質(zhì)控品(日本Sysmex 公司)，嚴(yán)格按照《上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》[6]進(jìn)行手指末梢血采集，所有兒童均在無名指末梢利用微量吸管采集兒童末梢血80 μL，然后加入含有EDTA-K2 抗凝劑的離心管中，將其充分混和至均勻。血細(xì)胞分析檢測由兩名熟練的醫(yī)護(hù)人員嚴(yán)格按要求進(jìn)行操作，所有標(biāo)本均在4 h 內(nèi)完成。檢測指標(biāo)包括白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞百分率、淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率、嗜堿性粒細(xì)胞百分率。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較不同性別兒童白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞百分率、淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率、嗜堿性粒細(xì)胞百分率。(2)比較2～6 歲健康兒童各年齡組間末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類的參考區(qū)間。(3)比較本次調(diào)查地區(qū)2～6歲正常兒童末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類分析結(jié)果與第八版諸福棠實用兒科學(xué)參數(shù)。(4)驗證本次調(diào)查的末梢白細(xì)胞計數(shù)及其分類的參考區(qū)間。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS25.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用Mann-Whitney 非參數(shù)檢驗進(jìn)行兩個獨立樣本間的結(jié)果分析，采用Kruskal-Wallis H非參數(shù)檢驗對5 個年齡段進(jìn)行多個獨立樣本間的結(jié)果分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別兒童間的各種參數(shù)比較 采用Mann-Whitney 非參數(shù)檢驗進(jìn)行兩個獨立樣本間的結(jié)果分析，男女兩組間白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞百分率和嗜堿性細(xì)胞百分率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率男女兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。其中淋巴細(xì)胞百分率女性明顯高于男性，單核細(xì)胞百分率和嗜酸性粒細(xì)胞百分率男性明顯高于女性，見表1。

表1 不同性別兒童間的各參數(shù)比較

2.2 2 ～6歲健康兒童各年齡組間末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類的參考區(qū)間比較 采用Kruskal-Wallis H非參數(shù)檢驗對5個年齡段進(jìn)行多個獨立樣本間的結(jié)果分析，所有參數(shù)的年齡組間比較，除了白細(xì)胞計數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞百分率外，其他各參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。再進(jìn)一步對各年齡組分別進(jìn)行Mann-Whitney 的分析，從2～3 歲開始，如果兩組間相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，則將兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行合并，并與4歲組進(jìn)行比較，直至將各年齡組六項參數(shù)全部完成比較。最后將各年齡組根據(jù)比對結(jié)果進(jìn)行分組劃分，同時考慮到性別對白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞百分率和嗜堿性細(xì)胞百分率無顯著性影響，故在這三項參數(shù)的年齡分組中不考慮性別的分組，而性別間淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 2～6歲健康兒童各年齡組間末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類的參考區(qū)間

2.3 本調(diào)查地區(qū)2～6歲正常兒童末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類分析結(jié)果與第八版諸福棠實用兒科學(xué)的參數(shù)比較 本次調(diào)查地區(qū)2～6歲兒童末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類結(jié)果與第八版《諸福棠實用兒科學(xué)》提供的參考區(qū)間相比，白細(xì)胞計數(shù)等6 項參數(shù)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 本調(diào)查地區(qū)2～6 歲正常兒童末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類分析結(jié)果與第八版諸福棠實用兒科學(xué)的參數(shù)比較

2.4 本調(diào)查的末梢白細(xì)胞計數(shù)及其分類參考區(qū)間進(jìn)行小樣本驗證情況 應(yīng)用本次調(diào)查的末梢白細(xì)胞計數(shù)及其分類參考區(qū)間進(jìn)行小樣本驗證，按照篩選標(biāo)準(zhǔn)，從參加幼托體檢補(bǔ)檢的2～6 歲兒童中選出任意20 例，將這20例標(biāo)本的測定值與需驗證的參考區(qū)間比較，落在參考區(qū)間外的測定值＜1個。本次調(diào)查的末梢血血細(xì)胞分析參考區(qū)間的技術(shù)要求及操作過程符合我國衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 402-2012)文件要求。

3 討論

血常規(guī)檢測是兒童醫(yī)院在臨床上常用的檢測指標(biāo)，白細(xì)胞計數(shù)作為血常規(guī)檢測的指標(biāo)之一，其在臨床上常被用于對疾病的診斷、治療與評估，尤其是在兒科發(fā)熱門診中具有重要的作用，它能對病毒性或細(xì)菌性的感染做出判斷[7]。白細(xì)胞計數(shù)因受采集部位的不同、檢測方法的差異以及地區(qū)、民族、環(huán)境等因素的影響，使其參考區(qū)間存在一定的差異。因此，國際檢驗學(xué)與臨床化學(xué)共同提出了在條件允許的情況下，各地區(qū)可建立適合本地區(qū)人群的參考區(qū)間[8-9]。

近幾年，手指末梢血的采集因具有創(chuàng)傷小、方便快捷、疼痛小等優(yōu)勢，在臨床上被廣泛應(yīng)用。對于兒童手指末梢血白細(xì)胞計數(shù)的參考區(qū)間主要依據(jù)試劑盒說明書或相關(guān)的參考文獻(xiàn)，但在參考前需進(jìn)行驗證[10]。兒童屬于特殊群體，處于生長發(fā)育的快速階段，其血液中的各項指標(biāo)均會受到年齡、性別、地區(qū)等因素的影響。另有，兒童免疫系統(tǒng)也處于一種逐步完善的階段，從而使其白細(xì)胞分類指標(biāo)也會隨著年齡的變化而變化，因此，在不同地區(qū)有必要建立符合本地區(qū)兒童白細(xì)胞計數(shù)的參考區(qū)間[11]。本研究結(jié)果顯示，在白細(xì)胞各參數(shù)中淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率在不同性別中相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且在淋巴細(xì)胞百分率中，女童明顯高于男童，在單核細(xì)胞百分率和嗜酸性粒細(xì)胞百分率中，男童明顯高于女童；在白細(xì)胞各參數(shù)中除了白細(xì)胞計數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞百分率不受年齡的影響外，其他參數(shù)值均與年齡有一定的關(guān)聯(lián)。本次調(diào)查上海市寶山區(qū)2～6歲兒童末梢血白細(xì)胞計數(shù)及其分類結(jié)果與第八版《諸福棠實用兒科學(xué)》[12]提供的白細(xì)胞計數(shù)等6項參數(shù)的參考區(qū)間相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。這與之前陳興等[13]、劉佳麗等[14]的研究結(jié)果基本一致，均說明了兒童白細(xì)胞的部分參數(shù)值會受到性別、年齡等因素的影響，但年齡與性別對白細(xì)胞的各參數(shù)值均有一定的差異性。這可能是由于地域、研究對象的數(shù)量、檢測系統(tǒng)、采血方式的不同所造成的差異性。再有，本研究只局限于上海市寶山區(qū)，具有一定的局限性，對其他地區(qū)不一定適用，且所研究的對象為2～6歲兒童，而對其他年齡段兒童的研究還需進(jìn)一步探討。通過調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，影響兒童白細(xì)胞計數(shù)及其分類參考區(qū)間的因素是多方面的，在醫(yī)學(xué)上有必要在各地區(qū)建立一套適合自身的參考區(qū)間。隨著檢測系統(tǒng)與技術(shù)的不斷更新與完善，建立符合本地區(qū)白細(xì)胞分類的參考區(qū)間，對于本地區(qū)兒童血常規(guī)檢測對相關(guān)疾病的診斷與治療具有重大意義[15]。

綜上所述，在對兒童性別、年齡與臨床需求的基礎(chǔ)上給予充分考慮，實驗室根據(jù)自身的檢測系統(tǒng)，建立一套適應(yīng)自己醫(yī)院在臨床診斷中所需求的白細(xì)胞計數(shù)及其分類的參考區(qū)間，具有重大的臨床意義。