王 鑫，羅 鈺，修偉業(yè)，徐美玉，馬永強,

（1.哈爾濱商業(yè)大學食品工程學院，黑龍江省谷物食品與谷物資源重點實驗室，黑龍江哈爾濱 150028；2.黑龍江省林業(yè)科學院，黑龍江哈爾濱 150081）

甜玉米芯是甜玉米的副產(chǎn)物，甜玉米芯多糖（Sweet corn cob polysaccharide, SCP）是甜玉米芯中的一種重要生物活性物質(zhì)[1]，具有降血糖[2]、抗腫瘤[3]、抗氧化等生物活性[4]，但是前期[5]制備的甜玉米芯多糖（SCP-80）其分子量約為100 kDa，難于被機體吸收利用，生物利用率較低。采用納米乳包埋甜玉米芯多糖，制備甜玉米芯多糖納米乳，一方面可以使其處于一個更加穩(wěn)定的體系當中，生物活性成分更加穩(wěn)定[6]；另一方面可以將其分子變小，更容易被機體吸收利用，從而提高其生物利用度[7]。

納米乳液（nano emulsion，NE），是將兩種互不相溶的溶液在表面活性劑、助表面活性劑的作用下，形成外觀透明或半透明，粒徑在1～100 nm，具有熱力學穩(wěn)定性、各向同性的分散體系[8]。納米乳液是一種極具潛力的新型載藥系統(tǒng)，具有提高包埋藥物穩(wěn)定性[9]、提高難溶性藥物溶解度[10]、提高大分子水溶性藥物的生物利用率[11]、藥物緩釋作用[12]等優(yōu)點。納米乳的制備方法主要有[13]剪切攪拌法、高壓均質(zhì)法、高能超聲法、相轉(zhuǎn)變溫度法、自發(fā)乳化法、低能乳化法。自發(fā)乳化法充分利用系統(tǒng)的物理化學破壞特性，它可以使水滴的自發(fā)性和分散作用成為一種可能，因此，大大減少了人工制備藥物過程中對于藥物的局部物理化學破壞，自發(fā)地形成小乳滴[14]。

本研究采用自發(fā)乳化法制備甜玉米芯多糖納米乳（SCP-80-NE），以期提高SCP-80的生物利用率。實驗以偽三元相圖法對甜玉米芯配方進行篩選，再以粒徑、透明度為指標對配方進行優(yōu)化，并對最佳配方制備的SCP-80-NE進行表征，并對所制備的SCP-80-NE進行體外模擬胃腸液緩釋性能研究及體外對α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用研究，為多糖納米乳制備及其在食品中應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

甜玉米芯多糖 實驗室制備；聚山梨酯-85（Tween85）、失水山梨糖醇單油酸酯-85（Span85）、肉豆蔻酸異丙酯 山東優(yōu)索化工科技有限公司；聚山梨酯-80（Tween80） 天津市富宇精細化工有限公司；失水山梨糖醇單油酸酯-80（Span80） 廣東潤華化工有限公司；大豆油、玉米油、阿卡波糖 市售；液體石蠟 天津市致遠化學試劑有限公司；亞甲基藍 天津基準化學試劑有限公司；蘇丹紅 福晨（天津）化學試劑有限公司；α-淀粉酶（3700 U/g） 北京奧博星生物技術(shù)有限責任公司；α-葡萄糖苷酶（60 U/mg） 合肥博美生物科技有限公司；谷胱甘肽 上海和氏璧化工有限公司；對硝基苯-β-D-半乳糖吡喃糖苷 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；可溶性淀粉 天津市博迪化工有限公司；胃蛋白酶（1200 U/g） 中國惠世生化試劑有限公司；胰蛋白酶（4000 U/g） 源葉生物科技有限公司；其余試劑 均為國產(chǎn)分析純。

Nano-ZS90激光粒度儀 英國馬爾文儀器有限公司；79-1磁力攪拌器 天津得利實驗分析儀器制造廠；DV2TRVTJ0粘度計 美國博勒飛；PHS-2F酸度計 上海儀電科學儀器股份有限公司；AF2011007紫外分光光度計 上海元析儀器有限公司；TG16-WS離心機 湖南湘儀儀器有限公司；HWS-26電熱恒溫水浴鍋 上海一恒科學儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 甜玉米芯多糖納米乳的制備方法 甜玉米芯多糖（SCP-80）的制備：以甜玉米芯為原料，采用水提醇沉法，經(jīng)過干燥→粉碎→過篩→脫脂→水提→濃縮→脫蛋白→脫色→體積分數(shù)80%乙醇醇沉→冷凍干燥→制得SCP-80[15]。

采用自發(fā)乳化法，制備SCP-80-NE。依次向表面活性劑中加入助表面活性劑和油相，待三相原料混勻后，逐步向混合液中以液滴態(tài)加入SCP-80溶液，滴加時不斷進行磁力攪拌[16]。隨著SCP-80溶液的增加，體系由澄清逐漸變渾濁，澄清度逐漸減小，隨著磁力攪拌器繼續(xù)攪拌，體系再次逐漸恢復(fù)到原澄清油相狀態(tài)[17?18]，即為SCP-80-NE。

1.2.2 偽三元相圖法篩選甜玉米芯多糖納米乳配方 偽三元相圖法是將水相、油相、表面活性劑三組分在等溫等壓的條件下用平面三角形的形式表現(xiàn)出來，在四組分體系中，偽三元相圖的一個頂點一般用助表面活性劑與表面活性劑看作混合表面活性劑（Smix）表示。該方法將納米乳組分之間的關(guān)系轉(zhuǎn)化為平面圖，更加直觀、簡潔，易于確定各組分的比例。采用水滴定法建立納米乳形成過程中各相比值偽三元相圖[19]，對于每個相圖，Smix和油相以1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1（w/w）的比例混合[20]，25 ℃下不斷攪拌，緩慢的向混合體系中加入蒸餾水，當混合體系達到濁點，體系將由澄清變?yōu)闇啙幔瑵嵋涸倮^續(xù)攪拌可以恢復(fù)澄清狀態(tài)時，記錄各組分質(zhì)量分數(shù)，繪制偽三元相圖，乳化區(qū)域的范圍可以反應(yīng)出各組分所占比例。

1.2.2.1 表面活性劑的篩選 固定助表面活性劑為無水乙醇，Km值為3:1，油相為液體石蠟，水相為質(zhì)量濃度1%的甜玉米芯多糖水溶液，選用單一表面活性劑Span80、Span85、Tween80、Tween85和復(fù)合表面活性劑Tween80:Span80=1:1、1:2、2:1、3:1、4:1（m:m），繪制偽三元相圖。

1.2.2.2 助表面活性劑的篩選 固定表面活性劑Tween80:Span80=1:1（m:m），Km值為3:1，油相為液體石蠟，水相為質(zhì)量濃度1%的甜玉米芯多糖水溶液，選取1,2-丙二醇、無水乙醇、丙三醇作為助表面活性劑，繪制偽三元相圖。

1.2.2.3 Km值的篩選 固定表面活性劑為Tween80:Span80=1:1（m:m），助表面活性劑為無水乙醇，油相為液體石蠟，水相為質(zhì)量濃度1%的甜玉米芯多糖水溶液，Km值（表面活性劑與助表面活性劑的質(zhì)量比值）分別設(shè)置為1:1、2:1、3:1、4:1、5:1，繪制偽三元相圖。

1.2.2.4 油相的篩選 固定表面活性劑為Tween80:Span80=1:1（m:m），助表面活性劑為無水乙醇，Km值為3:1，水相為質(zhì)量濃度1%的甜玉米芯多糖水溶液，選取大豆油、玉米油、液體石蠟、肉豆蔻酸異丙酯（IPM）作為油相，繪制偽三元相圖。

1.2.2.5 水相的篩選 固定表面活性劑為Tween80:Span80=1:1（m:m），助表面活性劑為無水乙醇，Km值為3:1，油相選取液體石蠟，水相選取質(zhì)量濃度分別為0.5%、1%、1.5%、2%的甜玉米芯多糖水溶液，繪制偽三元相圖。

1.2.3 甜玉米芯多糖納米乳配方優(yōu)化 從偽三元相圖得到最佳相圖，確定混合表面活性劑和多糖溶液的質(zhì)量分數(shù)范圍，比較不同質(zhì)量分數(shù)的混合表面活性劑（10%、20%、30%、40%、50%），不同質(zhì)量分數(shù)的SCP-80溶液（5%、15%、25%、35%、45%）對納米乳透明度、粒徑的影響，確定出最佳配方，并按照最佳配方制備的納米乳液進行驗證性實驗。

1.2.4 甜玉米芯多糖納米乳的評價 宏觀檢查所制備SCP-80-NE的外觀的透明度和均一性，通過使用亞甲基藍和蘇丹紅的不同鋪展速度模式來確定納米乳的類型[21]；用可見分光光度計測量納米乳的透明度；采用激光粒度分析儀檢測SCP-80-NE的粒徑和多分散性系數(shù)（PDI）。

1.2.5 甜玉米芯多糖納米乳穩(wěn)定性實驗 分別考察SCP-80-NE的離心穩(wěn)定性（10000 r/min離心30 min）、冷熱循環(huán)穩(wěn)定性（4、40 ℃下依次保存六個循環(huán)）、凍融穩(wěn)定性（儲存在?18、25 ℃進行三個循環(huán)，每個溫度下的儲存時間不少于48 h）和貯藏穩(wěn)定性（分別在4 、25 、60 ℃條件下放置30 d），以乳液的顏色和狀態(tài)評定所制備的SCP-80-NE穩(wěn)定性。

1.2.6 甜玉米芯多糖納米乳中多糖含量的測定 繪制葡萄糖標準曲線，采用苯酚硫酸法對SCP-80-NE中多糖含量進行測定[22]。取1 mL SCP-80-NE加入1 mL蒸餾水，1 mL 0.06 g/mL苯酚溶液，最后加入5 mL硫酸，震蕩搖勻，沸水浴15 min，在490 nm波長下檢測吸光度值。

1.2.7 甜玉米芯多糖納米乳體外模擬胃腸液緩釋作用分析 參考張貝貝等[23]對模擬胃腸液配制方法并稍作修改。取適量的SCP-80-NE于透析袋中放于模擬胃液中，水浴維持37 ℃，以100 r/min的速度攪拌，模擬人體的胃液消化功能，30 min測量一次SCP-80-NE的釋放量，測量時應(yīng)在92 ℃條件下滅酶2 min，采用苯酚硫酸法檢測樣品中總糖含量，每次取1 mL模擬胃液混合物，稀釋1000倍，取1 mL稀釋液加入1 mL蒸餾水，1 mL 0.06 g/mL苯酚溶液，最后加入5 mL硫酸，震蕩搖勻，沸水浴15 min，在490 nm波長下檢測吸光度值。模擬腸液的消化過程同模擬胃液的消化過程，計算累計釋放率見式（1）。

式中：Qt為t時刻SCP-80的累計釋放率，%；Mt為t時刻釋放出SCP-80含量，mg；M0為釋放初始時刻SCP-80-NE中的SCP-80，mg。

1.2.8 甜玉米芯多糖納米乳體外降血糖效果初探 參考董麗娟等[24]的方法并稍作修改，將SCP-80-NE配置成濃度分別為2、4、6、8、10 mg/mL，取0.3 mL的α-淀粉酶溶液與SCP-80-NE均勻加熱混合后待預(yù)熱37 ℃后再加入預(yù)熱的0.3 mL淀粉溶液，反應(yīng)5 min，37 ℃繼續(xù)反應(yīng)一定一段時間后，沸水浴中加入0.5 mL DNS溶液進行顯色，沸水浴5 min后立刻取出溶液冷卻，用蒸餾水稀釋至10 mL，在波長為540 nm下測定吸光度（A3）。陽性對照組使用阿卡波糖替代SCP-80-NE，空白對照物以蒸餾水代替抑制劑及磷酸鹽緩沖溶液代替α-淀粉酶（A2），以磷酸鹽緩沖溶液代替使用α-淀粉酶（A4），蒸餾水代替抑制劑作為空白組（A1）。根據(jù)抑制率計算酶活性被抑制50%時的抑制率濃度（IC50）。計算抑制率見式（2）。

式中：A1為SCP-80-NE用蒸餾水替代測定的吸光度；A2為SCP-80-NE用蒸餾水替代及α-淀粉酶被磷酸鹽緩沖溶液替代測定的吸光度；A3為SCP-80-NE作為抑制劑測定的吸光度；A4為α-淀粉酶用磷酸鹽緩沖溶液替代。

參考李春英等[25]的方法并稍作修改，將SCP-80-NE配置成濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL的溶液，比色管中加入0.1 mL 1 U/mLα-葡萄糖苷酶以及2 mL的磷酸鹽緩沖溶液（67 mmol/L pH6.8），混勻，于37 ℃條件下溫孵10 min，然后加入0.1 mL 3 mmol/L谷胱甘肽溶液，在37 ℃條件下，加入0.25 mL 10 mmol/L對硝基苯-β-D-半乳糖吡喃糖苷（PNPG）開始反應(yīng)10 min，加入2 mL 0.1 mol/L碳酸鈉溶液終止反應(yīng)，測定其在400 nm處的吸光度（A1），對照組以酶液被磷酸鹽緩沖液代替（Ax1），空白對照以磷酸鹽緩沖液代替酶液和SCP-80-NE（Ax2），磷酸鹽緩沖液代替SCP-80-NE測定的吸光度（A0）。計算抑制率見式（3）。根據(jù)抑制率算得酶活性被抑制50%時的抑制率濃度（IC50）。

式中：A1為SCP-80-NE作為抑制劑測定的吸光度；A0為磷酸鹽緩沖溶液代替SCP-80-NE測定的吸光度；Ax1以磷酸鹽緩沖溶液代替α-葡萄糖苷酶測定的吸光度；Ax2以磷酸鹽緩沖溶液代替α-葡萄糖苷酶和SCP-80-NE測定的吸光度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有實驗進行3次平行處理，結(jié)果均以平均數(shù)±標準差表示，采用SPSS 17.0進行顯著性分析，P<0.05為差異顯著，P<0.01表示差異性極顯著，采用Origin 2018軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 甜玉米芯多糖納米乳配方篩選結(jié)果

2.1.1 表面活性劑的確定 室溫條件下，在表面活性劑、無水乙醇、液體石蠟和水（Km=3:1）體系中，研究了單一表面活性劑Span80、Span85、Tween80、Tween85和混合表面活性劑Tween80:Span80（m:m）=1:1、1:2、2:1、3:1和4:1對納米乳液形成的影響。偽三元相圖如圖1所示，圖中黑色部分為W/O納米乳液區(qū)。僅使用一種表面活性劑時，所選表面活性劑均不能與油相形成穩(wěn)定的納米乳，而混合表面活性劑Tween80:Span80（m:m=1:1）能與油相形成穩(wěn)定的納米乳，可能是因為表面活性劑復(fù)配，可以更好的降低油/水界面張力，形成界面膜而促使納米乳的形成，從而增大微乳區(qū)范圍，這與姚秋萍等[26]制備魚腥草多糖納米乳的篩選結(jié)果相似，因此選擇Tween80:Span80（m:m=1:1）為制備SCP-80-NE的表面活性劑。

圖1 表面活性劑對偽三元相圖的影響Fig.1 Effect of surfactants on the pseudo-ternary phase diagram

2.1.2 助表面活性劑的確定 結(jié)果表明，在納米乳液形成過程中加入適量的助表面活性劑，可以降低界面膜彎曲應(yīng)力，并且使界面膜獲得足夠彈性，從而使納米乳區(qū)域范圍增大，促進納米乳的形成，使納米乳液更加穩(wěn)定[27?28]。圖2為Tween80:Span80（m:m=1:1）作為表面活性劑，1,2-丙二醇、無水乙醇和丙三醇為助表面活性劑時繪制的偽三元相圖。如圖2所示，當比較三種助表面活性劑的乳化能力時，無水乙醇能輔助表面活性劑形成更大的納米乳區(qū)，這可能是因為無水乙醇含有過多的羥基，而且丙二醇與丙三醇中有較高的親水性，從而降低了油包水納米乳區(qū)范圍，這結(jié)果跟Li等[29]在制備香菇多糖納米乳時，篩選的助表面活性具有相同的結(jié)論。因此，確定以無水乙醇作為助表面活性劑。

圖2 助表面活性劑對偽三元相圖的影響Fig.2 Effect of cosurfactant on pseudo-ternary phase diagram

2.1.3 Km值的確定 研究表明，Km值的選擇也對納米乳的形成的有較大程度的影響[30]。圖3顯示了在Tween80:Span80 （m:m=1:1）為表面活性劑，無水乙醇作為助表面活性劑時，在不同Km值時繪制的偽三元相圖，隨著Km值的增加，微乳區(qū)域呈現(xiàn)先增加再減小的趨勢。Km值的變化一方面可以控制表面活性劑的含量，使界面膜具有較好的彈性和流動性促進納米乳形成，另一方面調(diào)節(jié)助表面活性劑的含量，將表面活性劑調(diào)至最佳，更容易與油相結(jié)合成穩(wěn)定的體系。結(jié)果表明Km=3:1時能形成較大的納米乳區(qū)，此篩選結(jié)果與郝艷霜等[31]在制備藏蒲公英多糖納米乳時Km值篩選結(jié)果一致，故Km值確定為3:1。

圖3 不同Km值對偽三元相圖的影響Fig.3 Influence of different Km values on the pseudo-ternary phase diagram

2.1.4 油相的確定 制備納米乳時，油相的選擇主要在于油相本身的分子大小，油相碳鏈太長，其分子體積較大，不易與表面活性劑結(jié)合形成界面膜；油相碳鏈太短，分子體積太小，親油能力不強，影響界面膜的形成。圖4顯示了表面活性劑為Tween80:Span80（m:m=1:1），助表面活性劑為無水乙醇，Km值為3:1，油相分別為液體石蠟、肉豆蔻酸異丙酯、大豆油、玉米油時形成的相圖區(qū)域。相圖顯示液體石蠟所形成的納米乳區(qū)最大，且能在較大范圍內(nèi)被大量水相稀釋至接近相圖中水相頂點，仍保持透明和穩(wěn)定。此外，液體石蠟是一種安全的油，通常被選作口服藥物或功能性組分微乳液載體的油相[32]，因此，確定以液體石蠟作為油相。

圖4 不同油相對偽三元相圖的影響Fig.4 Influence of different oils on the pseudo-ternary phase diagram

2.1.5 水相的確定 納米乳可承載的活性物質(zhì)濃度也是影響納米乳的主要因素之一，圖5為在Tween80:Span80 （m:m=1:1），助表面活性劑為無水乙醇，Km值為3:1，液體石蠟作為油相條件下，分別加入質(zhì)量濃度為0.5%、1%、1.5%、2%的SCP-80水溶液形成的相圖區(qū)域。相圖表明納米乳可攜帶的最大SCP-80溶液濃度為1.5%，當濃度為2%時，乳區(qū)面積顯著減小，這可能是由于隨著多糖濃度的升高，納米乳液的流動性降低。因此當濃度上升到一定點時納米乳液的穩(wěn)定性降低，相圖區(qū)域減小。因此，選擇水相比例為1.5%。

圖5 不同濃度的甜玉米芯多糖溶液對偽三元相圖的影響Fig.5 Influence of different concentrations of polysaccharide solution on the pseudo ternary phase diagram

2.2 配方優(yōu)化結(jié)果

研究結(jié)合各種因素對納米乳液偽三元相圖的影響，篩選出SCP-80-NE配方為：Tween80/Span80/無水乙醇/液體石蠟/水溶液，Tween80:Span80（m:m）=1:1，Km=3:1。通過考察混合表面活性劑及SCP-80溶液體積分數(shù)對SCP-80-NE粒徑、透明度的影響，確定了SCP-80-NE的最終配方質(zhì)量比為：表面活性劑Tween80:Span80=1:1（m:m）為33.3%，無水乙醇為11.1%，液體石蠟為44.5%，1.5%甜玉米芯多糖溶液為11.1%。

2.3 甜玉米芯多糖納米乳驗證實驗結(jié)果

按照2.2最佳配方制備的SCP-80-NE如圖6所示，SCP-80-NE為一種淡黃色透明液體，觀察其體系均一，未出現(xiàn)渾濁、分層及含有絮凝物等現(xiàn)象，SCP-80-NE透明度為97.62±0.39%。如圖7所示，SCP-80-NE平均粒徑為43.22±4.84 nm，PDI為0.320±0.014，屬W/O型納米乳液，其粘度為209.9±4.1 cP，流動性較好；pH為7.6±0.2，屬于中性偏堿性納米乳液。

圖6 甜玉米芯多糖納米乳（SCP-80-NE）Fig.6 Sweet corn cob polysaccharide nano emulsion(SCP-80-NE)

圖7 SCP-80-NE粒徑分布圖Fig.7 Particle size distribution of SCP-80-NE

2.4 甜玉米芯多糖納米乳穩(wěn)定性實驗結(jié)果

如表1所示，SCP-80-NE在4、25、60 ℃貯藏穩(wěn)定性較好，貯藏過程中未出現(xiàn)渾濁、分層及含有絮凝物等現(xiàn)象，離心后未出現(xiàn)分層、多糖析出等現(xiàn)象。而冷-熱循環(huán)、凍融實驗表明其具有良好的熱力學穩(wěn)定性。

表1 SCP-80-NE的穩(wěn)定性評價Table 1 Stability evaluation of SCP-80-NE

2.5 甜玉米芯多糖納米乳中多糖含量的測定結(jié)果

以葡萄糖濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線，回歸方程為y=59.00x+0.006，R2=0.9970，經(jīng)測定SCP-80-NE中多糖含量為2.154±0.024 mg/mL。

2.6 甜玉米芯多糖納米乳體外模擬胃腸液緩釋作用結(jié)果

2.6.1 模擬胃液中的釋放行為 由圖8可知，模擬胃液消化時間為0.5 h時，SCP-80-NE的累計釋放率小于10%，而SCP-80的累計釋放量超過50%。SCP-80的釋放率極顯著高于SCP-80-NE（P<0.01），在1 h時SCP-80的釋放率顯著提高（P<0.05），而SCP-80-NE在0.5～1 h釋放率沒有顯著性差異（P>0.05），1.5 h時釋放率顯著提高（P<0.05），表明SCP-80-NE具有一定的緩釋作用。由于SCP-80-NE在納米乳膜的作用下，多糖分子無法快速釋放，延長了被包埋的多糖分子的釋放時間，從而減少多糖分子在胃液酸性體系下水解及糖苷鍵的斷裂，維持多糖的生物活性。而未被納米乳包埋的多糖，初始釋放率較大，此結(jié)果與Sun等[33]研究納米乳體外釋放具有相似的結(jié)論。

圖8 SCP-80-NE在模擬胃液中的累計釋放量Fig.8 Cumulative release of SCP-80-NE in simulated gastric juice

2.6.2 模擬腸液中的釋放行為 由圖9可知，與模擬胃液消化過程相比，SCP-80-NE在模擬腸液中的累計釋放率表現(xiàn)為均勻釋放的趨勢。SCP-80-NE與SCP-80相比，多糖釋放率具有極顯著差異（P<0.01），SCP-80-NE在0.5～2 h內(nèi)釋放差異不顯著（P>0.05），2 h后納米乳中SCP-80釋放率顯著增加（P>0.05），表明SCP-80-NE在腸液中釋放緩慢且均勻。可能是隨消化時間增加，未經(jīng)處理的多糖分子在攪拌的作用下快速釋放，而SCP-80-NE在2 h內(nèi)能保持多糖分子結(jié)構(gòu)不被破壞，減少腸酶對多糖結(jié)構(gòu)的影響，同時，SCP-80-NE釋放平緩，可能是由于納米乳外殼在堿性模擬腸液中破壞程度較低，釋放均勻。

圖9 SCP-80-NE在模擬腸液中的累計釋放量Fig.9 Cumulative release of SCP-80-NE in simulated intestinal fluid

2.7 甜玉米芯多糖納米乳體外降血糖結(jié)果

2.7.1 甜玉米芯多糖納米乳對α-淀粉酶的抑制作用 如圖10所示，在質(zhì)量濃度2～10 mg/mL范圍內(nèi)，抑制率隨SCP-80-NE濃度的增加而增加。當質(zhì)量濃度為2 mg/mL時，抑制率為16.48%±1.29%,其IC50為19.55 mg/mL。隨著SCP-80的增加，當濃度達到10 mg/mL時，抑制率達到32.60%±1.89%，此時抑制率具有顯著性提高（P<0.05），結(jié)果表明SCP-80-NE對α-淀粉酶也具有一定的抑制作用，這可能是SCP-80與α-淀粉酶是一種可逆性競爭抑制，SCP-80與α-淀粉酶結(jié)合，減少α-淀粉酶的結(jié)合位點，快速降低α-淀粉酶酶促反應(yīng)速度，起到抑制作用[34]，此結(jié)果與周笑犁等[35]研究得到的結(jié)果類似。

圖10 SCP-80-NE對α-淀粉酶活性抑制曲線Fig.10 Inhibition curve of α-amylase activity by SCP-80-NE

2.7.2 甜玉米芯多糖納米乳對α-葡萄糖苷酶的抑制作用 如圖11所示，在質(zhì)量濃度0.2～1.0 mg/mL范圍內(nèi)，抑制率隨著SCP-80-NE濃度的增加而增大。當質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL時，SCP-80-NE的抑制率為17.78%±1.76%，其IC50為1.63 mg/mL隨著劑量的增大到1.0 mg/mL時，抑制率達到了38.03%±1.35%，此時抑制率極顯著提高（P<0.01）。表明SCP-80-NE對α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用，這可能是SCP-80與α-葡萄糖苷酶可逆性的結(jié)合，抑制酶的活性，此結(jié)果與宋佩林等[36]的研究得到的結(jié)果類似。

圖11 SCP-80-NE對α-葡萄糖苷酶活性抑制曲線Fig.11 Curve of inhibition of α-glucosidase activity by SCP-80-NE

3 結(jié)論

采用偽三元相圖法篩選SCP-80-NE配方，分別考察了表面活性劑、助表面活性劑、Km值、油相、甜玉米芯多糖溶液濃度對乳化區(qū)域大小的影響。在最佳配方下制備的SCP-80-NE，平均粒徑為43.22±4.84 nm，PDI為0.320±0.014，pH為7.6±0.2，多糖含量2.154±0.024 mg/mL且具有良好穩(wěn)定性W/O型納米乳液。模擬胃腸液消化實驗表明，SCP-80-NE具有一定的緩釋作用。體外降血糖實驗表明，SCP-80-NE對α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶存在一定的抑制作用，當SCP-80-NE濃度達到10 mg/mL時對α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制率分別為32.60%±1.89%和38.03%±1.35%，此結(jié)果為甜玉米芯多糖在功能性食品的開發(fā)利用提供參考價值。