馬子坤，韓 冉，王 琦，吳 楠，徐 杰，白 雪

干擾是影響臨床醫(yī)學(xué)檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的重要原因之一，所謂干擾即在測定分析物濃度或活性時，在外界物體的干擾下使得檢測結(jié)果出現(xiàn)增高(正干擾)或下降(負(fù)干擾)的現(xiàn)象，對醫(yī)學(xué)檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性造成影響[1]。Caraway[2]研究指出，臨床醫(yī)學(xué)檢驗中多種成分的檢測結(jié)果均可能會受到治療性藥物的影響，且隨著研究的深入，臨床上也逐漸認(rèn)識到藥物對檢驗結(jié)果造成的干擾較為常見，而這類干擾情況的出現(xiàn)極易對檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性造成影響，甚至?xí)εR床診療方案的制定造成影響。當(dāng)前，臨床上對于西藥干擾檢驗結(jié)果的研究分析相對較多，并且已經(jīng)有相應(yīng)的軟件、專著等進行西藥干擾性能評價與查詢[3]。但是臨床上對于中藥干擾檢驗結(jié)果的研究相對較少。近年來，隨著中醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，中藥制劑在臨床上的應(yīng)用范圍也逐漸增大，這也使得越來越多的專家學(xué)者開始關(guān)注中藥對檢驗結(jié)果的干擾性能評價。本研究以當(dāng)前臨床上應(yīng)用范圍比較廣泛的燈盞細(xì)辛注射液、銀杏酮酯注射液、舒血寧注射液3種活血化瘀類中藥注射劑為研究對象，分析此3種中藥注射劑對臨床凝血功能項目檢測的干擾情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月—2019年12月在北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院進行健康體檢的健康人群60名作為研究對象。所有研究對象均未曾服用藥物，均不吸煙，體檢前3 d均未飲酒，均無精神疾病、意識障礙與認(rèn)知障礙，均知情同意并簽署知情同意書。所有研究對象均靜脈采血，提取血漿混合物作為基礎(chǔ)樣本備用。

1.2 實驗藥物 對照組以緩沖液作為空白干擾劑。干擾組干擾藥物包括燈盞細(xì)辛注射液、銀杏酮酯注射液、舒血寧注射液3種活血化瘀類中藥注射劑，其中燈盞細(xì)辛由云南生物谷藥業(yè)股份有限公司提供，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z53021620；銀杏酮酯由上海上藥杏靈科技藥業(yè)股份有限公司提供，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20000050；舒血寧注射液由神威藥業(yè)集團有限公司提供，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z13020796。

1.3 儀器與試劑 全自動血液凝固分析儀(日本Sysmex公司生產(chǎn)，型號：CS-5100)，凝血酶原時間(PT)測定試劑(批號：546940)，SIMENS Thrombin 血漿纖維蛋白原(FIB)測定試劑(批號：547283)，SIMENSTest Thrombin 凝血酶時間(TT)測定試劑(批號：46289)，SIMENS CaCl2活化部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑(批號：539757)。

1.4 方法

1.4.1 干擾篩選的配對差異實驗 利用高濃度干擾樣品進行一系列能鑒別有可能引起干擾的物質(zhì)的試驗。選取分析物濃度，建立有顯著性差別(dmax)的標(biāo)準(zhǔn)，明確樣本重復(fù)次數(shù)，制備基礎(chǔ)樣本池及儲存溶液、試驗樣本；將儲存溶液加至容量瓶體積的1/20，然后以基礎(chǔ)樣本加至刻度，混勻；按照同樣的方式進行對照樣本操作；然后于同一批測定中隊實驗(T)及對照樣品(C)進行交替分析，并對分析結(jié)果進行記錄。評價相對于未加干擾物的對照混合標(biāo)本(對照組)的偏倚。

1.4.2 劑量效應(yīng)實驗 確定干擾物濃度和干擾程度之間的關(guān)系。對可疑干擾物質(zhì)的濃度邊界進行明確，即最高濃度值和最低濃度值。然后建立臨床上顯著性差別的標(biāo)準(zhǔn)、明確各濃度測定次數(shù)(通常設(shè)置為3次)，并分別制備高濃度和低濃度樣本池。然后制備終值樣本池，在容量瓶中分別加入相同劑量的高值及低值樣本，并混勻。然后按照相同的操作方法，分別制備75%樣本池和25%樣本池及混勻高、低值樣本的容量瓶。于同批次按照濃度從低到高的順序?qū)λ袠?biāo)本進行檢測，然后再以從高到低的順序進行標(biāo)本檢測，為減少誤差，最后對低值樣本池分析物平均濃度進行計算，以其他測量結(jié)果減去該值，以表格形式對所有分析結(jié)果進行呈現(xiàn)。

2 結(jié) 果

2.1 確定配對差異實驗的重復(fù)次數(shù) 根據(jù)檢測儀器室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果對儀器精密度進行分析，基礎(chǔ)樣本檢測取10次，計算各檢測項目的保準(zhǔn)差(SD)，獲取各項目的臨床意義的差別標(biāo)準(zhǔn)(max)，計算dmax/SD比值，查表1得到試驗重測次數(shù)。

表1 dmax/SD與重測次數(shù)對應(yīng)情況分析

2.2 配對差異實驗結(jié)果

2.2.1 燈盞細(xì)辛注射液對凝血功能檢測項目的干擾 燈盞細(xì)辛注射液對凝血功能各指標(biāo)均無明顯干擾。詳見表2。

表2 燈盞細(xì)辛注射液對凝血功能檢測項目的干擾

2.2.2 銀杏酮酯注射液對凝血功能檢測項目的干擾 銀杏酮酯注射液對APTT有負(fù)干擾，對其他凝血功能指標(biāo)無明顯干擾。詳見表3。

表3 銀杏酮酯注射液對凝血功能檢測項目的干擾

2.2.3 舒血寧注射液對凝血功能檢測項目的干擾 舒血寧注射液對凝血功能各指標(biāo)均存在明顯干擾。詳見表4。

表4 舒血寧注射液對凝血功能檢測項目的干擾

3 討 論

藥物本身及藥物代謝產(chǎn)物均可能會影響檢驗樣本的原有基質(zhì)，從而干擾檢驗結(jié)果。國外研究協(xié)會頒布的EP7-A2文件[4]讓干擾研究有據(jù)可循，且多數(shù)學(xué)者均在研究中證實了藥物及代謝產(chǎn)物會對檢驗項目造成干擾這一論證。Munzenberger等[5]在研究中指出，病人服用一種藥物時，受藥物干擾的試驗占7.0%，服用兩種藥物時占16.7%，服用3種或4種藥物時則高達(dá)到66.7%。Fu等[6]在研究中指出，黃芪等中藥能夠?qū)C體免疫因子測定造成干擾。Dasgupta等[7]的研究結(jié)果顯示，丹參會干擾地高辛檢測；Flower等[8]在研究中指出，當(dāng)歸、知母、黃柏等藥物可能會影響細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果。因此，臨床上已將干擾列為影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的一項常見影響因素。但是當(dāng)前對于中藥干擾檢驗結(jié)果的分析則相對較少，近年來，隨著中藥藥理研究的深入，中藥注射劑在臨床上廣泛應(yīng)用，銀杏酮酯對APTT有負(fù)干擾，但干擾極小不易引起臨床檢測結(jié)果的偏差也呈現(xiàn)出明顯增大的趨勢[9]。中藥注射劑以中醫(yī)理論為前提，以現(xiàn)代藥劑學(xué)方式從藥物中提取有效物質(zhì)，支撐滅菌制劑，以供臨床注射使用。中藥注射劑具有起效快、療效顯著等特點，故而逐漸在臨床上得到推廣與使用。其中活血化瘀類中藥注射劑因具有疏通血脈、去除血瘀的作用，故而在臨床上的應(yīng)用范圍非常廣，且多數(shù)病人在輸注中藥注射劑的過程中或輸注后通常需行凝血功能檢查[10]。因此，開展對活血化瘀中藥注射劑對凝血功能檢測的干擾分析顯得尤為必要。

本次研究選用燈盞細(xì)辛注射液、銀杏酮酯注射液、舒血寧注射液3種臨床上較為常用的活血化瘀類中藥注射劑為研究藥物，并分析了3種藥物對臨床凝血功能項目檢測的干擾情況，結(jié)果顯示，燈盞細(xì)辛對凝血項目均無明顯干擾，銀杏酮酯對APTT有負(fù)干擾，但干擾極小不易引起臨床檢測結(jié)果的偏差[11]；舒血寧注射液對凝血項目PT、APTT、FIB、TT均存在明顯干擾。

綜上所述，檢驗結(jié)果是否準(zhǔn)確對于臨床診療方案的制定與開展有著極為重要的影響，臨床上須加強藥物對檢驗結(jié)果干擾研究的重視。當(dāng)前，西醫(yī)干擾檢驗結(jié)果的相關(guān)分析已經(jīng)有大量研究，并獲取了一定成果。但是對于中藥制劑對檢驗結(jié)果干擾的研究仍存在較大局限，多以部分藥物生化項目的分析為主。當(dāng)前臨床上尚未明確活血化瘀類中藥注射劑對凝血項目造成干擾的具體原理。且本次研究中也未進一步明確藥物對干擾的劑量效應(yīng)，因此，臨床上尚需開展更為深入的研究，以進一步探究中藥注射液對于檢驗項目的干擾，甚至可通過劑量效應(yīng)試驗確定藥物對檢驗結(jié)果干擾的影響程度，查找消除干擾的方式，提高檢驗的準(zhǔn)確度。