0 引言

胃癌作為常見(jiàn)的惡性腫瘤,與飲食習(xí)慣、遺傳、地域等因素有關(guān),在我國(guó)南方胃癌患病人數(shù)高于北方,病死率也較高

.化療手段是治療晚期胃癌患者的最佳方式,由于化療藥物治療出現(xiàn)耐藥性及毒副作用影響了治療效果

,因此尋找新的治療方式迫在眉睫,而新型靶向治療已成為胃癌治療的主要手段之一.環(huán)狀RNA(circular RNA,circRNA)是一種內(nèi)源性非編碼RNA分子,具有共價(jià)閉合結(jié)構(gòu),已成為近年的人類疾病和腫瘤研究的熱點(diǎn)

.研究結(jié)果表明

,在胃癌組織和細(xì)胞中circ_0044516表達(dá)水平增加,可能通過(guò)靶向調(diào)控miR-149促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡.通過(guò)在線生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)顯示,miR-516a-5p與circ_0044516相互結(jié)合,研究結(jié)果顯示,miR-516a-5p在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中低表達(dá),與患者年齡、病理分期、腫瘤大小有關(guān),可能通過(guò)靶向負(fù)調(diào)控HIST3H2A抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖

,但是在胃癌細(xì)胞及對(duì)胃癌細(xì)胞的生物學(xué)行為暫不清楚.關(guān)于circ_0044516和miR-516a-5p靶向調(diào)控作用尚不明確,鑒于此,本研究主要觀察circ_0044516可能通過(guò)靶向調(diào)控miR-516a-5p對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響

1 材料和方法

1.1 材料 細(xì)胞和主要試劑.胃上皮細(xì)胞(GES-1)、胃癌細(xì)胞(SNU-16、HGC-27)購(gòu)于中科院上海細(xì)胞中心;改良Eagle培養(yǎng)基(Dulbecco’s Minimum Essential,DMEM)培養(yǎng)基、胎牛血清購(gòu)于美國(guó)Gibco公司;Lipofectamine

2000試劑盒購(gòu)于美國(guó)Invitrogen公司;實(shí)驗(yàn)中所用序列、引物購(gòu)于上海吉瑪公司;TRIzol試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、熒光定量試劑盒購(gòu)于美國(guó)Thermo fisher公司;噻唑藍(lán)(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)試劑盒、凋亡試劑盒購(gòu)于上海碧云天生物;Transwell小室購(gòu)于上海澤邁生物技術(shù)有限公司;p21抗體、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)抗體、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)抗體、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)抗體、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)抗體購(gòu)于美國(guó)Abcam公司;雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司.

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染:將胃上皮細(xì)胞GES-1、胃癌細(xì)胞(SNU-16、HGC-27)培養(yǎng)在DMEM培養(yǎng)基內(nèi),且含有10%胎牛血清、青霉素、鏈霉素,培養(yǎng)條件為37 ℃、5% CO

.觀察細(xì)胞融合情況,融合度為90%時(shí),加入0.25%胰蛋白酶消化傳代培養(yǎng)細(xì)胞.

取對(duì)數(shù)期HGC-27細(xì)胞,將細(xì)胞接種至96孔板中,細(xì)胞融合達(dá)到80%,按照Lipofectamine

2000試劑盒說(shuō)明書將si-NC、si-circ_0044516、miR-NC、miR-516a-5p、pcDNA、pcDNA-circ_0044516轉(zhuǎn)染細(xì)胞中,記為si-NC組、si-circ_0044516組、miR-NC組、miR-516a-5p組、pcDNA組、pcDNA-circ_0044516組;共轉(zhuǎn)染sicirc_0044516和anti-miR-NC、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p至細(xì)胞內(nèi),記為si-circ_0044516+anti-miR-NC組、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p組.細(xì)胞轉(zhuǎn)染6h換細(xì)胞培養(yǎng)液,培養(yǎng)48 h后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn).

1.2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移:收集各組細(xì)胞HGC-27細(xì)胞(pcDNA組、pcDNA-circ_0044516組除外),加入不含血清培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度,濃度為2×10

個(gè)/mL.在Transwell小室上室中加入200 μL細(xì)胞懸液,下室加入500 μL含血清的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h,拿出小室擦掉沒(méi)有遷移的細(xì)胞,用4%多聚甲醛固定30 min,結(jié)晶紫染色20 min,在顯微鏡下觀察細(xì)胞,并拍照,即為遷移細(xì)胞數(shù).

2.4 Circ_0044516靶向調(diào)控miR-516a-5p的表達(dá) 圖6結(jié)果顯示,circ_0044516和miR-516a-5p存在互補(bǔ)的結(jié)合位點(diǎn).表3結(jié)果顯示,與miR-NC組比較,miR-516a-5p組circ_0044516 WT熒光素酶活性顯著降低(

<0.05),circ_0044516 MUT熒光素酶活性不受影響.

(1) 從Von Mises應(yīng)力圖上可以看出，豎井的圍巖應(yīng)力是隨著開挖深度的增加而逐漸增大的，故初期支護(hù)應(yīng)緊隨開挖進(jìn)度，并且每隔一段距離應(yīng)設(shè)置一個(gè)壁座，豎井上部20 m所處位置是V級(jí)圍巖，故壁座所隔距離應(yīng)相應(yīng)的減小。

借助互聯(lián)網(wǎng)建設(shè)的腦卒中智慧醫(yī)聯(lián)體平臺(tái)有效提升了區(qū)域神經(jīng)學(xué)科的發(fā)展，實(shí)現(xiàn)信息支撐資源下沉，貼合國(guó)家分級(jí)診療的醫(yī)改政策，有利于患者診療，形成科學(xué)有序的地區(qū)就醫(yī)格局。

1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡:收集各組細(xì)胞HGC-27細(xì)胞(pcDNA組、pcDNA-circ_0044516組除外),預(yù)冷磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffered saline,PBS)清洗細(xì)胞,使用結(jié)合緩沖液500 μL制備細(xì)胞懸液,然后先加入5 μL膜聯(lián)蛋白 V-FITC (Annexin V-FITC),再加入5 μL碘化丙啶(propidium iodide,PI),混勻后避光反應(yīng)15 min,上流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況.

1.2.2 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ_0044516和miR-516a-5p表達(dá)水平:按照TRIzol法提取胃上皮細(xì)胞GES-1、胃癌細(xì)胞(SNU-16、HGC-27)、及各組HGC-27細(xì)胞中總RNA,檢測(cè)RNA濃度后,按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書將RNA合成cDNA,使用cDNA為模板進(jìn)行PCR反應(yīng),反應(yīng)體系共20 μL,為10 μL SYBR Premix Ex Taq Ⅱ(2×),1 μL cDNA,上、下游引物各0.8 μL,ddH

O 7.4 μL.circ_0044516以GAPDH作為內(nèi)參,miR-516a-5p以U6作為內(nèi)參,采用2

法計(jì)算circ_0044516和miR-516a-5p表達(dá)水平.

綜上所述,沉默circ_0044516抑制胃癌細(xì)胞增殖和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,作用機(jī)制可能與調(diào)控miR-516a-5p有關(guān).當(dāng)然,本實(shí)驗(yàn)也存在不足的地方,只注重研究體外細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),關(guān)于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及可能相關(guān)信號(hào)通路等需要后一步繼續(xù)驗(yàn)證,為胃癌治療提供新的分子靶向理論依據(jù).

本系統(tǒng)開發(fā)了基于Xbee的智能家居無(wú)線能耗監(jiān)控系統(tǒng)[10]，主要分能耗監(jiān)測(cè)和控制兩部分：以無(wú)線網(wǎng)絡(luò)通訊的方式實(shí)現(xiàn)各電器設(shè)備能耗參數(shù)的數(shù)據(jù)采集，實(shí)現(xiàn)網(wǎng)頁(yè)或微信端在線實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)能耗數(shù)據(jù)曲線；同時(shí)還通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)、微信實(shí)現(xiàn)對(duì)電器設(shè)備的遠(yuǎn)程控制，如控制照明設(shè)備、空氣凈化器、熱水器等.

CircRNA具有共價(jià)閉合結(jié)構(gòu),已成為近年的人類疾病和腫瘤研究的熱點(diǎn),研究證明circRNA與胃癌發(fā)病有關(guān),可介導(dǎo)參與胃癌細(xì)胞增殖、遷移等過(guò)程.

使用SPSS 20.0軟件處理數(shù)據(jù),結(jié)果采用mean±SD表示,多組間比較使用單因素方差分析,兩組間比較使用獨(dú)立樣本

檢驗(yàn).

<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 胃癌細(xì)胞中circ_0044516和miR-516a-5p表達(dá)水平 與胃上皮細(xì)胞GES-1相比,胃癌細(xì)胞SNU-16、HGC-27中circ_0044516相對(duì)表達(dá)水平顯著增加(

<0.05),miR-516a-5p相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(

<0.05).圖1.

劉志武說(shuō)：“或許是兇手要向我們示威？向警方發(fā)起挑戰(zhàn)？從這個(gè)卍標(biāo)記來(lái)看也有點(diǎn)像兇手故意留下的標(biāo)記，許多案例都有這種情況?！?/p>

4) 科研和技術(shù)推廣薄弱。埃塞環(huán)境林業(yè)研究院有少量竹子栽培和加工利用研究人員，亞的斯大學(xué)建筑系有以研究原竹建筑的竹建筑組。目前埃塞尚無(wú)專門的竹林栽培和竹材加工研究機(jī)構(gòu)，各大學(xué)和學(xué)院也無(wú)竹林栽培和竹材加工專業(yè)。這些少量的研究人員從事竹林栽培和竹材加工技術(shù)研究和推廣，且大部分為兼職，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足現(xiàn)代竹資源發(fā)展和加工利用的需要。

董氏還十分強(qiáng)調(diào)君子、小人之辯，這是他一貫的主張。嘉靖五年(1526)他主考會(huì)試時(shí)，就以之作為選拔舉子的標(biāo)準(zhǔn)。他在《會(huì)試錄后序》中說(shuō)：

鄧小平作為這場(chǎng)偉大革命的主要領(lǐng)導(dǎo)人，是當(dāng)年改革開放一切重大決策的最后拍板者。他領(lǐng)導(dǎo)全黨開辟改革開放新道路，具有統(tǒng)領(lǐng)全局性決定作用的，是作出了這樣幾個(gè)重大決策：

2.3 過(guò)表達(dá)miR-516a-5p對(duì)HGC-27細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響 與miR-NC組比較,miR-516a-5p組miR-516a-5p相對(duì)表達(dá)水平顯著增加(

<0.05),細(xì)胞活性、遷移細(xì)胞數(shù)降低(

<0.05),凋亡率顯著增加(

<0.05),p21、Bax蛋白表達(dá)增加(

<0.05),Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá)降低(

<0.05).圖4、圖5、表2.

1.2.3 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖:收集各組細(xì)胞HGC-27細(xì)胞(pcDNA組、pcDNA-circ_0044516組除外),將細(xì)胞制成密度為3×10

個(gè)/mL,接種96孔板中,培養(yǎng)48 h,每孔加入20 μL MTT,繼續(xù)培養(yǎng)4 h,加入150 μL DMSO試劑,低速震蕩至結(jié)晶溶解,使用酶標(biāo)儀檢測(cè)490 nm處細(xì)胞吸光度值(A),計(jì)算細(xì)胞活性(%).

2.5 Circ_0044516靶向負(fù)調(diào)控miR-516a-5p的表達(dá) 與pcDNA組相比,pcDNA-circ_0044516組中circ_0044516相對(duì)表達(dá)水平顯著增加(

<0.05),miR-516a-5p相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(

<0.05).表4.

2.6 抑制miR-516a-5p對(duì)沉默circ_0044516處理HGC-27細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響 與si-circ_0044516+antimiR-NC組比較,si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p組miR-516a-5p相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(

<0.05),細(xì)胞活性、遷移細(xì)胞數(shù)增加(

<0.05),凋亡率顯著降低(

<0.05),p21、Bax蛋白表達(dá)降低(

<0.05),Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá)增加(

<0.05).圖7、圖8、表5.

3 討論

CircRNA在哺乳動(dòng)物異常表達(dá),于20世紀(jì)70年代首次被發(fā)現(xiàn),目前已受到國(guó)內(nèi)外研究學(xué)者的廣泛關(guān)注,還能夠競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微小RNA(microRNA,miRNA)參與腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、凋亡等生物學(xué)過(guò)程

.研究結(jié)果表明

,在胃癌組織中circ_001653表達(dá)增加,體外實(shí)驗(yàn)顯示下調(diào)circ_001653抑制胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,可能調(diào)控miR-377/NR6A1軸促進(jìn)胃癌發(fā)展.circ_0044516是最近被發(fā)現(xiàn)一種circRNA,在肺癌組織和細(xì)胞中高表達(dá),敲低circ_0044516可明顯抑制肺癌細(xì)胞增殖和阻滯細(xì)胞周期進(jìn)展,促進(jìn)細(xì)胞凋亡

.研究表明

,在前列腺癌組織外泌體中circ_0044516表達(dá)增加,下調(diào)其表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲由抑制作用.在胃癌研究中發(fā)現(xiàn),circ_0044516表達(dá)增加,通過(guò)調(diào)控miR-149-5p促進(jìn)HuR的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲

.本研究結(jié)果顯示,胃癌細(xì)胞中circ_0044516表達(dá)水平增加,明顯高于胃上皮細(xì)胞GES-1,沉默circ_0044516降低胃癌細(xì)胞存活率、遷移細(xì)胞數(shù),增加細(xì)胞凋亡率.p21是Clp家族成員,在癌組織中表達(dá)失調(diào),與細(xì)胞周期及增殖有關(guān)

.Bcl-2家族成員Bcl-2與Bax,二者之間相互拮抗共同促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生凋亡

.MMP2基因位于16q12.2區(qū)域,不僅能降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白,還可以促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移

.上調(diào)p21、Bax蛋白表達(dá),下調(diào)Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá),提示沉默circ_0044516抑制胃癌細(xì)胞增殖和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.

此外，教堂還要求教牧人員參加省、市黨委政府組織的宗教政策法規(guī)和宗教事務(wù)管理知識(shí)學(xué)習(xí)，和區(qū)民族宗教局組織的教職人員愛(ài)國(guó)愛(ài)教、宗教法律法規(guī)的學(xué)習(xí)培訓(xùn)班，以實(shí)現(xiàn)自我提高。

miRNA在正常組織和癌組織中差異表達(dá),可以作為促癌基因或抑癌基因影響癌癥的發(fā)展,包括在內(nèi)的胃癌

,如下調(diào)miR-335、miR-124、miR-218等

,上調(diào)miR-216a、miR-552、miR-592等

.研究結(jié)果顯示

,miR-516a-5p在肝細(xì)胞癌、膀胱癌等低表達(dá),上調(diào)miR-516a-5p表達(dá)能抑制癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲等過(guò)程.還有研究結(jié)果表明

,circ_MYC可能通過(guò)降低miR-516a-5p促進(jìn)急性髓系白血病細(xì)胞增殖.但是miR-516a-5p對(duì)胃癌細(xì)胞的研究暫不明確,在本研究中發(fā)現(xiàn),miR-516a-5p在胃癌細(xì)胞中表達(dá)水平降低,過(guò)表達(dá)miR-516a-5p降低胃癌細(xì)胞存活率和遷移細(xì)胞數(shù),增加凋亡率,p21、Bax蛋白表達(dá)增加,Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá)降低,提示過(guò)表達(dá)miR-516a-5p抑制胃癌細(xì)胞增殖和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.在線生物信息軟件和雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)顯示,miR-516a-5p是circ_0044516靶基因.過(guò)表達(dá)circ_0044516降低miR-516a-5p表達(dá)水平,提示circ_0044516靶向負(fù)調(diào)控miR-516a-5p的表達(dá).進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,抑制miR-516a-5p對(duì)沉默circ_0044516處理胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響,提示circ_0044516可能通過(guò)負(fù)調(diào)控miR-516a-5p促進(jìn)胃癌細(xì)胞發(fā)展.

2.2 沉默circ_0044516對(duì)HGC-27細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響 與si-NC組比較,si-circ_0044516組circ_0044516相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(

<0.05),細(xì)胞活性、遷移細(xì)胞數(shù)降低(

<0.05),凋亡率顯著升高(

<0.05),p21、Bax蛋白表達(dá)增加(

<0.05),Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá)降低(

<0.05).圖2、圖3、表1.

4 結(jié)論

1.2.6 Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p21、Bax、Bcl-2、MMP2蛋白表達(dá):將蛋白裂解液加各組細(xì)胞HGC-27細(xì)胞(pcDNA組、pcDNA-circ_0044516組除外),提取的細(xì)胞總蛋白使用BCA試劑盒檢測(cè)定量,加入上樣緩液,進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)凝膠處理,轉(zhuǎn)膜,脫脂奶粉封閉2 h,加入一抗p21、Bax、Bcl-2、MMP2、GAPDH抗體,4 ℃過(guò)夜孵育,加入帶標(biāo)記的二抗室溫下孵育2 h,將電化學(xué)發(fā)光(electro-chemi-luminescence,ECL)滴入聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)膜上,顯影、曝光.使用Image J軟件分析蛋白條帶密度值,以GAPDH作為內(nèi)參.

1.2.7 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)c i r c_0044516和miR-516a-5p靶向關(guān)系:構(gòu)建miR-516a-5p結(jié)合位點(diǎn)的circ_0044516野生型、突變型載體序列(circ_0044516 WT、circ_0044516 MUT),取HGC-27細(xì)胞接種24孔中,將circ_0044516 WT、circ_0044516 MUT分別與miR-NC或miR-516a-5p共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,48 h收集細(xì)胞,按照雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒操作步驟,檢測(cè)熒光素酶活性.

在胃癌組織和細(xì)胞中circ_0044516高表達(dá),通過(guò)靶向調(diào)控miRNA促進(jìn)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為.在線生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)顯示,miR-516a-5p與circ_0044516相互結(jié)合,而miR-516a-5p在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中低表達(dá),但是隨胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為暫不清楚.本研究主要觀察circ_0044516可能通過(guò)靶向調(diào)控miR-516a-5p對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響.

在本次關(guān)于腦梗塞患者的治療研究中，實(shí)驗(yàn)組的社區(qū)康復(fù)治療獲得了良好的治療效果，有效率高達(dá)94%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組的臨床治療的64%。由此可見(jiàn)，社區(qū)康復(fù)護(hù)理治療方法在腦梗塞患者的治療中獲得了良好的治療結(jié)果，病患的治療滿意度較高，有效的提升了病患的生活質(zhì)量和生活自理能力；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者的各項(xiàng)評(píng)分具有較大的優(yōu)勢(shì)，組間差異明顯，由此可以得出結(jié)論，社區(qū)康復(fù)護(hù)理能有效提升腦梗塞患者的治療效果，恢復(fù)病患生活自理能力的概率較大，良好的維護(hù)了醫(yī)患之間的關(guān)系，使社區(qū)衛(wèi)生工作“六位一體”做好做實(shí)，使患者體會(huì)到社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心工作的重要性。

本研究主要觀察circ_0044516對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響,及其是否能通過(guò)調(diào)控miR-516a-5p影響胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為,旨在為胃癌研究提供新的作用靶點(diǎn).

qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)胃上皮細(xì)胞GES-1和胃癌細(xì)胞SNU-16、HGC-27中circ_0044516、miR-516a-5p表達(dá)水平.將HGC-27細(xì)胞分為si-NC組、si-circ_0044516組、miRNC組、miR-516a-5p組、si-circ_0044516+anti-miR-NC組、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p組.qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ_0044516和miR-516a-5p表達(dá)水平;噻唑藍(lán)(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移;Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p21、Bax、Bcl-2、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)蛋白表達(dá);雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ_0044516和miR-516a-5p靶向關(guān)系.

認(rèn)知隱喻理論主要研究的是一般的、常規(guī)的概念模式，對(duì)于一些新創(chuàng)隱喻、新造詞語(yǔ)等內(nèi)涵更豐富的、非常規(guī)性隱喻則無(wú)法提供充分的理論支撐。美國(guó)語(yǔ)言學(xué)家Fauconnier與Turner提出了“多空間”模型，并在此基礎(chǔ)上創(chuàng)造出概念整合理論，探討了多空間模型和意義構(gòu)建的動(dòng)態(tài)性，為分析復(fù)雜而新鮮的隱喻表達(dá)開創(chuàng)了一條更加深刻的道路。

胃癌細(xì)胞circ_0044516高表達(dá),而miR-516a-5p低表達(dá),沉默circ_0044516或過(guò)表達(dá)miR-516a-5p抑制胃癌細(xì)胞增殖和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,抑制miR-516a-5p對(duì)沉默circ_0044516處理胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響.

胃癌細(xì)胞circ_0044516高表達(dá),沉默circ_0044516抑制胃癌細(xì)胞增殖和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,作用機(jī)制可能與調(diào)控miR-516a-5p有關(guān).

本實(shí)驗(yàn)也存在不足的地方,只注重研究體外細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),關(guān)于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及可能相關(guān)信號(hào)通路等需要后一步繼續(xù)驗(yàn)證.

1 Li P,Jing J,Li R,Ge M,Jia P,Hu W,Qi X,Wei WQ,Zhuang G.Upper Gastrointestinal Cancer in China:Spatial Epidemiologic Evidence from Screening Areas.

2020;13:935-946 [PMID:32655009 DOI:10.1158/1940-6207.CAPR-20-0139]

2 Song Z,Wu Y,Yang J,Yang D,Fang X.Progress in the treatment of advanced gastric cancer.

2017;39:1010428317714626 [PMID:28671042 DOI:10.1177/1010428317714626]

3 Li R,Jiang J,Shi H,Qian H,Zhang X,Xu W.CircRNA:a rising star in gastric cancer.

2020;77:1661-1680 [PMID:31659415 DOI:10.1007/s00018-019-03345-5]

4 Altesha MA,Ni T,Khan A,Liu K,Zheng X.Circular RNA in cardiovascular disease.

2019;234:5588-5600 [PMID:30341894 DOI:10.1002/jcp.27384]

5 Fang J,Chen W,Meng X.Downregulating circRNA_0044516 Inhibits Cell Proliferation in Gastric Cancer Through miR-149/Wnt1/β-catenin Pathway.

2021;25:1696-1705 [PMID:33140323 DOI:10.1007/s11605-020-04834-w]

6 Ye XY,Xu L,Lu S,Chen ZW.MiR-516a-5p inhibits the proliferation of non-small cell lung cancer by targeting HIST3H2A.

2019;33:2058738419841481 [PMID:30966836 DOI:10.1177/2058738419841481]

7 Zhou WY,Cai ZR,Liu J,Wang DS,Ju HQ,Xu RH.Circular RNA:metabolism,functions and interactions with proteins.

2020;19:172 [PMID:33317550 DOI:10.1186/s12943-020-01286-3]

8 Khan S,Jha A,Panda AC,Dixit A.Cancer-Associated circRNAmiRNA-mRNA Regulatory Networks:A Meta-Analysis.

2021;8:671309 [PMID:34055888 DOI:10.3389/fmolb.2021.671309]

9 Zhou W,Jiang R,Wang Y,Li Y,Sun Z,Zhao H.hsa_circ_001653 up-regulates NR6A1 expression and elicits gastric cancer progression by binding to microRNA-377.

2020;105:2141-2153 [PMID:33006200 DOI:10.1113/EP088399]

10 Chen YW,Du QR,He YJ,Chen WS,Jiang WY,Gui Q,Xu CC,Wang W,Cheng HY.Circ_0044516 Regulates miR-136/MAT2A Pathway to Facilitate Lung Cancer Development.

2021;2021:5510869 [PMID:34258296 DOI:10.1155/2021/5510869]

11 Li T,Sun X,Chen L.Exosome circ_0044516 promotes prostate cancer cell proliferation and metastasis as a potential biomarker.

2020;121:2118-2126 [PMID:31625175 DOI:10.1002/jcb.28239]

12 Yang Y,Cai B,Shi X,Duan C,Tong T,Yu C.circ_0044516 functions in the progression of gastric cancer by modulating MicroRNA-149-5p/HuR axis.

2021 [PMID:33417162 DOI:10.1007/s11010-020-04026-9]

13 Shamloo B,Usluer S.p21 in Cancer Research.

2019;11 [PMID:31416295 DOI:10.3390/cancers11081178]

14 Warren CFA,Wong-Brown MW,Bowden NA.BCL-2 family isoforms in apoptosis and cancer.

2019;10:177 [PMID:30792387 DOI:10.1038/s41419-019-1407-6]

15 Sanyal S,Amin SA,Adhikari N,Jha T.Ligand-based design of anticancer MMP2 inhibitors:a review.

2021;13:1987-2013 [PMID:34634916 DOI:10.4155/fmc-2021-0262]

16 Alessandrini L,Manchi M,De Re V,Dolcetti R,Canzonieri V.Proposed Molecular and miRNA Classification of Gastric Cancer.

2018;19 [PMID:29882766 DOI:10.3390/ijms19061683]

17 Zare A,Ahadi A,Larki P,Omrani MD,Zali MR,Alamdari NM,Ghaedi H.The clinical significance of miR-335,miR-124,miR-218 and miR-484 downregulation in gastric cancer.

2018;45:1587-1595 [PMID:30171475 DOI:10.1007/s11033-018-4278-5]

18 Safaralizadeh R,Ajami N,Nemati M,Hosseinpourfeizi M,Azimzadeh Isfanjani A,Moaddab SY.Disregulation of miR-216a and miR-217 in Gastric Cancer and Their Clinical Significance.

2019;50:78-83 [PMID:29177609 DOI:10.1007/s12029-017-0019-6]

19 李猛,仲雅婷,陳成,徐維,高超.miR-552和miR-592在胃癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志 2021;30:1096-1100+1106 [DOI:10.3969/j.issn.1006-5709.2021.10.004]

20 Yao Z,Xu R,Yuan L,Xu M,Zhuang H,Li Y,Zhang Y,Lin N.Circ_0001955 facilitates hepatocellular carcinoma (HCC) tumorigenesis by sponging miR-516a-5p to release TRAF6 and MAPK11.

2019;10:945 [PMID:31822654 DOI:10.1038/s41419-019-2176-y]

21 Huang W,Lu Y,Wang F,Huang X,Yu Z.Circular RNA circRNA_103809 Accelerates Bladder Cancer Progression and Enhances Chemo-Resistance by Activation of miR-516a-5p/FBXL18 Axis.

2020;12:7561-7568 [PMID:32922071 DOI:10.2147/CMAR.S263083]

22 Zou X,Jiang M.CircMYC regulates the mitochondrial respiration and cell viability via miR-516a-5p/AKT3 axis in acute myeloid leukemia.

2021;13:10112-10126 [PMID:34650684]